国产rhGM-CSF预防化疗病人白细胞下降的疗效及不良反应观察

目的：观察国产重组人粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭＣＳＦ）对化疗病人血白细胞下降的防治作用及其不良反应。方法：共７０例癌症病人，包括肺癌、非霍奇金氏淋巴瘤、头颈部癌、乳腺癌、胃癌等病种，按照３：１分别入国产ｒｈＧＭＣＳＦ及进口ｒｈＧＭＣＳＦ组，采取自身交叉对照的方法，每例病人化疗２疗程，其中一疗程加国产或进口ｒｈＧＭＣＳＦ作为治疗组疗程，而另一相同化疗疗程不加ｒｈＧＭＣＳＦ作为对照组疗程，比较治疗组及对照组白细胞（ＷＢＣ）及中性粒细胞（ＡＮＣ）的变化，并观察不良反应。同时与进口品进行初步的比较。结果：治疗组疗程加用国产ｒｈＧＭＣＳＦ，ＷＢＣ下降（＜４０×１０９／Ｌ）、ＡＮＣ下降（＜２０×１０９／Ｌ）持续天数均明显低于对照组疗程（６７天比１０６天，３２５天比６９天），且ＡＮＣ最低点亦高于对照组，因ＡＮＣ下降而延迟下一疗程化疗的发生率明显低于对照组（１１３％ｖｓ４９％），与进口ｒｈＧＭＣＳＦ的临床疗效基本一致。国产ｒｈＧＭＣＳＦ的不良反应多为ＩＩ级的发热、骨骼肌肉疼痛、皮疹、局部硬结，患者能耐受，与进口产品的不良反应无差异。结论：国产ｒｈＧＭＣＳＦ可缩短化疗后ＷＢＣ下降?

应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱和N端测序鉴定重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的结构

目的 :应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 (MALDI -TOF -MS)和N端测序方法鉴定重组人粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM -CSF)的结构。方法 :1 用Edman降解法进行N端测序。 2 应用MALDI-TOF -MS测定分子量并鉴定纯度。 3 通过还原、烷基化确定rhGM -CSF分子中二硫键数目。 4 通过蛋白内切酶Glu -C酶切的肽质量指纹谱确证氨基酸序列并确证其中两对二硫键的配对。结果 :1 测定的rhGM -CSFN端 15个氨基酸序列与从cDNA推导的序列一致。 2 测定的rhGM -CSF分子量与理论计算值一致。 3 证明rhGM -CSF没有自由巯基 ,含有两对二硫键 ,与理论值一致。 4 证明rhGM -CSF的氨基酸序列是正确的 ,并确证其中的两对二硫键配对正确。结论 :确证重组人粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM -CSF)的结构是正确的 ,没有修饰、变异和氨基酸的丢失。应用的方法灵敏、准确。

rhGM-CSF凝胶与异种皮对深Ⅱ度烧伤创面愈合效果分析

目的探讨重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rh GM-CSF)凝胶与异种皮相对比,对深Ⅱ度烧伤创面愈合效果差异。方法以入院病例号为编号,采用数字表法,将70例深Ⅱ度烧伤患者随机分成两组,每组35例。对照组按照常规治疗方法,同时削痂后给予异种皮(猪皮)覆盖;观察组患者削痂后给予rh GM-CSF凝胶覆盖创面。治疗7天时记录并观察患者换药疼痛程度、创面溶痂率、完全溶痂时间、创面愈合时间以及安全性。结果观察组VAS和TESS分别为2.8±0.7分和5.3±0.8分,均低于对照组(P<0.05);第3、7、10天观察组创面溶痂率34.5%、64.6%、90.6%均优于对照组25.6%、48.7%、78.5%(P<0.05);观察组患者完全溶痂时间和创面愈合时间分别为8.3±3.8天和17.9±4.5天,优于对照组(P<0.05)。结论与异种皮相比,rh GM-CSF凝胶可有效促进深Ⅱ度烧伤创面愈合,提高创面溶痂率,降低患者换药痛苦,安全性高,应用前景良好。

