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Ad.RGD-ING4对人鼻咽癌细胞CNE抑癌增效及其机制的研究
被引量:
2
1
作者
王奕鸿
盛伟华
+1 位作者
杨吉成
刘济生
《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》
CAS
北大核心
2014年第6期410-415,共6页
目的:研究带RGD的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞CNE生长、凋亡及细胞周期的影响并探讨其可能调节机制。方法:以Ad.RGD-ING4及腺病毒空载体感染CNE细胞,RT-PCR法检测ING4基因的表达水平,Western blot法检测目的蛋白的表达。用MTT试验检...
目的:研究带RGD的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞CNE生长、凋亡及细胞周期的影响并探讨其可能调节机制。方法:以Ad.RGD-ING4及腺病毒空载体感染CNE细胞,RT-PCR法检测ING4基因的表达水平,Western blot法检测目的蛋白的表达。用MTT试验检测ING4对CNE细胞生长情况的影响,用Annexin V-PE/7-AAD双染色测定ING4对CNE细胞凋亡的影响,用PI单染色检测ING4对CNE细胞细胞周期的影响。RT-PCR检测p21、Bcl-2、Bax基因的表达水平的差异,Western blot法检测Survivin蛋白、Cleaved-caspase3蛋白表达的差异。结果:CNE细胞感染Ad.RGD-ING4 72h后,ING4在CNE细胞中过表达,CNE细胞的生长受到明显抑制,细胞凋亡率明显升高,G2/M期出现明显阻滞。RT-PCR结果显示,感染Ad.RGD-ING4的CNE细胞中Bcl-2表达下降,p21、Bax表达升高,差异具有统计学意义(均P<0.01)。Western blot结果显示Survivin蛋白表达下降,Cleaved-caspase3蛋白表达升高。结论:Ad.RGD-ING4可以对鼻咽癌细胞株CNE的起到抑癌增效作用,这一作用可能是通过下调Bcl-2、Survivin表达及上调p21、Bax、caspase3实现的。
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关键词
AD
rgd-ing4
鼻咽肿瘤
MTT
凋亡
原文传递
RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的影响
被引量:
1
2
作者
王奕鸿
刘济生
+1 位作者
盛伟华
杨吉成
《解放军医药杂志》
CAS
2014年第4期50-54,共5页
目的研究RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞(CNE)裸鼠移植瘤的影响并探讨其可能调节机制。方法用RGD修饰的ING4单基因腺病毒载体(Ad.RGD-ING4)及腺病毒空载体(Ad.RGD-GFP)感染CNE细胞,RT-PCR法及Western blot法检测ING4基因的表...
目的研究RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞(CNE)裸鼠移植瘤的影响并探讨其可能调节机制。方法用RGD修饰的ING4单基因腺病毒载体(Ad.RGD-ING4)及腺病毒空载体(Ad.RGD-GFP)感染CNE细胞,RT-PCR法及Western blot法检测ING4基因的表达水平。采用CNE细胞株来建立15只人鼻咽癌裸鼠模型,分为PBS组、Ad.RGD-GFP及Ad.RGD-ING4组,每组5只。分别对瘤体内局部注射相应的干预用药,动态测量肿瘤体积,免疫组化检测Caspase-3基因的表达。结果 CNE细胞感染Ad.RGD-ING4 72 h后,ING4在CNE细胞中过表达,Ad.RGD-ING4组肿瘤体积明显小于PBS组及Ad.RGD-GFP组(P<0.01),免疫组化结果显示Ad.RGD-ING4组比其余两组Caspase-3基因的表达明显上调(P<0.01)。结论 Ad.RGD-ING4抑制人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长,可能的机制是通过上调Caspase-3基因促进肿瘤细胞凋亡。
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关键词
Ad
rgd-ing4
鼻咽肿瘤
基因
肿瘤
Caspase-3
裸鼠
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职称材料
腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞的生长抑制作用
被引量:
1
3
作者
何峰
李帅
+3 位作者
朱霞霞
杨吉成
盛伟华
缪竞诚
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期953-960,共8页
目的在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4腺病毒基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR克隆P53基因,构建pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,用Q...
