川芎嗪对rd和rds小鼠视网膜光感受器细胞干预作用的光镜观察

目的通过rd和rds小鼠视网膜光感受器细胞的病理变化探讨盐酸川芎嗪对遗传性视网膜色素变性小鼠可能的治疗作用。方法rd和rds新生鼠各84只,随机分为两组,实验组和对照组,每组42只小鼠。实验组小鼠从出生当天开始,ip盐酸川芎嗪80mg/kg,每日2次,至出生后35d;对照组ip等量生理盐水。分别于0d和注射后3、7、14、21、28、35d取眼球,立即经10%中性甲醛固定,光学显微镜下观察水平视网膜近赤道部位光感受器细胞的厚度。结果病理结果显示,经盐酸川芎嗪治疗后14、21、28、35d,与未用药的对照组相比较,rd和rds小鼠光感受器细胞层数明显增加(P<0.01)。结论川芎嗪可延缓rd和rds小鼠视网膜光感受器细胞的破坏。

人参皂苷Rd的抗癌机制研究进展

人参皂苷Rd是二醇型人参皂苷在人体肠道内的主要代谢产物之一,是三七、人参、绞股蓝等的提取物,具有广泛的生物活性。对心脑血管、神经系统、免疫系统及抗肿瘤方面等作用独特。由于人参皂苷Rd的药理作用的多样性和安全性,已成为人们关注的焦点,但因人参皂苷Rd的结构复杂,化学合成至今尚未成功,需从植物药中提取以满足医疗和科研的需要,但因植物中人参皂苷Rd的量较低,从植物中提取的方法难以满足需要。因此,国内外着重对有效获取人参皂苷Rd方面进行了大量研究,而忽略了其本身的抗癌功效。肿瘤防治现已成为世界性难题,据专家预测,由于我国目前环境污染和吸烟问题仍然严重,在2025年前癌症总的发病率不大可能下降,所以癌症是一个必须面对的多发病、常见病,而人参皂苷Rd由于其天然、价廉、低毒性,且在诱导癌细胞凋亡方面疗效显著,为抗癌药物新药开发提供了新的道路。故本文对人参皂苷Rd的抗癌机制研究进行了详细综述,旨在为人参皂苷Rd防治肿瘤及放化疗毒副反应提供理论依据。

苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨苦参碱(Ma)对人横纹肌肉瘤(RMS)细胞RD增殖及凋亡的影响。方法取对数生长期的细胞,分为对照组(无Ma);Ma组:Ma终浓度分别为0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL;U0126(MAPK抑制剂)组:U0126为10μmol/L;Ma联合U0126共同作用组:U0126均为10μmol/L,Ma浓度同Ma组;每组设5个复孔。给予相应药物作用后,采用倒置显微镜观察细胞形态学变化;四甲基氮唑蓝(MTT)比色法检测RD细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测凋亡率。结果药物作用后显微镜下可见细胞数目减少,细胞变小、变圆,随着Ma作用浓度的增加,RD细胞凋亡细胞逐步增多;Ma与U0126联合作用后,凋亡细胞明显增多,MTT比色法检测其抑制率按分组顺序分别为(13.39±1.13)%、(23.49±0.39)%、(38.84±0.35)%、(48.05±0.82)%、(63.47±1.35)%、(13.91±0.63)%、(24.52±0.46)%、(39.82±0.58)%、(48.98±0.31)%和(65.09±0.85)%;流式细胞仪检测其凋亡率按分组顺序分别为(5.49±0.96)%、(14.23±0.70)%、(25.84±4.17)%、(36.08±3.68)%、(42.53±2.71)%、(6.72±1.52)%、(17.23±3.42)%、(27.83±1.29)%、(38.25±1.44)%和(47.79±1.35)%;除U0126组外,其余各组与对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。结论苦参碱单独或与U0126共同作用RD细胞,可抑制该细胞的增殖,促进其凋亡,在本实验范围内浓度越高这种抑制增殖、诱导凋亡的作用越明显。

