RhCE抗原弱表达的分子基础与RHCE变异等位基因相关性研究

目的探讨血清学检测中弱反应的C，C，E或e抗原的分子生物学基础以及RHCE基因多态性，为Rh抗原在临床输血医学、遗传学和免疫学等方面的应用提供理论依据。方法随机选择2010年1月至2011年12月于本中心行全血捐献的RhD阳性献血者10373例为研究对象。采用U型微板法，单克隆抗-C，-c，-E，和-e试剂检测其RhCE血清学表型，通过血清学试管法复检，并鉴定携带弱C，c，E或e抗原的样本。采用多重PCR-序列特异性引物（SSP）技术检测基因银行公布的22个RHCE等位基因，DNA序列分析技术鉴定特异的RHCE等位基因（本研究遵循的程序符合本中心人体试验委员会所制定的伦理学标准，得到该伦理会批准，并与之签订临床研究知情同意书）。结果10373例全血捐献者中，检测到229例样本携带弱C，c，E或e抗原，其中共检测出22种具有明确单核苷酸突变的等位基因，多态性基因RHces（R114W），RHcE（E1，Ew；M167K），RHCE（M267K），RHCe（L297P），RHce（VS；L245V），RHces（G331C）和RHcE（L303Q）检出频率最高，最可能的变异单倍型为Dce，dce，DCe，DcE。这些RHCE等位基因变异体与C，c，E和e抗原的血清学免疫原性减弱相关，且大多数变异的RHCE等位基因和正常的RHCE等位基因以杂合体形式存在。结论RHCE基因的分子机制与RHD基因具有相似性，在弱表达CcEe抗原的样本中多种RHCE等位基因类型被检出，变异的等位基因可以影响Rh抗原的免疫反应性。阐明RhCE抗原表达异常的分子基础有助于优化血清学检测准确率。