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Misdiagnosis of synovial sarcoma-cellular myofibroma with SRFRELA gene fusion:A case report
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作者 Ying Zhou Yi-Wen Sun +1 位作者 Xiao-Yang Liu Dan-Hua Shen 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2024年第7期1326-1332,共7页
BACKGROUND Cellular myofibroma is a rare subtype of myofibroma that was first described in 2017.Its diagnosis is often challenging because of its relative rarity,lack of known genetic abnormalities,and expression of m... BACKGROUND Cellular myofibroma is a rare subtype of myofibroma that was first described in 2017.Its diagnosis is often challenging because of its relative rarity,lack of known genetic abnormalities,and expression of muscle markers that can be confused with sarcomas that have myogenic differentiation.Currently,scholars have limited knowledge of this disease,and published cases are few.Further accumulation of diagnostic and treatment experiences is required.CASE SUMMARY A 16-year-old girl experienced left upper limb swelling for 3 years.She sought medical attention at a local hospital 10 months ago,where magnetic resonance imaging revealed a 5-cm soft tissue mass.Needle biopsy performed at a local hospital resulted in the diagnosis of a spindle cell soft tissue sarcoma.The patient was referred to our hospital for limb salvage surgery with endoprosthetic replacement.She was initially diagnosed with a synovial sarcoma.Consequently,clinical management with chemotherapy was continued for the malignant sarcoma.Our pathology department also performed fluorescence in situ hybridization for result validation,which returned negative for SS18 gene breaks,indicating that it was not a synovial sarcoma.Next-generation sequencing was used to identify the SRF-RELA rearrangement.The final pathological diagnosis was a cellular/myofibroblastic neoplasm with an SRF-RELA gene fusion.The patient had initially received two courses of chemotherapy;however,chemotherapy was discontinued after the final diagnosis.CONCLUSION This case was misdiagnosed because of its rare occurrence,benign biological behavior,and pathological similarity to soft tissue sarcoma. 展开更多
关键词 Cellular myofibroma SRF rela Fusion PATHOLOGY Case report
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Foodborne toxin Aflatoxin B_(1)induced glomerular podocyte inflammation through proteolysis of RelA,downregulation of miR-9 and CXCR4/TXNIP/NLRP3 pathway
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作者 Jie Zhang Shuang Yang +7 位作者 Baocai Xu Zihui Qin Xinyi Guo Ben Wei Qinghua Wu Kamil Kuca Tushuai Li Wenda Wu 《Food Science and Human Wellness》 SCIE CAS CSCD 2024年第4期2289-2309,共21页
