狮头鹅RFRPR基因克隆和组织表达

RFRPR是下丘脑神经肽促性腺激素抑制激素(GnIH)的受体,为了获取鵝RFRPR基因结构及其在各组织中的表达情况,本研究采用獅头鹅作为实验材料,采集其下丘脑、睾丸和肌肉等组织样品提取RNA逆转录后,应用RT-PCR克隆的方法对RFRPR基因进行克隆,并用RACE扩增cDNA全长序列,同时运用实时荧光定量PCR的方法检测鵝RFRPR基因的组织表达规律。结果我们获得鵝RFRPR基因4个不同转录本V1-V4,这4个转录本的编码序列一样,共1200bp,编码399个氨基酸;荧光定量检测发现RFRPR基因在鹅的12个组织中均有表达,其中,在睾丸的表达量最高,在胸肌、腿肌和小脑表达量也相对其他组织较高,而在脾脏肾脏和十二指肠中表达量较低。这些结果表明RFRPR基因可能参与调控獅头鶴的公鹅的繁殖和肌肉生长。

鹅GnIH受体基因的克隆及组织表达特性研究

为明确促性腺激素抑制激素(GnIH)及其受体RF酰胺相关肽受体(RFRPR)和神经肽FF受体(NPFFR)在鹅不同组织的表达,探讨GnIH及其受体与鹅繁殖调控间的关系,研究通过逆转录PCR方法获取各基因的cDNA序列,采用实时荧光定量PCR分析GnIH、RFRPR和NPFFR在产蛋期母鹅的卵巢、输卵管、肾脏、肾上腺、眼球、脊髓、延髓、嗅球、视神经叶、大脑、小脑、垂体、下丘脑共13个组织中的mRNA表达水平。序列分析发现,鹅GnIH的2个受体RFRPR和NPFFR高度同源,氨基酸序列相似性达65.35%,具有相似的跨膜结构。荧光定量PCR结果显示,GnIH前体mRNA的主要表达部位是在下丘脑,且在延髓、脊髓、肾上腺、输卵管和卵巢中也有一定的表达。RFRPR和NPFFR两个受体在有GnIH表达的组织中基本都有表达。结果表明,在鹅中,RFRPR更符合GnIH受体的特征,GnIH及其受体可能从下丘脑-垂体-性腺轴的多个环节对鹅的繁殖行为进行调控。