信息可视化系统的RDV模型研究

信息可视化是信息管理和信息系统的热点研究问题.本文是在应用研究的基础上,从可视化问题的共性出发,建立了一个基于代数结构原理的信息可视化系统RDV模型.文章分析了RDV模型的三级结构,并对他们及其相互关系作了严格的数学描述,最后指出RDV模型的特点及适用性.

水稻矮缩病毒(RDV)基因组cDNA克隆和部分DNA序列分析

采用氯仿处理、聚乙二醇沉淀和蔗糖密度梯度离心的方法,从感病的水稻叶片中分离、纯化了水稻矮缩病毒(RDV)。在琼脂糖凝胶板上电泳分离到了9个 RNA 片段的 RDV 基因组。用电泳回收的方法纯化了 RDV 基因组的各 RNA 片段。利用 ollgo dT 作为引物,合成并克隆了其中几个片段的 cDNA。通过对 cDNA 克隆的物理图谱分析,建立了亚克隆,测定了它们的 cDNA 序列。这里报告其中第8条片段的 cDNA 部分序列。

单引物法同时克隆RDV基因组片段S11、S12及其序列分析

水稻矮缩病毒(Rice dwarf wrus,RDV)6个地方分离物基因组的lO%SDS-PAGE电泳图谱显示:松溪分离物基因片段S11、S12相对迁移速率明显不同。运用单引物法同时克隆该分离物的基因组片段S11、s12,并测定它们的全序列,结果表明s11、S12全长分别是1036bp、l066bp,基因结构和报道的RDV福州分离物基本一致,但分别突变了34、24个碱基,同源性分别为97.01%、97.86%。同时单引物法也为dsRNA病毒基因组的克隆提供了一种方法。

我国水稻普通矮缩病的研究进展

水稻普通矮缩病是由矮缩病毒经多种叶蝉传播的病毒病害。主要分布于我国长江以南稻区。近年来,病害发生程度逐年加重,发病面积不断扩大,并有进一步扩散的趋势。本文就矮缩病的病毒研究、抗性研究、发生规律和防治方法等进行了阐述,并针对我国普通矮缩病的研究现状及研究方向提出了建议。

心室复极化时程变异的检测研究

ＱＴ间期受到前一ＲＲ间期和心室肌细胞状态的影响，因此对心室复极化时程变异（ｒｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｄｕｒａｔｉｏｎｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ，ＲＤＶ）的分析可用来评价心室疾病状况。由于ＱＴ间期检测困难，一般以ＲＴ间期代替ＱＴ间期。我们采用以相关系数为条件的模板匹配的方法检测Ｔ波峰值点。受试者受控呼吸时，从ＨＲＶ和ＲＤＶ谱分析的结果可以看到，高频峰受到呼吸频率的调制。在乌拉坦麻醉下，用阿托品改变大白鼠呼吸频率，也可以看到类似的结果。这些结果证明了ＲＤＶ检测方法的可靠性，为今后进一步深入研究心室复极化的心电图指标打下了基础，将会在一些心室疾病的早期诊断和预后评估等方面发挥更大的作用。

30例肝硬化性贫血患者MCV／RDW分类及红细胞直方图分析

３０例肝硬化性贫血患者ＭＣＶ／ＲＤＷ分类及红细胞直方图分析（０６１００１）河北省沧州市中心医院检验科赵勇，耿素敏我们用Ｆ─８Ｏ０血液分析仪测定了３０例肝硬化性贫血患者的红细胞平均体积（ＭＣＶ）、红细胞体积分布宽度（ＲＤＷ）和红细胞直方图，旨在了解肝硬...

心室复极时间变异性

体表心电图上心室复极时间的逐拍微小变化称为复极时间变异性(RDV)。与心率变异性相比较,RDV直接反应心室状况及自主神经的影响,有可能成为研究心室复极动态变化的有用指标。本文概要介绍了RDV的由来、分析方法和研究现状。

水稻矮缩病毒外壳蛋白基因S8在昆虫细胞中的表达

将水稻矮缩病毒 (RiceDwarfVirus,RDV)外壳蛋白基因S8克隆到杆状菌毒转移载体 pVL1 393中 ,重组转移载体 pVL1 393 S8与线性杆状病毒RP2 3.LacZ共转染草地夜蛾细胞sf9,经过细胞体内同源重组、PCR筛选得到重组病毒RP2 3 S8。重组病毒RP2 3 S8感染sf9细胞后 ,收集细胞 ,并进行SDS PAGE及Western blot检测。结果表明 ,S8基因在昆虫细胞中成功表达 ,且在感染后

