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Research on the strain gauge mounting scheme of track wheel force measurement system based on high-speed wheel/rail relationship test rig
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作者 Yuanwu Cai Bo Chen Chongyi Chang 《Railway Sciences》 2024年第4期503-513,共11页
Purpose-This paper aims to analyze the stress and strain distribution on the track wheel web surface and study the optimal strain gauge location for force measurement system of the track wheel.Design/methodology/appro... Purpose-This paper aims to analyze the stress and strain distribution on the track wheel web surface and study the optimal strain gauge location for force measurement system of the track wheel.Design/methodology/approach-Finite element method was employed to analyze the stress and strain distribution on the track wheel web surface under varying wheel-rail forces.Locations with minimal coupling interference between vertical and lateral forces were identified as suitable for strain gauge installation.Findings-The results show that due to the track wheel web’s unique curved shape and wheel-rail force loading mechanism,both tensile and compressive states exit on the surface of the web.When vertical force is applied,Mises stress and strain are relatively high near the inner radius of 710 mm and the outer radius of 1110mmof the web.Under lateral force,high Mises stress and strain are observed near the radius of 670mmon the inner and outer sides of the web.As the wheel-rail force application point shifts laterally toward the outer side,the Mises stress and strain near the inner radius of 710 mm of the web gradually decrease under vertical force while gradually increasing near the outer radius of 1110 mm of the web.Under lateral force,the Mises stress and strain on the surface of the web remain relatively unchanged regardless of the wheel-rail force application point.Based on the analysis of stress and strain on the surface of the web under different wheel-rail forces,the inner radius of 870 mm is recommended as the optimal mounting location of strain gauges for measuring vertical force,while the inner radius of 1143 mm is suitable for measuring lateral force.Originality/value-The research findings provide valuable insights for determining optimal strain gauge locations and designing an effective track wheel force measurement system. 展开更多
关键词 Track wheel High-speed wheel/rail relationship test rig Instrumented wheelset Strain gauge Finite element
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RIG-Ⅰ、USP5在卵巢上皮性癌组织中的表达水平及预后意义