Aflatoxin B_(1)(AFB_(1))is a naturally-occurring mycotoxin and recognized as the most toxic foodborne toxin,particularly causing damages to kidney.Glomerular podocytes are terminally differentiated epithelial cells.AF... Aflatoxin B_(1)(AFB_(1))is a naturally-occurring mycotoxin and recognized as the most toxic foodborne toxin,particularly causing damages to kidney.Glomerular podocytes are terminally differentiated epithelial cells.AFB_(1)induces podocyte inflammation,proteinuria and renal dysfunction.Studying the mechanism of AFB_(1)-induced podocyte inflammation and murine kidney dysfunction,we detected that AFB_(1)increased ubiquitindependent degradation of the transcription factor RelA through enhanced interaction of RelA with E3 ubiquitin ligase tripartite motif containing 7(TRIM7)in mouse podocyte clone-5(MPC-5)and mouse glomeruli.Reduction of RelA resulted in decreasing microRNA-9(miR-9)and activating the chemokine receptor 4(CXCR4),thioredoxin interacting protein(TXNIP),and NOD-like receptor pyrin domain-containing 3(NLRP3)signaling axis(CXCR4/TXNIP/NLRP3 pathway),leading to podocyte inflammation.We also determined that downregulation of miR-9 led to CXCR4 expression and the downstream TXNIP/NLRP3 pathway activation.Overexpression of miR-9 or deletion of CXCR4 suppressed AFB_(1)-induced CXCR4/TXNIP/NLRP3 pathway,resulting in alleviating podocyte inflammation and kidney dysfunction.Our findings indicated that ubiquitin-dependent proteolysis of RelA,downregulation of miR-9,and activation of CXCR4/TXNIP/NLRP3 pathway played an essential role in AFB_(1)-induced glomerular podocyte inflammation.Our study revealed a novel mechanism,via RelA,for the control of AFB_(1)’s nephrotoxicity,leading to an effective protection of food safety and public health. 展开更多
关键词 Aflatoxin B_(1) Podocyte inflammation miRNA-9 Chemokine(C-X-C motif)receptor 4 rela ubiquitin-dependent degradation
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Picture Fuzzy Relations over Picture Fuzzy Sets
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作者 Mohammad Kamrul Hasan Abeda Sultana Nirmal Kanti Mitra 《American Journal of Computational Mathematics》 2023年第1期161-184,共24页
Nowadays, picture fuzzy set theory is a flourishing field in mathematics with uncertainty by incorporating the concept of positive, negative and neutral membership degrees of an object. A traditional crisp relation re... Nowadays, picture fuzzy set theory is a flourishing field in mathematics with uncertainty by incorporating the concept of positive, negative and neutral membership degrees of an object. A traditional crisp relation represents the satisfaction or the dissatisfaction of relationship, connection or correspondence between the objects of two or more sets. However, there are some problems that can’t be solved through classical relationships, such as the relationship between two