RET基因C634Y突变致多发性内分泌腺瘤病2A型一例报道并文献复习

多发性内分泌腺瘤病2A型(MEN2A)是多发性内分泌腺瘤病2型(MEN2)的一种,临床通常表现为甲状腺髓样癌(MTC)、嗜铬细胞瘤(PHEO)及甲状旁腺功能亢进。研究表明MEN2A由10号染色体RET基因突变导致。本文报道了一例由RET基因C634Y突变导致的MEN2A患者,并对其家族成员进行了基因检测,绘制系谱图。基因检测结果显示患者同胞及同胞的子女存在C634Y突变。通过本病例诊疗结合文献复习,提示临床当患者出现内分泌腺体肿瘤时,需引起警惕,应对患者其他内分泌腺体进行进一步检查,并进行RET基因检测,以防出现误诊、漏诊,实现早期治疗,提高治疗效果,改善患者预后。MEN2A患者亲属也应进行RET基因检测。

RET基因p.M918T突变的多发性内分泌腺瘤病(Ⅱ_(b)型)1例报告并文献复习

多发性内分泌腺瘤病(multiple endocrine neoplasia, MEN)为一组罕见的遗传性多种内分泌组织发生肿瘤综合征的总称,有两个或两个以上的内分泌腺体病变而产生的一种临床综合征。MEN又可分为多发性内分泌腺瘤病Ⅰ型(multiple endocrine neoplasia type-Ⅰ,MEN-Ⅰ)和 多发性内分泌腺瘤病Ⅱ型(multiple endocrine neoplasia type-Ⅱ,MEN-Ⅱ),此外.

中国人先天性巨结肠RET基因突变特征研究

为了研究中国人先天性巨结肠(HD)RET基因突变特征,从分子水平探讨先天性巨结肠症(HD)的发病机理,揭示中国人群HD与RET基因突变的关系。我们应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)-DNA测序方法,对50例HD患儿和30例无便秘正常对照者,进行RET基因第13外显子突变筛查,并对第13外显子突变阳性患儿家系作研究。结果发现在50例HD患儿中,有7例第13外显子扩增片段在SSCP分析时出现泳动变位。经DNA测序证实,有3种点突变类型(错义、同义和移码),第13外显子突变率为14%(7/50)。在7例第13外显子突变的患儿中,发现2例患儿的父亲存在与其子相同的突变。实验表明中国先天性巨结肠人群存在着RET基因突变,且以杂和性点突变为主,HD具有一定的遗传性。

RET基因p.M918T突变导致多发性内分泌肿瘤-Ⅱb型1例

多发性内分泌肿瘤-Ⅱb型(multiple endocrine neoplasia type-Ⅱb,MEN-Ⅱb)是一种罕见的由RET基因突变引起的常染色体显性遗传病,具有特殊的临床表型,如黏膜神经瘤、类马方综合征体型、甲状腺髓样癌及嗜铬细胞瘤等。临床医生对此病认识不足,诊断往往延迟。2018年11月中南大学湘雅三医院收治了1例MEN-Ⅱb患者,该患者自幼有舌黏膜神经瘤,曾因二尖瓣脱垂及脊柱畸形接受手术治疗,于22岁时被诊断为甲状腺髓样癌并接受手术治疗,但直至28岁发现嗜铬细胞瘤才临床诊断为MEN-Ⅱb。基因检测提示该患者携带一新发RET基因p.M918T杂合突变。在临床工作中早期识别内分泌系统以外的临床表现并进行RET基因筛查是早期诊断及治疗的关键。

先天性巨结肠与RET基因c135位点单核苷酸多态性相关性分析

目的确定国人陕西地区正常汉族人群中是否存在RET基因c135位点单核苷酸多态性及基因频率,研究先天性巨结肠患儿该位点基因型与表型的相关性,探讨其病因。方法整体抽样随机选取40例陕西西安地区健康汉族献血者血样进行DNA抽提。对16例病理诊断证实为先天性巨结肠患儿狭窄段肠组织标本进行DNA提取(均为陕西地区患儿,汉族,散发性)。PCR扩增RET基因外显子2(含c135片段),长度300 bp,产物纯化后直接测序,并用相关软件及统计学分析。结果陕西地区正常汉族人群存在RET基因c135位点单核苷酸多态性A/G,A、G基因频率分别为0.475、0.525,各等位基因频率接近,G等位基因频率稍占优势。病例组16例A、G基因频率分别为0.844,0.156。病例组基因型以突变型AA(13/16)为主。对照组与病例组存在明显差异(P<0.001)。A等位基因与疾病关联强度OR=5.97,OR95%CI(2.24,15.92),OR值在0.05水平上有显著性。结论国人陕西地区汉族人群RET位点存在单核苷酸多态性A/G,c135G>A。先天性巨结肠表型与该位点A基因型明显相关。RET基因c135位点单核苷酸多态性纯合突变型AA在先天性巨结肠患儿中过高表达。