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作者 齐曼 芦秋彤 +3 位作者 刘少卿 张娟 崔艳萍 刘咏梅 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第2期277-280,共4页
目的 探讨维甲酸诱导基因-Ⅰ(RIG-Ⅰ)、泛素特异性肽酶5(USP5)在卵巢上皮性癌组织中的表达水平及预后意义。方法 选取98例卵巢上皮性癌组织样本为病例组,同期98例正常卵巢组织为对照组。免疫组化法测定两组RIG-Ⅰ、USP5表达水平。单因... 目的 探讨维甲酸诱导基因-Ⅰ(RIG-Ⅰ)、泛素特异性肽酶5(USP5)在卵巢上皮性癌组织中的表达水平及预后意义。方法 选取98例卵巢上皮性癌组织样本为病例组,同期98例正常卵巢组织为对照组。免疫组化法测定两组RIG-Ⅰ、USP5表达水平。单因素及多因素Cox回归分析RIG-Ⅰ、USP5表达水平与卵巢上皮性癌患者临床预后的关系。结果 病例组RIG-Ⅰ、USP5表达阳性率均高于对照组(P<0.05)。卵巢上皮性癌患者RIG-Ⅰ、USP5表达与肿瘤最大径、TNM分期、肿瘤浸润、分化程度、淋巴结转移、复发率相关(P<0.05)。RIG-Ⅰ、USP5阳性的卵巢上皮性癌患者5年生存率均分别低于RIG-Ⅰ、USP5阴性的卵巢上皮性癌患者(P<0.05)。单因素分析显示:肿瘤最大径≥2 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、浸润深度≥1 cm、分化程度高、淋巴结转移、复发、RIG-Ⅰ阳性、USP5阳性的卵巢上皮性癌患者5年生存率分别低于肿瘤最大径<2 cm、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、浸润深度<1 cm/无浸润、分化程度低、无淋巴结转移、无复发、RIG-Ⅰ阴性、USP5阴性的卵巢上皮性癌患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示:TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、分化程度高、RIG-Ⅰ和USP5表达阳性均是影响卵巢上皮性癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 RIG-Ⅰ、USP5与卵巢上皮性癌患者临床病理特征相关;RIG-Ⅰ、USP5阳性表达是卵巢上皮性癌预后危险因素。 展开更多
关键词 维甲酸诱导基因Ⅰ 泛素特异性肽酶5 卵巢上皮性癌
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猪肠道组织RIG-I的表达及其在猪传染性胃肠炎病毒致病机制中作用的初步研究 被引量:4
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作者 王文哲 李亮 +2 位作者 何豪杰 薛美 冯力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期161-168,共8页
为探究天然免疫分子维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)在猪肠道组织中的表达情况,评价其在猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)致病机制中的作用。本研究经原核表达重组RIG-I蛋白(rRIG-1)并采用SDS-PAGE切胶纯化该蛋白,将其免疫大白兔制备兔RIG-I多克隆抗体... 为探究天然免疫分子维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)在猪肠道组织中的表达情况,评价其在猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)致病机制中的作用。本研究经原核表达重组RIG-I蛋白(rRIG-1)并采用SDS-PAGE切胶纯化该蛋白,将其免疫大白兔制备兔RIG-I多克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体效价。结果显示获得了效价可达1∶64000的兔RIG-I多克隆抗体。利用该抗体经western blot检测SPF猪各肠道组织中RIG-I的表达。结果显示,制备的多克隆抗体可与猪各肠道中的RIG-I反应,且RIG-I在SPF猪空肠中的表达量最高。利用该抗体经western blot检测TGEV感染的ST细胞及猪空肠中RIG-I的表达水平。结果显示,TGEV感染后ST细胞中RIG-I的表达水平极显著高于空白对照细胞(P<0.01);与正常SPF猪空肠相比,TGEV感染的SPF猪空肠组织中RIG-I蛋白的表达水平明显提高。表明TGEV感染后能够刺激细胞内源性及感染猪肠道组织中RIG-I蛋白的表达水平。将本研究构建的重组质粒pCAGGS-RIG-I-flag和RIG-I干扰RNA(siRIG-I)分别转染ST细胞,采用western blot鉴定RIG-I的过表达和敲低效果后,再利用TGEV感染,24 h后采用qPCR检测RIG-I对上述ST细胞中IFN-β转录水平的影响;收集细胞上清,采用TCID50方法测定病毒滴度。qPCR及病毒滴度的测定结果显示,与转染空载体的对照组相比,RIG-I过表达的ST细胞中IFN-β的转录水平极显著升高(P<0.001),且细胞上清中的病毒滴度下降约75%;与转染NCsiRNA的对照组相比,敲低RIG-I的ST细胞中IFN-β的转录水平极显著下降(P<0.001),且细胞上清中的病毒滴度升高约4.8倍。表明,TGEV感染细胞中的RIG-I能够促进细胞中IFN-β的转录,提高宿主细胞的抗病毒免疫反应,从而抑制病毒的复制。本研究结果证实RIG-I在介导TGEV诱导宿主细胞产生IFN的过程中发挥重要作用,该结果为深入探究TGEV的致病机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 维甲酸诱导基因I(rig-I) 多克隆抗体 猪传染性胃肠炎病毒 干扰素Β 致病机制
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ZNF205通过靶向RIG-I正调控RLR抗病毒信号通路
