纳米雄黄混悬液对人宫颈癌细胞RCAS1表达的影响

目的：研究RCASl在纳米雄黄混悬液诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡中的表达，探讨其在细胞凋亡中的作用。方法：HeLa细胞经不同浓度纳米雄黄混悬液作用一定时间后，MTT法检测细胞生长、增殖状态，光镜及透射电镜下观察细胞形态及凋亡情况，ELISA检测RCA81蛋白量的表达，并进行图像分析。结果：纳米雄黄混悬液对HeLa细胞生长增殖有时间剂量依赖性抑制作用；25～50mg·L^-1纳米雄黄混悬液作用48～72h后，HeLa细胞出现凋亡细胞的形态学改变；ELISA检测表明HeLa细胞高表达RCASl蛋白，A值为（1．47±0．05），空白对照A值（0．139±0．015）；25～50mg·L。。纳米雄黄混悬液作用48h后，RCASl蛋白的表达量A值分别降低为（0．423±0．021）和（0．146±0．018）（P〈0．01）。结论：纳米雄黄混悬液可抑制HeLa细胞的生长、增殖和诱导凋亡，并使RCAS1蛋白表达下降。

非小细胞肺癌中RCAS1的表达及意义探究

目的探究非小细胞肺癌中RCAS1的表达及意义。方法采取免疫组织化学法进行检测该院2009年2月—2011年2月间收录的38例(A组)非小细胞肺癌组织和同期的36例肺良性病变的肿瘤组织(B组)及36例正常肺组织(C组)中的RCAS1的表达水平作为对比。结果通过分析,A组肺组织中RCAS1的表达阳性率明显的高于C组肺组织中的RCAS1的表达阳性率,比较具有明显的差异(P<0.05),统计学有意义;其中组织中的RCAS1表达水平与患者的临床分期和分化程度有关,与患者的性别、年龄、病理类型和淋巴结转移无关。结论在非小细胞肺癌中RCAS1异常表达,并且与临床分期和分化程度有着密切的联系,可以作为一种新型的非小细胞肺癌的预后判断的指标物。

RCAS1基因与乳腺癌相关性分析

目的分析RCAS1基因表达与乳腺癌的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测105例乳腺浸润性导管癌组织及相应癌旁组织的RCAS1基因表达,结合临床病理资料分析RCAS1基因表达与乳腺癌相关性。结果 RCAS1基因在乳腺癌组织表达率为84%(88/105)、癌旁组织表达率为17%(18/105),两者差异有统计学意义(P<0.05)。RCAS1蛋白表达以病人的年龄、肿瘤大小、病理组织学分级、淋巴结转移等方面比较,差异无统计学意义。结论 RCAS1基因表达可能与乳腺癌发生密切相关,可能有潜在的应用价值,值得进一步研究。

Fas蛋白与RCAS1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义

目的探讨甲状腺乳头状癌组织中Fas蛋白和SiSo细胞表达的受体肿瘤结合抗原(RCAS1)的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测40例甲状腺乳头状癌组织、40例癌旁正常组织及20例结节性甲状腺肿组织中Fas蛋白和RCAS1的表达,分析两者与甲状腺乳头状癌临床病理因素之间的关系。结果甲状腺乳头状癌组织中Fas蛋白表达水平明显低于癌旁组织及结节性甲状腺肿(P<0.001),RCAS1的表达水平高于癌旁组织与结节性甲状腺肿(P<0.001);Fas蛋白的表达与临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05);RCAS1的表达与临床分期无关(P>0.05),与淋巴结转移相关(P<0.05)。结论 Fas蛋白和RCAS1的表达与甲状腺乳头状癌密切相关,两者联合检测对甲状腺乳头状癌的临床诊断有一定的指导意义,为进一步的免疫学治疗提供一定的实验基础。

