一个麻疯树RING型锌指蛋白基因JcRFP1的克隆及表达

首次从麻疯树胚乳cDNA文库中克隆得到一个RING型锌指蛋白基因(GenBank登录号为JF920726),命名为JcRFP1。该cDNA长度为728bp,包含编码JcRFP1蛋白的完整开放阅读框(516bp)。JcRFP1基因在麻疯树各器官中均检测到表达且表达量依次为:叶>茎>花>果实>种子>根。将克隆到的JcRFP1基因的cDNA序列连接到表达载体pET32a(+)上,导入BL21(DE3)pLysS菌株,成功诱导表达相对分子质量为33.2kDa的可溶性融合蛋白。该融合蛋白免疫新西兰大白兔,得到效价为1:6500的抗血清。研究表明,JcRFP1蛋白具有体外泛素连接酶E3活性,在麻疯树体内可能参与油菜素甾醇信号转导途径。