脐血血浆与rhGM-CSF对正常骨髓细胞生长影响的比较研究

脐血血浆与ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对正常骨髓细胞生长影响的比较研究２１００２９南京医科大学第一附属医院张学忠１陈玉心汪承亚敖忠芳１现在南京医科大学附属南京第一医院（２１０００６）脐血中除单个核细胞（ＭＮＣ）中含有较丰富的造血干／祖细胞外，血浆中也富含多种造血...

rhGM-CSF预防肿瘤化疗所致白细胞减少的随机对照临床研究

目的：观察ｒｂＧＭ－ＣＳＦ（重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子）预防和治疗肿瘤化疗所致白细胞（ＷＢＣ）和中性粒细胞（ＡＮＣ）减少的临床疗效和毒性反应。方法：采用随机自身交叉对照临床研究的方法，对６４例病人进行化疗和ｒｈＧＭ－ＣＳＦ治疗，每一例病人连续观察２个周期。ＡＢ组病人第１周期为治疗组（Ａ周期），采用化疗加ｒｈＧＭ－ＣＳＦ治疗，第２周期为对照组（Ｂ周期），采用单纯化疗；ＢＡ组病人第１周期为对照组（Ｂ周期）采用单纯化疗，第２周期为治疗组（Ａ周期）采用化疗加ｒｈＧＭ－ＣＳＦ治疗。结果：５９例病人可评价疗效，治疗组ＷＢＣ和ＡＮＣ下降持续天数明显少于对照组，同时，ＷＢＣ和ＡＮＣ最低值也高于对照组，并且最低值时的中位化疗序日也比对照组明显提前，第２１天时，治疗组ＷＢＣ和ＡＮＣ数值明显高于对照组，化疗延迟的例数治疗组明显少于对照组。结论：ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对化疗所致的白细胞和中性粒细胞减少具有明显的预防和治疗作用，保证化疗如期进行，不良反应可以耐受。

rhGM-CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成的影响

目的 探讨rhGM CSF促进口腔溃疡愈合的作用机制。方法 取体外培养的胎儿口腔粘膜成纤维细胞 ,用rhGM CSF刺激成纤维细胞后第 2、4、6天用细胞计数及3 H 胸腺嘧啶掺入法 (3 H TdR)测定其增殖情况。结果 rhGM CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成有刺激作用 ,在 80～ 10 0ng/ml时 ,细胞生长达到最佳状态 ,过高浓度rhGM CSF的刺激作用反而下降。结论 rhGM

冻干重组rhGM-CSF的稳定性

目的 观察冻干重组ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的稳定性。方法采用ＸＴＴ法，ＴＦ－１细胞为依赖细胞株，对重组人 粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）进行了稳定性观察。结果重组ｒｈＧＭ－ＣＳＦ在３７℃保存３个月，２２℃５个 月，４℃４８个月生物学活性未降低。结论 重组ｒｈＧＭ－ＣＳＦ稳定性好。

rhIL-3、rhGM-CSF对γ线照射恒致河猴造血损伤的作用

观察了国产白介素３（ｒｈＩＬ－３）和市售粒巨噬系集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）单用和伍用对恒河猴辐射后造血功能的改善作用。结果表明，单用ＩＬ－３２０μｇ／ｋｇ×２８天可提高３．５Ｇｙ照射猴白细胞最低值水平，缩短白细胞低水平的持续时间；减缓血小板的下降趋势。单用ＧＭ－ＣＳＦ使白细胞恢复提前，超常恢复时峰值可达照前的５００％。二者伍用兼有二种因子的效果，白细胞减少幅度小且时间短，恢复提前，回落平稳。两因子单用和伍用可使受照猴骨髓造血祖细胞比对照增多约３～９倍，但停药后迅速下跌。

rhGM-CSF治疗急性再生障碍性贫血的效果

在常规治疗急性再生障碍性贫血 (AAA)基础上用大剂量的rhGM -CSF连续静脉给药 2w(5～ 15 μg kg.d)治疗 8例 ,并与常规治疗方法进行比较 ,研究结果表明 ,观察组较对照组外周血白细胞数增加 5～ 30倍。rhGM-CSF可以缓解AAA的临床症状 ,降低感染机会 ,是辅助治疗AAA的有效方法。