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作者 钟霓 王晨 +1 位作者 翁光秀 许亮国 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期708-713,共6页
目的探究ZNF205(zinc finger protein 205)对RIG-I(retinoic acid-inducible gene I)介导的RLR(RIG-I like receptors,RLRs)抗病毒信号通路的影响。方法采用免疫共沉淀、免疫印迹、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、双荧光素酶报告基因实验、... 目的探究ZNF205(zinc finger protein 205)对RIG-I(retinoic acid-inducible gene I)介导的RLR(RIG-I like receptors,RLRs)抗病毒信号通路的影响。方法采用免疫共沉淀、免疫印迹、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、双荧光素酶报告基因实验、实时荧光定量PCR、病毒空斑等实验探索ZNF205在RLRs信号通路中的作用。结果ZNF205与RIG-I相互作用。过表达ZNF205促进了SeV诱导的IRF3(interferon regulatory factor 3)的二聚化,也增强了RIG-I-N(aa1-284)介导或SeV诱导的IFN-β(interferon beta)启动子的活性,同时还增强了SeV诱导的IFN-β的转录。病毒空斑实验结果显示过表达ZNF205能够抑制病毒的复制。研究结果还表明,ZNF205促进RIG-I的泛素化修饰以及RIG-I的K63泛素化修饰。结论ZNF205在RLR抗病毒先天免疫信号通路中起正调控作用。 展开更多
关键词 ZNF205 rig-I 泛素化 RLR信号抗病毒信号通路
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Development of a Test Rig for Axial Strains Measurement in Automobile Wheel
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作者 Samuel Onoriode Igbudu David Abimbola Fadare 《Open Journal of Applied Sciences》 2023年第10期1764-1777,共14页
In automobile wheel application, a test rig is vital and used to simulate conditions of the wheel in service in order to affirm the safety and reliability of the wheel. The present work designed a test rig for measuri... In automobile wheel application, a test rig is vital and used to simulate conditions of the wheel in service in order to affirm the safety and reliability of the wheel. The present work designed a test rig for measuring axial strains in automobile wheel. The wheel used was a five-arm wheel (6JX14H2;ET 42) and Tyre (175 × 65 R 14). Experimental (EXP) test was carried out, with a radial load of 4750 N and inflation pressure of 0.3 MPa, to measure the axil strains which were converted to maximum principal strain values and, compared with data from Finite Element Analysis (FEA) using Creo-Element/Pro 5.0 at wheel’s contact angles of 90 degree (FEA 90 deg), 40 degree (FEA 40 deg) and 30.25 degree (FEA 30.25 deg), respectively. Results show that at the wheel’s point of contact with the ground, maximum principal strain values were highest at the inboard bead seat with a value of about 5.69 × 10<sup>-4</sup> mm/mm, followed by the values at the well of about 5.66 × 10<sup>-4</sup> mm/mm. The value at the outboard bead seat was least at about 2.22 × 10<sup>-4</sup> mm/mm, which was due to the presence of spikes at this location that tends to resist imposed radial loads. However, the highest mean maximum principal strain values