用RISA法评估地下水细菌群落结构差异及变化

提出运用RISA法从细菌群落角度对垃圾填埋场地下水生态系统的空间异质性进行定量分析。RISA图谱的相似度聚类分析表明 :与随时间产生的变化相比 ,细菌群落在空间上的差异更大 ;同批取样不同位置和深度的地下水RISA图谱存在明显差异 ,整体上在 6 0 %～ 70 %相似度聚类。

RISA法对生物强化处理油脂废水的效应评估

目的：建立对投菌生物强化处理废水的效应评估方法。方法：在流化床生物反应器系统处理油脂废水过程中,投加高效油脂降解菌进行强化处理,采用RISA法对生物强化处理油脂废水的效应进行了评估。结果：投加强化菌后,载体表面的球形菌明显增加,丝状菌减少;油脂去除率提高了15%-21%,CODCr去除率提高了20%-23.5%;RISA分析表明,投加的强化菌5d后在系统中还能被检测到,但在第8d时,强化菌的特征谱带已检测不到。结论：投加的强化菌对系统原有菌群结构产生的影响很小;本实验数据可为生物强化技术应用于实际污水处理提供参考。

用RISA法评估补饲对枯草期放牧羊细菌群落结构的影响

为了揭示补饲不同精料对放牧羊瘤胃微生物多样性及瘤胃微生物群落结构的影响,为放牧羊的科学补饲提供基础资料,本研究以6只杜蒙杂交羔羊为研究对象,运用RISA法对补饲不同精料的放牧羊瘤胃微生物多样性及瘤胃微生物群落结构进行了分析。结果表明,放牧羊在补饲不同蛋白水平的精料后,瘤胃微生物多样性明显提高,体重显著增加(P<0.01)。放牧羊瘤胃微生物主要以硬壁菌门、拟杆菌门为主,Prevotella和Selenomonas ruminantium是瘤胃中分布数量最多的细菌,与瘤胃发酵密切相关。

RISA、DGGE和2D-PAGE技术对大豆根际土壤细菌多样性分析的比较

采用基于PCR扩增的核糖体间隔区分析(RISA)、变性梯度凝胶电泳(DGGE)和双向电泳(2D-PAGE)3种分子生态学技术对大豆根际土壤细菌多样性比对分析。结果表明:2D-PAGE技术得到的土壤细菌多样性(基因点)最丰富,其次为DGGE技术(基因片段),RISA技术(基因片段)最低。RISA技术得到的条带数最少,但结果稳定性较高,并且实验操作比较简单;DGGE技术得到的条带数较多,具有较高的精度,但误差来源也最多;2D-PAGE技术作为一种新颖的土壤微生物研究方法,可以很好地解决其他2种技术分辨率低的缺点,能够获得丰富的土壤细菌多样性信息,在土壤微生物生态学研究中发挥重要作用,但与前2种技术相比,其操作比较复杂,条件要求相对比较严格。尽管存在不足,2D-PAGE技术在土壤微生物生态学研究领域中已显示出潜在的优势。

绍兴黄酒麦曲中真菌多样性的研究

运用传统分离培养方法和RISA图谱分析方法,结合序列测定技术对绍兴黄酒麦曲中真菌的多样性进行了研究。通过纯培养的方式对绍兴黄酒麦曲进行分离,并运用ITS序列分析技术对获得的不同菌株进行了分类鉴定,结果显示在分离获得的16种丝状真菌中,伞枝犁头霉、米根霉、微小毛霉、米曲霉、烟曲霉是麦曲中的主要真菌。RISA图谱分析结果表明这一非培养方法可应用于麦曲中主要真菌的组成研究。此外,运用RISA图谱技术比较了位于不同区域工厂的麦曲真菌多样性,结果显示不同生产区域的麦曲中优势真菌的组成不同,证实周边地域环境是影响麦曲中真菌多样性的重要因素。

活性污泥基因组DNA快速提取新方法及其指纹分析

建立了从活性污泥中快速提取基因组DNA的新方法,过程包括粗提与精制两个步骤,简化了繁琐的提取程序,提高了提取效率.用该方法提取的基因组DNA做模板,进行扩增核糖体限制性酶切片断分析(ARDRA)及核糖体基因间区序列分析(R ISA),均获得了理想的多态性指纹图谱;采用两对特异性引物(鞘氨醇单胞菌属和氨加氧酶基因)对所提污泥基因组DNA进行扩增,均获得了正确的PCR产物.该方法提取的污泥基因组DNA不但适用于研究污泥系统中菌群多样性分析,而且还可以对特定基因进行跟踪监测.

