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A novel resorufin based fluorescent “turn-on” probe for the selective detection of hydrazine and application in living cells 被引量:2
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作者 Tun Tang Yu-Qi Chen +6 位作者 Bo-Shi Fu Zhi-Yong He Heng Xiao Fan Wu Jia-Qi Wang Shao-Ru Wang Xiang Zhou 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2016年第4期540-544,共5页
In this study, a resorufin derivative RTP-1, which is a novel fluorescent ‘‘turn-on'' probe for sensitive detection of hydrazine within 30 min, is designed and synthesized. The selective deprotection of the ester ... In this study, a resorufin derivative RTP-1, which is a novel fluorescent ‘‘turn-on'' probe for sensitive detection of hydrazine within 30 min, is designed and synthesized. The selective deprotection of the ester group of the probe by hydrazine led to a prominent enhancement of fluorescent intensity, as well as a remarkable color change from colorless to pink, which could be distinguished by naked eye. The fluorescence enhancement showed decent linear relationship with hydrazine concentration ranging from 0 to 50 mmol/L, with a detection limit of 0.84 mmol/L. The specificity of RTP-1 for hydrazine to a number of metal ions, anions and amines is satisfactory. The sensing mechanism of RTP-1 and hydrazine was evaluated by HPLC, ESI mass spectrometry and density functional theory(DFT).Moreover, we have utilized this fluorescent probe for imaging hydrazine in living cells, and the fluorescence was clearly observed when the cells were incubated with hydrazine(100 mmol/L) for 30 min. 展开更多
关键词 resorufin Fluorescent probe HYDRAZINE SELECTIVITY Cell imaging
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Sensing cytochrome P4501A1 activity by a resorufin-based isoform-specific fluorescent probe 被引量:3
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作者 Qiang Jin Hongying Ma +5 位作者 Lei Feng Ping Wang Rongjing He Jing Ning Ling Yang Guangbo Ge 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2020年第11期2945-2949,共5页
Cytochrome P4501 A1(CYP1A1),a heme-containing monooxygenase,is of particular importance for human health because of its vital roles in the metabolic activation of pro-carcinogenic compounds to the carcinogens.Decipher... Cytochrome P4501 A1(CYP1A1),a heme-containing monooxygenase,is of particular importance for human health because of its vital roles in the metabolic activation of pro-carcinogenic compounds to the carcinogens.Deciphering the relevance of CYP1A1 to human diseases and screening of CYP1A1 modulators require reliable tool(s)for probing this key enzyme in complex biological matrices.Herein,a practical and ultrasensitive fluorescence-based assay for real-time sensing CYP1A1 activities in biological systems has been developed,via designing an isoform-specific fluorogenic sensor for CYP1A1(CHPO).The newly developed fluorogenic substrate for CYP1A1 has been carefully investigated in terms of specificity,sensitivity,precision,quantitative linear range and the