at the locations of inboard, well and outboard, were about 2.11 × 10<sup>-4</sup> mm/mm, 3.78 × 10<sup>-4</sup> mm/mm and .99 × 10<sup>-4</sup> mm/mm, respectively. With the highest single value of about 5.69 × 10<sup>-4</sup> mm/mm, the inboard bead seat was the most strained location of the wheel. Overall results showed that all values of maximum principal strains were below the threshold value of about 1 × 10<sup>-2</sup> mm/mm. The values obtained for EXP and FEA could be said to be in close agreement when compared with the threshold value. With this in mind, the rig is recommended for use in related experimental procedures. 展开更多
关键词 Test rig STRAIN Contact Angle Radial Load Inflation Pressure
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Finite Element Analysis of Jumbo Rig Assembly for Tunneling
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作者 YAO Haiping 《International Journal of Plant Engineering and Management》 2023年第1期59-64,共6页
This paper describes the force acting the assembly of the jumbo rig for tunneling.The finite element analysis is used to calculate this machine structure on its different working states.
关键词 jumbo rig for tunneling fea STRESS DEFORMATION failure analysis
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Rig-I基因表达下降对成熟B细胞株的影响
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作者 柳子星 孙岳平 +1 位作者 马志敏 王铸钢 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期131-133,共3页
Rig-I是全反式维甲酸诱导NB4细胞分化过程的上调基因,可能与细胞分化有关。通过RNAi的方法,使一株B细胞株(1B4.B6.细胞株)的Rig-I下降,研究其下调后对该B细胞株的影响。结果表明Rig-I下调表达使1B4.B6.细胞株中的CD138单阳性细胞比例明... Rig-I是全反式维甲酸诱导NB4细胞分化过程的上调基因,可能与细胞分化有关。通过RNAi的方法,使一株B细胞株(1B4.B6.细胞株)的Rig-I下降,研究其下调后对该B细胞株的影响。结果表明Rig-I下调表达使1B4.B6.细胞株中的CD138单阳性细胞比例明显减少,B220单阳性和CD138+B220+双阳性细胞不同程度的升高,这可能与B细胞株分化成浆细胞有关,同时Rig-I下调使LPS刺激该细胞株产生IgG3的胚系转录本(germlinetranscript)的表达下调。提示Rig-I可能参与抗体类别转换。 展开更多
关键词 rig—i RNAI技术 Iγ3-Cγ3
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RIG-I信号转导途径在机体抗病毒中的作用 被引量:4
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作者 周晓娜 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期381-383,共3页
在真核生物体内,除了能够识别入侵机体的病毒RNA的TOLL样受体外,近年来发现了另一种能够识别病毒RNA的细胞质内受体——RIG-I。RIG-I能够识别病毒的RNA组分,并通过自身的CARD与下游信号分子MAVS的CARD相互作用来传递信号,激活细胞转录因... 在真核生物体内,除了能够识别入侵机体的病毒RNA的TOLL样受体外,近年来发现了另一种能够识别病毒RNA的细胞质内受体——RIG-I。RIG-I能够识别病毒的RNA组分,并通过自身的CARD与下游信号分子MAVS的CARD相互作用来传递信号,激活细胞转录因子IRF-3和NF-κB,使其进入细胞核内,诱导β干扰素的表达,从而启动固有免疫应答和调节随后的获得性免疫应答,增强机体抵抗病毒的能力。另外,近年来的研究还发现了两个与RIG-I在序列、功能上都有很大相似性的病毒RNA识别蛋白质:MDA5和LGP2。 展开更多
关键词 TOLL样受体 rig—i MAVS 固有免疫应答
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RIG-I样受体信号通路及其调控研究进展 被引量:22
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作者 丁云磊 孙英杰 +3 位作者 王晓旭 胡跃 费荣梅 丁铲 《中国动物传染病学报》 CAS 2014年第5期72-79,共8页