绍兴黄酒麦曲中真菌的初步研究

对绍兴黄酒麦曲中的真菌组成和特性、以及制曲过程中的变化进行了初步研究。运用分离培养方法,共获得16种丝状真菌,分子鉴定结果显示,伞枝犁头霉、米根霉、微小毛霉、米曲霉、烟曲霉是麦曲中的主要真菌。运用RISA图谱法分析制曲过程中真菌的变化,并结合序列测定技术比较制曲始末的真菌种类,显示出种群结构发生了显著变动。对7株主要丝状真菌的产酶特性进行调查,结果显示,纯培养条件下只有曲霉属的真菌产酶,但在混合培养体系中,产酶种类或数量变化显著。

综合应用ITS及16S rDNA进行环境微生物生态研究

提出并介绍一种研究微生物生态的新方法。该方法将克隆测序和RISA图谱技术有机结合。其技术关键是 :PCR扩增的目标片段包含全长ITS和部分 1 6SrDNA片段 ,既可利用 1 6SrDNA进行系统发育分析 ,又可测定ITS片段大小并与RISA图谱进行比对定位。分析过程简单经济 ,易于操作 。

基因工程菌对偶氮染料脱色及生物强化作用

研究了基因工程菌Escherichia(E.)coliJM109(pGEX-AZR)对偶氮染料的脱色及生物强化能力.实验表明,含有10%E.coliJM109(pGEX-AZR)的强化体系对酸冲击的耐受能力没有提高,脱色率仅为80%;而对碱度及盐度的冲击表现出较强的耐受能力,脱色率超过90%.同时在AnSBRs中连续运行42 d,强化体系耐浓度冲击的能力和脱色率均高于对照体系.利用RISA测定微生物群落结构,E.coliJM109(pGEX-AZR)在强化体系中始终作为优势菌群存在并保持较高的代谢活性.

黄酒机械成型麦曲制曲过程中真菌动态变化的研究

采用传统分离培养和免培养的方法研究了机械化黄酒麦曲堆放成型过程中真菌群落的动态变化情况。研究结果显示,机械化黄酒麦曲堆放成型过程中演替存在的真菌大致分13个属,其中犁头霉属、曲霉属、毛霉属真菌存在于整个麦曲成型堆放过程中。在麦曲成型堆放的前期,麦曲中主要存在犁头霉属(Absidia corymbifera)、曲霉属(Aspergillus oryzae)、毛霉属(Rhizomucor Pusillus)、青霉属(Penicilliumaurantiogriseum)、毕赤酵母属(Pichia burtonii)等真菌。在麦曲成型堆放的中后期,除前期存在的真菌外,还存在裸胞壳属(Emericellanidulans)、散囊菌属(Eurotiumamstelodami)、青霉属(Penicillium chrysogenum)、棒孢酵母属(Clavispora lus-itaniae)、毕赤酵母属(Pichia anomala)、伊萨酵母属(Issatchenkia orientali)、平脐蠕孢属(Bipolaris spicifera)和复膜孢酵母属(Saccharomycopsis fibuligera)。反映出机械化黄酒麦曲在成型堆放过程中真菌多样性丰富,这些真菌微生物在麦曲品质和黄酒大罐酿造中均有重要的影响。

用指纹图谱评价环境样本DNA的提取效果

研究了DNA指纹图谱技术在评价环境样本DNA提取效果方面的应用。采用 3种DNA提取方法提取垃圾渗滤水和活性污泥中的微生物DNA ,并用ARDRA和RISA图谱加以评价。实验结果表明 。

