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RhoGAP结构域在DLC-1基因抑制人结肠癌HT29细胞增殖、侵袭中的作用 被引量:3
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作者 吴鹏 吴平平 +3 位作者 金治 李楠 杨琳 黄培林 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1383-1388,共6页
目的:探讨Rho蛋白GTP酶活化蛋白(Rho GTPase activation protein,RhoGAP)结构域在肝癌缺失基因1(frequentlydeleted in liver,DLC-1)抑制人结肠癌HT29细胞的增殖、侵袭中的作用。方法:脂质体转染DLC-1基因及RhoGAP结构域缺失的ΔDLC-1... 目的:探讨Rho蛋白GTP酶活化蛋白(Rho GTPase activation protein,RhoGAP)结构域在肝癌缺失基因1(frequentlydeleted in liver,DLC-1)抑制人结肠癌HT29细胞的增殖、侵袭中的作用。方法:脂质体转染DLC-1基因及RhoGAP结构域缺失的ΔDLC-1亚克隆至大肠癌HT29细胞株;应用MTT、平板克隆实验检测细胞增殖的改变;Transwell实验观察细胞侵袭迁移能力的改变;流式细胞术检测细胞周期。结果:转染成功后,全长DLC-1基因转染组(pcDNA3.1-DLC1-HT29)与野生型及空载组相比,细胞增殖能力下降,侵袭能力减弱,细胞周期G1期阻滞并诱导凋亡,而ΔDLC-1亚克隆转染组(pcDNA3.1-ΔDLC1-HT29)对细胞增殖、侵袭及细胞周期均无明显影响。结论:DLC-1基因可能是通过其内在的RhoGAP结构域抑制人结肠癌细胞HT29的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 肝癌缺失基因-1 转染 rhogap结构域 HT29细胞株
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胃泌素干预影响人结肠癌细胞P190RhoGAP磷酸化的机制 被引量:4
2
作者 宋文冲 于皆平 +3 位作者 曹俊 刘军 沈磊 于红刚 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2007年第1期21-26,共6页
目的:研究胃泌素对人结肠癌细胞P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平的影响。方法:使用胆囊收缩素2受体(CCK2R)的真核表达载体pCR3.1/CCK2R转染人结肠癌细胞株Colo320,上调胃泌素表达;使用胃泌素拮抗剂下调胃泌素表达。使用相同浓度的胃泌素(1... 目的:研究胃泌素对人结肠癌细胞P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平的影响。方法:使用胆囊收缩素2受体(CCK2R)的真核表达载体pCR3.1/CCK2R转染人结肠癌细胞株Colo320,上调胃泌素表达;使用胃泌素拮抗剂下调胃泌素表达。使用相同浓度的胃泌素(1×10-7mol/L)按时间梯度刺激细胞;采用蛋白质印迹法检测总FAK、酪氨酸磷酸化的FAK的表达情况,并确定FAK最大磷酸化时间点;以免疫沉淀和蛋白质印迹法检测FAK最大磷酸化时间点的P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平。结果:胃泌素引起FAK最大酪氨酸磷酸化作用时间点为12 h,胃泌素刺激12 h较0 h、胃泌素拮抗剂+胃泌素刺激12 h后P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平明显增加。结论:P190RhoGAP为FAK的下游信号分子,酪氨酸磷酸化的P190RhoGAP在胃泌素-CCK2R-FAK信号通路引起肿瘤细胞的侵袭、浸润、转移过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 胃泌素 缩胆囊素 结肠肿瘤 黏着斑激酶 P190rhogap
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RhoGAP结构域家族蛋白的研究进展 被引量:3
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作者 叶文雨 余文英 鲁国东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期2573-2580,共8页
