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ABA受体RCAR1/PYL9相互作用蛋白质的筛选及初步研究 被引量:13
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作者 李德款 张亮 +5 位作者 彭梅芳 胡伟芳 李鹰 蔡黎 李旭锋 杨毅 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期486-490,共5页
使用拟南芥作为模型,采用酵母双杂交系统筛选出和ABA受体RCAR1/PYL9有相互作用的蛋白质,以更深入的研究RCAR1/PYL9的功能.首先利用反转录PCR方法获得拟南芥的cDNA,然后通过酵母双杂交系统,用拟南芥RCAR1/PYL9作为诱饵蛋白对拟南芥cDNA... 使用拟南芥作为模型,采用酵母双杂交系统筛选出和ABA受体RCAR1/PYL9有相互作用的蛋白质,以更深入的研究RCAR1/PYL9的功能.首先利用反转录PCR方法获得拟南芥的cDNA,然后通过酵母双杂交系统,用拟南芥RCAR1/PYL9作为诱饵蛋白对拟南芥cDNA文库进行筛选,并获得多个阳性克隆.对该菌落进行进一步的鉴定得到与RCAR1/PYL9具有相互作用的蛋白质,这对进一步研究RCAR1/PYL9及其相互作用蛋白质在ABA信号转导途径中的作用及地位奠定了基础. 展开更多
关键词 rcar1/PYL9 酵母双杂交系统 CDNA文库
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AtMYB44与ABI1竞争性结合ABA受体RCAR1的研究 被引量:2
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作者 赵哲 李德款 +2 位作者 袁德志 王晓玉 李旭锋 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期663-667,共5页
为了进一步确定AtMYB44、ABI1、RCAR1三者之间的关系,本文进行了竞争性pull down和ABI1磷酸酶活性的测定实验,结果表明AtMYB44与ABI1能够竞争性结合RCAR1,并且这种竞争性结合依赖于ABA,AtMYB44能够降低RCAR1对ABI1活性的抑制,这为深入研... 为了进一步确定AtMYB44、ABI1、RCAR1三者之间的关系,本文进行了竞争性pull down和ABI1磷酸酶活性的测定实验,结果表明AtMYB44与ABI1能够竞争性结合RCAR1,并且这种竞争性结合依赖于ABA,AtMYB44能够降低RCAR1对ABI1活性的抑制,这为深入研究ABA信号转导途径奠定了基础. 展开更多
关键词 竞争性蛋白沉降技术 rcar1 ABI1 AtMYB44
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拟南芥AtDWD与RCAR1相互作用的初步研究
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作者 姜欣 李德款 +2 位作者 陶志文 袁德志 杨毅 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期402-407,共6页
采用pull down和酵母共转化的方法研究了AtDWD与RCAR1之间的相互作用。体外pull down试验得出 AtDWD与 RCAR1之间存在明显的相互作用;酵母共转化试验显示AtDWD的截断区域中只有 WD45和 WD345转化子可以在 SD 四缺培养基平板上长出正常... 采用pull down和酵母共转化的方法研究了AtDWD与RCAR1之间的相互作用。体外pull down试验得出 AtDWD与 RCAR1之间存在明显的相互作用;酵母共转化试验显示AtDWD的截断区域中只有 WD45和 WD345转化子可以在 SD 四缺培养基平板上长出正常的酵母菌落。实验结果表明,AtDWD C端的145~350位氨基酸序列中含有与 RCAR1相互作用的功能域。 展开更多
关键词 酵母双杂交 Pulldown rcar1 AtDWD
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ROP11 GTPase Negatively Regulates ABA Signaling by Protecting ABI1 Phosphatase Activity from Inhibition by the ABA Receptor RCAR1/PYL9 in Arabidopsis 被引量:15
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作者 Zixing Li Zheng Li +6 位作者 Xiang Gao Viswanathan ChinnusamyI Ray Bressant Zhi-Xin Wang Jian-Kang Zhu Jia-Wei Wu Dong Liu 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2012年第3期180-188,共9页
