用PCR-SSCP法鉴定差异显示中正确的阳性克隆cDNA片段

目的 使用PCR -SSCP的方法鉴定正确阳性克隆的cDNA片段 ,解决从差异显示序列凝胶中纯化序列不均一性的PCR产物所来带的实验误差。方法 差异显示方法、PCR片段克隆、质粒DNA扩增、PCR -SSCP电泳。结果 经基因测序分析证实cDNA克隆片段的PCR -SSCP电泳带泳动位置相同 ,基因序列也相同 ,电泳带泳动位置不同 ,基因序列也不同。结论 使用PCR -SSCP的方法能鉴定差异显示中正确的阳性克隆片段 ,并具有灵敏度高、重复性好的特点。

早胜牛及其杂交类群IGF-Ⅱ基因多态性与肉用性状关联分析

为研究IGF-Ⅱ基因多态性对胴体性状和肉质性状的影响,采用PCR-SSCP和DNA测序技术检测早胜牛及其杂交类群(南德温×早胜牛杂交一代、安格斯×早胜牛杂交一代)IGF-Ⅱ基因第2外显子的遗传多态性,分析不同基因型与肉用性状的相关性。结果表明,检测到1个SNPs(T116C),等位基因E和基因型EF频率分别为0.56和0.40,为优势等位基因和基因型;相关分析显示,屠宰率和优质肉块占宰前活质量比例FF型显著高于EE和EF型,净肉率EE型显著高于FF和EF型,背膘厚度FF和EE型都显著高于EF型,剪切力FF型显著低于EE和EF型。以上结果说明,IGF-Ⅱ基因第2外显子可以作为早胜牛肉用方向选育的有效分子标记。

早胜牛及其杂交类群GH基因遗传多态性研究

[目的]为深入探究早胜牛的分子遗传特性及潜力,重视和保护地方优秀种质资源,加快甘肃省肉牛新品种选育。[方法]以GH基因作为影响早胜牛及其杂交类群生长发育性状的候选基因,采用PCR-SSCP方法和DNA测序技术分析了GH基因Exon2和Exon5两个位点的遗传多态性。[结果]表明:GH基因存在遗传多态性,其中,Exon2位点检测到C1059T和C1150A两处SNPs,产生了AA、AB和BB三种基因型;Exon5位点检测到C2258T、C2277T和A2291C三处SNPs,产生了CC和CD两种基因型。[结论]为开展早胜牛GH基因遗传多态性与其生产性能的相关性研究提供了一定的理论依据。

早胜牛GH基因多态性与其生长发育性状的相关性分析

[目的]为研究GH基因多态性对早胜牛生长发育性状的影响,确定可用于肉牛新品种选育的优势基因型。[方法]采用PCR-SSCP方法和DNA测序技术检测了GH基因第2外显子及第5外显子的遗传多态性,应用最小二乘线性模型分析了不同基因型与不同生长阶段体重、体尺及肉用指数的相关性。[结果]GH基因第2外显子存在2处SNPs,产生了2个等位基因和3种基因型,多态信息含量为0.21,属于低度多态;第5外显子存在3处SNPs,产生2个等位基因了和2种基因型,多态信息含量为0.32,属于中度多态。相关性分析表明,第2外显子,初生重和6月龄重,BB型与AB显著高于AA型(P<0.05);周岁重,BB型显著高于AA型与AB型(P<0.05);第5外显子,初生重、6月龄重、周岁重及肉用指数,CD型都显著高于CC型(P<0.05)。[结论]GH基因第5外显子多态性更为丰富,选择潜力较大,可以作为早胜牛肉用方向选育的有效分子标记。