anti-interference ability.The excellent selectivity,strong anti-interference ability and fast response kinetics,making the practicability of CHPObased CYP1A1 activity assay is better than that of most reported CYP1A1 activity assays.Furthermore,CHPO has been successfully used for imaging CYP1A1 activities in living cells and human tissues,as well as for high-throughput screening of CYP1A1 inhibitors using tissue preparations as enzyme sources.Collectively,this study provided a practical fluorogenic sensor for real-time sensing CYP1A1 in complex biological systems,which would strongly facilitate the investigations on the relevance of CYP1A1 to human diseases and promote high-throughput screening of CYP1A1 modulators for biomedical applications. 展开更多
关键词 Cytochrome P4501A1 Fluorogenic sensor Activity sensing resorufin Isoform-specificity BIOIMAGING
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β-葡萄糖醛酸苷酶荧光底物试卤灵葡萄糖醛酸苷的高效制备 被引量:2
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作者 王欣欣 吕侠 +6 位作者 葛广波 冯磊 辛红 李耀光 曹云峰 韩冠英 郭斌 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1321-1327,共7页
以猴肝微粒体(Cy LM)为酶源,采用生物制备法实现了荧光底物试卤灵(Resorufin)向试卤灵葡萄糖醛酸苷(Resorufinβ-D-glucuronide)的高效转化,同时借助新型色谱分离材料C18WAX及固相萃取技术实现了Resorufinβ-D-glucuronide的高效富集及... 以猴肝微粒体(Cy LM)为酶源,采用生物制备法实现了荧光底物试卤灵(Resorufin)向试卤灵葡萄糖醛酸苷(Resorufinβ-D-glucuronide)的高效转化,同时借助新型色谱分离材料C18WAX及固相萃取技术实现了Resorufinβ-D-glucuronide的高效富集及选择性洗脱,最终获得纯度大于98%的目标产物.所得产物结构经LC-MS,1H NMR和13C NMR等手段进行了表征.在此基础上,以该葡萄糖醛酸产物为探针底物建立了β-葡萄糖醛酸苷酶活性检测及抑制剂高通量筛选的方法. 展开更多
关键词 试卤灵 试卤灵葡萄糖醛酸苷 固相萃取 Β-葡萄糖醛酸苷酶 抑制剂筛选
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重庆市江水中有机污染物细胞毒性分析 被引量:2
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作者 崔志鸿 李鹏 +3 位作者 刘晋祎 刘胜学 周燕虹 曹佳 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期560-561,共2页
目的了解重庆市主城区嘉陵江和长江水中有机物污染状况,评价水中有机污染物对人群健康的影响。方法固相萃取法萃取水中有机污染物,将萃取的有机污染物溶于二甲基亚砜(DMSO)中,对H4IIE细胞进行染毒,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)检测水中有机... 目的了解重庆市主城区嘉陵江和长江水中有机物污染状况,评价水中有机污染物对人群健康的影响。方法固相萃取法萃取水中有机污染物,将萃取的有机污染物溶于二甲基亚砜(DMSO)中,对H4IIE细胞进行染毒,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)检测水中有机污染物对H4IIE细胞增殖的抑制作用,并用荧光比色法检测水中有机污染物对H4IIE细胞7-乙氧基-3-异吩嗯唑酮.脱乙基酶(EROD)的诱导作用。结果各水样处理H4IIE细胞后,H4IIE细胞的增殖随染毒时间和剂量的增加而呈下降趋势。48和72h处理组200和250倍浓缩的水样对细胞增殖有显著抑制作用(P<0.05,与溶剂对照组比较);2,3,7,8-四氯二苯并-对-二恶英(TCDD)对EROD诱导的半数有效剂量(EC50)值为4.4pg/ml,各水样相对于2,3,7,8-TCDD的毒性当量值分别为(2004.08)大溪沟:2.2×10-4pg/L;(2004.08)寸滩:0.9×10-4pg/L;(2005.01)大溪沟:13.3×10-4pg/L;(2005.01)寸滩:3.7×10-4pg/L。结论污染物对H4IIE细胞的毒性呈现出时间和剂量依赖性;各水样均可诱导H4IIE细胞EROD活性;同一采样点中,枯水期水样毒性大于丰水期水样。 展开更多
关键词 有机污染物 细胞毒性 7-乙氧基-3-异吩嗯唑酮·脱乙基酶(EROD) H4IIE细胞
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试卤灵类光学探针的研究进展 被引量:4
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作者 李照 马会民 《影像科学与光化学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期60-68,共9页
光学探针是指与目标物质发生反应(包括配位、包合和基团反应等)并引起光学(吸光、荧光或发光)性质的变化,基于这些变化从而可对目标物质进行分析与测定的一类特殊试剂。光学探针不仅能改善分析的灵敏度,而且能大幅度提高对样品的时空分... 光学探针是指与目标物质发生反应(包括配位、包合和基团反应等)并引起光学(吸光、荧光或发光)性质的变化,基于这些变化从而可对目标物质进行分析与测定的一类特殊试剂。光学探针不仅能改善分析的灵敏度,而且能大幅度提高对样品的时空分辨能力,因此,长期以来一直受到人们的关注。试卤灵为一性能优良的荧光体,特别是其7-羟基的取代作用通常会封闭光信号;这一特性近年引起了人们的兴趣,并被广泛用于构建具有低背景光信号的新型探针。本文将综述试卤灵类光学探针的发展及其在蛋白酶、离子、活性氧物种分析方面的应用,包括探针分子的构筑、检测机理以及生物成像等方面的研究。 展开更多