加饭酒大罐发酵过程中真菌群落的动力学研究

采用分离培养法和基于核糖体RNA基因间隔序列的RISA图谱分析技术,研究了绍兴加饭黄酒大罐发酵过程中醪液内真菌群落的动力学变化及所含真菌群落情况。研究结果显示,发酵醪液中共涉及9属13种真菌。它们分别是犁头霉属(Absidiasp.),根毛霉属(Rhizomucor variabilis),曲霉属(Aspergillus oryzae,As-pergillus niger,Aspergillussydowii,Emericellanidulans),青霉属(Penicilliumcitrinum),伊萨酵母属(Issatch-enkia orientalis),毕赤氏酵母属(Pichia anomala,Pichia burtonii),酵母属(Saccharomyces cerevisia),红酵母属(Rhodotorula mucilaginosa),念珠菌属(Clavisporalusitaniae)。其中犁头霉、米曲霉属和异常毕赤氏酵母在整个发酵过程中均出现,既是发酵投料时的原始菌群,也是发酵醪液中的主要菌群。酿酒酵母和黏质红酵母在发酵前期含量较少,在中后期数量逐渐增多,并成为发酵醪液中的优势菌群。

转基因抗虫棉叶围细菌种群动态变化及其分子鉴定

【目的】研究转基因抗虫棉叶围细菌的种群动态变化,并鉴定主要的细菌种群。【方法】采用常规培养的方法与RISA法相结合,分析转基因抗虫棉花33B、SGK321和GK12、受体棉花33、石远321和泗棉3号的叶围细菌在整个生育期的种群动态变化,并对主要细菌种群的ITS序列进行克隆测序,与数据库的序列进行比对鉴定细菌。【结果】6个棉花品种的叶围细菌的数量和群落多样性指数随着时间的变化,同一棉花品种不同采样时间之间差异显著,而同一采样时间抗虫棉和对应的受体棉间的差异较小。用RISA法分析棉花叶围细菌群落结构,能够得到清晰的指纹图谱,图谱表明叶围细菌群落结构复杂,多样性丰富,聚类分析结果表明,叶围细菌群落变化与棉花品种无相关性。从棉花叶围分离了104类菌株,对14个主要菌株进行分子鉴定,14个菌株的ITS序列都被GenBank收录(登陆号为DQ447751-DQ447764)。【结论】叶围细菌的总数量及群落多样性指数在抗虫棉与对应的受体棉之间多数差异不显著。棉花叶围细菌主要涉及9个细菌属,占优势的为芽孢杆菌属(Bacillus)、假单孢菌属(Pseudomonas)。

固定化工程菌对偶氮染料脱色及强化作用

利用聚亚胺酯大孔泡沫吸附固定基因工程菌Escherichia coliJM109(pGEX-AZR),研究其对偶氮染料的脱色动力学及生物强化作用.实验表明,固定的E.coliJM109(pGEX-AZR)对酸性大红GR的脱色动力学符合Andrews方程,动力学常数为μmax,c、Kc、Kic分别为49.2 mg.(g.h)-17、10.43 mg.L-1和681.62 mg.L-1,R2为0.995.将固定的E.coliJM109(pGEX-AZR)按10%的比例投加到厌氧序批式活性污泥反应器中连续运行32 d,含有固定化工程菌的强化体系耐浓度冲击的能力和脱色率均高于对照体系,脱色率可以稳定在90%以上.利用RISA对其微生物群落结构进行分析,E.coliJM109(pGEX-AZR)及降解酸性大红GR的优势菌群可以在污泥体系中稳定存在.

扶桑花红色素的提取及性质研究

This article studies the extraction and the solvent and dominant characteristics of the Red Pigment in Hibisc. Also discussed is the influence of metal ion, light, heat, oxidizer and reducer on the Red Pigment in Hibisc.

含氟聚合物及其涂料

一种含氟涂料组合物及其涂饰件：JP2016141699[日本专利公开]／日本：ShinEtsuChemCo．，LtdfKatayama，Risa等）．-2016．08．08． 题述涂料组合物含有：（A）在1个链端上具有可水解基团硅烷，并经含有氟代氧化烯的聚合物或／和硅烷化合物的水解产物处理过的硅烷化合物，（B）在2个链端上具有可水解基团硅烷，并经含有氟代氧化烯的聚合物或，和硅烷化合物的水解产物处理过的硅烷化合物；

含氟聚合物及其涂料

201609001一种含氟有机硅化合物及其涂膜的固化方法：JP2016 20 407[日本专利公开]/日本：Shin-Etsu Chemical Co.,Ltd.（Katayama,Risa等）.-2016.02.04.-36页.-2014/143 604涉及了一种不用锡化合物来固化有机硅化合物的方法,所述有机硅化合物具有氟烷基氧化烯基团和可水解基团。本专利还涉及了一种具有优异防水性能的固化膜,其防水性能与采用锡化合物固化的固化膜的防水性能相当。