目的在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4腺病毒基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR克隆P53基因,构建pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,用QBI-293A细胞进行包装扩增和检测效价。将Ad.RGD、Ad.RGD-ING4、Ad.RGD-P53、Ad.RGD-ING4-P53分别感染A549细胞后,流式细胞仪检测各组重组腺病毒对A549细胞的感染效率。Western blotting检测A549和PC-9细胞中ING4或/和P53蛋白的表达。MTT法检测A549细胞生长,流式细胞仪检测各组A549和PC-9细胞的凋亡率。real-time PCR检测A549细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX及BCL-2 mRNA的表达水平。结果 PCR和酶切鉴定结果表明:成功构建了pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,包装扩增后经效价检测可达1×109~1×1010pfu/m L;各组重组腺病毒感染A549细胞后,感染效率可达90%~95%。Western blotting检测结果表明ING4或/和P53蛋白可在A549和PC-9细胞中成功表达。MTT法检测发现ING4或/和P53单双基因重组腺病毒均能明显抑制A549细胞生长,流式细胞仪检测表明ING4或/和P53基因表达均可诱导A549和PC-9细胞凋亡,且Ad.RGD-ING4-P53双基因重组腺病毒组较Ad.RGD-ING4和Ad.RGD-P53单基因组更为明显(P〈0.05)。real-time PCR检测表明腺病毒介导的ING4或/和P53基因表达能够上调A549细胞内Caspase-3、BAX mRNA表达,下调BCL-2 mRNA的表达,且双基因组较单基因组更为明显(P〈0.05)。结论成功构建了Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53重组腺病毒。各重组腺病毒目的基因表达均能明显抑制人肺腺癌细胞的生长,诱导细胞凋亡,且双基因组较单基因组效果更优,其分子机制可能与细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX表达上调及BCL-2表达下调有关。
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关键词
RGD腺病毒
ING
4
基因
P53基因
人肺腺癌细胞
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职称材料
题名
Ad.RGD-ING4对人鼻咽癌细胞CNE抑癌增效及其机制的研究
被引量:
2
1
作者
王奕鸿
盛伟华
杨吉成
刘济生
机构
苏州大学附属第一医院耳鼻咽喉科
苏州大学基础医学院细胞与分子生物学教研室
出处
《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》
CAS
北大核心
2014年第6期410-415,共6页
基金
江苏省苏州市国标技术引进与合作创新项目(No:SH201209)
文摘
目的:研究带RGD的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞CNE生长、凋亡及细胞周期的影响并探讨其可能调节机制。方法:以Ad.RGD-ING4及腺病毒空载体感染CNE细胞,RT-PCR法检测ING4基因的表达水平,Western blot法检测目的蛋白的表达。用MTT试验检测ING4对CNE细胞生长情况的影响,用Annexin V-PE/7-AAD双染色测定ING4对CNE细胞凋亡的影响,用PI单染色检测ING4对CNE细胞细胞周期的影响。RT-PCR检测p21、Bcl-2、Bax基因的表达水平的差异,Western blot法检测Survivin蛋白、Cleaved-caspase3蛋白表达的差异。结果:CNE细胞感染Ad.RGD-ING4 72h后,ING4在CNE细胞中过表达,CNE细胞的生长受到明显抑制,细胞凋亡率明显升高,G2/M期出现明显阻滞。RT-PCR结果显示,感染Ad.RGD-ING4的CNE细胞中Bcl-2表达下降,p21、Bax表达升高,差异具有统计学意义(均P<0.01)。Western blot结果显示Survivin蛋白表达下降,Cleaved-caspase3蛋白表达升高。结论:Ad.RGD-ING4可以对鼻咽癌细胞株CNE的起到抑癌增效作用,这一作用可能是通过下调Bcl-2、Survivin表达及上调p21、Bax、caspase3实现的。
关键词
AD
rgd-ing4
鼻咽肿瘤
MTT
凋亡
Keywords
Ad. RGDING
4
nasopharyngeal carcinoma
MTT
apoptosis
分类号
R739.63 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的影响
被引量:
1
2
作者
王奕鸿
刘济生
盛伟华
杨吉成
机构
苏州大学附属第一医院耳鼻咽喉科
苏州大学基础医学院细胞与分子生物学教研室
出处
《解放军医药杂志》
CAS
2014年第4期50-54,共5页
基金
苏州市科技计划项目(SYS201014)
文摘
目的研究RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞(CNE)裸鼠移植瘤的影响并探讨其可能调节机制。方法用RGD修饰的ING4单基因腺病毒载体(Ad.RGD-ING4)及腺病毒空载体(Ad.RGD-GFP)感染CNE细胞,RT-PCR法及Western blot法检测ING4基因的表达水平。采用CNE细胞株来建立15只人鼻咽癌裸鼠模型,分为PBS组、Ad.RGD-GFP及Ad.RGD-ING4组,每组5只。分别对瘤体内局部注射相应的干预用药,动态测量肿瘤体积,免疫组化检测Caspase-3基因的表达。结果 CNE细胞感染Ad.RGD-ING4 72 h后,ING4在CNE细胞中过表达,Ad.RGD-ING4组肿瘤体积明显小于PBS组及Ad.RGD-GFP组(P<0.01),免疫组化结果显示Ad.RGD-ING4组比其余两组Caspase-3基因的表达明显上调(P<0.01)。结论 Ad.RGD-ING4抑制人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长,可能的机制是通过上调Caspase-3基因促进肿瘤细胞凋亡。
关键词
Ad
rgd-ing4
鼻咽肿瘤
基因
肿瘤
Caspase-3
裸鼠
Keywords
Ad.