The phytohormone abscisic acid (ABA) regulates many key processes in plants, such as seed germina- tion, seedling growth, and abiotic stress tolerance. In recent years, a minimal set of core components of a major AB... The phytohormone abscisic acid (ABA) regulates many key processes in plants, such as seed germina- tion, seedling growth, and abiotic stress tolerance. In recent years, a minimal set of core components of a major ABA signaling pathway has been discovered. These components include a RCAR/PYR/PYL family of ABA receptors, a group of PP2C phosphatases, and three SnRK2 kinases. However, how the interactions between the receptors and their targets are regulated by other proteins remains largely unknown. In a companion paper published in this issue, we showed that ROP11, a member of the plant- specific Rho-like small GTPase family, negatively regulates multiple ABA responses in Arabidopsis. The current work demonstrated that the constitutively active ROP11 (CA-ROP11) can modulate the RCAR1/PYL9-mediated ABA signaling pathway based on reconstitution assays in Arabidopsis thaliana protoplasts. Furthermore, using luciferase complementation imaging, yeast two-hybrid assays, co- immunoprecipitation assays in Nicotiana benthamiana and bimolecular fluorescence complementation assays, we demonstrated that CA-ROP11 directly interacts with ABI1, a signaling component downstream of RCAR1/PYL9. Finally, we provided biochemical evidence that CA-ROP11 protects ABI1 phosphatase activity from inhibition by RCAR1/PYL9 and thus negatively regulates ABA signaling in plant cells. A model of how ROP11 acts to negatively regulate ABA signaling is presented. 展开更多
关键词 ROP11 GTPase ABA signaling rcar1/PYL9A ABI1 Arabidopsis.
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拟南芥AtMYB44与RCAR1相互作用的研究
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作者 陶志文 李德款 +2 位作者 姜欣 袁德志 杨毅 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期189-193,共5页
以拟南芥脱落酸(ABA)受体RCARl和以文为诱饵蛋白质,利用酵母双杂交(Y2H)技术筛选出转录因子AtMYB44,本文进行了pulldown及重转酵母验证,确定它们之间的关系,实验结果显示RCARl与AtMYB44之间确实存在相互作用.此外,为了确定RC... 以拟南芥脱落酸(ABA)受体RCARl和以文为诱饵蛋白质,利用酵母双杂交(Y2H)技术筛选出转录因子AtMYB44,本文进行了pulldown及重转酵母验证,确定它们之间的关系,实验结果显示RCARl与AtMYB44之间确实存在相互作用.此外,为了确定RCARl在AtMYB44上的作用区域,构建了不同长度的AtMYB44cDNA序列的PGADT7载体,利用酵母双杂交实验分析,表明只有AtMYB44的N端54~105氨基酸序列与RCARl存在相互作用. 展开更多
关键词 蛋白沉降 酵母双杂交 rcar1 AtMYB44
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植物激素——脱落酸(ABA)的细胞信号转导机制 被引量:4
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作者 周杨杨 左圆圆 李小平 《黑龙江农业科学》 2011年第7期14-17,共4页
植物激素脱落酸(ABA)参与从种子萌发到植物开花、结果和衰老等多个生长发育过程。研究ABA细胞信号转导的分子机制对进一步阐明其功能具有重要的意义。通过介绍FCA(Flowering Control Locus A)、Mg离子螯合酶H亚基(ABAR/CHLH)、G蛋白偶... 植物激素脱落酸(ABA)参与从种子萌发到植物开花、结果和衰老等多个生长发育过程。研究ABA细胞信号转导的分子机制对进一步阐明其功能具有重要的意义。通过介绍FCA(Flowering Control Locus A)、Mg离子螯合酶H亚基(ABAR/CHLH)、G蛋白偶联受体(GCR2)、GTG1/GTG2(GPCR-type G-Proteins1/2)和PYR1/PYL/RCAR在ABA信号传导途径中的作用模式,阐述了其能够接受ABA信号并激活相关下游组分,从而完成其生理功能。 展开更多
关键词 ABA受体 信号转导 PYR1/PYL/RCAR
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