人工合成RGD小肽对肝星状细胞分泌细胞外基质的影响

目的 :探讨精氨酰甘氨酰天冬氨酸肽 (Arg -Gly -Asp ,RGD)对肝星状细胞分泌细胞外基质 (extra cellularmatrix ,ECM)的影响。方法 :利用化学方法合成RGD ;应用胶原酶原位灌注法分离SD大鼠原代肝星状细胞 (hepaticstallatecell,HSC) ,接种培养 4 8h后 ,随机分成 4组 :①空白对照组 ;②转化生长因子 β1(transform inggrowthfactorβ1,TGFβ1)组 :只加TGFβ1(终浓度 5ng/ml) ;③RGD组 :只加RGD(终浓度 10 0 μg/ml) ;④联合加药组 :加RGD(终浓度 10 0 μg/ml)同时加TGFβ1(终浓度 5ng/ml)。连续培养 3d后 ,放射免疫分析细胞上清液各项ECM含量变化。结果 :与空白对照组相比 ,TGF β1组和联合加药组细胞上清液中透明质酸(hyaluronicacid ,HA)、层粘连蛋白 (laminin ,LN)和Ⅲ型前胶原 (procollagenⅢ ,PCⅢ )水平均显著增高 ,RGD组细胞上清中各项ECM水平则无明显改变 ;与TGFβ1组相比 ,联合用药组HSC细胞上清LN和PCⅢ水平明显降低。结论 :RGD明显降低HSC培养上清中LN和PCⅢ含量 ,表明RGD能抑制原代HSC合成及分泌ECM ,其机制可能与竞争性结合整合素有关。