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植物病毒编码RNA沉默抑制子的研究进展 被引量:5
1
作者 王献兵 张凌娣 +2 位作者 李大伟 韩成贵 于嘉林 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期31-38,共8页
RNA沉默是真核生物用来抵抗病毒入侵的一种普遍而又古老的防御机制,而病毒在进化过程中也相应地产生了一些与之抗衡的功能,其中编码沉默抑制子就是对抗RNA沉默的有效策略。它们分别能够在不同阶段,以不同的方式干扰来自于寄主的RNA沉默... RNA沉默是真核生物用来抵抗病毒入侵的一种普遍而又古老的防御机制,而病毒在进化过程中也相应地产生了一些与之抗衡的功能,其中编码沉默抑制子就是对抗RNA沉默的有效策略。它们分别能够在不同阶段,以不同的方式干扰来自于寄主的RNA沉默,从而有效地建立侵染。本文主要针对目前已经发现的由植物病毒编码RNA沉默抑制子的作用特征、鉴定方法以及作用副效应进行综述,并讨论了RNA沉默抑制子的研究及应用前景。 展开更多
关键词 rna沉默 抗病毒 抑制子 进化
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植物病毒抑制子抑制RNA沉默的机制及生物学应用 被引量:4
2
作者 牛颜冰 青玲 +2 位作者 王德富 姚敏 郭平毅 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第1期137-142,共6页
RNA沉默(RNA silencing)是真核生物细胞内保守的和序列特异的RNA降解系统。高等植物中病毒诱导的、以降解病毒为目标的RNA沉默是一种寄主适应性防御系统。为了对该系统进行防御,植物病毒已进化形成了在RNA沉默的不同阶段起作用,并最终... RNA沉默(RNA silencing)是真核生物细胞内保守的和序列特异的RNA降解系统。高等植物中病毒诱导的、以降解病毒为目标的RNA沉默是一种寄主适应性防御系统。为了对该系统进行防御,植物病毒已进化形成了在RNA沉默的不同阶段起作用,并最终战胜寄主沉默反应的病毒抑制蛋白。本文讨论了现今鉴定和初步分析抑制子的方法以及抑制子的作用模式;同时对植物沉默抑制子的生物学应用包括用抑制子解析RNA沉默途径、用抑制子增强外源蛋白表达水平以及抑制子引起发育缺陷等进行了讨论。 展开更多
关键词 rna沉默 病毒抑制子 生物学应用
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RNA沉默的病毒抑制子 被引量:4
3
作者 崔晓峰 周雪平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第3期210-216,共7页
RNA沉默是一种在真核生物体内普遍保守的、通过核酸序列特异性的相互作用来抑制基因表达的调控机制. RNA沉默的一种重要生物学效应是防御病毒的侵染,而针对寄主的这种防御机制,许多植物病毒已演化通过编码RNA沉默的抑制子来克服这种防... RNA沉默是一种在真核生物体内普遍保守的、通过核酸序列特异性的相互作用来抑制基因表达的调控机制. RNA沉默的一种重要生物学效应是防御病毒的侵染,而针对寄主的这种防御机制,许多植物病毒已演化通过编码RNA沉默的抑制子来克服这种防御反应. 目前,已从植物、动物和人类病毒中鉴定了20多种RNA沉默的抑制子,围绕抑制子的鉴定和作用机理研究已成为病毒学研究的一个热点. 对RNA沉默抑制子的发现、鉴定方法、作用机理及与病毒病症状形成的关系、动物病毒的沉默抑制子等方面的最新进展做了综述,并对沉默抑制子的应用和存在的问题进行了讨论. 展开更多
关键词 rna沉默 病毒 抑制子
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甘蔗线条花叶病毒RNA沉默抑制子的寄主互作蛋白鉴定 被引量:2
4
作者 冯小艳 王俊刚 +4 位作者 王文治 沈林波 赵婷婷 冯翠莲 张树珍 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2022年第6期1231-1239,共9页
甘蔗线条花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)是引起甘蔗花叶病的一种主要病原。SCSMV编码的P1蛋白是RNA沉默抑制子,在SCSMV抑制寄主的RNA沉默防御中发挥关键作用,但其作用机制尚未清楚。与寄主蛋白互作是RNA沉默抑制子发挥... 甘蔗线条花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)是引起甘蔗花叶病的一种主要病原。SCSMV编码的P1蛋白是RNA沉默抑制子,在SCSMV抑制寄主的RNA沉默防御中发挥关键作用,但其作用机制尚未清楚。与寄主蛋白互作是RNA沉默抑制子发挥其抑制作用的主要途径之一,因此鉴定与病毒RNA沉默抑制子互作的寄主蛋白是研究抑制子作用机制的一个重要方法。