RCAS1蛋白在肾透明细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨表达于SiSo细胞系上的受体结合癌抗原(RCAS1)在肾透明细胞癌(RCC)中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学法检测RCAS1在62例RCC组织及14例癌旁肾组织中的表达,用Western blot分别检测了3例肾透明细胞癌和3例癌旁肾组织中RCAS1的蛋白表达,并分析了RCAS1蛋白的表达与临床病理特征的关系。结果免疫组织化学检查RCC组织中RCAS1表达率为79.0%(49/62),与癌旁组织表达率14.3%(2/14)比较,差异有显著性(P<0.01)。RCAS1在RCC的表达随着病理分级降低而增高(P<0.05),与RCC的病理分化程度呈负相关(P<0.01),与RCC的临床分期呈正相关(P<0.01)。Western blot检测RCAS1蛋白结果显示,RCC组织中的RCAS1表达明显高于癌旁组织(P<0.01)。结论 RCAS1在RCC中高表达,且与其病理分级、临床分期相关,检测RCAS1的表达有助于对RCC的病理分级、临床分期和预后的判断。

康莱特联合奥沙利铂胸腔灌注治疗恶性胸腔积液及对RCAS1、VEGF表达的影响

目的:探讨康莱特联合奥沙利铂胸腔灌注治疗恶性胸腔积液的临床价值以及灌注治疗对恶性胸腔积液中Si So细胞上的受体结合肿瘤抗原(RCAS1)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:选取110例非小细胞肺癌并胸腔积液患者,分为康莱特组35例,奥沙利铂组35例及联合用药组40例,分别收集胸腔注药前及每次注药48h后的胸水标本,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测胸水标本中的RCAS1、VEGF水平。结果:三组疗效比较,联合组优于康莱特组(P<0.01)。生活质量改善方面,联合组优于康莱特组与奥沙利铂组(P<0.05)。三组治疗后的毒副反应比较,康莱特组低于联合组及奥沙利铂组(P<0.05)。三组治疗前、第1周期治疗后、第2周期治疗后胸水RCAS1及VEGF表达水平均有逐渐下降趋势(P<0.05),联合用药组较其它两组下降更明显(P<0.001)。结论:康莱特联合奥沙利铂胸腔灌注对控制恶性胸腔积液具有一定的临床价值,检测胸水RCAS1、VEGF表达水平可评估康莱特联合奥沙利铂灌注治疗效果。

RCAS1、Caspase-8在胃腺癌组织中的表达及意义

目的探讨RCAS1、Caspase-8在胃腺癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测46例胃腺癌组织及其切端正常胃黏膜组织中RCAS1、Caspase-8的蛋白表达。结果正常胃黏膜组织及胃腺癌组织中RCAS1蛋白的阳性表达率分别为60.87%(28/46)和84.78%(39/46)(P<0.05)。正常胃黏膜组织及胃腺癌组织中Caspase-8蛋白的阳性表达率分别为80.43%(37/46)和65.22%(30/46)(P<0.05)。二者在胃癌组织中的表达呈负相关性(r=-0.321、P<0.05)。结论 RCAS1、Caspase-8蛋白在胃腺癌组织中的异常表达与胃腺癌的发生、发展有关。

肿瘤相关抗原RCAS1重组质粒的构建与GST-RCAS1融合蛋白的表达和纯化及鉴定

目的:构建RCA S1的重组质粒、表达GST-RCA S1融合蛋白并进行纯化和生物学活性鉴定。方法:从M CF-7细胞提取总RNA,通过RT-PCR得到RCA S1的扩增产物,纯化后用E coRⅠ和BamHⅠ双酶切。选择pGEX-2T作为载体,用E coRⅠ和BamHⅠ双酶切后与上述酶切后DNA连接,转化感受态JM 109大肠杆菌,挑单个菌落提取质粒进行双酶切和测序鉴定。选择测序正确的质粒重新转化BL 21大肠杆菌,用终浓度0.1 mm o l/L的IPTG诱导表达GST-RCA S1蛋白,用GST亲和层析纯化并通过SDS-PAGE电泳和W estern印迹试验证实。利用特异性抗RCA S1多抗(N-18和C-20)鉴定所表达的融合蛋白,通过流式细胞仪检测GST-RCA S1融合蛋白诱导活化T细胞凋亡的作用。结果:通过RT-PCR得到大小为642bp的产物,重组质粒通过双酶切和测序鉴定正确。通过IPTG诱导在BL 21大肠杆菌中表达并纯化得到GST-RCA S1蛋白,通过SDS-PAGE电泳鉴定分子量为52 kM r,与预测一致,并由W estern印迹试验证明为GST融合蛋白。该融合蛋白能被特异性抗RCA S1(N-18和C-20)多抗识别。GST-RCA S1对诱导活化的T细胞凋亡有一定的作用。结论:成功构建RCA S1的重组质粒,并表达GST-RCA S1融合蛋白,对其生物学活性作了初步研究。