转基因抗矮花叶病玉米的遗传、表达及抗病性研究

目的:研究目的基因在转基因植株及其后代中遗传表达的稳定性,以及目的基因表达与抗病性的关系,最终得到转基因纯合株系。方法:以采用花粉介导法将RDV运动蛋白缺陷型(RDV MP-)基因导入玉米自交系478的转基因种子(T0)作为试验材料,对其或其后代进行潮霉素抗性筛选、PCR检测、目的基因表达产物含量测定、农艺性状筛选,以及田间接种病毒的抗病鉴定。结果:通过潮霉素抗性筛选从T0种子获得了11株疑似转化植株;对T1、T2、T3代转基因植株的PCR分析证实目的基因已导入玉米植株,并显示随着转化植株世代交替,目的基因可稳定遗传给下一代,且目的基因在待测材料中的检出比例也随着代数的增加而提高;目的基因表达量的测定结果为1.83～11.57 ng/mg叶片鲜重之间;田间接种玉米矮花叶病病毒试验结果证明转化植株比对照植株的抗矮花叶病能力有了显著提高,个别株系在T1代的发病率就为0,T1、T2、T3代转化植株的抗病性逐代提高,比临近对照的抗病性提高2～5级;目的基因表达量与植株(系)的抗病性显著相关,r=0.923,P<0.01;入选纯合系的农艺性状也有较大变化,穗粒数比对照系增加约5%。结论:通过以上方法,可以筛选到转基因抗病玉米纯合株系。

规模化猪场仔猪腹泻4种病原的感染情况调查

采用PCR和RT-PCR技术,对福建省16个规模化猪场的仔猪腹泻样本进行致病性大肠杆菌(EPEC)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪轮状病毒(RDV)的感染情况调查。结果表明:15个猪场EPEC检测为阴性,1个猪场同时检测到大肠杆菌K88的201 bp条带和仔猪水肿病大肠杆菌F18ab菌毛蛋白的510 bp条带,EPEC的阳性率为6.25%。1个猪场检测到TGEV的497 bp特有条带,TGEV的阳性率为6.25%。3个猪场检测到PEDV的854 bp特有条带,PEDV的阳性率为18.75%。3个猪场检测到RDV的342 bp特有条带,RDV的阳性率为18.75%。1个猪场同时感染EPEC和PEDV 2种病原,其余的15个猪场均为单一病原感染。表明福建省规模化猪场的仔猪腹泻仍然存在EPEC、TGEV、PEDV、RDV病原感染,呈现散发流行,与以往的报道相比阳性率明显下降。

转基因玉米株系纯合系选育及其农艺性状表现

目的:以携带水稻矮缩病毒(RDV)运动蛋白缺陷型(MP-)基因的转基因玉米种子T0为试验材料,通过分子分析、抗病鉴定及农艺性状筛选得到转基因纯合株系。方法:首先对转化种子进行潮霉素抗性筛选,其后对各代转基因材料进行PCR检测、农艺性状调查和抗病鉴定。结果:从645粒T0转化种子得到抗潮霉素植株246株,即T1转基因植株。T1、T2、T3、T4代材料的PCR检测阳性率分别为56.9%、83.9%、94.6%和99.8%,证明RDVMP-基因已被导入玉米自交系中,且目的基因可以稳定遗传到转基因植株及其后代。田间人工接种抗病鉴定结果表明,经过连续筛选,转基因后代植株(系)的抗病性不断提高,T1、T2、T3和T4代中的高抗病材料分别占总材料数的8.9%、31.5%、70.7%和100%;所选纯合系连续2年的发病率均为0,抗病性比相应对照株系提高4级。农艺性状调查结果表明,转基因株系的株高比对照株系高15.0～33.4cm,穗位高提高13.4～20.2cm,;穗长增加2.0～3.8cm,穗粒数增加10.2～22.8粒。结论:根据分子检测、田间抗病鉴定及农艺性状鉴定结果,选育到96C0502、96C0507和96C0513等抗矮花叶病转基因玉米纯合株系。