为探究SCSMVP1抑制寄主RNA沉默的机制,本研究首先将SCSMVP1基因连接到质粒pGBKT7上构建诱饵质粒pGBKT7-P1,然后对pGBKT7-P1进行毒性和自激活检测,最后以pGBKT7-P1为诱饵,采用酵母双杂交技术从甘蔗cDNA文库中筛选与P1互作的寄主蛋白。结果显示,成功构建pGBKT7-P1诱饵质粒。将pGBKT7-P1诱饵质粒转入Y2HGold酵母菌株后,酵母菌株在SD/-Trp平板及液体培养基中生长良好,表明pGBKT7-P1诱饵质粒对Y2HGold酵母菌株无毒性。含pGBKT7-P1诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Trp/X-α-Gal平板上长出白色菌落未变蓝,在SD/-Trp/X-α-Gal/AbA和SD/-Trp/-Leu/X-α-Gal/AbA平板上无菌落生长,表明pGBKT7-P1诱饵质粒无自激活活性。用pGBKT7-P1诱饵质粒对甘蔗cDNA文库进行筛选,经SD/-Trp/-Leu/X-α-Gal/AbA平板筛选1次及SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/X-α-Gal/AbA平板筛选3次后,获得42个阳性酵母克隆,提取阳性酵母质粒并导入大肠杆菌中扩大培养,经测序及blastx比对分析,获得13个可能与SCSMV P1互作的寄主甘蔗蛋白,分别是生长素应答蛋白IAA1、IAA15,转录因子NAC、GATA4、OFP4,真核翻译起始因子eIF5A,分子伴侣DnaJ,辅分子伴侣SBA1,重金属相关异戊二烯化植物蛋白HIPP35,mec-8和unc-52蛋白同系物抑制子SMU2,外膜孔蛋白OEP24,及2个未表征蛋白。基于这些蛋白的功能,推测P1可能通过与寄主蛋白互作来调控寄主防御反应相关基因的表达,和/或通过与寄主蛋白互作来影响寄主RNA沉默相关蛋白的合成、加工或转运,从而发挥其RNA沉默抑制子的功能。研究结果为后续深入解析P1抑制RNA沉默的作用机制奠定了重要基础。 展开更多
关键词 甘蔗线条花叶病毒 rna沉默抑制子 P1蛋白 互作蛋白
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病毒编码的RNA沉默抑制子的特征及其生物技术应用 被引量:3
5
作者 孙燕霞 刘红梅 《山东科学》 CAS 2008年第2期21-26,38,共7页
RNA沉默是一种依赖核酸序列特异性的RNA降解过程,是动物、植物抵抗病毒等外源核酸的一种保守防御机制。而针对寄主的这种防御机制,许多病毒演化出RNA沉默抑制子以克服这种防御反应。本文综述了几种动物、植物病毒抑制子的结构和作用方式... RNA沉默是一种依赖核酸序列特异性的RNA降解过程,是动物、植物抵抗病毒等外源核酸的一种保守防御机制。而针对寄主的这种防御机制,许多病毒演化出RNA沉默抑制子以克服这种防御反应。本文综述了几种动物、植物病毒抑制子的结构和作用方式,讨论了病毒抑制子之间的交叉抑制功能,病毒运动和沉默抑制子之间的关系,病毒RNA和亚病毒寄生物通过沉默抑制子而进行的自我保护原理,抑制子对于miRNA(microRNA)途径的影响以及病毒抑制子在生物技术方面的应用。 展开更多
关键词 rna沉默 病毒沉默抑制子 小分子干扰rna rna
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昆虫RNA沉默抗病毒机制研究进展 被引量:2
6
作者 吴萍 郭锡杰 周加春 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期927-932,共6页
RNA沉默是昆虫用来抵御病毒入侵的一种普遍而又进化保守的防御机制,而昆虫病毒也会相应地编码沉默抑制子来破坏宿主的防御功能。本文主要结合果蝇的相关研究成果对昆虫RNA沉默抗病毒机制、RNA沉默抑制子的作用特征及宿主与病毒的共进化... RNA沉默是昆虫用来抵御病毒入侵的一种普遍而又进化保守的防御机制,而昆虫病毒也会相应地编码沉默抑制子来破坏宿主的防御功能。本文主要结合果蝇的相关研究成果对昆虫RNA沉默抗病毒机制、RNA沉默抑制子的作用特征及宿主与病毒的共进化关系做一综述。研究表明,由小干扰RNA(small interfering RNAs,siRNA)介导的RNA干扰在果蝇抗病毒防御机制中发挥重要作用。果蝇中Dicer-2(Dcr-2),argonaute-2(AGO2)和双链RNA结合蛋白R2D2是siRNA干扰途径中的3个关键组分,这3个基因的缺失或突变会显著提高果蝇对RNA病毒的感受性。此外,果蝇中还鉴定了其他与RNA干扰密切相关的基因,如vasa intronic gene,aubergine,armitage,rm62和piwi,它们在抗病毒感染中同样发挥重要作用。果蝇病毒中已鉴定出3种RNA沉默病毒抑制子(viralsuppressors of RNAi,VSRs),分别为果蝇FHV病毒沉默抑制子FHV-B2、果蝇C病毒沉默抑制子DCV-1A及果蝇CrPV病毒沉默抑制子CrPV-1A。FHV-B2和DCV-1A通过与dsRNA或siRNA结合抑制RNA沉默,而CrPV-1A通过与AGO2结合阻止RISC的形成抑制RNA沉默。在漫长的进化过程中,病毒和宿主相互博弈,协同进化。昆虫抗病毒沉默途径中的关键组分通过保持持续和快速进化来对抗高度变异的VSRs。 展开更多