模式识别受体(pattern-recognition receptors,PRRs)中的RIG-I样受体(RIG-I like receptors,RLRs)是细胞质中一类RNA解旋酶,它们可以通过其RNA配体结合病原相关分子模式(pathogen associated molecular pattern,PAMP),识别非自身的病毒... 模式识别受体(pattern-recognition receptors,PRRs)中的RIG-I样受体(RIG-I like receptors,RLRs)是细胞质中一类RNA解旋酶,它们可以通过其RNA配体结合病原相关分子模式(pathogen associated molecular pattern,PAMP),识别非自身的病毒RNA。被感染的细胞中,这种相互作用可以通过触发RLRs以及下游信号分子的活化,最终导致I型干扰素的产生和炎性因子的产生,细胞做出抗病毒免疫应答。本文简单介绍了RLR信号通路的组成及其泛素化调控,总结了病毒逃避RLR通路信号转导的机制,最后阐述了NOD样受体(NOD-like receptors,NLRs)通路对RLR通路的影响。通过对RLR信号通路分子在抗病毒免疫调节中的作用了解,可以为控制病毒的感染和免疫调节提供一个新的思路。 展开更多
关键词 rig-I样受体 先天性免疫 细胞信号转导 病毒感染
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热休克蛋白27对水泡性口炎病毒体外增殖的调控作用
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作者 李殿玉 莫荣纤 +6 位作者 赵旭 高铭 李洪珊 白辉盛 马瑞仙 李向茸 冯若飞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2540-2549,共10页
本研究旨在探究热休克蛋白27(heat shock protein 27, HSP27)对水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus, VSV)体外增殖及VSV感染介导的维甲酸诱导基因I样受体家族(retinoid acid-inducible gene-I-like receptor, RLR)信号通路的作... 本研究旨在探究热休克蛋白27(heat shock protein 27, HSP27)对水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus, VSV)体外增殖及VSV感染介导的维甲酸诱导基因I样受体家族(retinoid acid-inducible gene-I-like receptor, RLR)信号通路的作用及机制。利用实时荧光定量PCR、免疫印迹、免疫共沉淀、病毒滴度测定及免疫荧光等方法,首先检测VSV感染对HSP27 mRNA和蛋白表达的影响,进而验证过表达和干扰HSP27对VSV增殖的影响,进一步探究HSP27对VSV感染介导的RLR信号通路的影响,最后分析HSP27与RLR信号通路靶分子的相互作用及共定位情况。结果表明,VSV感染可促使HSP27基因转录和蛋白表达上调,稳定过表达和瞬时过表达HSP27均能显著抑制VSV的体外增殖;干扰宿主细胞中HSP27表达可促进VSV增殖。HSP27能够增强VSV及维甲酸诱导基因I蛋白(retinoic acid-inducible gene I protein, RIG-I)介导的IFN-β的产生及RIG-I的蛋白表达,而且HSP27与RIG-I相互作用并共定位于细胞质中。本研究揭示了HSP27靶向RIG-I上调其表达,增强RLR信号通路的转导,进而负调控VSV体外增殖,为深入揭示宿主因子HSP27在病毒感染中的作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 热休克蛋白27 水泡性口炎病毒 RLR信号通路 维甲酸诱导基因I蛋白
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岗藿抗感汤治疗流感临床疗效观察及其对RIG-I、Th1/Th2影响 被引量:9
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作者 杨柳柳 刘小虹 +1 位作者 冯立志 张高 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2017年第10期83-86,共4页
目的:研究岗藿抗感汤对流感患者临床症状及调节免疫的影响。方法:本研究选择流感患者60例,随机分为岗藿抗感汤组30例、磷酸奥司他韦胶囊组(可威)30例。通过使用岗藿抗感汤治疗流行性感冒,并对患者进行感冒症状分级量化评分及测定患者外... 目的:研究岗藿抗感汤对流感患者临床症状及调节免疫的影响。方法:本研究选择流感患者60例,随机分为岗藿抗感汤组30例、磷酸奥司他韦胶囊组(可威)30例。通过使用岗藿抗感汤治疗流行性感冒,并对患者进行感冒症状分级量化评分及测定患者外周血RIG-I(IFN-α、IFN-β)、Th1/Th2(IFN-γ/IL-4)细胞比值表达,从而了解岗藿抗感汤在流行性感冒发生发展中如何参与调节免疫及对临床症状的影响,为指导临床治疗提供依据。结果:岗藿抗感汤组连续给药5 d,可缩短患者退热时间,改善其感冒症状,升高RIG-I(IFN-α、IFN-β)(P<0.05),也对增高的IFN-γ及IFN-γ/IL-4比值有降低作用(P<0.05)。结论:岗藿抗感汤具有抑制流感病毒Th1细胞亚群优势反应的作用,同时可激活RIG-I诱导I型干扰素的产生,抑制流感病毒的复制。 展开更多
关键词 岗藿抗感汤 流感 rig-I TH1/TH2
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RIG-I样受体与RNA病毒识别 被引量:13
