水稻矮缩病毒(RDV)基因组cDNA克隆和部分DNA序列分析

采用氯仿处理、聚乙二醇沉淀和蔗糖密度梯度离心的方法,从感病的水稻叶片中分离、纯化了水稻矮缩病毒(RDV)。在琼脂糖凝胶板上电泳分离到了9个 RNA 片段的 RDV 基因组。用电泳回收的方法纯化了 RDV 基因组的各 RNA 片段。利用 ollgo dT 作为引物,合成并克隆了其中几个片段的 cDNA。通过对 cDNA 克隆的物理图谱分析,建立了亚克隆,测定了它们的 cDNA 序列。这里报告其中第8条片段的 cDNA 部分序列。

水稻普矮病毒基因组第十片段cDNA的克隆及其体外转录

由提纯的水稻普矮病毒(Rice Dwarf Virus,简称 RDV)中分离出其基因组 dsRNA,以人工合成的分别与 RDV 第十片段(RDV-S_(10))3′末端互补的两段核苷酸作为引物,合成并克隆 S_(10)全长 cDNA,体外转录成 RNA。用同位素标记的其 cDNA 作为探针,打点杂交,能检测出浓度为2×10^(-12)g 的病毒核酸和直接测出1.25×10^(-4)g 染病水稻中的病毒核酸。