objects being vague. In those situations, picture fuzzy relation over picture fuzzy sets is an important and powerful concept which is suitable for describing correspondences between two vague objects. It represents the strength of association of the elements of picture fuzzy sets. It plays an important role in picture fuzzy modeling, inference and control system and also has important applications in relational databases, approximate reasoning, preference modeling, medical diagnosis, etc. In this article, we define picture fuzzy relations over picture fuzzy sets, including some other fundamental definitions with illustrations. The max-min and min-max compositions of picture fuzzy relations are defined in the light of picture fuzzy sets and discussed some properties related to them. The reflexivity, symmetry and transitivity of a picture fuzzy relation are described over a picture fuzzy set. Finally, various properties are explored related to the picture fuzzy relations over a picture fuzzy set. 展开更多
关键词 Picture Fuzzy Sets Picture Fuzzy relations Picture Fuzzy Binary rela-tions Composition of Picture Fuzzy relations
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靶向RelA(p65)基因shRNA慢病毒载体构建及功能鉴定
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作者 霍云飞 高明慧 +4 位作者 豆双双 寇卜心 柴梦音 刘晓霓 石英 《中国临床新医学》 2023年第9期907-912,共6页
目的构建靶向RelA(p65)基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,并对其功能进行验证。方法设计3对针对RelA基因的RNA干扰序列,并合成相应的shRNA序列。shRNA退火形成双链oligo序列后应用基因重组技术构建重组质粒,经菌落... 目的构建靶向RelA(p65)基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,并对其功能进行验证。方法设计3对针对RelA基因的RNA干扰序列,并合成相应的shRNA序列。shRNA退火形成双链oligo序列后应用基因重组技术构建重组质粒,经菌落聚合酶链式反应(PCR)及测序鉴定,将重组正确的质粒进行慢病毒包装和滴度测定,通过Western blot实验筛选出对HepG2细胞株中RelA基因干扰效果最好的慢病毒,并通过CCK-8检测Lenti-shRelA对细胞增殖活性的影响。结果测序结果显示重组慢病毒载体与设计参考序列一致,提示重组慢病毒载体构建成功。重组慢病毒Y4056、Y21318、Y21319、Y21320的滴度分别为3.13×10^(8)TU/ml、2.97×10^(8)TU/ml、2.51×10^(8)TU/ml、3.40×10^(8)TU/ml。用慢病毒Lenti-shRelA(Y21318、Y21319、Y21320、Y4056)感染HepG2细胞,Western blot实验结果显示Y21320对HepG2细胞株中RelA基因的干扰效果最好。CCK-8实验结果显示RelA的敲降可显著抑制细胞增殖活力。结论该研究成功构建了靶向RelA基因shRNA慢病毒载体,其能有效下调HepG2细胞RelA的表达并抑制细胞增殖,为进一步研究RelA在肝癌发生、发展中的机制奠定了基础。 展开更多
关键词 rela基因 短发夹RNA 慢病毒 肝癌
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结核分枝杆菌调节蛋白RelA的原核表达及多克隆抗体制备 被引量:12
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作者 伊正君 付玉荣 +3 位作者 许福亮 高昆山 李猛 李建花 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期170-173,共4页