关键词 光学探针 试卤灵 蛋白酶 离子 活性氧物种 荧光成像分析
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一种基于刃天青还原的荧光方法对β-葡萄糖苷酶活性的检测 被引量:5
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作者 程鑫 张珩 马济美 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期360-363,共4页
建立了一种简单的荧光分析方法实现了对β-葡萄糖苷酶的定量分析检测。其原理是底物2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2βG)在β-葡萄糖苷酶的水解作用下生成抗坏血酸,后者将刃天青还原生成具有强烈荧光的试卤灵,通过溶液荧光强度的变... 建立了一种简单的荧光分析方法实现了对β-葡萄糖苷酶的定量分析检测。其原理是底物2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2βG)在β-葡萄糖苷酶的水解作用下生成抗坏血酸,后者将刃天青还原生成具有强烈荧光的试卤灵,通过溶液荧光强度的变化对β-葡萄糖苷酶活性进行检测。结果发现,抗坏血酸浓度在3~400μmol/L范围内与反应体系在585 nm处的荧光强度呈线性关系,相关系数r^2=0.981。并基于此实现了对β-葡萄糖苷酶活性的定量检测:β-葡萄糖苷酶的浓度在1~30 U/L范围内与溶液在585 nm处的荧光强度呈良好的线性关系,相关系数r^2=0.995,检出限为1.0 U/L。该方法操作简单,反应灵巧,检测范围较宽,可实现对β-葡萄糖苷酶活性的定量分析检测。 展开更多
关键词 β-葡萄糖苷酶活性 刃天青 试卤灵 抗坏血酸 荧光 检测
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刃天青与试卤灵酸度响应性的光谱研究
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作者 沈钰杰 邹金辉 +2 位作者 赵博霖 谭琴琴 张玉微 《材料研究与应用》 CAS 2022年第2期286-290,共5页
刃天青是单分子单粒子荧光显微技术中一种常用的荧光探针。然而其荧光性质随环境的变化会发生明显的变化,这导致单分子荧光信号的不稳定性。本文基于pH对荧光探针发光性质的影响,研究了缓冲溶液pH与浓度对荧光强度的影响,获得了荧光最... 刃天青是单分子单粒子荧光显微技术中一种常用的荧光探针。然而其荧光性质随环境的变化会发生明显的变化,这导致单分子荧光信号的不稳定性。本文基于pH对荧光探针发光性质的影响,研究了缓冲溶液pH与浓度对荧光强度的影响,获得了荧光最优化的条件。进一步构建了数学模型,结合理论计算,获取了其荧光强度与氢离子的依赖关系,并对pH的响应性能给出了理论解释。结果表明,随着pH的增加,荧光强度先增大后减小。理论研究表明,荧光猝灭与刃天青和间苯二酚的质子化有关。 展开更多
关键词 荧光 染料 刃天青 试卤灵 酸度
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西花蓟马对吡虫啉抗性机制的研究 被引量:22
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作者 王圣印 刘永杰 +5 位作者 周仙红 张安盛 李丽莉 门兴元 张思聪 于毅 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期559-565,共7页
为了解大规模应用吡虫啉防治西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pergande)的抗性风险,本文研究了吡虫啉与多杀菌素和啶虫咪的交互抗性并比较了多功能氧化酶系(mixed-function oxidases,MFO)的3个组分细胞色素P450、细胞色素b5、甲氧... 为了解大规模应用吡虫啉防治西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pergande)的抗性风险,本文研究了吡虫啉与多杀菌素和啶虫咪的交互抗性并比较了多功能氧化酶系(mixed-function oxidases,MFO)的3个组分细胞色素P450、细胞色素b5、甲氧试卤灵O脱甲基酶(methoxyresorufin O-demethylase,MROD)在西花蓟马敏感品系(S)、抗吡虫啉品系(BK)和北京田间品系(BJ)中的含量以及活性。生物测定表明北京田间品系(BJ)对多杀菌素已经产生了较高抗性(RR50=35.38),而对啶虫咪(RR50=3.05)和吡虫啉(RR50=1.82)处于敏感,交互抗性研究结果表明西花蓟马对吡虫啉与多杀菌素(RR50=1.31)和啶虫咪(RR50=3.20)无交互抗性。生化研究表明:西花蓟马抗吡虫啉品系的3个组分含量均显著高于S品系西花蓟马的含量(P<0.05),其中细胞色素P450在是S品系WFT的4.5倍,细胞色素b5含量是S品系WFT的4.23倍,MROD活性是S品系WFT的5.99倍,表明多功能氧化酶系与西花蓟马对吡虫啉的抗药性密切相关。 展开更多
关键词 西花蓟马 抗药性 细胞色素P450 细胞色素B5 甲氧试卤灵-O-脱甲基酶
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石油烃暴露对栉孔扇贝(Chlamys farreri)组织生物转化酶及DNA损伤的影响 被引量:5
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作者 任加云 苗晶晶 +1 位作者 李学平 梅增霞 《海洋湖沼通报》 CSCD 北大核心 2016年第3期46-54,共9页