PCR介导的ret基因体外定点突变

目的:利用PCR技术介导ret基因cDNA上第2753位碱基的体外定点突变。方法:利用PCR技术进行定点突变,采用DpnⅠ进行原始模板消化。经Amp抗性、PCR技术初步筛选,通过序列分析进行确证。结果:Amp抗性及PCR筛选结果均为阳性;序列分析提示,2753处碱基由T→C。结论:成功完成了ret基因的体外定点突变。

乳腺癌细胞ret基因转录水平的表达及其与PI3KAktmTOR信号通路相关因子的关系

目的探讨乳腺癌细胞ret基因转录水平的表达及其与PI3KAktmTOR信号通路相关因子的关系。方法以乳腺癌细胞为研究对象,采用荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞中RET、PI3K、mTOR和AKT mRNA表达量,构建合成ret shRNA慢病毒载体,转染乳腺癌细胞,再次采用RT-PCR检测细胞中RET、PI3K、mTOR和AKT mRNA表达量。比较转染前后细胞中RET、PI3K、mTOR和AKT mRNA表达量,并采用Pearson线性相关分析法分析其细胞中RET mRNA表达量与其PI3K、mTOR和AKT mRNA表达量的关系。结果转染前细胞中RET、PI3K、mTOR和AKT mRNA表达量分别为0.851±0.126、0.872±0.126、0.845±0.087和0.769±0.355,均分别高于转染后的0.108±0.023、0.113±0.022、0.098±0.022和0.072±0.013(P<0.05)。Pearson线性相关分析结果显示,细胞中RET mRNA表达量与其PI3K、mTOR和AKT mRNA表达量均呈正相关(r=0.877、0.852、0.863,P<0.05)。结论乳腺癌细胞ret基因转录水平较高且与PI3KAktmTOR信号通路相关因子密切相关,可能通过调控PI3KAktmTOR信号通路而影响乳腺癌的发生发展,可能作为乳腺癌治疗的靶基因之一。

天津地区肠无神经节细胞症RET基因13号外显子基因多态性研究

目的:探讨RET基因13号外显子的基因多态性改变与肠无神经节细胞症(HSCR)的发生关系。方法:提取74例HSCR患者和53例与胃肠道疾病无关的对照组病人的全血DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增RET基因13号外显子,纯化,应用直接测序方法分析13号外显子的基因表达情况。结果:在HSCR组与对照组中,RET基因13号外显子存在T769G基因多态性改变,其基因型频率在HSCR组中为GG78.27%,GT18.93%,TT2.8%;在对照组中为GG58.5%,GT15.1%,TT26.4%。等位基因频率在HSCR组中为G:87.84%,T:12.16%;在对照组中为G:66.0%,T:34.0%。两组的基因型和等位基因频率差异均有统计学意义(χ2=18.383,P<0.001;χ2=19.834,P<0.001)。结论:RET基因13号外显子的T769G基因多态性改变与先天性巨结肠的发生可能相关。

超声引导下细针穿刺研究ret基因活化与人类甲状腺癌的关系

目的 研究 ret基因的活化与人类甲状腺癌的关系。方法 对 5 0例高度怀疑甲状腺癌的甲状腺结节患者采用超声引导下细针穿刺技术与 RT- PCR技术相结合 ,研究活检组织中 ret基因的活化形式 PTC基因的表达。结果 乳头状癌 2 6例 ,其中有 7例 (2 7% ) PTC基因表达阳性 ;另 2 4例中滤泡状癌 1 0例 ,未分化癌 2例 ,腺瘤 5例 ,结节性甲状腺肿 7例 ,均未见 PTC基因表达。结论 ret基因的活化仅出现在甲状腺乳头状癌中 ,因此对