目的:克隆编码结核分枝杆菌调节基因RelA并在大肠杆菌中表达,纯化后制备兔抗RelA的抗体。方法:利用PCR从结核分枝杆菌H37Rv株中扩增RelA基因,构建重组表达质粒pET-32a(+)-RelA;以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性重组菌株,IPTG... 目的:克隆编码结核分枝杆菌调节基因RelA并在大肠杆菌中表达,纯化后制备兔抗RelA的抗体。方法:利用PCR从结核分枝杆菌H37Rv株中扩增RelA基因,构建重组表达质粒pET-32a(+)-RelA;以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性重组菌株,IPTG诱导目的蛋白表达,在变性条件下对目的蛋白进行镍离子亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Westem blot鉴定目的蛋白的表达及反应原性;以表达的RelA蛋白免疫家兔,制备抗RelA的多克隆抗体并进行效价及特异性鉴定。结果:扩增了RelA基因,克隆于表达载体pET-32a(+)中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确。经诱导在大肠杆菌中表达出相对分子质量(Mr)为120 000的目的蛋白;纯化的RelA免疫家兔后,能有效地刺激特异性抗体的产生,抗血清的效价达到1∶6 400以上,且具有良好的特异性。结论:已成功构建RelA基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达;制备出兔抗RelA抗体,效价及特异性均良好,为进一步研究RelA蛋白在结核病中的致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 rela 原核表达 多克隆抗体
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RelA/p65的翻译后修饰及其对NF-κB转录活性的影响 被引量:15
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作者 李毅斌 蔡军伟 刘靖华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期977-983,共7页
RelA/p65是NF-κB的一个亚单位,其翻译后修饰能够精细地调控NF-κB的转录激活,并在炎症反应及炎症反应相关疾病的发生和发展过程中发挥重要的作用.RelA的翻译后修饰主要包括磷酸化、乙酰化、甲基化以及泛素化等.这些翻译后修饰不仅能在... RelA/p65是NF-κB的一个亚单位,其翻译后修饰能够精细地调控NF-κB的转录激活,并在炎症反应及炎症反应相关疾病的发生和发展过程中发挥重要的作用.RelA的翻译后修饰主要包括磷酸化、乙酰化、甲基化以及泛素化等.这些翻译后修饰不仅能在生理和病理的条件下有效地调控NF-κB的转录激活,彼此之间还存在着复杂的相互作用,一种翻译后修饰可以使另一种修饰增强或是抑制,从而综合而完善地调控NF-κB的转录活性.本文就近年来RelA的翻译后修饰及这些修饰之间的相互作用对NF-κB信号通路影响的最新研究进展进行综述. 展开更多
关键词 核因子ΚB rela P65 翻译后修饰
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反义RelA下调白血病耐药细胞株HL-60/E6 bcl-x_L mRNA 被引量:3
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作者 曹文静 张瑶珍 +3 位作者 张东华 邹萍 李登举 唐锦治 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期294-297,共4页
为了探讨NF κB对白血病耐药细胞株HL 6 0 E6bcl x基因转录的影响 ,首先在体外采用间歇小剂量表阿霉素 (6ng ml)作用于HL 6 0细胞的方法 ,建立了性能稳定的广谱耐药细胞株HL 6 0 E6。然后用RT PCR方法检测 5 μmol L硫代修饰反义R... 为了探讨NF κB对白血病耐药细胞株HL 6 0 E6bcl x基因转录的影响 ,首先在体外采用间歇小剂量表阿霉素 (6ng ml)作用于HL 6 0细胞的方法 ,建立了性能稳定的广谱耐药细胞株HL 6 0 E6。然后用RT PCR方法检测 5 μmol L硫代修饰反义RelA作用于HL 6 0 E6细胞后bcl x基因mRNA水平的变化。同时应用免疫荧光技术和流式细胞术分别对HL 6 0 E6细胞中NF κB RelA的功能状态及脂质体作为寡核苷酸载体的转染效率进行评估。结果表明 ,在HL 6 0 E6细胞中RelA表达于胞核 ,NF κB处于持续活化状态。脂质体介导的寡核苷酸 (ODN)的转染效率明显高于裸ODN组 ,在 4 ,6和12小时时有显著差异 (P <0 .0 1)。反义RelA作用于HL 6 0 E6细胞后 ,bcl xL mRNA水平下降呈时间依赖性 ,8小时抑制达到最高峰 ,15小时后逐渐恢复 ,而对照组bcl xL mRNA水平变化不明显。分析结果认为 ,NF κB对bcl x有转录调节作用 ,反义技术封闭RelA亚基可以减弱NF κB对bcl xL 基因的转录激活 ,进而推测NF κB可能是白血病细胞耐药的一个重要因子。 展开更多
关键词 HL-60细胞系 E6细胞系 反义rela bcl-xLmRNA 白血病耐药细胞株 免疫荧光技术
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胸膜肺炎放线杆菌relA基因缺失株的构建及其生物学特性的研究 被引量:3
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作者 李婷婷 李刚 +4 位作者 刘双红 徐胜奎 李大鹏 王春来 刘伟石 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期969-974,共6页
为探究信号分子4或5磷酸鸟苷[(p)ppGpp]对胸膜肺炎放线杆菌(APP)适应性及致病性影响,本研究以APP血清7型S8为亲本株,通过同源重组、卡那抗性及蔗糖负向筛选的方法,将(p)ppGpp的合成调控基因relA敲除,构建缺失突变株S8△relA。生物学特... 为探究信号分子4或5磷酸鸟苷[(p)ppGpp]对胸膜肺炎放线杆菌(APP)适应性及致病性影响,本研究以APP血清7型S8为亲本株,通过同源重组、卡那抗性及蔗糖负向筛选的方法,将(p)ppGpp的合成调控基因relA敲除,构建缺失突变株S8△relA。生物学特性鉴定结果表明,S8△relA具有良好的遗传稳定性,与亲本株增殖速度变化差异不显著,但平台期营养限制环境下,S8△relA存活能力降低,而且在Gly、Ile、Val营养缺失时,S8△rel生长能力显著抑制;S8△relA的持留菌形成能力、生物膜形成能力以及体外抗肺泡巨噬细胞(PAM)吞噬能力均有不同程度降低;对小鼠致病性试验结果显示,S8△relA相比亲本株S8毒力降低2.7倍。研究结果表明(p)ppGpp在环境胁迫下参与APP适应性调控,并对其毒力有一定的影响。本研究首次证明了(p)ppGpp作为一种信号分子,同样可以调控APP的生长,并且在宿主肺部弱营养环境条件下,APP与致病力相关的表型均受到影响,这为进一步阐明APP的致病机制提供实验依据。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 rela基因 基因缺失株