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作者 秦成峰 秦鄂德 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1418-1423,共6页
RIG-I样受体(RIG-I likereceptors,RLR)是一类新发现的模式识别受体,能够识别细胞质中的病毒RNA,通过RLR级联信号诱导干扰素和促炎症细胞因子的产生,对抗病毒天然免疫的建立起着非常重要的作用。RLR信号通路既受宿主的严格调控,也能够... RIG-I样受体(RIG-I likereceptors,RLR)是一类新发现的模式识别受体,能够识别细胞质中的病毒RNA,通过RLR级联信号诱导干扰素和促炎症细胞因子的产生,对抗病毒天然免疫的建立起着非常重要的作用。RLR信号通路既受宿主的严格调控,也能够作为病毒逃避宿主干扰素反应的靶点。本文重点讨论了RLR及其在RNA病毒识别和抗病毒天然免疫中的作用。 展开更多
关键词 天然免疫 RNA病毒 干扰素 rig-I MDA5 RLR
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基于改进RIG算法的动态诊断策略生成 被引量:5
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作者 李登 万福 +1 位作者 尹亚兰 周红波 《电子测量与仪器学报》 CSCD 2014年第2期159-163,共5页
针对TEAMS生成的静态诊断策略无法满足现场诊断的需求,在研究rollout信息启发式(RIG)算法的基础上,提出了一种基于改进RIG算法的动态诊断策略生成方法。首先通过改进原有的RIG算法使之符合动态诊断的需要;然后根据现场诊断过程中出现的... 针对TEAMS生成的静态诊断策略无法满足现场诊断的需求,在研究rollout信息启发式(RIG)算法的基础上,提出了一种基于改进RIG算法的动态诊断策略生成方法。首先通过改进原有的RIG算法使之符合动态诊断的需要;然后根据现场诊断过程中出现的各种具体情况,获取局部D矩阵;在此基础上利用改进的RIG算法选择出下一步最佳的测试,最终实现了故障诊断策略的动态生成。仿真实例表明,若直接采用基于RIG算法的静态诊断策略,需要4种类型的测试;若采用基于改进RIG算法的动态诊断策略生成方法,只需选择一步测试即能诊断出系统故障。该方法能够实现维修人员的交互式诊断,有效地提高了故障诊断策略的实用性。 展开更多
关键词 诊断策略 D矩阵 rig算法 故障诊断
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猪RIG-I真核表达载体的构建及其抗口蹄疫病毒作用研究 被引量:2
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作者 王国庆 朱紫祥 +5 位作者 曹伟军 杨帆 毛箬青 李丹 刘磊 郑海学 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期600-607,共8页
为研究模式识别受体分子RIG-I是否具有抑制口蹄疫病毒(FMDV)复制的作用,本研究从猪的PK15细胞中提取RNA,通过分段扩增与融合PCR的方法,扩增猪的RIG-I的完整CDS序列,进一步构建猪RIG-I的真核表达质粒。通过Western blotting和间接免疫荧... 为研究模式识别受体分子RIG-I是否具有抑制口蹄疫病毒(FMDV)复制的作用,本研究从猪的PK15细胞中提取RNA,通过分段扩增与融合PCR的方法,扩增猪的RIG-I的完整CDS序列,进一步构建猪RIG-I的真核表达质粒。通过Western blotting和间接免疫荧光试验对构建的真核表达质粒进行表达验证,证明其成功表达,同时证明猪RIG-I蛋白定位于细胞的细胞质中。感染试验发现FMDV能够诱导细胞内RIG-I的转录上调,这表明两者间存在着重要联系。过表达试验证实RIG-I具有抑制FMDV复制的作用,而下调表达RIG-I可以促进FMDV的复制,这表明RIG-I在机体抗口蹄疫病毒感染过程中发挥着重要作用。本研究的开展,为进一步探索RIG-I抗口蹄疫病毒的分子机制提供了理论支持;为口蹄疫病毒感染过程中,天然免疫系统抗病毒机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 rig-I 天然免疫 抗病毒作用
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乌鬃鹅RIG-Ⅰ基因的克隆及初步分析 被引量:3
15
作者 吴宁昭 王彬 +5 位作者 左晓昕 陈卓 张阿秀 陈阳 徐琪 陈国宏 《中国家禽》 北大核心 2014年第19期9-13,共5页
维甲酸诱导基因蛋白Ⅰ(RIG-Ⅰ)是一类胞质内模式识别受体,在机体抗病毒天然免疫过程中发挥重要作用。本研究通过poly(I∶C)和5′ppp-dsRNA刺激原代鹅胚成纤维细胞,采用RT-PCR扩增获得了乌鬃鹅RIG-ⅠCDS,其全长2805bp,编码934个氨基酸。... 维甲酸诱导基因蛋白Ⅰ(RIG-Ⅰ)是一类胞质内模式识别受体,在机体抗病毒天然免疫过程中发挥重要作用。本研究通过poly(I∶C)和5′ppp-dsRNA刺激原代鹅胚成纤维细胞,采用RT-PCR扩增获得了乌鬃鹅RIG-ⅠCDS,其全长2805bp,编码934个氨基酸。氨基酸序列分析表明,该蛋白无跨膜区,无信号肽,位于细胞质和细胞核,故推测gRIG-Ⅰ蛋白为胞质内可溶性蛋白。实时荧光定量PCR结果显示,poly(I∶C)和5′ppp-dsRNA能显著上调gRIG-ⅠmRNA水平。研究结果为RIG-Ⅰ在鹅抗病毒天然免疫研究奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 维甲酸诱导基因蛋白Ⅰ 基因克隆 反转录聚合酶链反应
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NEK8调控Ⅰ型干扰素信号通路的初步研究
16
作者 潘利洁 孙悦 +2 位作者 俞馨 余莉 曹苑苑 《安徽大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第5期94-101,共8页