关键词 昆虫 rna干扰 抗病毒机制 rna沉默抑制子 共进化
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甘蔗黄叶病毒P0蛋白分子特性及其抑制RNA沉默活性 被引量:1
7
作者 林艺华 肖胜华 +4 位作者 刘营航 陈建生 傅华英 陈如凯 高三基 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期4627-4636,共10页
【目的】甘蔗黄叶病(yellow leaf,YL)是一种主要的甘蔗病毒病害,在全球多数甘蔗种植国家或地区普遍发生,已对甘蔗生产造成严重威胁。其病原为甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,SCYLV),属于黄症病毒科马铃薯卷叶病毒属成员。研... 【目的】甘蔗黄叶病(yellow leaf,YL)是一种主要的甘蔗病毒病害,在全球多数甘蔗种植国家或地区普遍发生,已对甘蔗生产造成严重威胁。其病原为甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,SCYLV),属于黄症病毒科马铃薯卷叶病毒属成员。研究SCYLV编码的沉默抑制子P0蛋白的分子特征、保守结构域及其在自然寄主甘蔗上抑制RNA沉默的功能,为下一步从RNA沉默水平解析SCYLV致病分子机理奠定基础。【方法】利用RT-PCR克隆技术获得SCYLV中国分离物CHN-FJ4编码的RNA沉默抑制子基因P0及其两个缺失突变体P0Δ2-15(N端缺失15个氨基酸)和P0Δ155-256(C端缺失102个氨基酸),然后定向克隆到单子叶植物表达载体p Ubi-nos(空载体)上,获得重组质粒。利用甘蔗嫩叶组织瞬时表达系统鉴定病毒RNA沉默抑制子技术,结合Image J软件定量分析P0及其两个缺失突变体抑制外源基因EYFP瞬时表达活性的变化。番茄丛矮病毒(Tomato bushy stunt virus,TBSV)编码的P19作为沉默抑制子阳性对照。【结果】P0核苷酸序列的遗传进化分析结果显示,所获得的SCYLV病毒分离物CHN-FJ4为BRA基因型,与其他BRA基因型分离物氨基酸序列一致性为96.1%—98.4%。利用MEME在线软件预测P0蛋白的保守结构域,结果表明P0蛋白含有3个显著的保守区。分别位于第1—60、76—125和161—210氨基酸残基。通过Datamonkey在线服务器(http://www.datamonkey.org)提供的5种运算方法分析P0蛋白氨基酸位点的选择压力,结果显示P0蛋白具有8个氨基酸正向选择位点。将含有P0及其缺失突变体的重组质粒连同含EYFP报告基因的p TEM12质粒采用基因枪轰击法分别导入甘蔗嫩叶组织细胞,轰击后48—120 h,P0和P19逐渐地提高EYFP荧光表达点数和荧光表达水平;在120 h,与p Ubi-nos空载体(不含沉默抑制子)对照组相比,P0和P19均显著地提高甘蔗嫩叶组织EYFP荧光表达点数和荧光表达水平,分别达1.6倍和4.0倍以上。P0与P19抑制RNA沉默活性水平没有显著差异(P>0.05)。P0蛋白N端缺失15个氨基酸(P0Δ2-15)和C端缺失102个氨基酸(P0Δ155-256)均丧失了沉默抑制子的功能,荧光表达与不含沉默抑制子对照组相当。【结论】在甘蔗嫩叶组织EYFP瞬时表达体系上,P0能够显著地提高外源基因EYFP表达水平。P0蛋白N端15个氨基酸和C端102个氨基酸含有显著的保守区域,是P0发挥沉默抑制子功能所必需的。 展开更多
关键词 甘蔗黄叶病毒 P0蛋白 rna沉默抑制子 黄色荧光蛋白
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7种RNA沉默抑制子对植物病毒载体表达系统表达水平的影响 被引量:1
8
作者 王盛 董洁 +3 位作者 曹慜 穆红珍 丁国平 张虹 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1536-1542,共7页
目的探索不同植物病毒RNA沉默抑制子对植物病毒载体表达系统重组蛋白表达水平的作用,为合理高效地利用这一新型的外源基因表达平台奠定基础。方法构建了7种不同的RNA沉默抑制子瞬时表达载体,以农杆菌渗滤法,与马铃薯X病毒表达载体PVXdt-... 目的探索不同植物病毒RNA沉默抑制子对植物病毒载体表达系统重组蛋白表达水平的作用,为合理高效地利用这一新型的外源基因表达平台奠定基础。方法构建了7种不同的RNA沉默抑制子瞬时表达载体,以农杆菌渗滤法,与马铃薯X病毒表达载体PVXdt-GFP共侵染寄主植物本明烟,通过对报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的荧光观察,并以Western blotting、ELISA和RT-qPCR等测定GFP在烟草中的表达情况,分析不同RNA沉默抑制子对植物中外源基因表达水平的作用和特点。结果 7种病毒RNA沉默抑制子对外源基因GFP在烟草中表达水平的作用效果和持续时间存在差异,其中,番茄丛矮病毒的P19蛋白的增效作用最好,作用时间也最长;非洲木薯花叶病毒的AC2蛋白和水稻黄斑驳病毒的P1蛋白无明显的增效作用。结论 RNA沉默抑制子可以通过抑制病毒诱导的RNA沉默来提高外源基因在植物中的表达水平和表达持续时间,但是不同的植物病毒载体表达系统需要通过筛选获得其最佳的共表达沉默抑制子"伴侣"。 展开更多