用RD-PCR技术获取IL-1β作用前后NIT-1细胞的差异表达基因

目的 :获取IL - 1β作用前后NIT - 1细胞的差异表达基因 ,为进行差异基因的克隆和鉴定奠定基础。方法 :利用转基因小鼠胰岛 β细胞系 (NIT - 1) ,通过应用一种改良的筛选差异基因的技术 (RestrictiondisplayPCR ,RD -PCR技术 )筛选cDNA的差异表达条带。结果 :通过对比对照组与实验组凝胶电泳结果 ,找出 79条表达有差异的条带 ,包括实验组出现的新条带和实验组缺失的条带。结论 :应用RD -PCR技术成功分离了IL - 1β作用前后NIT - 1细胞的差异表达条带 ,为大量筛选、克隆与鉴定与 β细胞破坏机制相关的新基因奠定基础 ,有助于了解胰岛素依赖型糖尿病 (IDDM)发病的分子机制。

遗传性视网膜变性rd小鼠及其感光细胞凋亡研究

目的 研究遗传性视网膜变性rd小鼠感光细胞层的发育变化及细胞凋亡。方法 对出生后 5d到4 0d的rd小鼠及对照小鼠视网膜感光细胞层进行光镜及超微结构观察、TUNEL法检测及形态计量学分析。结果 与同龄对照鼠相比 ,rd小鼠出生后第 10d视网膜开始变性 ,尔后 1周内感光细胞迅速减少 ,第 18d时只残留一层视椎细胞。rd小鼠出生后第 10d感光细胞层开始出现TUNEL染色阳性细胞 ,第 14d及 16d达到高峰。电镜下变性高峰期rd小鼠视网膜感光细胞层可见大量浓缩核、染色质边聚及凋亡小体。结论 rd小鼠视网膜感光细胞在发育过程中变性 ,并通过凋亡的方式死亡。

IgG4相关性疾病2023年度进展

IgG4相关性疾病(IgG4-RD)是一种由免疫介导的可致多器官受累的慢性炎症伴纤维化疾病,2023年IgG4-RD的研究取得了诸多进展,主要涵盖流行病学、动物模型及发病机制、诊断标准验证、临床表现和分型和治疗等多方面内容。本文将介绍上述领域的代表性成果。

中药复方制剂对rds小鼠感光细胞凋亡的干预作用研究

目的观察中药复方制剂对先天性视网膜变性小鼠视网膜感光细胞凋亡的影响。方法以黄芪等药组成复方制剂1。对先天性视网膜变性动物模型rds小鼠,采用原位末端转移酶标记(TUNEL)方法及组织病理学技术,观察复方制剂1作用后,小鼠视网膜感光细胞数量及感光细胞凋亡的变化。结果仔鼠2周时,中药组小鼠视网膜感光细胞核数与对照组相比无明显差别,两组感光细胞凋亡率分别为1.6%及6.5%,组间差异有显著性(P<0.01);4周时中药组感光细胞核数目较对照组多,差异有显著统计学意义(P<0.01),两组感光细胞凋亡率分别为3.3%及8.5%,组间差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论中药复方制剂1可以延缓rds小鼠视网膜色素变性过程中感光细胞凋亡的发展。

