人绒毛膜促性腺激素上调滋养层细胞整合素β3和骨桥蛋白表达促进胚胎体外着床

目的探讨人绒毛膜促性腺激素(hCG)影响胚胎体外着床的分子调控机制。方法选择人滋养层细胞株BeWo及人子宫内膜细胞株RL95-2为研究材料。将BeWo细胞与RL95-2细胞共培养,以制备体外胚胎着床模型。对该模型进行如下研究。①通过间接免疫荧光方法,观察整合素β3及其配体骨桥蛋白(OPN)在BeWo细胞的定位表达;②采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,分析不同含量hCG作用于BeWo细胞后,对BeWo细胞整合素β3及OPN的mRNA相对表达量影响;③通过BeWo球状体黏附实验和铺展实验,观察hCG作用于BeWo细胞后,对BeWo球状体在RL95-2单层细胞上黏附和植入的影响。采用单因素方差分析或t检验,对不同含量hCG作用于BeWo细胞后的BeWo细胞整合素β3及骨桥蛋白mRNA相对表达量,以及hCG处理前、后BeWo球状体黏附率及铺展倍数进行统计学比较。结果①整合素β3及OPN均在BeWo细胞的细胞膜表面表达。②1 000 IU/mL hCG作用于BeWo细胞后,整合素β3及OPN的mRNA相对表达量分别为(2.07±0.57)、(1.95±0.48),均高于10 IU/mL hCG作用于BeWo细胞后的(1.12±0.31)、-(8.44±0.18);1 000 IU/mL hCG作用于BeWo细胞后,整合素β3的mRNA相对表达量,高于100 IU/mL hCG作用于BeWo细胞后的(1.24±0.19),并且上述差异均有统计学意义(P=0.007、0.009、0.014)。③采用1 000 IU/mL hCG处理BeWo细胞后,在BeWo球状体+RL95-2单层细胞共培养0.5 h时的BeWo球状体黏附率为(89.51±6.47)%,显著高于无hCG处理的(50.24±7.73)%,并且差异有统计学意义(t=90.900、P<0.001)。④采用1 000 IU/mL hCG处理BeWo球状体+RL95-2单层细胞,共培养24 h时BeWo球状体铺展倍数为(2.28±0.52),高于无hCG处理的铺展倍数(1.93±0.36),并且差异有统计学意义(t=6.864、P=0.012)。结论 hCG可能通过上调滋养层细胞表面整合素β3及OPN的表达水平,促进胚胎体外着床。