不同剂量rhGM-CSF cDNA直接注射小鼠骨骼肌的表达

将表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的重组真核表达质粒(pCG1),以30μg和60μg的剂量分别直接注射小鼠骨骼肌,观察不同剂量的质粒(pCG1)在小鼠体内分泌表达rhGM-CSF的情况。ELISA检测表明,注射60μg质粒DNA的小鼠血液中测得的rhGM-CSF含量与对照组相比有显著差别,而注射30μg质粒DNA的小鼠血液中rhGM-CSF含量与对照组相比无显著差别。以60μg质粒DNA直接注射骨骼肌后第15～20天左右表达量最高,平均约91ng/ml。生物学活性检测结果显示,注射60μg质粒DNA的小鼠血液能维持GM-CSF依赖的TF-1细胞的生长。这提示用质粒DNA直接注射小鼠骨骼肌时,质粒DNA必须达到足够的量。

rhGM-CSF联合rhIL-4对髓性白血病细胞B7分子表达的上调作用

目的 探讨GM CSF联合IL 4对髓性白血病细胞表面B7分子表达的上调作用。方法 从初诊急性或慢性髓性白血病患者的外周血中分离出单个核细胞 (PBMNC) ,用rhGM CSF联合rhIL 4共同孵育 7～ 10d ;通过流式细胞仪检测细胞因子诱导前后细胞表面B7分子的表达。结果 未经细胞因子诱导的白血病细胞表面B7分子低表达或缺如 ,经过GM CSF联合IL 47～ 10d的诱导 ,可显著上调B7分子的表达。结论 髓性白血病细胞表面存在B7分子表达缺陷 ;用GM CSF联合IL

RhGM-CSF贴片治疗化疗后口腔黏膜炎的临床观察

目的:观察rhGM-CSF贴片治疗化疗后口腔黏膜炎的疗效。方法:用自制rhGM-CSF贴片及普通贴片贴敷口腔溃疡面,3次/d。每天由血液科医生按照WHO标准评估口腔黏膜炎的严重程度。结果:治疗组40例化疗后口腔溃疡患者用rhGM-CSF贴片贴敷溃疡面,有效率87.5%,对照组40例用普通贴片贴敷溃疡面,有效率32.5%,两组疗效相差非常显著,P<0.01。结论:rhGM-CSF可以明显促进口腔黏膜炎愈合,并缩短病程。

大肠杆菌表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的纯化

对重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）的工程菌表达产物进行纯化，经过超声破碎，包涵体抽提，凝胶层析，复性，离子交换一系列纯化步骤，终产物纯度达９８％，比活性达１０００００００ｕ／ｍｇ。

rhGM-CSF对VP-16诱导的HL-60细胞凋亡的影响

为探讨rhGM CSF对VP 16诱导的HL 60细胞凋亡的影响 ,我们观察了预先应用rhGM CSF孵育的HL 60细胞由VP 16诱导的凋亡过程及凋亡相关基因bcl 2和fas的表达变化。应用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态和超微结构的变化 ,凝胶电泳检测DNA的碎片 ,流式细胞术检测细胞凋亡率、bcl 2和fas的表达。实验结果显示 ,rhGM CSF可抑制VP 16诱导的HL 60细胞的凋亡 ,它加强了VP 16对bcl 2表达的下调作用 ,抑制了VP 16对fas表达的上调作用。由此推测 ,rhGM CSF可能是通过下调fas表达降低HL 60细胞对VP