宫颈癌组织中RCAS1的表达及其临床意义

目的研究RCAS1在宫颈癌组织中的表达及其与宫颈癌的临床病理特征之间的关系。方法选取2008年1月—2011年3月在该院行手术治疗的宫颈癌组织标本和宫颈良性病变组织标本,应用免疫组化法检测RCAS1蛋白的表达表达量,并研究RCAS1蛋白和宫颈癌临床病理特征之间的关系。结果宫颈癌组织中RCAS1阳性表达率(86.15%)显著高于良性宫颈组(19.35%)差异有统计学意义(χ2=40.946,P=0.000<0.05)。RCAS1的表达与组织类型无关,差异无统计学意义(χ2=0.700,P=0.403>0.05),与临床分期无关,差异无统计学意义(χ2=1.319,P=0.251>0.05)。低分化癌组织中RCAS1的表达显著高于高分化癌,差异有统计学意义(χ2=10.877,P=0.001<0.05)和中分化癌差异有统计学意义(χ2=10.819,P=0.001<0.05)。伴有淋巴结转移者RCAS1的表达率显著高于无淋巴结转移者,差异有统计学意义(χ2=8.715,P=0.003<0.05)。结论RCAS1在宫颈癌的发生发展中具有重要意义,RCAS1的表达水平和宫颈癌组织的恶性程度和侵袭力相关。

探讨肿瘤标志物RCAS1在肿瘤患者中的检测意义

目的检测表达在SiSo细胞上的受体结合肿瘤抗原(receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells,RCASl)在不同肿瘤患者血清及组织中的表达水平,探讨其在肿瘤发生、发展中的作用机制.方法收集肿瘤患者85例(患者组)和健康体检者(对照组)98例,采用免疫组织化学染色方法观察肿瘤组织中RCAS1的表达情况,采用ELISA方法检测受检者血清中RCAS1水平,并对检测结果进行统计学分析.结果免疫组化结果显示RCAS1在肿瘤组织中呈粗颗粒状黄褐色反应产物.患者组RCAS1水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).鼻咽癌患者组织中RCAS1的阳性表达率为76.2%,且随着病情的加重,血清RCAS1的水平和阳性检出率均不断升高,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05).结论血清RCAS1水平检测可用于肿瘤患者的辅助诊断.

RCAS1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨RCAS1在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法选取50例食管鳞状细胞癌组织(研究组)和30例食管正常黏膜组织(对照组),测定RCAS1蛋白表达情况。结果研究组RCAS1表达阳性率高于对照组(P<0.05)。RCAS1表达阳性率与性别、年龄无关,与患者的临床分期、组织分化程度有关。Ⅲ期患者RCAS1表达阳性率高于Ⅱ期(P<0.05);低分化患者RCAS1表达阳性率高于中分化和高分化患者(P<0.05)。结论食管鳞状细胞癌中RCAS1蛋白异常表达,检测其表达在食管鳞状细胞癌诊断中具有重要的意义。

RCAS1在多种肿瘤细胞系中的表达

目的采用多种方法检测多种肿瘤细胞系中S iSo细胞表达的受体结合肿瘤抗原(RCAS1)的表达情况。方法采用实时定量聚合酶链反应(PCR)、Northern b lot检测、免疫组化法和酶联免疫吸附实验对10个人肿瘤细胞系及2个正常人细胞系RCAS1分子的表达进行了检测。结果实时定量PCR及Northern b lot结果显示,除了正常肝细胞LO2,各肿瘤细胞及正常人胚肾细胞293均见RCAS1 mRNA表达;免疫组化见各肿瘤细胞和293细胞的细胞膜和细胞浆中均有RCAS1蛋白,但在LO2细胞中未见RCAS1蛋白;除了HuH-7和LO2细胞,其余10个细胞培养上清液中的RCAS1蛋白量均明显高于DMEM全培液(P<0.001)。结论RCAS1广泛表达于多种肿瘤细胞系中。