为探究RLR通路中激酶NEK8对Ⅰ型干扰素的调控作用及其具体作用机制,笔者利用双萤光素酶报告系统检测SeV刺激下NEK8对IFN-β-Luc.,IRF3介导的启动子ISRE-Luc.以及NF-κB-Luc.的调控作用;转染不同浓度的NEK8,分析其对IFN-β-Luc.激活的调... 为探究RLR通路中激酶NEK8对Ⅰ型干扰素的调控作用及其具体作用机制,笔者利用双萤光素酶报告系统检测SeV刺激下NEK8对IFN-β-Luc.,IRF3介导的启动子ISRE-Luc.以及NF-κB-Luc.的调控作用;转染不同浓度的NEK8,分析其对IFN-β-Luc.激活的调控是否是浓度依赖性的;检测NEK8对IL-6-Luc.和IRF-1-Luc.激活的调控作用来分析NEK8对IFN-β启动子调控的特异性;转染不同阶段的信号蛋白,分析NEK8在IFN-Ⅰ通路中发挥作用的具体位置;利用qRT-PCR技术分析NEK8对IFN-ⅠmRNA水平的调控作用及其特异性.结果显示:NEK8能够负调控RLR通路中IFN-β的启动子以及IRF3介导的启动子的激活,而对NF-κB启动子的激活无调控作用并发现其对IFN-β启动子的抑制作用是浓度依赖性的;NEK8对TNF-α诱导的IL-6启动子的激活以及IFN-γ诱导的IRF-1的激活均无调控作用表明其特异性负调控IFN-β-Luc.的激活;并发现其作用位点位于VISA和TBK1之间,NEK8特异性地负调控RLR通路中SeV或poly(I:C)刺激下IFN-β,CXCL10 mRNA的转录水平,而对IL-6 mRNA的转录水平无影响,并且其对TNF-α诱导的IL-6 mRNA以及IFN-γ诱导的IRF-1 mRNA水平无调控作用.该实验首次发现了在RNA病毒感染时,NEK8特异性地对IFN-β启动子的激活及其mRNA水平的负调控作用,并证明其发挥作用的位点在VISA和TBK1之间. 展开更多
关键词 Ⅰ型干扰素 NEK8 rig-I 天然免疫
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利用PiggyBac转座系统构建稳定表达鹅RIG-I的DF-1细胞系 被引量:4
17
作者 胡跃 孙英杰 +5 位作者 王晓旭 仇旭升 宋翠萍 谭磊 胡桂学 丁铲 《中国动物传染病学报》 CAS 2014年第3期53-60,共8页
维甲酸诱导基因-I(retinoic acid inducible gene-I,RIG-I)是最近几年发现的一种细胞内模式识别受体,能够特异性的识别并结合病毒RNA,进而发挥抗病毒效应。RIG-I在进化中相对保守,但已有报道和我们的前期研究显示:家禽中鸭和鹅体内均有R... 维甲酸诱导基因-I(retinoic acid inducible gene-I,RIG-I)是最近几年发现的一种细胞内模式识别受体,能够特异性的识别并结合病毒RNA,进而发挥抗病毒效应。RIG-I在进化中相对保守,但已有报道和我们的前期研究显示:家禽中鸭和鹅体内均有RIG-I受体,但鸡却缺乏RIG-I受体。为了研究这种天然缺失对鸡是否有不利影响,本研究利用PiggyBac转座系统将鹅源RIG-I转染入鸡胚成纤维细胞系DF-1,两次亚克隆后获得单个克隆,以荧光、RT-PCR及Western blot进行鉴定,最终获得稳定表达鹅RIG-I的DF-1细胞系,为进一步研究鸡的先天性免疫机制和鹅RIG-I的功能打下基础。 展开更多
关键词 鹅维甲酸诱导基因-I 鸡胚成纤维细胞系DF-1 PiggyBac转座系统
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平喘宁调节PI3K信号通路干预寒哮大鼠肺组织气道炎症机制
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作者 蔡旻 方向明 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2024年第5期19-24,共6页
目的探讨平喘宁基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)调控相关信号分子表达,对于卵清蛋白(OVA)致敏诱导的寒哮大鼠模型肺组织气道炎症的作用机制。方法将105只健康雄性SD大鼠随机分为7组,分别为正常组、模型组、平喘宁高剂量组、平喘宁中剂量组... 目的探讨平喘宁基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)调控相关信号分子表达,对于卵清蛋白(OVA)致敏诱导的寒哮大鼠模型肺组织气道炎症的作用机制。方法将105只健康雄性SD大鼠随机分为7组,分别为正常组、模型组、平喘宁高剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁低剂量组、桂龙咳喘宁组、地塞米松组,每组15只。在寒冷环境下,以OVA对除正常组之外的其他组大鼠进行致敏,以建立模型。造模成功后,每日予以正常组和模型组等体积0.9%氯化钠溶液,平喘宁高、中、低剂量组分别予以平喘宁汤剂14.578、7.289、3.645 g/(kg·d)灌胃给药,桂龙咳喘宁组、地塞米松组分别予以桂龙咳喘宁片溶于0.9%氯化钠溶液的药液0.405 g/(kg·d)、地塞米松片溶于0.9%氯化钠溶液的药液0.405 mg/(kg·d)灌胃给药。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠肺组织病理变化;酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-13、IL-25水平;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测NADPH氧化酶4(NOX4)mRNA、维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)mRNA、胶原蛋白VⅠ(Col6)mRNA的表达水平。在整个实验过程中,对大鼠一般行为学状况进行观察和记录。