人参皂苷Rd对高糖致人牙周膜干细胞成骨分化抑制作用的影响

目的:探讨高糖诱导条件对人牙周膜干细胞(PDLSCs)增殖及分化的影响,并探讨人参皂苷Rd(GSRd)对高糖诱导PDLSCs成骨分化的影响。方法:PDLSCs经高糖(30 mmol/L D-葡萄糖)或对照(5 mmol/L D-葡萄糖)处理后,通过测定PDLSCs的碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙蛋白(OCN)和ALP的mRNA表达及骨桥蛋白(OPN)的蛋白表达,以评估PDLSCs成骨分化水平。同时通过检测GSRd对PDLSCs经高糖处理后超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的mRNA及蛋白表达水平,以评估GSRd对高糖诱导PDLSCs成骨分化中氧化应激的影响。结果:高糖处理可减低PDLSCs中ALP的活性(P<0.05),而10和40μmol/L的GSRd可提高正常和高糖培养条件下PDLSCs中ALP的活性(P<0.05);并且,GSRd可上调ALP、OCN mRNA表达及OPN蛋白表达(F=102.893、56.061、60.296,P<0.05),上调CAT、SOD的mRNA及蛋白表达水平(F=48.393、67.134、29.837、7.539,P<0.05)。结论:GSRd对体外培养的PDLSCs的成骨分化有一定的促进作用;在高糖条件,GSRd可以减轻氧化应激对PDLSCs成骨的抑制作用,促进PDLSCs的成骨作用。

川芎嗪对视网膜色素变性rd小鼠的干预作用及其抗凋亡作用机制研究

目的观察川芎嗪对视网膜色素变性rd小鼠视网膜外核层细胞的病理、超微结构、凋亡和Bcl-2表达的影响,探讨川芎嗪对rd小鼠的干预作用和干预机制。方法rd新生小鼠84只随机分为实验组和对照组,每组42只。实验组小鼠从出生时腹腔注射盐酸川芎嗪80mg/kg,每天2次,至生后35天,对照组同时注射等量生理盐水。分别在用药后0、3、7、14、21、28、35天取眼球,立即经10%中性甲醛固定,常规病理切片。另取眼球经2.5%戊二醛溶液固定,电镜观察。用TUNEL方法检测视网膜外核层细胞的凋亡,用免疫组化方法测定Bcl-2在视网膜的表达。结果病理结果显示,经盐酸川芎嗪治疗后14、21、28、35天rd小鼠外核层细胞层数与未用药对照组比较,明显增加(P<0.01)。电镜结果显示,川芎嗪可减缓rd小鼠外核层细胞和视网膜光感受器细胞外段盘膜部位线粒体的病变,减少盘膜和外界膜的破坏。rd小鼠经盐酸川芎嗪药物治疗后第7、14、21、28、35天外核层细胞的凋亡率明显低于未用药对照组(P<0.01);第3、7、14、21、28、35天Bcl-2在视网膜外核层及光感受器细胞外段的表达明显增强(P<0.05或0.01)。结论盐酸川芎嗪可延缓rd小鼠视网膜外核层细胞的减少,其作用机制可能是通过上调视网膜外核层及光感受器细胞外段Bcl-2的表达延缓rd小鼠视网膜光感受器细胞的凋亡。

rd小鼠出生后5周内视网膜外核层细胞及其外段的光镜和电镜观察

目的观察遗传性视网膜色素变性rd小鼠视网膜外核层细胞层的病理和超微结构变化,为进一步应用rd小鼠进行实验研究提供数据。方法rd新生鼠42只,分别在第0、3、7、14、21、28、35d取眼球,立即经10%中性甲醛固定,光学显微镜下观察眼球水平位视网膜赤道部外核层细胞的厚度;另取眼球经2.5%戊二醛溶液固定,电镜观察。结果病理结果显示,rd小鼠视网膜外核层细胞层数或密度从第14d开始减少2.14层±0.60层,第21d减至近单层1.30层±0.37层,第35d减至0.57层±0.25层。电镜结果显示,rd小鼠视网膜光感受器细胞层生后第14d出现凋亡;外段盘膜部位线粒体从第7d开始出现部分溶解、减少,逐渐加重;外界膜也从第7d开始变为较连续,第21d后不连续。结论视网膜光感受器细胞外段的线粒体和外界膜对于视网膜盘膜的形成起重要作用。这一结果为进一步开展rd小鼠的研究提供了科学依据。