分泌型rhGM-CSF中试产品的质量分析

参照 2 0 0 0版《中国生物制品规程》对 3批粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)原液及半成品进行理化及生物学活性检定 ,结果显示 3批rhGM CSF原液及半成品均符合 2 0 0 0版生物制品规程的各项检定标准。对 3批rhGM CSF中试产品质量分析 ,说明rhGM CSF的生产工艺合理 ,产品质量稳定 。

表达含凝血酶识别位点的rhGM-CSF融合蛋白工程菌的选定及其酶切后目的蛋白的纯化

比较 4株表达含凝血酶识别位点的rhGM CSF融合蛋白工程菌的特性 ,选定用于开发的工菌株 ,其表达产物相对分子质量为 2 6 0 0 0 ,N端 110 0 0为MS2 ,C端 15 0 0 0为rhGM CSF ,较易用凝血酶消化释放出目的蛋白。用阴离子交换、疏水和凝胶过滤层析 ,或后二者结合进行可得到适宜人体应用的纯品 ,活性达到 10 7IU mg蛋白。

rhGM-CSF和rhIL-4诱导的髓性白血病细胞刺激自体T细胞增殖与IFN-γ分泌作用

为了研究rhGM CSF和rhIL 4诱导的髓性白血病细胞刺激自体T细胞的增殖作用和IFN γ的分泌作用 ,运用rhGM CSF和rhIL 4在体外进行CML和AML外周血MNC培养 ,培养的第 7天运用流式细胞术测定CML和AML细胞的CD80 ,CD86和HLA DR表达 ;以诱导的白血病细胞作为刺激细胞 ,自体T细胞作为反应细胞 ,在体外进行混合淋巴细胞培养 (MLR) ,测定自体T细胞的增殖情况和IFN γ的分泌情况。结果显示 ,rhGM CSF和rhIL 4明显上调CML细胞HLA DR ,CD80和CD86的表达 ,并明显上调AML细胞的CD80与CD86表达 ;诱导后的白血病细胞刺激自体T细胞明显的增殖和促进IFN γ的分泌 (CML组 )作用。结论 :rhGM CSF和rhIL

rhGM-CSF对^(60)Co照射小鼠外周血细胞和骨髓细胞动态变化的影响

目的： 探讨重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ） 对受照小鼠外周血和骨髓细胞的影响． 方法：采用６．０ Ｇｙ ６０ Ｃｏγ照射小鼠造成造血功能损伤，采尾静脉血计数外周血白细胞及其分类， 取一侧股骨骨髓计数骨髓有核细胞，取另侧骨髓制片观察骨髓粒系分裂池、存贮池、成熟池骨髓细胞绝对值动态变化． 结果： Ｌｅｕｃｏｍ ａｘ 与ｒｈ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ不能使受损血细胞恢复常态，但能动员外周造血器官与贮备池血细胞加速释放， 在骨髓严重受抑后，能使骨髓细胞粒系增殖提前，分裂池细胞分化增殖，诱导贮备池不成熟的细胞发育成熟细胞． 结论：ｒｈ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ对６０ Ｃｏ 辐射小鼠的粒细胞和单核细胞具有增殖和动员作用．

rhGM-CSF化疗前应用对骨髓保护作用的观察

目的 :观察rhGM -CSF化疗前应用对骨髓的保护作用。方法 :2 2例初治乳腺癌病人于化疗前 3天每天一次rhGM- CSF 15 0 μg皮下注射 ,观察病人化疗后外周血白细胞数的变化情况 ,采用自身交叉对照。 结果 :统计化疗后第 7、10、15天治疗周期与对照组白细胞减少病人数及减少程度 ,显示均有显著差异。结论 :rhGM -CSF化疗前应用对骨髓有显著的保护作用。