结果HE染色法可见相较于正常组,模型组大鼠肺组织的平滑肌增生,有明显炎性细胞浸润,管壁增厚;相较于模型组,各治疗组大鼠肺组织病理情况均有改善。ELISA法可见相较于正常组,模型组大鼠BALF中IL-13、IL-25表达上升(P<0.01);相较于模型组,平喘宁高、中、低剂量组的IL-13、IL-25表达差异均有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR法可见相较于正常组,模型组大鼠肺组织中NOX4、RIG-I、Col6 mRNA表达差异均有统计学意义(P<0.01);相较于模型组,各治疗组差异均有统计学意义(P<0.01)。大鼠一般行为学状况观察可见相较于正常组,模型组大鼠形体消瘦,皮毛枯槁,扎堆聚集,呼吸急促,打喷嚏,可闻及哮鸣声;相较于模型组,用药后各治疗组在呼吸频率、活动状态、哮鸣声响、皮毛情况等各方面均有改善。结论平喘宁通过调节PI3K信号通路中NOX4、RIG-I、Col6的表达减轻寒哮大鼠气道炎症。 展开更多
关键词 支气管哮喘 平喘宁 PI3K NOX4 rig-I Col6
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RLRs家族中RIG-I和MDA-5的研究进展 被引量:8
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作者 翟景波 吕昌龙 《微生物学免疫学进展》 2017年第1期54-59,共6页
非特异性固有免疫是预防病毒感染的第一道防线,Toll样受体(toll-like receptors,TLRs)和维甲酸诱导基因I样受体(RIG-I like receptors,RLRs)是感知病毒RNA的两个主要受体家族。RLRs为存在于胞浆中的RNA解旋酶家族,可识别在病毒感染或复... 非特异性固有免疫是预防病毒感染的第一道防线,Toll样受体(toll-like receptors,TLRs)和维甲酸诱导基因I样受体(RIG-I like receptors,RLRs)是感知病毒RNA的两个主要受体家族。RLRs为存在于胞浆中的RNA解旋酶家族,可识别在病毒感染或复制期间进入到胞浆内的单链或双链RNA。目前研究RLRs家族比较多的成员有维甲酸诱导型基因I(retinoic acid-inducible gene I,RIG-I)、黑色素瘤分化相关基因5(melanoma differentiation associated gene-5,MDA-5)及遗传学和生理学实验室蛋白2(laboratory of genetics and physiology 2,LGP2)。本文分别就RLRs家族中RIG-I和MDA-5结构、生物学作用及其信号传导中关键分子的研究进展作一概述。 展开更多
关键词 维甲酸诱导基因I样受体 维甲酸诱导基因I 黑色素瘤分化相关基因5 信号通路
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甘露消毒丹及其挥发油对流感病毒感染小鼠RIGⅠ/NF-κB信号通路的影响 被引量:5
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作者 刘光华 刘娟 +2 位作者 高畅 张聪聪 贾晓妍 《中国中西医结合儿科学》 2017年第6期461-466,共6页
目的观察甘露消毒丹及其挥发油对流感病毒感染小鼠血清中白细胞介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素α/β(IFN-α/β)含量及肺组织中非结构蛋白1(NS1)、维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-Ⅰ)mRNA、核因子κB(NF-κB)蛋白的影响,以探讨甘... 目的观察甘露消毒丹及其挥发油对流感病毒感染小鼠血清中白细胞介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素α/β(IFN-α/β)含量及肺组织中非结构蛋白1(NS1)、维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-Ⅰ)mRNA、核因子κB(NF-κB)蛋白的影响,以探讨甘露消毒丹及其挥发油抗病毒作用的分子机制。方法选择SPF级BALB/c小鼠36只,雌雄各半,随机分为6组,分别为正常组、模型组、灌胃组、滴鼻组、灌胃滴鼻合用组、奥司他韦组,每组6只。除正常组外,其余5组以流感病毒FM1-6-E2滴鼻造模。于造模后第7天,摘眼球放血处死小鼠,通过透射电子显微镜对肺组织进行检测以及图像分析,采用ELISA法测定血清中IL-4、TNF-α、IFN-α/β含量,qRT-PCR检测各组小鼠肺组织中NS1、RIG-ⅠmRNA的表达,Western blot方法测定各组小鼠肺组织NF-κB蛋白的表达。结果 (1)流感病毒感染后模型小鼠肺组织超微结构可见Ⅱ型细胞坏死、肺泡结构破坏,肺泡腔内纤毛增粗、脱落,形成肺部炎症;各治疗组均可改善肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的异常改变。(2)流感病毒感染小鼠后,血清中IL-4、TNF-α、IFN-α/β的含量及肺组织中的NS1、RIG-ⅠmRNA、NF-κB蛋白表达均高于正常组,模型组与正常组比较,差异显著;与模型组比较,灌胃组、滴鼻组、灌胃滴鼻合用组、奥司他韦组血清中IFN-α/β含量显著升高,IL-4、TNF-α含量及NS1 mRNA、RIG-ⅠmRNA、NF-κB蛋白表达明显下调(P<0.05),甘露消毒丹各治疗组不同剂型抗流感病毒作用差异有统计学意义(P<0.05),灌胃滴鼻合用组>灌胃组>滴鼻组。结论甘露消毒丹具有抗流感病毒感染的作用,通过抑制RIG-Ⅰ/NF-κB信号传导通路的活化,阻止炎症的病理反应,提高免疫因子含量,降低流感病毒引起的免疫炎性损伤。 展开更多
关键词 流感病毒感染 甘露消毒丹 挥发油 rig NFΚB 小鼠
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