关键词 rna沉默抑制子 马铃薯X病毒 共表达 绿色荧光蛋白
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RNA沉默在植物生物逆境反应中的作用 被引量:4
9
作者 谢兆辉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期561-570,共10页
RNA沉默是真核生物共有的基因表达调节机制和防御机制。在植物RNA沉默中,一些小RNAs,如微小RNAs和小干扰RNAs,在植物防御病毒、细菌或食草动物的反应中具有重要作用。为了抑制宿主的RNA沉默系统,植物病毒或细菌进化出了在RNA沉默不同阶... RNA沉默是真核生物共有的基因表达调节机制和防御机制。在植物RNA沉默中,一些小RNAs,如微小RNAs和小干扰RNAs,在植物防御病毒、细菌或食草动物的反应中具有重要作用。为了抑制宿主的RNA沉默系统,植物病毒或细菌进化出了在RNA沉默不同阶段起作用的病毒沉默抑制子或细菌沉默抑制子,来克服寄主的RNA沉默反应。文章就植物RNA沉默、病毒沉默抑制子、细菌沉默抑制子及其相关防御反应的一些新进展做一概述。 展开更多
关键词 rna沉默 微小rna 小干扰rna 病毒沉默抑制子 细菌沉默抑制子
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植物病毒编码的RNA沉默抑制因子
10
作者 李春霞 于晓庆 +3 位作者 田延平 崔海涛 竺晓平 李向东 《山东科学》 CAS 2005年第2期15-21,共7页
RNA沉默广泛存在于真核生物中,是一种发生于RNA水平的基因表达调节机制。寄主植物利用RNA沉默防御病毒的入侵,而病毒编码抑制因子以抵御这种防卫反应,从而达到在植物体内扩增、形成侵染的目的。近几年越来越多的沉默抑制因子被鉴定出来... RNA沉默广泛存在于真核生物中,是一种发生于RNA水平的基因表达调节机制。寄主植物利用RNA沉默防御病毒的入侵,而病毒编码抑制因子以抵御这种防卫反应,从而达到在植物体内扩增、形成侵染的目的。近几年越来越多的沉默抑制因子被鉴定出来。本文就已鉴定出的沉默抑制因子的特点进行了系统介绍。 展开更多
关键词 rna沉默 抑制因子 转录后基因沉默 互作
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水稻条纹病毒安徽分离物NS3基因的克隆及其RNA沉默抑制子功能的初步鉴定
11
作者 邓竹根 丁菲 +2 位作者 贾琳 宋培培 江彤 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期636-641,共6页
采集安徽马鞍山水稻条纹叶枯病感病稻株,TRIzol法提取样本总RNA,设计特异性引物进行RT-PCR扩增,获得水稻条纹病毒(RSV)安徽分离物的RNA3部分片段,克隆并测序。序列分析表明,该片段全长874 nts,含有完整的NS3基因,NS3基因序列长度为636 n... 采集安徽马鞍山水稻条纹叶枯病感病稻株,TRIzol法提取样本总RNA,设计特异性引物进行RT-PCR扩增,获得水稻条纹病毒(RSV)安徽分离物的RNA3部分片段,克隆并测序。序列分析表明,该片段全长874 nts,含有完整的NS3基因,NS3基因序列长度为636 nts,编码211个氨基酸。序列比对发现,RSV安徽分离物NS3基因与来源于华东各省市RSV分离物NS3基因间的序列相似性高达97.6%~99.4%,而与RSV云南分离物NS3基因间的序列相似性相对较低,为93.4%~95.4%。构建RSV NS3基因系统关系树,发现RSV安徽分离物NS3基因与来源于华东各省市8个RSV分离物NS3基因聚成一个单独的分支,说明华东各省市各个RSV分离物亲缘关系最近。将RSV安徽分离物NS3基因插入植物表达载体pBIN438,构建重组植物表达载体pBIN-NS3并转化农杆菌。将含pBIN-NS3的农杆菌和含pBIN-GFP的农杆菌共浸润16c本氏烟叶片,6天后紫外灯下观察发现,共浸润区表现出强烈的绿色荧光,说明16c本氏烟GFP基因局部沉默被抑制,可以初步证明RSV安徽分离物编码的NS3蛋白是一个RNA沉默抑制子。 展开更多
关键词 水稻条纹病毒 NS3基因 克隆 序列分析 rna沉默抑制子
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假马鞭曲叶病毒和中国胜红蓟黄脉病毒C4蛋白是RNA沉默的抑制子 被引量:1
12
作者 熊庆 周雪平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期39-43,共5页