为探讨海水中石油烃对栉孔扇贝生物转化酶和DNA损伤的影响,将栉孔扇贝分别置于含4个浓度梯度(0.1mg·L-1,0.3mg·L-1,1.0mg·L-1和3.0mg·L-1)石油烃的海水中进行为期30d的暴露实验,取消化盲囊和鳃丝分别测定其7-乙氧... 为探讨海水中石油烃对栉孔扇贝生物转化酶和DNA损伤的影响,将栉孔扇贝分别置于含4个浓度梯度(0.1mg·L-1,0.3mg·L-1,1.0mg·L-1和3.0mg·L-1)石油烃的海水中进行为期30d的暴露实验,取消化盲囊和鳃丝分别测定其7-乙氧基异吩恶唑脱乙基酶(7-Ethoxy-Resorufin-O-Deethylase,EROD)、谷胱甘肽S转移酶(Glutathione S-Transferase,GST)活性和DNA损伤F值。结果显示,除0.1mg·L-1浓度组各指标变化不明显外,其余各处理组各指标随时间都出现不同程度的变化。消化盲囊和鳃丝EROD活力相对于对照组都明显被激活,消化盲囊EROD活力随时间内一直呈现上升趋势,在第30d达到最大值,而鳃丝EROD活力从3d后趋于稳定;消化盲囊和鳃丝GST酶活性在0.3mg·L-1处理组明显被激活,在其余两个高浓度组呈现先激活,最后显著被抑制的趋势,鳃丝GST酶活性被较早的抑制;消化盲囊和鳃丝DNA损伤F值在各浓度组随时间明显下降,呈现剂量-效应和时间-效应关系,鳃丝下降幅度较为明显。结果表明,扇贝对0.3mg·L-1以下浓度石油烃暴露具有一定的耐受性,可以通过提升自身生物转化酶活性等功能进行解毒,而对于1.0mg·L-1以上浓度的石油烃暴露,机体显示出明显的致毒效应,鳃丝受到损伤程度较消化盲囊明显,三种指标结合在一起研究能够反映机体受石油烃影响解毒和受损伤的过程,是较好的反映海水石油烃污染程度的生物学指标。 展开更多
关键词 石油烃 栉孔扇贝 EROD GST DNA损伤
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一种用于活细胞中检测还原性谷胱甘肽的试卤灵类荧光探针 被引量:7
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作者 赵灵芝 赵柳 李照 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期7-11,共5页
设计并合成了一种试卤灵类的荧光探针R1,通过质谱,1HNM R谱及13C NM R谱等手段对探针R1进行表征。并采用荧光光谱法和紫外-可见光谱法研究了探针R1对小分子生物硫醇包括还原型谷胱甘肽(GSH)和L-半胱氨酸(Cys)的光谱响应。实验结果表... 设计并合成了一种试卤灵类的荧光探针R1,通过质谱,1HNM R谱及13C NM R谱等手段对探针R1进行表征。并采用荧光光谱法和紫外-可见光谱法研究了探针R1对小分子生物硫醇包括还原型谷胱甘肽(GSH)和L-半胱氨酸(Cys)的光谱响应。实验结果表明,探针R1在p H 7.4磷酸缓冲溶液中对小分子生物硫醇均表现出快速、灵敏的显色和荧光响应,以及较好的选择性。与GSH作用后,探针R1的溶液颜色由无色变为红色。在5~100μmol/L范围内,探针R1的荧光强度与GSH浓度呈线性关系,对GSH的检出限为0.3μmol/L。此外,探针R1可跨过细胞膜,可应用于He La细胞内源性的GSH的激光共聚焦成像,对研究各类病理状态下细胞内氧化还原状态异常有一定的辅助作用。 展开更多
关键词 试卤灵 荧光探针 L-半胱氨酸 还原型谷胱甘肽
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Monitoring biofouling based on aerobic respiration in reverse osmosis system
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作者 Youngjae Yu Keun-Young Park +5 位作者 Jaehyun Jung Wonjung Song Jaehyeok Kim Junhee Ryu Harshad Lade Jihyang Kweon 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2019年第4期247-256,共10页
A monitoring method of biofouling in reverse osmosis(RO) system was proposed based on the fluorescent signal of resorufin, which is reduced by nicotinamide adenine dinucleotide released from viable cells during aerobi... A monitoring method of biofouling in reverse osmosis(RO) system was proposed based on the fluorescent signal of resorufin, which is reduced by nicotinamide adenine dinucleotide released from viable cells during aerobic respiration. The fluorescent signal of resorufin reduced by planktonic cells and microorganisms of biofilm showed linearity, indicating its feasibility to monitor biofouling in a RO system. For the application of the method to the lab-scale RO system, the injection concentration of resazurin and the injection flow rate were optimized. Biofilm on RO membranes continuously operated in a lab-scale RO system was estimated by resorufin fluorescence under optimized detection condition. As a result,resorufin fluorescence on RO membrane showed a significant increase in which the permeability of RO system decreased by 30.48%. Moreover, it represented the development of biofilm as much as conventional biofilm parameters such as adenosine triphosphate,extracellular polymeric substances, and biofilm thickness. The proposed method could be used as a sensitive and low-cost technology to monitor biofouling without autopsy of membranes. 展开更多
关键词 ON-SITE MONITORING Biofilm Aerobic RESPIRATION RESAZURIN reduction mechanism resorufin fluorescence
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