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RGDS-尿激酶原嵌合体的构建与表达
被引量:
13
1
作者
孙迎庆
郭雁
+1 位作者
李令媛
茹炳根
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999年第2期189-193,共5页
利用定点突变及DNA重组技术,构建了在尿激酶原K区C端的β发夹区插入了精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸〔RGDS〕片段的尿激酶原嵌合体基因,并利用昆虫杆状病毒表达系统通过感染Sf9细胞对野生型及嵌合体尿激酶原进行了高...
利用定点突变及DNA重组技术,构建了在尿激酶原K区C端的β发夹区插入了精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸〔RGDS〕片段的尿激酶原嵌合体基因,并利用昆虫杆状病毒表达系统通过感染Sf9细胞对野生型及嵌合体尿激酶原进行了高效表达,表达量分别为1200~1800IU/(106细胞·ml)和1800~2400IU/(106细胞·ml).经过CM-SepharoseFF离子交换层析、SephadexG-75凝胶过滤层析及超滤浓缩对野生型及突变型进行了部分纯化,并对其性质进行了初步研究.表明突变体尿激酶原保留了全部尿激酶原的纤溶酶原激活活性,并具有很强的抗血小板聚集活性.
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关键词
尿激酶原
rgd片段
昆虫杆状病毒
激活剂
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职称材料
题名
RGDS-尿激酶原嵌合体的构建与表达
被引量:
13
1
作者
孙迎庆
郭雁
李令媛
茹炳根
机构
北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系蛋白质工程国家重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999年第2期189-193,共5页
文摘
利用定点突变及DNA重组技术,构建了在尿激酶原K区C端的β发夹区插入了精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸〔RGDS〕片段的尿激酶原嵌合体基因,并利用昆虫杆状病毒表达系统通过感染Sf9细胞对野生型及嵌合体尿激酶原进行了高效表达,表达量分别为1200~1800IU/(106细胞·ml)和1800~2400IU/(106细胞·ml).经过CM-SepharoseFF离子交换层析、SephadexG-75凝胶过滤层析及超滤浓缩对野生型及突变型进行了部分纯化,并对其性质进行了初步研究.表明突变体尿激酶原保留了全部尿激酶原的纤溶酶原激活活性,并具有很强的抗血小板聚集活性.
关键词
尿激酶原
rgd片段
昆虫杆状病毒
激活剂
Keywords
Prourokinase,
rgd
fragment,Platelet aggregation,Insect baculovirus
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RGDS-尿激酶原嵌合体的构建与表达
孙迎庆
郭雁
李令媛
茹炳根
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999
13
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参考文献
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