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复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃癌前病变模型大鼠IKKβ、RelA蛋白表达的影响 被引量:3
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作者 孔娟 朱西杰 +2 位作者 叶景阳 张蔷 安婷婷 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期163-166,I0003,共5页
目的:研究复方蜥蜴散不同微粒组合剂(FFXY)治疗对胃癌前病变(PLGC)大鼠凋亡相关蛋白RelA(P65)及IKKβ表达的影响,揭示其治疗PLGC的可能作用机制。方法:将120只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,维酶素治疗组,复方蜥蜴散80目、... 目的:研究复方蜥蜴散不同微粒组合剂(FFXY)治疗对胃癌前病变(PLGC)大鼠凋亡相关蛋白RelA(P65)及IKKβ表达的影响,揭示其治疗PLGC的可能作用机制。方法:将120只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,维酶素治疗组,复方蜥蜴散80目、100目等量混合治疗组,80目治疗组及100目治疗组,每组20只,除空白组外,均采取MNNG配合饥饱失常及情绪刺激综合造模。造模成功后分别作相应处理,应用免疫组化法检测其对胃黏膜组织IKKβ、RelA蛋白表达的影响,并对实验结果进行统计分析。结果:通过图像分析软件对免疫组化图像光密度的测算,1模型组IKKβ、RelA的阳性表达高于空白对照组,有显著性差异(P<0.01);2其他各治疗组IKKβ、RelA的阳性表达均低于模型对照(P<0.01);3FFXY各治疗组IKKβ、RelA的阳性表达均低于维酶素治疗组(P<0.05);480目、100目等量混合组两种因子阳性表达低于80目组和100目组(P<0.05),80目组和100目组两种因子表达相当。结论:1通过MNNG等综合诱导因素造模成功;2FFXY各组和维酶素组治疗PLGC均有效,其中FFXY各组对PLGC大鼠疗效均优于维酶素组,尤以80目、100目等量混合剂量组疗效最显著。表明FFXY对PLGC胃黏膜损伤可能具有保护、修复和治疗作用,其作用机制可能是通过降低或抑制PLGC组织中IKKβ、RelA的表达,从而促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 复方蜥蜴散不同微粒组合剂 PLGC MNNG IKKΒ rela
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泻肺定喘汤对中性粒细胞型哮喘大鼠KLF-2/RelA比例平衡及中性粒细胞凋亡的影响 被引量:9
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作者 韩莹 蔡庆宇 张岩 《中国中医急症》 2019年第4期607-610,614,共5页
目的观察泻肺定喘汤对中性粒细胞型哮喘大鼠KLF-2/RelA比例平衡及中性粒细胞凋亡的影响。方法 48只大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组和泻肺定喘汤低、中、高剂量组。除空白组外,其余组均按照脂多糖(LPS)+卵白蛋白(OVA)联合致敏... 目的观察泻肺定喘汤对中性粒细胞型哮喘大鼠KLF-2/RelA比例平衡及中性粒细胞凋亡的影响。方法 48只大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组和泻肺定喘汤低、中、高剂量组。除空白组外,其余组均按照脂多糖(LPS)+卵白蛋白(OVA)联合致敏的方法复制中性粒细胞型哮喘模型。造模后各药物干预组给予相应的药物治疗,空白组和模型组给予等体积的0.9%氯化钠注射液灌胃治疗,每日1次,连续2周。疗程结束后观察各组大鼠肺泡灌洗液中白细胞计数及分类,流式细胞术检测外周血中性粒细胞的凋亡,并通过Western blotting法测定中性粒细胞中KLF-2、RelA、Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果与模型组比较,泻肺定喘汤中、高剂量均能够显著降低肺泡灌洗液中白细胞数量及中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞的百分比,增加中性粒细胞的凋亡,差异均具有显著统计学意义(P <0.01);此外,泻肺定喘汤中、高剂量还能显著降低中性粒细胞中Bcl-2蛋白的表达,上调KLF-2、RelA、Bax蛋白的表达和KLF-2/RelA、Bax/Bcl-2的比值,与模型组比较,差异均具有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。结论泻肺定喘汤能够通过调控KLF2/RelA比例的平衡,从而促进中性粒细胞的凋亡,减轻炎症反应。 展开更多
关键词 中性粒细胞型哮喘 泻肺定喘汤 KLF-2/rela比例 细胞凋亡 大鼠
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RelA/p65的磷酸化调节及其与肿瘤的关系 被引量:9
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作者 李丽 陈玉婷 曾希 《中南医学科学杂志》 CAS 2018年第2期216-220,共5页
NF-κB是广泛存在于真核细胞中的一种具有多向调节功能的转录因子。它通过对靶基因的调节,参与细胞的增殖与转化、凋亡、炎症以及免疫应答等重要的生命活动,并在炎症、肿瘤等疾病中的扮演着重要角色。早期研究发现,NF-κB具有抗凋亡和... NF-κB是广泛存在于真核细胞中的一种具有多向调节功能的转录因子。它通过对靶基因的调节,参与细胞的增殖与转化、凋亡、炎症以及免疫应答等重要的生命活动,并在炎症、肿瘤等疾病中的扮演着重要角色。早期研究发现,NF-κB具有抗凋亡和促肿瘤的作用。但是,临床试验证实NF-κB抑制剂在肿瘤治疗中的临床疗效并不理想。随着研究深入,发现NF-κB翻译后修饰对其功能有着重要影响,特别是不同位点的磷酸化状态对其功能影响极大。本综述重点讲述NF-κB最重要的功能亚基RelA/p65的磷酸化调节及其与肿瘤的关系。 展开更多