从噬菌体随机肽库中初步筛选RCAS1的模拟表位

目的从噬菌体随机肽库中初步筛选表达于SiSo细胞系的受体结合癌抗原(receptorbindingcancerantigenexpressedonSiSocells,RCAS1)的模拟表位。方法用抗RCAS1单克隆抗体2211对噬菌体随机肽库进行多级亲和筛选,建立与2211具有亲和力的肽库,随机挑选阳性克隆,用双抗体夹心ELISA和斑点ELISA检测其特异性。结果经过3轮免疫筛选,阳性噬菌体克隆富集了100倍,在随机挑取的10个阳性克隆斑中,有7个克隆可与2211单克隆抗体特异性结合。结论这7个阳性克隆中可能包含了肿瘤相关抗原RCAS1的模拟表位。

RCAS1mRNA在肝细胞癌中表达的意义

目的研究RACS1mRNA在原发性肝细胞癌中的表达并探讨其意义。方法应用SYBR GreenⅠ逆转录实时荧光定量PCR技术检测37例肝细胞癌(HCC)及癌旁组织中RCAS1mRNA的相对表达量,研究其表达与各项临床指标间的关系。结果RCAS1mRNA的表达水平与病理分级和临床TNM分期有显著相关性(P<0.05),而与病人的性别、血清AFP水平及肿瘤大小无显著相关性。结论RACS1mRNA可作为判断HCC侵袭性和进展的一个潜在指标。

一种新的肿瘤相关抗原RCAS1

RCA S1(receptor-b ind ing cancer an tigen expressed on S iSo ce lls)是一种新近发现的肿瘤相关抗原,为Ⅱ型跨膜蛋白,表达在多种不同类型的肿瘤细胞表面,而且RCA S1的表达与肿瘤的分化、侵袭性和恶性程度呈正相关,并提示不良预后。最近研究表明,RCA S1能诱导活化后的免疫细胞发生凋亡,这可能是RCA S1表达在肿瘤细胞表面进而逃避机体免疫监视的机制之一。

恶性胸腔积液中RCAS1、Claudin-18表达量与增殖和侵袭基因表达的相关性

目的:探讨恶性胸腔积液中RCAS1、Claudin-18表达量与增殖和侵袭基因表达的相关性。方法:87例原发性非小细胞肺癌合并恶性胸腔积液患者作为恶性胸腔积液组,56例结核性胸水患者作为结核性胸水组。对比两者胸水中RCAS1、Claudin-18基因,增殖、侵袭相关基因的表达量,采用Pearson检验评估恶性胸水中RCAS1、Claudin-18表达量与增殖和侵袭基因表达的相关性。结果:恶性胸水组胸水中RCAS1、Claudin-18mRNA的表达量均显著高于结核性胸水组。恶性胸水组胸水中增殖基因LRRC3B、TCF21mRNA的表达量低于结核性胸水组,SIRT1、EZH2mRNA的表达量高于结核性胸水组;侵袭基因DDX17、Nectin4、Vav3、NGAL、Snail mRNA的表达量高于结核性胸水组,EFEMP1、MCPH1mRNA的表达量低于结核性胸水组。Pearson检验发现,恶性胸腔积液中RCAS1、Claudin-18表达量与增殖相关基因、侵袭相关基因表达量直接相关。结论:恶性胸腔积液中RCAS1、Claudin-18表达量异常增高,且具体表达量与肿瘤细胞增殖侵袭活性直接相关,可作为鉴别良恶性胸水的可靠指标。