真核生物中RhoGTP酶激活蛋白(RhoGTPase activating proteins,RhoGAPs)编码一大类具有RhoGAP活性的基因家族,作为分子开关,可以极大地提高Rho族蛋白内在的RhoGTPase活性。本综述主要就RhoGAP家族蛋白的结构、调控机制及其功能多样性进... 真核生物中RhoGTP酶激活蛋白(RhoGTPase activating proteins,RhoGAPs)编码一大类具有RhoGAP活性的基因家族,作为分子开关,可以极大地提高Rho族蛋白内在的RhoGTPase活性。本综述主要就RhoGAP家族蛋白的结构、调控机制及其功能多样性进行了简述,目的在于阐明RhoGAP与RhoGTP酶信号传导途径的内在联系,为深入研究RhoGAP蛋白的调控机理及其功能提供一定的参考和理论依据。 展开更多
关键词 RhoGTP酶蛋白 rhogap结构域 结构 调控机理 功能多样性
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基因表达分析稻瘟病菌中8个假定RhoGAP蛋白与几丁质合酶的关系 被引量:3
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作者 叶文雨 豆献英 +4 位作者 陈美莲 牛晓庆 杨雪 余文英 鲁国东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期2724-2729,共6页
通过分析稻瘟病菌Rho GAP家族基因与几丁质合酶家族基因的表达关系,研究该家族基因对细胞壁形成的影响。利用不同生物信息学软件对Rho GAP家族进行序列分析,运用RT-PCR技术获得了该家族基因的部分c DNA序列,通过实时荧光定量技术分析Rho... 通过分析稻瘟病菌Rho GAP家族基因与几丁质合酶家族基因的表达关系,研究该家族基因对细胞壁形成的影响。利用不同生物信息学软件对Rho GAP家族进行序列分析,运用RT-PCR技术获得了该家族基因的部分c DNA序列,通过实时荧光定量技术分析Rho GAP基因与几丁质合酶基因的表达关系。结果表明,稻瘟病菌数据库中8个Rho GAP基因均含有保守的GAP结构域,且为水溶性蛋白,蛋白分子量相对较大,系统进化分析结果显示,16个Rho GTP酶激活蛋白可分为两类;不同的几丁质合成酶基因在不同Rho GAP基因突变体中的表达量不同,总的趋势是上调的。说明Rho GAP基因家族蛋白可能参与了稻瘟病菌不同阶段细胞壁的合成,本结果为进一步研究Rho GAP家族基因参与多样性的代谢途径奠定了基础。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 rhogap 生物信息学 几丁质合酶 Real.time PCR
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结肠癌中p190RhoGAP表达与临床特征和预后相关性 被引量:1
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作者 吴红梅 李永民 +2 位作者 王正彩 胡成乙 张淑君 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2018年第2期124-128,共5页
目的探讨结肠癌组织中p190RhoGAP表达与患者临床资料的关系及其作为结肠癌预后标志物的意义。方法收集10例配对的结肠癌以及正常黏膜组织和74例结肠癌患者的蜡块组织,采用免疫组化以及实时荧光定量PCR的方法检测p190RhoGAP的mRNA以及蛋... 目的探讨结肠癌组织中p190RhoGAP表达与患者临床资料的关系及其作为结肠癌预后标志物的意义。方法收集10例配对的结肠癌以及正常黏膜组织和74例结肠癌患者的蜡块组织,采用免疫组化以及实时荧光定量PCR的方法检测p190RhoGAP的mRNA以及蛋白表达程度。回顾性收集74例结肠癌患者的临床资料,分析p190RhoGAP与临床资料及预后的关系。结果 p190RhoGAP在结肠癌组织的表达高于癌旁正常黏膜组织; p190RhoGAP与结肠癌分化程度、p T分期、p N分期以及AJCC分期具有显著的相关性(P <0. 05); p190RhoGAP高表达组与低表达组的总体生存率(OR)具有显著差异(47. 65±3. 50 vs 62. 16±2. 86,P=0. 008),患者5年生存率(60个月)分别是43. 5%和76. 9%。结论p190RhoGAP的异常表达与结肠癌密切相关,p190RhoGAP高表达的结肠癌患者预后差,p190RhoGAP可能成为结肠癌潜在的预后因子。 展开更多
关键词 p190rhogap 结肠癌 临床特征 预后
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腺病毒介导人FRNK基因对结肠癌细胞Colo320WT中p190RhoGAP磷酸化和RhoA活性的影响
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作者 曹俊 于皆平 +3 位作者 刘超红 陈新文 罗和生 于红刚 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期581-584,共4页