为了研究中国胜红蓟黄脉病毒(Ageratum yellow vein Chin virus,AYVCNV)和假马鞭曲叶病毒(Stachytarpheta leafcurl virus,StaLCV)C4蛋白的功能,利用烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)载体在本氏烟(Nicotianabenthamiana)中分别... 为了研究中国胜红蓟黄脉病毒(Ageratum yellow vein Chin virus,AYVCNV)和假马鞭曲叶病毒(Stachytarpheta leafcurl virus,StaLCV)C4蛋白的功能,利用烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)载体在本氏烟(Nicotianabenthamiana)中分别表达了这两种病毒的C4蛋白,结果发现它们均能在本氏烟中引起类似于病毒侵染的症状,推测AYVCNV和StaLCV的C4蛋白是病毒的致病因子;在RNA沉默的抑制试验中,AYVCNV和StaLCV的C4蛋白均能够在表达gfp基因的转基因本氏烟(16c)上抑制由gfp基因正义链引起的基因沉默的建立,证明它们都是RNA沉默的抑制子。 展开更多
关键词 双生病毒 中国胜红蓟黄脉病毒 假马鞭曲叶病毒 抑制子 rna沉默
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siRNA, miRNA and HIV: promises and challenges 被引量:8
13
作者 Man Lung YEUNG Yamina BENNASSER +1 位作者 Shu Yun LE Kuan Teh JEANG 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2005年第11期935-946,共12页
Small interfering RNA (siRNA) and microRNA (miRNA) are small RNAs of 18-25 nucleotides (nt) in length that play important roles in regulating gene expression. They are incorporated into an RNA-induced silencing comple... Small interfering RNA (siRNA) and microRNA (miRNA) are small RNAs of 18-25 nucleotides (nt) in length that play important roles in regulating gene expression. They are incorporated into an RNA-induced silencing complex (RISC) and serve as guides for silencing their corresponding target mRNAs based on complementary base-pairing. The promise of gene silencing has led many researchers to consider siRNA as an anti-viral tool. However, in long-term settings, many viruses appear to escape from this therapeutical strategy. An example of this may be seen in the case of human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) which is able to evade RNA silencing by either mutating the siRNA- targeted sequence or by encoding for a partial suppressor of RNAi (RNA interference). On the other hand, because miRNA targeting does not require absolute complementarity of base-pairing, mutational escape by viruses from miRNA- specified silencing may be more difficult to achieve. In this review, we discuss stratagems used by various viruses to avoid the cells’ antiviral si/mi-RNA defenses and notions of how viruses might control and regulate host cell genes by encoding viral miRNAs (vmiRNAs). 展开更多