有机磷对胎鼠RET基因转录和致突变作用的研究

目的 探讨有机磷农药在先天性巨结肠症发病中的作用。方法 40只妊娠Wistar大鼠随机分为 4组。在大鼠妊娠期 8～ 1 4d ,Ⅰ组每日以生理盐水灌胃作为阴性对照 ;Ⅱ组每日以 5 0mg·kg-1敌百虫 (LD50 的 1 /1 0 )灌胃 ;Ⅲ组给予 1 0mg·kg-1敌百虫 (LD50 的 1 /5 0 ) ;Ⅳ组给予 2mg·kg-1敌百虫 (LD50 的1 /2 5 0 )。分娩前处死母鼠 ,取出胎鼠 ,每只母鼠取 4只体重相似的胎鼠 ,取其远段 1cm结肠组织 ,提取DNA和RNA。采用RT -PCR方法检测RET基因表达 ,采用PCR -SSCP对RET基因第 1 5外显子 (E1 5 )进行基因突变检测 ,阳性PCR产物进行直接测序。结果 RET基因在所有的标本中均稳定表达。在Ⅲ组 (1 0mg·kg-1敌百虫 )的 2只胎鼠 (由不同母鼠所产 )和Ⅱ组 (5 0mg·kg-1敌百虫 )的 1只胎鼠的DNA标本在PCR -SSCP分析时发现泳动变位 ,经测序证实均为V90 6密码子存在GTG→GTT的同义突变。

RET基因多态性与甲状腺乳头状癌的关联性分析

目的:探讨RET基因第11外显子上rs1799939位点基因多态性与甲状腺乳头状癌(PTC)的关系,为PTC的遗传学机制研究提供理论依据。方法:采用病例-对照研究方法,选取100例PTC患者作为病例组,选取与病例组患者年龄、性别匹配的100例健康人作为对照组,采用PCR-RELP方法检测病例组和对照组的基因型,应用SPSS 13.0统计软件分析该单核苷酸多态性(SNPs)位点与甲状腺癌的关联性。结果:病例组和对照组在rs1799939位点上的基因型频数分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05);病例组和对照组rs1799939位点的基因型和等位基因频数分布差异无统计学意义(P>0.05);不同性别的甲状腺乳头状癌患者在该位点的基因型和等位基因频数分布差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论:RET基因rs1799939位点的基因多态性可能与PTC的发生无关联。

先天性巨结肠RET基因突变及相关疾病分析

先天性巨结肠(Hirschsprung's disease,HD)是常见的先天性消化道畸形,其病因尚未明了。最近研究表明原癌基因RET的突变在HD发病中起主要作用。方法:采集30例散发性先天性巨结肠和30例正常儿童的全血标本,提取基因组;采用聚合酶链反应(PCR)和单链构象多态(SSCP)技术分析RET基因的第6、10、16外显子。结果:2例患儿存在第10外显子的突变,其中1例家庭中有MEN2A患者;1例患儿存在第16外显子的突变。结论:RET基因突变可能是导致先天性巨结肠发生的重要原因之一,MEN2A和先天性巨结肠的发生可能有一定联系。

ret基因真核表达载体的构建及其瞬时表达

目的:构建ret基因真核表达载体pcDNA3.0-RET,为制作转基因动物提供实验基础。方法:利用HandⅢ及NotⅠ限制性核酸内切酶,消化pSK-RET及pcDNA3.0空质粒,获得目的基因及相应载体;通过T4连接酶重组DNA;通过氨苄青霉素(Amp)抗性、酶切鉴定及DNA序列分析,确定阳性克隆。通过脂质体包裹转染NIH3T3细胞,采用Westernblot方法检测载体的瞬时表达状况。结果:Amp抗性筛选阳性;酶切片段电泳分析在5400bp及3300bp处有明显条带;DNA序列分析提示重组基因与实际序列一致;Westernblot结果显示175000处有明显条带。结论:ret基因真核表达载体pcDNA3.0-RET构建成功,并可瞬时表达。

甲状腺乳头状癌Ret基因的检测

目的研究分析Ret原癌基因(Retproto-oncogene)在甲状腺乳头状癌表达状态及其临床价值。方法回顾性分析93例初治甲状腺乳头状癌行甲状腺癌联合根治术的有完整随访资料的患者临床、组织病理和免疫组织化学染色资料,与同期收治的31例甲状腺良性病变相比较。对常规HE染色证实上述病变的石蜡包埋组织行Ret免疫组织化学染色。结果93例甲状腺乳头状癌中,45例(48.4%)Ret基因阳性表达,31例甲状腺良性病变中,8例(25.8%)阳性表达。Ret基因在甲状腺乳头状癌和良性病变中的阳性表达率存在统计学差异。Ret基因表达与甲状腺乳头状癌的局部侵犯及颈淋巴结转移有明显相关性(P<0.05)。结论Ret基因表达状态对甲状腺良恶性病变的鉴别有一定的提示作用,可能对预测甲状腺乳头状癌的发展及颈淋巴结转移的危险性有参考价值。