目的利用腺病毒载体表达人FRNK基因,体外观察其对胃泌素干预下的结肠癌细胞Colo320WT中p190RhoGAP磷酸化和RhoA活性的影响。方法2005年10月至2006年9月,武汉大学人民医院消化内科在中国科学院,武汉病毒所病毒学国家重点实验室,利用A... 目的利用腺病毒载体表达人FRNK基因,体外观察其对胃泌素干预下的结肠癌细胞Colo320WT中p190RhoGAP磷酸化和RhoA活性的影响。方法2005年10月至2006年9月,武汉大学人民医院消化内科在中国科学院,武汉病毒所病毒学国家重点实验室,利用AdEasyTM系统在大肠埃希菌内同源重组构建表达人FRNK基因的腺病毒载体pAdhFRNK。脂质体转染pCR3.1-GR质粒于结肠癌细胞Colo320中,G418抗生素筛选出稳定表达胆囊收缩素乏受体/胃泌素受体(CCK-2R)的阳性克隆,逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)鉴定。用10~8mol/L胃泌素干预Colo320WT细胞12h和pAdhFRNK体外感染Colo320WT细胞2d后,再用10—8moL/L的胃泌素干预细胞12h,然后用免疫沉淀方法检测磷酸化的p190RhoGAP的表达,pull—down测定RhoA的活性。结果在胃泌素干预12h后的磷酸化的p190RhoGAP的表达量明显增加,RhoA活性降低,而用pAdhFRNK感染后胃泌素干预的细胞中磷酸化p190RhoGAP表达又降低,RhoA活性却增加。结论hFRNK基因可明显阻断外源性胃泌素引起Colo320WT细胞中p190RhoGAP磷酸化的表达和RhoA的活性。 展开更多
关键词 腺病毒 基因治疗 结肠癌 p190rhogap RHOA
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玉米弯孢叶斑病菌RhoGAP基因家族的全基因组鉴定与生物信息学分析 被引量:2
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作者 王玉莹 侯巨梅 +3 位作者 赵丰舟 申永强 左豫虎 刘铜 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期44-49,共6页
RhoGAPs(GTPase activating proteins)通过与Rho GTP酶结合,促使GTP酶水解成Rho GDP无活状态,在生物体中调控着重要的生物学功能。在全基因组上对玉米弯孢叶斑病菌(C.lunata)中RhoGAP基因家族成员进行鉴定,对其序列特征分析。结果表明,... RhoGAPs(GTPase activating proteins)通过与Rho GTP酶结合,促使GTP酶水解成Rho GDP无活状态,在生物体中调控着重要的生物学功能。在全基因组上对玉米弯孢叶斑病菌(C.lunata)中RhoGAP基因家族成员进行鉴定,对其序列特征分析。结果表明,玉米弯孢叶斑病菌(C.lunata)有5个RhoGAP基因家族成员,分布在5不同的Scaffold上,其基因结构分析显示,外显子和内含子大小与位置均不一样,表现出复杂的基因结构。序列比对和系统进化分析发现,5个RhoGAP氨基酸序列与其他真菌来源的RhoGAP一样具有特征性保守序列区,与粗糙脉胞菌(N.crassa)和小麦黄斑叶斑病菌(P.tritici-repentis)的RhoGAP蛋白关系密切,其亲缘关系最近。 展开更多
关键词 玉米 rhogap 弯孢叶斑病菌 基因家族 基因结构
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Phylogenetic Analysis of RhoGAP Domain-Containing Proteins
8
作者 Marcelo M. Brando Karina L. Silva-Brando +1 位作者 Fernando F. Costa Sara T.O. Saad 《Genomics, Proteomics & Bioinformatics》 SCIE CAS CSCD 2006年第3期182-188,共7页
Proteins containing an Rho GTPase-activating protein (RhoGAP) domain work as molecular switches involved in the regulation of diverse cellular functions. The ability of these GTPases to regulate a wide number of cel... Proteins containing an Rho GTPase-activating protein (RhoGAP) domain work as molecular switches involved in the regulation of diverse cellular functions. The ability of these GTPases to regulate a wide number of cellular processes comes from their interactions with multiple effectors and inhibitors, including the RhoGAP family, which stimulates their