16个水稻品种对水稻矮缩病毒抗性的鉴定

16个水稻品种对水稻矮缩病毒(Rice dwarfvirus,RDV)的抗性鉴定结果表明:不同水稻品种对RDV的抗性存在明显差异.根据各品种的发病率划分其抗性等级.免疫品种1个,占供试品种的6.25%;中抗品种6个,占37.50%;中感品种3个,占18.75%;高感品种6个,占37.50%.感病品种潜育期较短,为11-15 d左右;抗病品种潜育期较长,为15-20 d左右.水稻品种的发病率与叶蝉带毒率密切相关,相关系数为99.99%.协优46兼具抗虫性和抗病性;宜香2292仅具抗病性;冈优734为免疫品种,是水稻矮缩病抗性育种的良好材料.

水稻矮缩病毒第一号组份基因和编码蛋白的序列分析

水稻矮缩病毒（RiceDwarfVirus，简称RDV）是我国南方水稻病毒病的重要病原，属植物呼肠孤病毒。从中国福建分离物中克隆了基因组第一号片段（S1）的全长cDNA并对其进行全序列分析，结果表明RDV福建分离物S1克隆片段全长4422bp，含有一个长4332bp的开放阅读框架，编码一个由1444个氨基酸组成的多肽（P1），分子量为164kD．根据基因序列，对推测的P1氨基酸序列分析表明，序列中含有依赖于RNA的RNA聚合酶（RNA-dependentpolymerase-RDRP）保守序列：motifＩ（DXXXXD）、motifⅡ（SGXXXTXXXN）和motifⅢ（GDD），除此之外，在模式Ⅲ后还存在一个很保守的区域EXXKXY。由此说明RDVS1编码的蛋白P1可能是病毒的一种RDRP。将RDV福建分离物引核苷酸和编码蛋白氨基酸序列与日本流行株系相比，同源性分别为95％和97％。RDV福建分离物S1序列已被DenBank接受，号码为U73201。

水稻矮缩病毒昆明分离物抗血清制备及免疫捕捉PCR检测

By Using the modified method to extract Rice dwarf virus virions from infected rice leaves,a concentration 3.854mg/mL of purified virus virions reached,and the Rabbits was immunized with purified virions,yielding high titer antiserum;1:20480 by the indirect enzyme-linked immunosorbent assay(I-ELISA)test.The antiserum successfully detected three rice samples from Kunming,Yuxi and Luliang by I-ELISA.Immunocapture polymerase chain reaction(IC-PCR),respectively was the utilized to show that serologic and molecular methods were successfully used for detection of Rice dwarf virus.

表达反义核酶RNA的转基因水稻对矮缩病毒复制和症状的抑制作用

用基因枪法将含有ＲＤＶ第五片段反义核酶序列基因的植物表达载体ｐＲＯＫＩＩ转化水稻幼胚，在Ｇ４１８存在的条件下，约２～３个月可筛选出抗性愈伤，转入分化培养基中培养可分化出幼苗。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法检测为阳性的水稻幼苗进行抗病性测定显示，转ＲＤＶ反义核酶基因的水稻植株对ＲＤＶ的复制和症状有显著抑制作用。转基因植株发病较轻，并能部分结实，而对照植株则明显矮化且大多不能抽穗。

用含水冷冻电镜技术测定的水稻矮缩病毒的三维结构

用含水冷冻电镜技术和计算机数据处理方法分别测定了水稻矮缩病毒（ＲＤＶ）完整颗粒和只含内壳层的颗粒的三维结构，其分辨率分别为２．６ｎｍ和３．３ｎｍ。从完整颗粒的结构中可以清晰地看到它的外壳层和内壳层的双层结构及其内部的ＲＮＡ或非结构蛋白质的电子密度。完整颗粒和内壳层的直径分别为６９．８ｎｍ和５４．０ｎｍ，外壳层和内壳层的厚度分别为６．９ｎｍ和２．５ｎｍ。外壳层表面的三角形剖分数Ｔ＝１３。外壳层由２６０个衣粒（三体）组成，因此共有７８０个蛋白质亚基。外壳层和内壳层上均有许多通道。内外壳层之间以及外壳层的衣粒之间是以一种十分新颖的联锁方式相互连接的。