关键词 NF-ΚB rela/p65 磷酸化 肿瘤
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RelA与uPA在卵巢癌细胞系中表达的相关性研究 被引量:1
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作者 卢运萍 王常玉 +2 位作者 胡芳 王世宣 马丁 《中国妇产科临床杂志》 2002年第2期87-90,共4页
目的 探讨RelA对人卵巢癌细胞株A2780、OVCAR-3 uPA合成的影响。方法用RelA、IкBα反义寡核苷酸(ASODN)处理A2780、OVCAR-3细胞株,然后以Western Blot、RT—PCR检测RelA、uPA的表达以及RelA在蛋白、mRNA水平对uPA的调节作用。结果 Rel... 目的 探讨RelA对人卵巢癌细胞株A2780、OVCAR-3 uPA合成的影响。方法用RelA、IкBα反义寡核苷酸(ASODN)处理A2780、OVCAR-3细胞株,然后以Western Blot、RT—PCR检测RelA、uPA的表达以及RelA在蛋白、mRNA水平对uPA的调节作用。结果 RelA表达与uPA蛋白及mRNA表达水平均呈明显正相关。RelAASODN下调uPA的表达与其作用时间相俄。结论用RelA ASODN抑制RelA表达可明显下调uPA的表达。 展开更多
关键词 rela IкBα 反义寡核苷酸 UPA 卵巢癌细胞株
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RELA融合基因阳性室管膜瘤 被引量:1
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作者 阎晓玲 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2017年第4期305-305,共1页
2016年,世界卫生组织(WH0)中枢神经系统肿瘤分类将RELA融合基因阳性室管膜瘤定义为一种以RELA融合基因为特征的幕上室管膜瘤,占儿童幕上室管膜瘤的70%,而在成人中比例较低。
关键词 rela融合基因阳性室管膜瘤 神经疾病
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奶山羊青春期乳腺发育重要基因RelA的全长克隆
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作者 王立娜 苑春艳 +2 位作者 李春 李庆章 高学军 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2011年第2期31-33,52,共4页
从本实验室已建立的关中奶山羊7个时期乳腺Long-SAGE标签库中筛选出在青春期高表达的RelA基因,用RACE方法克隆并获得关中奶山羊RelA基因的全长,将全长序列与NCBI GenBank中人(H.sapiens)和牛(Bos taurus)数据库进行同源性比对,证实用所... 从本实验室已建立的关中奶山羊7个时期乳腺Long-SAGE标签库中筛选出在青春期高表达的RelA基因,用RACE方法克隆并获得关中奶山羊RelA基因的全长,将全长序列与NCBI GenBank中人(H.sapiens)和牛(Bos taurus)数据库进行同源性比对,证实用所选EST标签引物克隆出的基因全长是奶山羊RelA基因。 展开更多
关键词 奶山羊 乳腺 RACE rela
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孕酮和骨化三醇通过miR-590-5p靶向RelA调控子宫内膜癌细胞Ishikawa的细胞因子分泌
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作者 赵丽洁 赵慧 +1 位作者 郭丹 林丽红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1343-1348,共6页
目的:探讨孕酮和骨化三醇抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞因子分泌的分子机制。方法:孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞,检测细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1及CXCL2的mRNA水平,NF-κB亚基RelA、RelB、c-Rel、p50、p52蛋白水平。荧光... 目的:探讨孕酮和骨化三醇抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞因子分泌的分子机制。方法:孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞,检测细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1及CXCL2的mRNA水平,NF-κB亚基RelA、RelB、c-Rel、p50、p52蛋白水平。荧光素酶报告检测RelA启动子活性。高通量测序检测孕酮和骨化三醇处理Ishikawa细胞后miRNA表达差异。过表达孕酮和骨化三醇共同调控的差异miRNA,检测RelA表达。结果:孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞后,细胞因子IL1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2分泌水平和表达均显著降低(P<0.05),NF-κB亚基RelA表达下调,NF-κB亚基RelB、c-Rel、p50、p52表达无改变。孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞,RelA启动子活性变化差异无统计学意义(P>0.05),但RelA mRNA水平降低(P<0.05)。孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞后,有110种miRNAs表达上调,骨化三醇处理后有57种miRNAs表达上调,其中14种miRNAs两种处理后均上调。过表达两种处理后均上调的miRNAs,发现过表达miR-590-5p可降低NF-κB亚基RelA mRNA水平(P<0.05),且靶向NF-κB亚基RelA-3'端非编码区(P<0.05)。此外,过表达miR-590-5p后RelA蛋白水平下降,敲低后NF-κB亚基RelA蛋白水平上升。过表达miR-590-5p后,细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达均显著降低(P<0.05),敲低后细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达均显著升高(P<0.05)。但同时过表达或敲低miR-590-5p和RelA时,细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达无明显变化(P>0.05)。结论:孕酮和骨化三醇处理Ishikawa细胞后miR-590-5p表达升高,miR-590-5p靶向NF-κB亚基RelA-3'端非编码区,降低RelA蛋白水平,降低NF-κB复合体活性,最终下调细胞因子IL1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达。本研究为孕酮和骨化三醇治疗子宫内膜癌的分子机制提供新依据,为孕酮和骨化三醇降低机体炎症反应提供理论依据。 展开更多
关键词 miR-590-5p 子宫内膜癌 ISHIKAWA细胞 细胞因子 孕酮 rela 骨化三醇
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子宫平滑肌肉瘤组织EphA2/EphrinA1表达及沉默EphA2对肿瘤细胞生长与RelA/p65磷酸化的影响
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作者 邓卉 陈晓燕 +3 位作者 严园 魏征 肖凤莲 余晓 《西部医学》 2022年第5期644-651,共8页
目的探究生促红素肝细胞受体A2(EphA2)及其配体(EphrinA1)在子宫平滑肌肉瘤组织中的表达情况,通过沉默EphA2探究其对肿瘤细胞生长及RelA/p65磷酸化的影响。方法以重庆市中医院28例子宫平滑肌肉瘤患者为研究对象,免疫组织化学染色和实时... 目的探究生促红素肝细胞受体A2(EphA2)及其配体(EphrinA1)在子宫平滑肌肉瘤组织中的表达情况,通过沉默EphA2探究其对肿瘤细胞生长及RelA/p65磷酸化的影响。方法以重庆市中医院28例子宫平滑肌肉瘤患者为研究对象,免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测子宫平滑肌肉瘤与瘤旁组织中EphA2、EphrinA1mRNA表达;通过脂质体介导法将EphA2-siRNA转染至SK-UT-1细胞以沉默EphA2表达,同时以正常培养的细胞作为正常组、转染NC-siRNA的细胞作为阴性对照组(NC-siRNA组);qRT-PCR和Western blot检测细胞中EphA2表达,以确定转染效率;CCK-8法、Transwell小室实验检测细胞增殖活性、迁移与侵袭;TUNEL染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况;免疫荧光染色检测细胞内p65表达变化;Western blot检测RelA/p65磷酸化位点蛋白表达水平。结果子宫平滑肌肉瘤组织中EphA2、EphrinA1 mRNA与蛋白表达水平均显著高于瘤旁组织(P<0.05);与空白对照组比较,EphA2-siRNA组细胞在转染24、48及72 h后的增殖活性下降,细胞迁移与侵袭数目均减少,TUNEL阳性染色细胞率增加,细胞凋亡率增加,p65绿色荧光强度明显减弱,同时,p53蛋白表达升高,RelA/p65 Ser536和RelA/p65 Ser276磷酸化蛋白水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论EphA2与EphrinA1在子宫平滑肌肉瘤组织中呈高表达,靶向沉默EphA2表达可抑制子宫平滑肌肉瘤细胞增殖与转移,诱导细胞发生凋亡,并抑制RelA/p65的Ser536和Ser276位点磷酸化。 展开更多
关键词 子宫平滑肌肉瘤 EPHA2 EPHRINA1 rela/p65磷酸化
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relA基因敲除对多黏菌素抗鲍曼不动杆菌异质性耐药的影响 被引量:4
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作者 余春波 卢明 +3 位作者 邵雷 蒲甜 陈代杰 周薇 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1004-1010,1004,共7页
目的·观察严谨反应相关的(p)ppGpp合成酶基因(relA)对多黏菌素抗鲍曼不动杆菌异质性耐药的影响。方法·采用Red同源重组技术敲除鲍曼不动杆菌ATCC19606中relA基因;用结晶紫染色法观察鲍曼不动杆菌菌膜形成的情况;用群体分析法(... 目的·观察严谨反应相关的(p)ppGpp合成酶基因(relA)对多黏菌素抗鲍曼不动杆菌异质性耐药的影响。方法·采用Red同源重组技术敲除鲍曼不动杆菌ATCC19606中relA基因;用结晶紫染色法观察鲍曼不动杆菌菌膜形成的情况;用群体分析法(population analysis profiles,PAP)检测在多黏菌素作用下鲍曼不动杆菌产生异质性耐药菌落数的变化并计算异质性耐药率;用杀菌曲线检测在多黏菌素作用下鲍曼不动杆菌持留菌形成情况。结果·成功敲除鲍曼不动杆菌中relA基因,获得relA基因敲除株ATCC19606-ΔrelA,鲍曼不动杆菌的菌膜形成量明显下降,多黏菌素作用下异质性耐药菌落数及持留菌形成量均显著性降低。结论·细菌严谨反应中(p)ppGpp合成酶relA基因可能是影响鲍曼不动杆菌对多黏菌素产生异质性耐药的重要因素。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 rela基因 多黏菌素 Red同源重组技术 异质性耐药 持留性 菌膜