关键词 small interfering rna MICROrna rna interference human immunodeficiency virus type-1 rna-induced silencing complex suppressor of sirna viral mirna
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Comparative Analysis of RNAi Suppression Activity of Proteins from Two Disparate Viruses
14
作者 Sudhanshu Sekhar Das Neeti Sanan-Mishra 《American Journal of Plant Sciences》 2014年第12期1789-1798,共10页
RNAi is an efficient surveillance machinery that plays a robust defensive role in shielding plant and animal hosts against viral infections. In counter-defense viruses encode suppressor proteins that have the ability ... RNAi is an efficient surveillance machinery that plays a robust defensive role in shielding plant and animal hosts against viral infections. In counter-defense viruses encode suppressor proteins that have the ability to restrict the RNAi machinery to ensure successful systemic invasion. The B2 protein of insect Flock House Virus (FHV-B2) and AC2 protein of Mungbean Yellow Mosaic India Virus (MYMIV-AC2) are two well-characterized suppressors of RNAi, capable of reversing reporter gene silencing. In this study, we compared the strength of the two suppressors by assaying for the degree of RNAi reversion and the duration of sustaining the reversal in planta. The suppression activity was observed by assaying for GFP fluorescence at 3 dpi, 7 dpi and 14 dpi. The phenotypic observations were corroborated with small RNA Northern Blotting and semi-quantitative RT-PCR. The results indicate that suppressor strength of FHVB2 is comparable to MYMIV-AC2, although they are encoded by virus infecting host from two different eukaryotic kingdoms. This study will provide new insights to dissect the conservation in the RNAi pathways during the host-virus interactions. 展开更多
关键词 MYMIV-AC2 FHVB2 AGROINFILTRATION rna silencing suppressor (rss) REVERSAL of GFP silencing Assay
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Suppressor of RNA silencing encoded by Rice gall dwarf virus genome segment 11 被引量:8
15
作者 LIU FuXiu ZHAO Qin +2 位作者 RUAN XiaoLei HE YunWei LI HuaPing 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2008年第3期362-369,共8页
