Southern 和 Northern blot 是分析 DNA或 mRNA 结构的常用方法。转移后的 DNA 或RNA 滤膜先用变性鱼精 DNA,Denhardt’s,甲酰胺,SSC 等配成的溶液预杂交,然后在基本相同的条件下加入。<sup>32</sup>P 标记的特异 DNA 探针...Southern 和 Northern blot 是分析 DNA或 mRNA 结构的常用方法。转移后的 DNA 或RNA 滤膜先用变性鱼精 DNA,Denhardt’s,甲酰胺,SSC 等配成的溶液预杂交,然后在基本相同的条件下加入。<sup>32</sup>P 标记的特异 DNA 探针杂交。使用众多大分子试剂如变性鱼精DNA,Derhardt’s等的目的,是为了降低滤膜对<sup>32</sup>p 标记探针的非特异结合,从而减少放射自显影的本底。但这些试剂目前尚需进口,且用量可观。据我们实验室近二年来的统计,用于预杂交和杂交的溶液就有约10万毫升,需要用去大量的变性鱼精 DNA 和 Denhardt’s试剂,而且配制这些试剂比较费时。1984年 David A.Johnson（Gene Anal-ytical Technique,1984,1:3—8）介绍了使用脱脂干奶粉代替鱼精 DNA 和 Denhardt’s等作为预杂交和杂交试剂的方法。使用这一方法。展开更多
文摘Southern 和 Northern blot 是分析 DNA或 mRNA 结构的常用方法。转移后的 DNA 或RNA 滤膜先用变性鱼精 DNA,Denhardt’s,甲酰胺,SSC 等配成的溶液预杂交,然后在基本相同的条件下加入。<sup>32</sup>P 标记的特异 DNA 探针杂交。使用众多大分子试剂如变性鱼精DNA,Derhardt’s等的目的,是为了降低滤膜对<sup>32</sup>p 标记探针的非特异结合,从而减少放射自显影的本底。但这些试剂目前尚需进口,且用量可观。据我们实验室近二年来的统计,用于预杂交和杂交的溶液就有约10万毫升,需要用去大量的变性鱼精 DNA 和 Denhardt’s试剂,而且配制这些试剂比较费时。1984年 David A.Johnson（Gene Anal-ytical Technique,1984,1:3—8）介绍了使用脱脂干奶粉代替鱼精 DNA 和 Denhardt’s等作为预杂交和杂交试剂的方法。使用这一方法。