RCAS1与FAS蛋白在宫颈癌组织中的表达及意义

目的探讨RCAS1与FAS蛋白在宫颈癌组织中的表达、相互关系及意义。方法采用免疫组化学S-P法检测48例宫颈癌、20例宫颈上皮内瘤变(CIN)和10例宫颈良性病变上皮组织中RCAS1及FAS的表达情况。结果宫颈癌组织中RCAS1表达水平明显高于CIN及宫颈良性病变上皮组织(P<0.05),而FAS蛋白表达水平明显低于CIN及宫颈良性病变上皮组织(P<0.05);RCAS1的阳性表达率与宫颈癌分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄、组织类型及临床分期无关(P>0.05);FAS的阳性表达率与宫颈癌分化程度有关(P<0.05),与患者年龄、组织类型、临床分期及淋巴结转移无关(P>0.05);宫颈癌组织中RCAS1与FAS蛋白表达无明显相关性(r=-0.652,P>0.05)。结论在宫颈癌的发生发展过程中RCAS1与FAS蛋白可能起重要作用,但两者的作用机制并无相关性。

RCAS1和CD105在胸腔积液中的表达及临床意义

目的研究癌性胸水和结核性胸水患者血清及胸水中Si So细胞表达的受体结合肿瘤抗原(RCAS1)和CD105的表达水平和临床意义。方法根据病理类型将76例胸腔积液患者分为恶性胸腔积液(癌性组)40例和结核性胸腔积液患者(结核组)36例,应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)分别对两组血清及胸水中的RCAS1和CD105的水平进行检测,比较两组血清和胸水中RCAS1和CD105表达水平的差异以及两者与临床之间的关系。结果 40例恶性胸腔积液(癌性组)血清及胸水中RCAS1和CD105表达水平均高于36例结核性胸腔积液患者(结核组),癌性胸腔积液患者和结核性胸腔积液患者血清中RCAS1水平分别为(36.1988±5.6195)U/m L和(13.6022±3.2608)U/m L,癌性胸腔积液患者和结核性胸腔积液患者血清中CD105的水平分别为(6.2090±0.2608)μg/L和(5.1536±0.1872)μg/L,癌性胸腔积液患者和结核性胸腔积液患者胸水中RCAS1水平分别为(50.3008±5.3298)U/m L和(21.1433±3.1365)U/m L,癌性胸腔积液患者和结核性胸腔积液患者胸水中CD105的水平分别为(4.1133±0.1695)μg/L和(3.2492±0.1305)μg/L,两者相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论监测胸腔积液患者血清和胸水中RCAS1和CD105的表达水平对恶性胸腔积液和结核性胸腔积液的鉴别诊断有一定的临床应用价值。

RCAS1在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16感染的关系

背景与目的:表达在SiSo细胞上的受体结合肿瘤抗原(receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells,RCAS1)在多种肿瘤组织中呈高表达,并与肿瘤逃避免疫监视有关。本研究检测RCAS1蛋白在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16感染的相关性,并探讨其临床意义。方法:采用免疫组化SP(streptavidin-peroxidase)法,分别检测71例宫颈癌、76例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及20例正常宫颈上皮组织中RCAS1蛋白与HPV16E7蛋白的表达,并分析两者的表达与临床病理因素的关系。结果:宫颈癌组织中,RCAS1蛋白主要表达于癌细胞膜和/或细胞浆,HPV16 E7蛋白主要表达于癌细胞核。正常宫颈上皮组织不表达RCAS1蛋白,CIN与宫颈癌组织中RCAS1蛋白的表达率分别为39.47%和77.46%,HPV16 E7蛋白的表达率分别为0.05%、28.94%和61.97%,提示随着宫颈病变恶性程度的进展,RCAS1与HPV16 E7表达均逐渐增强(P<0.05)。低分化宫颈癌组中RCAS1表达显著高于高、中分化宫颈癌组(P=0.002),但与患者年龄、临床分期及组织学分型无关(P>0.05);HPV16 E7在鳞癌组中的表达显著高于腺癌组(P=0.000),但与患者年龄、临床分期、组织学分级无关(P>0.05)。RCAS1的表达与HPV16感染在宫颈癌中的表达呈正相关(r=0.780,P=0.000)。结论:RCAS1基因在宫颈癌组织中表达增强,RCAS1表达强度与宫颈癌恶性程度相关;RCAS1阳性的宫颈癌组织中存在HPV16感染。