人参皂甙RD预处理对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨人参皂甙RD预处理对谷氨酸所致PC12细胞损伤的影响。方法将PC12细胞分为对照组、谷氨酸损伤组和人参皂甙RD预处理组。对照组细胞正常培养;谷氨酸损伤组细胞置于含10 mmon/L谷氨酸的DMEM培养基中培养24 h;人参皂甙RD预处理组细胞经50μmol/L人参皂甙RD预处理30 min后,再加谷氨酸继续培养24 h。采用噻唑蓝比色法检测细胞活力;按试剂盒检测培养液乳酸脱氢酶(LDH)释放量;流式细胞仪检测胞内活性氧(ROS)水平;按试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果人参皂甙RD预处理最佳浓度为50μmol/L。与谷氨酸损伤组相比,人参皂甙RD预处理PC12细胞活力明显增高(P<0.05),培养液LDH释放量明显降低(P<0.05),胞内ROS含量明显降低(P<0.05),胞内SOD含量明显增高(P<0.05)。结论人参皂甙RD预处理可减轻谷氨酸引起的PC12细胞损伤。

中药夜明方对rds小鼠视网膜感光细胞干预作用的实验研究

目的:探讨中药夜明方对遗传性视网膜色素变性小鼠的治疗作用。方法:选4周龄和12周龄rds小鼠各9只,各随机分为3组,即空白对照组、杞菊地黄丸组和中药夜明方组,每组3只小鼠。夜明方组每天20 mL/kg夜明颗粒溶液灌胃,杞菊地黄丸组每天20 mL/kg杞菊地黄丸原液灌胃,空白对照组每天等量蒸馏水灌胃。连续28天灌胃后,颈椎脱臼术处死小鼠,摘取眼球,立即经10%甲醛固定48 h,光学显微镜下观察水平视网膜近赤道部位光感受器细胞的厚度。结果:观察结果显示,经夜明方治疗28天后,与空白组和杞菊地黄丸组相比较,夜明方可延缓rds小鼠视网膜外核层层数的减少(P<0.05)。结论:夜明方可延缓rds小鼠视网膜光感受器的破坏。

脑苷肌肽对rd小鼠视网膜细胞保护作用的研究

目的观察脑苷肌肽(cattle encephalon glycoside and ignotin,CEGI)对体外分离的rd小鼠视网膜细胞的保护作用,旨在探求CEGI对视网膜以及视神经损伤相关疾病的治疗效果,为临床用药提供客观依据和指导。方法采用体外分离rd小鼠视网膜细胞悬液,用MTT和台盼蓝染料排斥法观察CEGI和神经生长因子(NGF)对细胞活性的影响。结果 MTT实验示CEGI8.00mg·L-1、0.04g·L-1、0.20g·L-1和NGF0.04mg·L-1、0.20mg·L-1对视网膜细胞活性有促进作用,尤其以CEGI0.04g·L-1和NGF0.20mg·L-1最为明显,细胞增殖率分别为130.0%±21.8%和124.0%±13.3%。若将二者组合使用,可使细胞增长率达到132.0%±9.1%,与药物空白对照组100.0%±10.1%相比差异均有统计学意义。台盼蓝染料排斥试验结果显示0.04g·L-1CEGI组活细胞比例在除5min外的各时间点,都明显高于对照组,而0.20mg·L-1NGF组也可保护视网膜细胞,主要以短时间点为主(5min～1d),与对照组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 CEGI有促进视网膜细胞生长发育作用,对rd小鼠视网膜细胞有一定的保护作用。

5-aza-2′脱氧胞啶联合组蛋白乙酰基转移酶抑制剂LAQ对体外RD-ES细胞的抑制作用

研究5-杂氮-2'-脱氧胞啶(5aza-CdR)联合组蛋白乙酰基转移酶(HDAC)抑制剂LAQ对体外RD-ES细胞的抑制作用。体外培养人尤文氏瘤细胞株RD-ES,观察不同浓度5aza-CdR联合HDAC抑制剂LAQ对RD-ES细胞的生长抑制作用。本实验表明HDAC抑制剂能增强5aza-CdR对RD-ES细胞抑制作用,且呈量-效关系,LAQ对RD-ES细胞系的IC50值是8 ng/mL,5aza-CdR联合LAQ对体外RD-ES细胞的抑制作用显著,并与瘤抑制基因ECAD和TSLC1的表达密切相关。5-az,a-2'脱氧胞啶联合HDAC抑制剂LAQ对RD-ES细胞生长有明显的抑制作用。