抗水稻矮缩病毒的反义核酶及复制酶部分序列的合成、克隆及其水稻表达载体的构建

采用反转录－聚合酶链式反应方法（ＲＴＰ－ＣＲ），在人工合成的引物引导下，扩增出水稻矮缩病毒基因组第一片段（Ｓ１）全长序列及第五片段的部分序列（ＳＳⅢ）．将扩增的片段分别克隆到克隆载体ｐＧＥＭ７Ｚｆ（＋）及ｐＵＣ１９的ｓｍａｌ位点上，并进行了序列测定。在此基础上，利用ｐＣＲ引入的方法将核酶序列引入到Ｓ５Ⅲ片段反义链上以构成反义核酶基因Ｓ５ⅢＲ，将Ｓ１片段５＇端部分序列（Ｓ１－１）及Ｓ５ⅢＲ基因克隆到植物表达载体ｐＲＯＫⅡ上，构建成水稻转化载体ｐＲＯＫ－Ｓ１－１＇及ｐＲＯＫ－Ｓ５ⅢＲ。

黑尾叶蝉RNAi途径关键蛋白AGO2多克隆抗体制备及应用

【目的】制备效价高且特异性强的黑尾叶蝉RNAi途径关键蛋白Argonaute 2(AGO2)多克隆抗体,为进一步研究AGO2蛋白在叶蝉RNAi免疫途径中的调控功能及作用机制提供技术支持。【方法】通过RT-PCR从黑尾叶蝉基因组扩增出AGO2基因的功能片段,与原核表达质粒pET-28a重组构建重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21感受态细胞进行诱导表达;以纯化的AGO2融合蛋白免疫雄性新西兰大白兔获得高效价的多克隆抗体,并以多克隆抗体为一抗,采用Western blotting检测AGO2蛋白在健康和带毒黑尾叶蝉中的表达情况。【结果】RT-PCR扩增获得的黑尾叶蝉AGO2基因片段为1635 bp,构建的pET-AGO2重组质粒能在BL21感受态细胞中成功表达出AGO2融合蛋白,其最适表达条件:温度28℃,IPTG浓度0.5 mmol/L,诱导时间5 h,摇床转速220 r/min。以纯化AGO2融合蛋白免疫雄性新西兰大白兔获得的多克隆抗体效价为1∶106,抗体浓度约350μg/mL。Western blotting检测结果表明,AGO2蛋白在健康和水稻矮缩病毒(RDV)感染黑尾叶蝉中均有表达,但与健康黑尾叶蝉相比,AGO2蛋白在RDV感染黑尾叶蝉中的表达水平更高,即RDV侵染能提高AGO2蛋白的表达水平。【结论】制备获得的黑尾叶蝉RNAi途径关键蛋白AGO2多克隆抗体具有高纯度和高效价,且特异性强,可用于检测AGO2蛋白在病毒感染黑尾叶蝉中的表达水平,进而揭示AGO2蛋白在介体昆虫RNAi途径中的功能机制。

转水稻粗缩病毒运动蛋白缺陷型基因玉米的二重PCR检测

以外源基因(RDV MP-)和玉米内源基因Zein作为PCR扩增对象,旨在建立一种简便有效的转基因玉米及其产品的二重PCR检测技术。转外源基因(RDV MP-)材料的常规PCR检测结果证明外源基因在转基因材料中可稳定遗传;对常规PCR检测的阴性结果材料进行二重PCR检测,扩增结果除进一步证实常规PCR检测的阴性结果结论外,还证明提取的植物总DNA质量符合试验要求,进而从二重PCR检测结果还得出常规PCR检测的阴性结果出错率为1.4%。此方法简单,实用,结果可靠,可适用于转基因植物及产品的检测。

一种VSAR地面目标估计和定位新方法

针对速度合成孔径雷达(VSAR)地面运动目标方位定位,在距离-多普勒-速度域提出了一种基于改进Radon变换的目标径向速度估计新方法。基于VSAR地面运动目标信号模型,首先通过改进Radon变换实现模糊数和待定距离估计。进而,利用滑窗处理确定目标正确距离和模糊多普勒中心,实现运动目标速度估计和正确定位。新方法通过级联处理实现速度估计和定位,运算量小。最后,仿真结果证明了方法的正确性和有效性。