rgd-ing4
Nasopharyngeal neoplasm
Gene, neoplasm
Caspase-3
Nude mouse
分类号
R739.6 [医药卫生—肿瘤]
R-332 [医药卫生]
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职称材料
题名
腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞的生长抑制作用
被引量:
1
3
作者
何峰
李帅
朱霞霞
杨吉成
盛伟华
缪竞诚
机构
苏州大学医学部细胞教研室
出处
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期953-960,共8页
基金
国家自然科学基金(81001016)~~
文摘
目的在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4腺病毒基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR克隆P53基因,构建pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,用QBI-293A细胞进行包装扩增和检测效价。将Ad.RGD、Ad.RGD-ING4、Ad.RGD-P53、Ad.RGD-ING4-P53分别感染A549细胞后,流式细胞仪检测各组重组腺病毒对A549细胞的感染效率。Western blotting检测A549和PC-9细胞中ING4或/和P53蛋白的表达。MTT法检测A549细胞生长,流式细胞仪检测各组A549和PC-9细胞的凋亡率。real-time PCR检测A549细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX及BCL-2 mRNA的表达水平。结果 PCR和酶切鉴定结果表明:成功构建了pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,包装扩增后经效价检测可达1×109~1×1010pfu/m L;各组重组腺病毒感染A549细胞后,感染效率可达90%~95%。Western blotting检测结果表明ING4或/和P53蛋白可在A549和PC-9细胞中成功表达。MTT法检测发现ING4或/和P53单双基因重组腺病毒均能明显抑制A549细胞生长,流式细胞仪检测表明ING4或/和P53基因表达均可诱导A549和PC-9细胞凋亡,且Ad.RGD-ING4-P53双基因重组腺病毒组较Ad.RGD-ING4和Ad.RGD-P53单基因组更为明显(P〈0.05)。real-time PCR检测表明腺病毒介导的ING4或/和P53基因表达能够上调A549细胞内Caspase-3、BAX mRNA表达,下调BCL-2 mRNA的表达,且双基因组较单基因组更为明显(P〈0.05)。结论成功构建了Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53重组腺病毒。各重组腺病毒目的基因表达均能明显抑制人肺腺癌细胞的生长,诱导细胞凋亡,且双基因组较单基因组效果更优,其分子机制可能与细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX表达上调及BCL-2表达下调有关。
关键词
RGD腺病毒
ING
4
基因
P53基因
人肺腺癌细胞
Keywords
RGD adenovirus
ING
4
gene
P53 gene
human lung adenocarcinoma cell
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Ad.RGD-ING4对人鼻咽癌细胞CNE抑癌增效及其机制的研究
王奕鸿
盛伟华
杨吉成
刘济生
《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》
CAS
北大核心
2014
2
原文传递
2
RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的影响
王奕鸿
刘济生
盛伟华
杨吉成
《解放军医药杂志》
CAS
2014
1
下载PDF
职称材料
3
腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞的生长抑制作用
何峰
李帅
朱霞霞
杨吉成
盛伟华
缪竞诚
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
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职称材料
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