intrinsic GTPase activity. Here, a phylogenetic approach was applied to study the evolutionary relationship among 59 RhoGAP domain-containing proteins. The sequences were aligned by their RhoGAP domains and the phylogenetic hypotheses were generated using Maximum Parsimony and Bayesian analyses. The character tracing of two traits, GTPase activity and presence of other domains, indicated a significant phylogenetic signal for both of them. 展开更多
关键词 Bayesian analysis character tracing PARSIMONY PHYLOGENOMICS protein domain rhogap
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Rho蛋白调控分子机理研究进展 被引量:9
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作者 王军 杨献光 +1 位作者 侯成千 梁卫红 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期101-104,共4页
Rho蛋白作为信号通路重要的开关分子,在所有的真核细胞中发挥着重要的生理功能,因而对Rho蛋白调控的分子机理研究就极为重要.从Rho蛋白的结构、功能、调节Rho蛋白鸟苷酸结合形式的蛋白以及Rho蛋白已知效应物等方面总结了Rho蛋白调控分... Rho蛋白作为信号通路重要的开关分子,在所有的真核细胞中发挥着重要的生理功能,因而对Rho蛋白调控的分子机理研究就极为重要.从Rho蛋白的结构、功能、调节Rho蛋白鸟苷酸结合形式的蛋白以及Rho蛋白已知效应物等方面总结了Rho蛋白调控分子机理的研究现状. 展开更多
关键词 RHO蛋白 RhoGEFs rhogaps RhoGDIs 下游效应物
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抑癌基因DLC-1作为非小细胞肺癌研究新靶点的进展
10
作者 翟玉洁 陈绍水 《滨州医学院学报》 2013年第5期366-368,371,共4页
肺癌是严重威胁人类健康且预后最差的恶性肿瘤之一,近年来由于肺癌危险因素的改变及人口老龄化等多重作用下,我国肺癌发病率及病死率呈持续增高趋势。据世界卫生组织(WHO)预测,到2025年,我国每年新增的肺癌病死例数将超过100万,... 肺癌是严重威胁人类健康且预后最差的恶性肿瘤之一,近年来由于肺癌危险因素的改变及人口老龄化等多重作用下,我国肺癌发病率及病死率呈持续增高趋势。据世界卫生组织(WHO)预测,到2025年,我国每年新增的肺癌病死例数将超过100万,肺癌将成为我国最常见的恶性肿瘤之一。 展开更多
关键词 DLC-1 rhogap SAM START 肺癌
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A RHOse by any other name:a comparative analysis of animal and plant Rho GTPases 被引量:7
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作者 Tore Brembu Per Winge +1 位作者 Atle Magnar Bones Zhenbiao Yang 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2006年第5期435-445,共11页
Rho GTPases are molecular switches that act as key regulators of a many cellular processes, including cell movement, morphogenesis, host defense, cell division and gene expression. Rho GTPases are found in all eukaryo... Rho GTPases are molecular switches that act as key regulators of a many cellular processes, including cell movement, morphogenesis, host defense, cell division and gene expression. Rho GTPases are found in all eukaryotic kingdoms. Plants lack clear