Rice gall dwarf virus(RGDV)is an important rice pathogen in China and Southeast Asia.However,little is known about the molecular mechanisms of RGDV interactions with plant cells.Here,we have identi-fied an RGDV protei... Rice gall dwarf virus(RGDV)is an important rice pathogen in China and Southeast Asia.However,little is known about the molecular mechanisms of RGDV interactions with plant cells.Here,we have identi-fied an RGDV protein,Pns11,which acts as a suppressor of RNA silencing in coinfiltration assays with the reporter,green fluorescent protein(GFP)in transgenic Nicotiana benthamiana line 16c carrying GFP.Pns11 suppressed local and systemic silencing induced by sense RNA.The spread of mobile RNA si-lencing signals was blocked or inactivated by Pns11.Expression of Pns11 also enhanced Potato virus X pathogenicity in N.benthamiana.This suppressor could reduce,but not eliminate,siRNA in the local and systemic RNA silencing suppression assays,suggesting that Pns11 functions by interfering with initial stages of RNA silencing. 展开更多
关键词 水稻矮化病毒 rna噪声抑制 抑制物 基因片段
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三种葡萄病毒的RT-PCR检测和系统进化分析 被引量:12
16
作者 王建辉 刘建军 +3 位作者 陈克玲 李洪雯 何建 关斌 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期197-201,共5页
【目的】为了研究不同葡萄病毒病快速检测方法和四川分离株系统进化,【方法】比较3种葡萄总RNA提取方法,还优化了葡萄病毒病的RT-PCR检测方法。分别克隆了3种病毒四川分离株的部分基因组区域,并开展了系统进化分析。【结果】结果表明,... 【目的】为了研究不同葡萄病毒病快速检测方法和四川分离株系统进化,【方法】比较3种葡萄总RNA提取方法,还优化了葡萄病毒病的RT-PCR检测方法。分别克隆了3种病毒四川分离株的部分基因组区域,并开展了系统进化分析。【结果】结果表明,改进硅胶颗粒吸附法快速从葡萄枝条的韧皮组织中提取了总RNA,并以葡萄18SRNA为内参基因,RT-PCR分别成功扩增出3种病毒的目的片段。把16个地理起源的GLRaV-2分离株的外壳蛋白基因(Coat protein,CP)分成5个系统进化组。而7个地理起源的GVB分离株CP同源性为79.1%~98.7%。此外,5个GVA四川分离株分别位于系统进化树的4个聚类群。【结论】GLRaV-2、GVB和GVA不同地理起源的分离株在核酸水平上具有变异性,其中GVA四川分离株之间具有显著的遗传差异,可能包括4种株系。 展开更多
关键词 葡萄卷叶伴随2型病毒 葡萄B病毒 葡萄A病毒 病毒外壳蛋白基因 病毒沉默抑制子基因
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甘蔗转HC-Pro基因的研究 被引量:4
17
作者 郭莺 阮妙鸿 +3 位作者 吴杨 刘佳 杨川毓 张木清 《热带作物学报》 CSCD 2010年第6期965-971,共7页
通过基因枪(PDS-1000He)轰击法将构建好的多功能蛋白HC-Pro的植物表达载体pHCFL与带PMI筛选标记基因的pZMLR14植物表达载体共转化导入易感花叶病甘蔗品种福农95-1702的胚性愈伤组织中,转化的愈伤经甘露糖筛选后获得抗性转化甘蔗幼苗。经... 通过基因枪(PDS-1000He)轰击法将构建好的多功能蛋白HC-Pro的植物表达载体pHCFL与带PMI筛选标记基因的pZMLR14植物表达载体共转化导入易感花叶病甘蔗品种福农95-1702的胚性愈伤组织中,转化的愈伤经甘露糖筛选后获得抗性转化甘蔗幼苗。经PCR检测、氯酚红显色、RT-PCR检测和DNA点杂交分析获得转HC-Pro的转基因植株,转化率为0.8%(HC-Pro基因)、1.7%(PMI基因)和0.4%(HC-Pro基因+PMI基因)。花叶病毒接种实验结果显示,未转基因植株的发病率为75%,而转基因植株均系统性发病,推测由于HC-Pro的大量表达抑制了甘蔗体内自身的RNA沉默机制而使病情加重。其它农艺性状调查结果显示,转基因与未转基因植株之间不存在显著差异,表明转HC-Pro和PMI基因对甘蔗的生长或其他农艺性状没有负面影响。 展开更多
