CCK-8法与Alamar blue法对RKO细胞株增殖活力测试条件的对比分析

目的以RKO细胞株为增殖活力测试的研究对象，比较CCK-8法与Alamarblue法在检测中波长、孵育时间、细胞密度等方面的差异性。方法取体外培养对数生长期的RKO细胞株，分别比较两者在不同检测波长（380、430、480、530、580、630nm）、不同孵育时间（1、2、3、4、5、6h）、不同细胞密度（2×10^4、5×10^3、1．25×10^3CUF·mL^-1）下所测的光密度值（OD值），并比较两者在相同条件下同-标本重复检测时的平衡性。结果ALamarblue法在不同细胞密度中的最佳检测波长皆为580nm，而CCK-8法的最佳检测波长会随着细胞密度的变化而有所改变；1—6h时，CCK-8法适合的孵育时间在1h以后，Alamarblue为2h以后，且CCK-8法的灵敏度、平衡性都强于Alamarblue法。结论CCK-8法在细胞增殖活力检测中的灵敏性、平衡性、快捷性等都略强于ALamarblue法。

γ-干扰素加强TRAIL抑制人大肠癌细胞株作用的研究

目的:探讨γ-干扰素(IFN-γ)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抑制人大肠癌细胞株作用的影响。方法:以大肠癌细胞株RKO为对象,采用MTT比色法和流式细胞术研究IFN-γ对TRAIL抑制RKO的影响。结果:IFN-γ组、TRAIL组和IFN-γ72h+TRAIL组的存活分数分别为99·28%、85·45%、52·60%。IFN-γ组、TRAIL组、IFN-γ24h+TRAIL组、IFN-γ48h+TRAIL组和IFN-γ72h+TRAIL组的凋亡率分别为1·51%、2·38%、4·97%、13·30%、21·00%。IFN-γ24h+TRAIL组的凋亡率高于IFN-γ组与TRAIL组的凋亡率之和(P<0·01)。随着IFN-γ预处理时间的延长,TRAIL引起RKO的凋亡率也明显上升(P<0·01)。结论:IFN-γ能有效加强TRAIL对RKO细胞株的凋亡诱导作用。

延龄草诱导人结肠癌RKO细胞凋亡的作用机制研究

目的:探讨延龄草诱导结肠癌RKO细胞凋亡的作用机制。方法:以人结肠癌RKO细胞株为模型,通过MTT实验检测延龄草不同提取部位对RKO细胞的细胞毒性;以流式细胞术及光比色法检测延龄草乙酸乙酯部位对RKO细胞线粒体膜电位及Caspase9和Caspase3活性的影响。结果:延龄草乙酸乙酯部位(EE-TM)对RKO细胞增殖抑制作用最显著(P<0.01),干预24、48及72 h后的IC50值依次为52.64、22.56及18.39μg/mL;EE-TM干预12 h后可以导致RKO细胞线粒体膜电位下降(P<0.01),干预24 h及48 h后可以导致RKO细胞内Caspase9及Caspase3的活性增强(P<0.01)。结论:延龄草具有体外抗结肠癌活性,作用机制可能是通过线粒体通路介导细胞走向凋亡。