视网膜色素变性rds小鼠生后5周内视网膜外核层细胞光镜和电镜观察

目的观察遗传性视网膜色素变性rds小鼠在出生后5周内视网膜外核层细胞的光镜和超微结构变化,为进一步应用rds小鼠进行实验研究提供数据。方法rds新生鼠42只,在0d、3d、7d、14d、21d、28d、35d分别取11个眼球,立即经体积分数10%中性甲醛固定,光学显微镜下观察眼球水平位视网膜赤道部外核层细胞的厚度;另取1个眼球经体积分数2.5%戊二醛溶液固定,电镜观察外核层细胞及其盘膜。结果光镜观查结果显示:0d、3d视网膜的外核层和内核层未分开;7d的rds小鼠外核层和内核层已能区分,外核层光感受器细胞层数为(9.55±0.69)层;14d稍有增加为(10.09±0.70)层;21d后逐渐减少,为(9.00±0.63)层;28d为(8.27±0.65)层;35d为(7.91±0.70)层。电镜结果显示,rds小鼠视网膜的外核层细胞从出生后第14天凋亡细胞增加;第21天盘膜初步形成,但部分被破坏;线粒体在出生当天、第3天和7天丰富,第14天破坏较重;外界膜从第14天发展为不连续;从7d开始,视网膜色素上皮层出现多层和吞噬泡增多。结论rds小鼠从21d后视网膜外核层细胞逐渐减少,视网膜光感受器细胞外段的线粒体和外界膜破坏逐渐加重。这一结果为进一步开展rds小鼠的研究提供了科学依据。

IgG4相关性疾病(IgG4-RD)发病机制的研究进展

IgG4相关性疾病(IgG4-related disease,IgG4-RD)是以多发脏器肿大、血清IgG4升高为特点的一类自身免疫性疾病,发病机制仍不明确。病原体感染导致抗原呈递细胞表面模式识别受体激活,通过抗原呈递促进CD4+T细胞激活,分化为Th1、Th2、Treg和Tfh细胞,产生一系列T细胞因子,进一步促进B细胞活化并转化为浆细胞,产生IgG4。而巨噬细胞和Treg细胞产生的转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)和血小板源性生长因子等进一步促进了纤维化的发生。以上细胞因子和免疫细胞参与IgG4-RD发病,为今后的治疗策略提供了新的思路。

苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖凋亡的影响及其作用机制

目的:探讨苦参碱(Matrine,Ma)对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖凋亡的影响及其作用机制。方法:将我组经体外培养的人横纹肌肉瘤RD细胞随机分为实验组和对照组。其中,实验组又分为3个小组且3个小组的细胞中分别加入浓度为0.5mg/ml、1.0mg/ml和1.5mg/ml的苦参碱,对照组细胞中不加入苦参碱。然后应用MTT比色法检测苦参碱对横纹肌肉瘤RD细胞增殖的影响;应用流式细胞仪(FCM)检测苦参碱对横纹肌肉瘤细胞凋亡的影响;应用RT-PCR检测不同浓度苦参碱作用后fas、caspase3等凋亡相关基因的mRNA表达水平。结果:①在抑制RD细胞增殖、诱导RD细胞凋亡方面,实验组和对照组间的差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组可明显抑制RD细胞增殖、诱导RD细胞凋亡,且作用效果与剂量相关。②将浓度为2.0mg/ml的苦参碱作用于RD细胞24h后,细胞增殖的抑制率和凋亡率分别为(50.49±0.076)%和(39.43±0.487)%。③实验组caspase3和FasmRNA的表达较对照组明显增强(P<0.05)。结论:苦参碱能有效抑制人横纹肌肉瘤RD细胞增殖、诱导人横纹肌肉瘤RD细胞凋亡,且caspase3和FasmRNA等相关基因可能参与了苦参碱抑制RD细胞增殖和诱导RD细胞凋亡的过程。