关键词 rna沉默 rna沉默抑制子 HC-PRO 共转化 PMI
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植物病毒适应性机制研究进展 被引量:2
18
作者 仵发静 刘雅婷 +4 位作者 李晶 郑元仙 陈雪娇 徐烨 智龙 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期30-34,共5页
植物病毒是一类专性寄生生物,其生存和繁衍依赖于宿主植物和传播介体。植物病毒通过适应性进化来对抗宿主的防御系统,响应环境的变化,确保病毒的顺利传播和扩大种群数量,其适应性机制的研究不仅有助于我们对病毒的变异和进化、病毒与宿... 植物病毒是一类专性寄生生物,其生存和繁衍依赖于宿主植物和传播介体。植物病毒通过适应性进化来对抗宿主的防御系统,响应环境的变化,确保病毒的顺利传播和扩大种群数量,其适应性机制的研究不仅有助于我们对病毒的变异和进化、病毒与宿主及传播介体间的互作有更深刻的理解,更重要的是为植物病毒病的防治提供了新的思路和途径。主要从RNA沉默抑制子、快速进化、病毒的传播3个方面,就近年来在植物病毒适应性机制研究领域的一些进展进行概述。 展开更多
关键词 rna沉默抑制子 快速进化 病毒传播 适应性机制
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植物抗病毒分子机制的研究进展 被引量:1
19
作者 孔君 杜智欣 +1 位作者 朱水芳 鲁洁 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期15-20,共6页
植物在进化过程中为微生物提供了丰富的物质环境,微生物的生存依赖于植物的生物合成和产生能量的能力。有近450种植物致病病毒,可导致一系列的疾病。但植物不是被动地面对病毒的攻击,而是进化了精细而有效的防御机制来抵抗、限制或损害... 植物在进化过程中为微生物提供了丰富的物质环境,微生物的生存依赖于植物的生物合成和产生能量的能力。有近450种植物致病病毒,可导致一系列的疾病。但植物不是被动地面对病毒的攻击,而是进化了精细而有效的防御机制来抵抗、限制或损害病毒的感染。植物抗病基因(R-gene)可以抵抗包括病毒在内的多种病原体。由特定病毒而引发的防御反应是先天固有的,而且研究人员已经鉴定了与这种防御反应相关的细胞学和生理学特性。作为抵抗外来核酸(包括病毒)的重要细胞防御途径,RNA沉默近来获得了显著性的研究进展。在植物中这些途径的协同作用有效地防御了病毒的感染。 展开更多
关键词 植物病毒 R基因 rna沉默 抑制子
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PIM-1基因沉默对前列腺癌细胞生长抑制作用的研究 被引量:2
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作者 张晓光 徐勇 +1 位作者 张志宏 杨阔 《天津医药》 CAS 北大核心 2012年第11期1089-1091,I0003,共4页
目的:探讨RNA干扰(RNAi)沉默PIM-1基因表达对前列腺癌细胞体外生长的影响。方法:将RNAi重组质粒(PPIM1-shRNA-3)经脂质体介导转染前列腺癌PC-3细胞,用G418筛选稳定转染、PIM-1基因沉默的PC-3细胞。用空质粒载体(pRNAT-U6.1/Neo)稳定转染... 目的:探讨RNA干扰(RNAi)沉默PIM-1基因表达对前列腺癌细胞体外生长的影响。方法:将RNAi重组质粒(PPIM1-shRNA-3)经脂质体介导转染前列腺癌PC-3细胞,用G418筛选稳定转染、PIM-1基因沉默的PC-3细胞。用空质粒载体(pRNAT-U6.1/Neo)稳定转染的PC-3细胞和正常培养的PC-3细胞作为对照,进行体外研究。利用细胞计数法分别检测3组PC-3细胞的增殖能力。利用流式细胞技术分别检测3组PC-3细胞的细胞周期及凋亡情况。结果:与两对照组PC-3细胞相比,PIM-1基因沉默组的PC-3细胞在培养48、72和96h的细胞计数显著减少(P<0.01),细胞周期中G1期细胞的比例显著升高,而S期细胞的比例显著降低(P<0.01),发生早期凋亡的细胞比例明显升高(P<0.01)。结论:PIM-1基因沉默可以使得PC-3细胞的细胞周期进程受阻,抑制细胞增殖,并诱发细胞凋亡。PIM-1可以作为前列腺癌基因治疗的有效靶点,具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 rna干扰 原癌基因蛋白质c—pim-1基因 肿瘤抑制 肿瘤抑制蛋白质类 基因沉默
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