homologs to conventional Rho GTPases found in yeast and animals; instead, they have over time developed a unique subfamily, ROPs, also known as RAC. The origin of ROP-like proteins appears to precede the appearance of land plants. This review aims to discuss the evolution of ROP/RAC and to compare plant ROP and animal Rho GTPases, focusing on similarities and differences in regulation of the GTPases and their downstream effectors. 展开更多
关键词 Rho GTPase rhogap RHOGEF RHOGDI CYTOSKELETON NADPH oxidase RIC
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稻瘟病菌中一个假定Rho GTP酶激活蛋白与Rho族蛋白的互作关系 被引量:1
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作者 叶文雨 陈四妙 +6 位作者 陈晓 林艺娟 汪洋 余文英 鲁国东 陈继圣 王宗华 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期719-724,共6页
Rho族蛋白是重要的分子开关,受GTP酶激活蛋白(GAP)调控。MGG_09303在稻瘟病菌中编码一个假定的Rho GTP酶激活蛋白。为探讨其与Rho族蛋白的互作关系,本文首先将基因MGG_09303与酵母中RhoGAPs蛋白序列进行多重比对,结果表明MGG_09303与酿... Rho族蛋白是重要的分子开关,受GTP酶激活蛋白(GAP)调控。MGG_09303在稻瘟病菌中编码一个假定的Rho GTP酶激活蛋白。为探讨其与Rho族蛋白的互作关系,本文首先将基因MGG_09303与酵母中RhoGAPs蛋白序列进行多重比对,结果表明MGG_09303与酿酒酵母中的RhoGAP蛋白的氨基酸同源性较高的有BEM3(29%)、BEM2(28%)、LRG1(27%),而相似性较高的有RGD2(53%)、LRG1(52%),还发现MGG_09303与酿酒酵母中的RhoGAP具有共同的保守的精氨酸。据此初步预测它有可能与Rho1和Rho3存在互作,本研究构建了pGADT7-MGG_09303捕获表达载体,利用酵母双杂交技术将捕获载体pGADT7-MGG_09303分别与Rho族蛋白持续激活态(CA)和失活态(DN)诱饵载体共转AH109酵母细胞,进行双杂交实验。结果表明,MGG_09303蛋白与Rho1和Rho3的持续激活态(CA)互作,而不与其负显性失活态(DN)互作,研究结果验证了预测的结果,为进一步研究RhoGAP蛋白对Rho族蛋白负调控的分子机制奠定了重要的基础。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 酿酒酵母 RHO GAP 序列比对 酵母双杂交 Rho族蛋白 相互作用
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DLC2在肿瘤中作用及机制的研究进展 被引量:2
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作者 李晓曼 吴媛媛 +2 位作者 王爱云 陈文星 陆茵 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期911-914,共4页
DLC2是新近发现的抑癌基因,在肝癌、乳腺癌、胶质瘤等多种肿瘤中不表达或低表达。DLC2可增强RhoA、Cdc42的GTP酶活性,负性调控Rho蛋白活性及其下游效应分子,并可靶向定位于黏着斑;DLC2还可通过其SAM结构域与蛋白相互作用,促进蛋白泛素... DLC2是新近发现的抑癌基因,在肝癌、乳腺癌、胶质瘤等多种肿瘤中不表达或低表达。DLC2可增强RhoA、Cdc42的GTP酶活性,负性调控Rho蛋白活性及其下游效应分子,并可靶向定位于黏着斑;DLC2还可通过其SAM结构域与蛋白相互作用,促进蛋白泛素化降解;近年来研究发现,DLC2可通过竞争性内源RNA机制与其他转录体相互调控。通过以上3种主要机制,DLC2抑制肿瘤细胞增殖,并促进肿瘤细胞凋亡,阻碍肿瘤细胞转移、侵袭及黏附,削弱肿瘤细胞的干性,增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。因此,上调DLC2的表达可作为潜在的抗肿瘤策略,用于协同化疗治疗肿瘤。 展开更多
关键词 DLC2 STARD13 肿瘤发生发展 抑癌基因 rhogap ceRNA
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