REIC/Dkk-3蛋白在肿瘤发生发展中的作用

REIC基因在永生化的细胞系和部分肿瘤细胞系中发现并且表达下调,在许多人的肿瘤组织中表达也减少.目前研究认为,REIC/Dkk-3表达下调可能与启动子的甲基化有关.异常REIC/Dkk-3表达所致细胞表型异常在恶性肿瘤发生和演进过程中发挥重要作用.细胞浆型和分泌型REIC与靶蛋白作用后启动细胞信号传导,但是REIC/Dkk-3的生物学功能尚未深入阐述.对REIC/Dkk-3的研究在理论上可以大大推动肿瘤病因学的发展,为肿瘤的诊断和治疗提供一个新的分子靶点,对提高肿瘤患者生存率和生存质量具有很大的促进作用.如果能研发REIC/Dkk-3抗肿瘤重组多肽及增强REIC/Dkk-3作用的化疗药物,也将为肿瘤患者治疗开辟新的途径和思路.本文就REIC/Dkk-3蛋白在肿瘤发生发展中作用进行综述.

Wnt信号通路拮抗因子DKK-3在肿瘤中的研究进展

Wnt信号通路在肿瘤细胞的增殖、分化及发生中发挥了重要作用,其异常激活是许多肿瘤的重要特征。作为分泌性Wnt信号通路的拮抗因子Dickkopf相关蛋白-3(DKK-3),深入研究其生物学功能以及抑制Wnt信号通路的机制,对肿瘤诊断、治疗及预后具有重要意义。本文就DKK-3的生物学作用,参与肿瘤不同阶段的发展,以及DKK-3表达/DKK-3启动子甲基化作为肿瘤生物标志物和分子靶点的潜在临床价值作一简要综述。

DKK-1、GSK-3β、PGSK-3β在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨DKK-1、GSK-3β、PGSK-3β在宫颈鳞癌组织中的表达及与其发生发展、临床病理特征的关系。方法收集病理组织标本:包括慢性宫颈炎25例,宫颈上皮内瘤变29例,宫颈鳞癌41例,采用免疫组织化学染色法分别检测其中DKK-1、GSK-3β、PGSK-3β的表达情况。结果慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变组织中DKK-1阳性表达率均明显高于宫颈鳞癌(P<0.05)。慢性宫颈炎组织中GSK-3β阳性表达率明显高于宫颈癌组织(P<0.05),而PGSK-3β阳性表达率低于宫颈癌组织(P<0.05);DKK-1、PGSK-3β阳性表达与宫颈鳞癌组织分化、FIGO临床分期及有无淋巴结转移显著相关(P<0.05);PGSK-3β蛋白表达量CINⅠ、CINⅡ~Ⅲ及宫颈鳞癌组织明显高于慢性宫颈炎组织(P<0.05);CINⅠ中PGSK-3β蛋白表达量明显高于宫颈癌组织(P<0.05)。结论 DKK-1、GSK-3β、PGSK-3β表达与宫颈鳞癌的发生、发展密切相关。

胃癌患者血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3表达水平及其与临床病理特征的相关性研究

目的分析胃癌患者血清DKK-1、人附睾蛋白(HE)4、多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)-1和淋巴细胞活化基因(LAG)-3水平及其与临床病理特征的关系。方法选取60例胃癌患者作为研究组,另选60例同期进行健康体检的体检者作为对照组。比较两组研究对象、不同临床病理特征胃癌患者的血清DKK-1、HE4、PARP-1和LAG-3的表达水平,并分析胃癌患者预后的影响因素。结果研究组血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平均高于对照组(均P<0.05)。不同TNM分期、胃癌细胞分化程度、淋巴结转移情况胃癌患者的血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平差异均有统计学意义(均P<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者的血清DKK-1、HE4、PARP-1水平均高于Ⅰ~Ⅱ期胃癌患者,血清LAG-3水平低于Ⅰ~Ⅱ期胃癌患者;胃癌细胞分化程度越高,患者的血清DKK-1、HE4、PARP-1表达水平越高,血清LAG-3表达水平越低;伴有淋巴结转移胃癌患者的血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平均高于无淋巴结转移患者(均P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,TNM分期和血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3水平是胃癌患者死亡的独立危险因素(均P<0.05)。结论胃癌患者血清DKK-1、HE4、PARP-1、LAG-3呈高表达水平,其与胃癌的临床分期、淋巴结转移、胃癌细胞分化程度密切相关,均为胃癌患者死亡的独立危险因素。