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RelA基因修饰的树突状细胞在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用 被引量:1
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作者 易锐文 易果果 +3 位作者 冯松福 杨济泽 彭玲 陆晓和 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第1期5-9,共5页
目的探讨RelA基因修饰供体骨髓来源的树突状细胞(dendritic cells,DC)在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用。方法以SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,建立大鼠穿透性同种异体角膜移植动物模型。将60只受体大鼠随机分为4组,每组15只,分别... 目的探讨RelA基因修饰供体骨髓来源的树突状细胞(dendritic cells,DC)在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用。方法以SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,建立大鼠穿透性同种异体角膜移植动物模型。将60只受体大鼠随机分为4组,每组15只,分别为对照组(造模前7 d尾静脉注射PBS 1 mL)、mDC组(造模前7 d尾静脉注射mDC 1 mL,共5×10~6个细胞)、imDC组(造模前7 d尾静脉注射imDC 1 mL,共5×106个细胞)及RelA-DC组(造模前7 d尾静脉注射RelA修饰的DC 1 mL,共5×10~6个细胞)。术后每天观察角膜植片免疫排斥反应情况并记录角膜植片的存活时间;术后14 d每组随机处死5只受体大鼠取其角膜作组织病理学观察。结果 RelA-DC组角膜植片存活时间为(26.2±2.3)d,较对照组(11.4±1.3)d、mDC组(9.3±1.3)d及imDC组(19.4±2.6)d均明显延长,差异均有统计学意义(均为P<0.05);imDC组的存活时间显著长于对照组、mDC组(均为P<0.05);与mDC组比较,对照组植片的存活时间延长,差异有统计学意义(P>0.05)。角膜植片组织病理学(HE染色)结果显示,对照组、mDC组角膜植片明显增厚、水肿,基质层胶原纤维排列紊乱,可见大量炎症细胞浸润以及新生血管;imDC组角膜植片呈不同程度水肿,基质层胶原纤维排列轻度紊乱,可见少量炎症细胞浸润;RelA-DC组角膜植片轻度水肿,基质层胶原纤维排列较规则,几乎没有单核细胞浸润。结论静脉输注RelA基因修饰的DC能抑制大鼠角膜移植术后免疫排斥反应的发生,明显延长角膜植片的存活时间。 展开更多
关键词 rela基因 树突状细胞 角膜移植 免疫排斥反应
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relA基因在重组大肠杆菌BL21合成嘌呤核苷磷酸化酶作用研究 被引量:1
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作者 段纪甫 高黎荣 +2 位作者 李江 付水林 宫衡 《工业微生物》 CAS CSCD 2014年第3期30-34,共5页
利用Red同源重组技术敲除大肠杆菌BL21中relA基因,获得△relA突变株。进一步研究表明在LB复合培养中relA基因对大肠杆菌的生长几乎没有明显影响,但是对其重组蛋白的合成有着较大的影响:降低了25%。结果表明,relA基因在大肠杆菌表达重组... 利用Red同源重组技术敲除大肠杆菌BL21中relA基因,获得△relA突变株。进一步研究表明在LB复合培养中relA基因对大肠杆菌的生长几乎没有明显影响,但是对其重组蛋白的合成有着较大的影响:降低了25%。结果表明,relA基因在大肠杆菌表达重组蛋白方面有着较重要的作用。 展开更多
关键词 大肠杆菌 RED重组 rela基因 嘌呤核苷磷酸化酶
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类鼻疽伯克霍尔德菌ΔrelA缺失株的构建及其生物学特性比较 被引量:2
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作者 吴兴勇 李雪苗 +5 位作者 刘成利 田申 王彦双 厉安洋 朱侨 夏乾峰 《海南医学院学报》 CAS 2022年第15期1135-1140,共6页
目的:敲除类鼻疽伯克霍尔德菌严谨反应信号分子(p)ppGpp合成相关基因relA,探讨其对细菌的生长、泳动和生物被膜形成的生物学功能的影响。方法:将甲氧苄啶(trimethoprim resistance,TPR)抗性片段通过BglⅡ酶切位点经酶切酶连的方法对含S... 目的:敲除类鼻疽伯克霍尔德菌严谨反应信号分子(p)ppGpp合成相关基因relA,探讨其对细菌的生长、泳动和生物被膜形成的生物学功能的影响。方法:将甲氧苄啶(trimethoprim resistance,TPR)抗性片段通过BglⅡ酶切位点经酶切酶连的方法对含SacB蔗糖致死基因的pK18mobSacB自杀性质粒进行改造,从而获得具有甲氧苄啶抗性的质粒(TPR-pK18mobSacB);通过同源重组基因的敲除方法对类鼻疽伯克霍尔德菌HNBP001的relA进行敲除,获得relA缺失菌株并测定比较其缺失前后生长、泳动、生物被膜的表型变化。结果:成功获得relA缺失菌株;ΔrelA的生长速度、泳动性及生物被膜形成均下降。结论:TPRpK18mobSacB改造质粒提高HNBP001菌株的敲除效率,可广泛应用于类鼻疽伯克霍尔德菌的基因敲除,为实验室从分子水平研究类鼻疽伯克霍尔德菌基因功能提供便利;relA基因的缺失可抑制HNBP001的生长、泳动和生物被膜形成。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 rela 基因敲除 生物学特性
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