IgG4-RD中恶性肿瘤发病的相关性研究

目的初步分析IgG4-RD中恶性肿瘤的发病情况,同时分析IgG4对恶性肿瘤的监测意义,为临床上利用IgG4评估恶性肿瘤病情进展及预后提供参考依据。方法选取60例IgG4-RD患者纳入分析,进行Ig G4-RD组与非IgG4-RD组恶性肿瘤发病情况对比、恶性肿瘤患者与非恶性肿瘤患者血清Ig G4水平对比以及血清IgG4水平对恶性肿瘤的监测价值分析,同时对肿瘤组及非肿瘤组的T-reg细胞计数进行对比。结果 IgG4-RD组与非IgG4-RD组恶性肿瘤发病情况对比结果显示,除胰腺癌人数构成比在两组间存在统计学差异外(P <0. 05),其他恶性肿瘤人数构成比在两组间均没有统计学差异(P>0. 05);恶性肿瘤患者与非恶性肿瘤患者血清IgG4水平没有统计学差异(P> 0. 05),不同性别恶性肿瘤患者血清Ig G4水平没有统计学差异(P>0. 05),不同年龄及病程恶性肿瘤患者血清IgG4水平有统计学差异(P<0. 05);肿瘤组T-reg细胞计数显著高于非肿瘤组(P <0. 05);血清IgG4对胰腺癌及肝癌的监测价值明显优于其他类型的恶性肿瘤,且二者的ROC曲线下面积达到优质诊断指标的临界标准(曲线下面积大于0. 6)。结论 T-reg细胞计数的升高是IgG4-RD中恶性肿瘤发病的重要指征之一,血清IgG4对胰腺癌和肝癌的监测价值也明显优于其他类型的恶性肿瘤,说明血清Ig G4水平的升高与胰腺癌的相关性较其他恶性肿瘤更高;但本研究其他结果则表明血清IgG4水平对恶性肿瘤的发生与否仅有一定的提示意义,并不具有作为诊断依据的研究价值。

RD、Hep-2、L20B细胞用于脊髓灰质炎病毒学监测的实验研究

目的 :观察 RD、Hep- 2和 L 2 0 B用于脊髓灰质炎病毒学常规监测的实验结果 ,提高脊髓灰质炎病毒的检出率。方法:对 RD、Hep- 2和 L2 0 B用于脊髓灰质炎病毒监测进行了实验研究。用细胞培养法进行病毒分离。结果 :L2 0 B细胞对脊髓灰质炎病毒具有较强的敏感性和特异性 ,但非脊髓灰质炎肠道病毒 (NPEV)在 RD细胞上呈选择性增值 ,可能会造成 NPEV检出率下降。 结论:RD、Hep- 2和 L2 0

大蒜素对人横纹肌肉瘤RD细胞的作用及其机制

目的探讨大蒜素(allicin)对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖和凋亡的作用及其相关机制。方法应用不同浓度大蒜素(5,10,20,30μg/ml)作用人横纹肌肉瘤RD细胞株24h,采用MTT比色法检测不同浓度大蒜素下RD细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测不同浓度大蒜素作用后RD细胞的凋亡率。结果 MTT比色法检测各实验组增殖抑制率分别为(25.82±1.75)%、(31.04±1.61)%、(36.32±1.61)%、(42.58±3.88)%;流式细胞仪检测对照组及各实验组凋亡率分别为(5.23±0.80)%、(7.07±0.83)%、(10.60±2.51)%、(15.70±1.79)%、(19.33±0.72)%。以上检测各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论大蒜素能有效抑制RD细胞的增殖,诱导其凋亡。