DKK-1、TFF3和CA72-4检测在胃癌中的临床应用

目的探讨人类分泌性蛋白Dickkopf-1(DKK-1)、三叶因子家族蛋白3(TFF3)、糖类抗原72-4(CA72-4)检测在胃癌诊断和治疗中的临床应用。方法选择2013年1月至2015年5月于该院就诊的胃癌患者75例(胃癌组),随机选择良性胃病患者70例(良性胃病组)和健康体检者70例(健康对照组)作为研究对象。采用电化学发光分析仪检测各组CA72-4浓度,采用酶联免疫吸附试验检测各组DKK-1、TFF3浓度。利用ROC曲线评价各指标的诊断效能,比较治疗前3项指标诊断胃癌的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值。比较胃癌根治术后4周胃癌组各指标浓度的变化。结果胃癌组DKK-1、TFF3、CA72-4浓度明显高于良性胃病组与健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。经ROC曲线分析,DKK-1、TFF3、CA72-4曲线下面积分别为0.876(95%CI0.803~0.950)、0.944 4(95%CI0.894~0.975)、0.818(95%CI0.726~0.884)。CA72-4诊断灵敏度和特异度分别为78.6%、84.3%;DKK-1诊断灵敏度和特异度分别为93.6%、87.1%;TFF3诊断灵敏度和特异度分别为92.4%、90.1%。胃癌根治术后4周,胃癌组DKK-1、TFF3、CA72-4浓度明显降低,与治疗前比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 DKK-1、TFF3、CA72-4的检测对胃癌病情诊断有一定的临床价值,这3项肿瘤标志物联合检测有助于改善胃癌诊断的特异性和敏感性。

Dickkopf-3在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究抑癌基因Dickkopf-3在非小细胞肺癌组织中的表达及其与肺癌临床指标间的关系,以探讨其在肺癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学技术检测Dkk-3蛋白在50例非小细胞肺癌和20例肺良性疾病组织中的表达,染色强度作半定量评分。结果 Dkk-3在非小细胞肺癌组织中阳性表达率为52%(26/50),而在肺良性疾病组织中阳性表达率为85%(17/20),并且Dkk-3在非小细胞肺癌组织中的表达水平显著低于肺良性疾病肺组织(P<0.05)。Dkk-3在Ⅲ、Ⅳ期肺癌组织中的阳性表达率显著低于Ⅰ和Ⅱ期中的表达,并且染色强度也相应低于Ⅰ、Ⅱ期;已有淋巴结转移的肺癌组织中Dkk-3阳性表达率及染色强度均显著低于无淋巴结转移的肺癌组织(P<0.05);Dkk-3在不同性别以及肺鳞癌和腺癌组织中的表达无明显差异(P>0.05)。结论 Dkk-3基因的低表达可能在非小细胞肺癌的发生发展中起一定作用,可能是一种潜在的肺癌抑癌基因。

原发性肝癌REIC/Dkk-3基因mRNA低表达及其意义

原发性肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一，病死率很高。Tsuji等从几种永生细胞系中发现一段新的REIC／Dkk-3基因序列表达明显下调，而在正常细胞系中表达正常，提示REIC／Dkk-3可能是一种新的抑癌基因。为探讨REIC／Dkk-3基因表达与人肝细胞癌的关系，本研究应用荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ—RT—PCR）对肝细胞癌癌灶及癌旁组织中REIC／Dkk-3基因mRNA的表达进行了定量检测，以探讨REIC／Dkk-3基因与肝癌发生发展、病理分型及肿瘤生物学行为之间的关系。

REIC／Dkk-3基因对肾癌细胞786-0的影响及作用机制

目的探讨REIC／Dkk-3基因是否具有杀伤肾癌细胞786—0的作用及其机制。方法采用REIC／Dkk-3基因过表达载体（pEZ-M29-REIC／Dkk-3）转染786—0细胞，分别于转染24、48、72、96h后行细胞计数试剂盒（CCK-8）检测其对786—0细胞的增殖抑制作用；流式细胞仪膜联蛋白V（AnnexinV）／碘化丙锭（PI）双染法检测其对786-0细胞诱导细胞凋亡的影响，PI单染法检测周期阻滞效应，Westernblot法检测凋亡和周期阻滞相关蛋白的表达。结果Western.blot和实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）结果显示转染REIC／Dkk-3基因后其表达量较对照组升高5倍多。CCK-8结果显示，随着作用时间的增加，786-0细胞的增殖抑制率逐渐增加，处理24、48、72、96h后对照组细胞存活率为92．0％、90．0％、84．0％、80．5％，REIC／Dkk-3过表达组分别为89．50％、73．75％、63．00％、58．50％，与空质粒组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。流式AnnexinV／PI双染法显示REIC／Dkk-3可诱导肾癌细胞凋亡，过表达组、空载体组、空白对照组凋亡率分别为28．5％、7．2％、0．6％，Westernblot结果显示REIC／Dkk-3可上调活化酪半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（cleaved—Caspase-3）和下调B细胞淋巴瘤／白血病-2（bcl-2）的表达。细胞周期结果显示REIC／Dkk-3可诱导肾癌细胞发生G。期阻滞，过表达组、空载体组、空白对照组G，期比例分别为（69．90±3．40）％、（59．57±1．20）％和（52．57±1．20）％；Westernblot结果显示REIC／Dkk-3过表达可上调p21和下调细胞周期素D1（CyelinD1）。结论REIC／Dkk-3可抑制肾癌细胞786-0的增殖，可能是通过诱导发生细胞凋亡和G1期阻滞实现的。