炎性肌纤维母细胞肿瘤的分子特性:高频ALK和ROS1基因融合及罕见新型RET基因重排亚型

约50%的普通型炎性肌纤维母细胞肿瘤（ IMTs）伴ALK基因重排和过表达。近年来,已证明其它激酶的基因融合,如ROS1和PDGFRB,与IMT的发病机制有关。然而这些新出现的基因型是否与IMT的临床病理特征有关仍然未知。本文作者对不同临床表现的IMT大样本进行详细的分子遗传学研究,并分析基因型-表型之间的潜在相关性。

RET基因在肺癌中的研究进展

RET原癌基因已经逐渐被证实与多种恶性肿瘤的发生、发展具有相关性,伴着分子靶向研究的热潮,RET基因的融合突变在肺癌患者中被发现,提示肺癌精准治疗的新靶点出现。RET突变更易出现于较年轻、分化程度较低、非吸烟的非小细胞肺腺癌患者。靶向治疗由于对致癌基因的特异性阻断,可以有效地抑制肿瘤细胞的生长,而RET抑制剂的问世,为肺癌分子治疗研究领域带来新的曙光。

先天性巨结肠与RET基因的相关研究进展

RET原癌基因编码酪氨酸激酶受体,在细胞的增殖分化和迁移过程中发挥重要作用。先天性巨结肠(hirschsprung disease,HSCR)是由于肠神经嵴细胞(enteric neural crest cells,ENCCs)在肠道内的移行、种植过程中发生异常,致使远端肠道缺乏神经节细胞,是最常见的先天性小儿消化道畸形。研究证实RET原癌基因为主要易感基因。本文就近年来RET基因与HSCR发生、发展关系的国内外研究进行综述。

先天性巨结肠层粘连蛋白基因及RET基因的表达研究

目的:通过对先天性巨结肠(HD)病变段层粘连蛋白(LN)转录表达的研究,探讨肠壁微环境改变对HD的形成作用以及与RET基因学说的相关性。方法:利用RT-PCR技术对HD病儿层粘连蛋白mRNA在无神经节细胞段、有神经节细胞段、正常段的表达进行检测,美国alpha9900凝胶图像分析系统判定表达强度,SPSS软件统计分析,推断LN的作用,同时检测RET基因的表达,用直线相关关系研究两者的相关性。结果:LN基因在无神经节细胞段异常高表达(P〈0.05),无神经节细胞段〉有神经节细胞段〉正常段;而RET基因的表达正好相反,无神节细胞段〈有神经节细胞段〈正常段,在无神经节细胞段明显减少,两者存在负相关关系。结论:HD无神经节细胞段LN的增高是内在的,LN增高引起肠神经细胞过早分化、定居导致无神经节细胞症的发生,可能与RET基因有一定内在联系。

MEN2与ret基因的研究进展

多发性内分泌腺瘤病2型(MEN2)是一种常染色体显性遗传病,累及甲状腺、肾上腺、甲状旁腺等多个腺体。其发病与细胞ret原癌基因突变有关,且ret突变基因型与MEN2表型有很强的关联性。本文综述有关ret及其配体和下游信号途径的研究结果,以及MEN2的诊断和治疗的进展。

selpercatinib治疗携带RET基因融合甲状腺癌的阳性资料公布

礼莱公司宣布临床LIBRETTO-001试验提供口服赛哌替尼(selpercatinib,LOXO-292)治疗携带RET基因融合甲状腺癌的阳性资料。RET改变的甲状腺癌分为两类,即RET突变型甲状腺髓样癌和RET融合阳性甲状腺癌。未用过卡博替尼(cabozantinib)、凡德他尼(vandetanib)治疗的76名RET突变型甲状腺髓样癌患者经该药治疗后,客观有效反应率(ORR)为59%,虽多数患者仍有反应或无病情进展,但平均有效反应持续时间(DOR)和平均无病情进展存活期(PFS)未达到显著改变。