丙肝患者血清HCV-RNA含量与肝功能及血常规指标的相关性

目的探讨丙肝患者血清HCV-RNA含量与肝功能和血常规指标的相关性,为丙肝患者早期诊断和治疗效果监测提供参考依据。方法选取丙肝患者651例,应用实时荧光定量PCR法检测血清HCV-RNA含量。根据血清HCVRNA含量分为六组,分析患者血清HCV-RNA含量与肝功能和血常规指标的关系。结果随着丙肝患者血清HCVRNA含量增加,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST),AST/ALT,谷氨酰基转移酶(GGT)和总胆红素(TBIL)均呈升高趋势,而清蛋白/球蛋白比值(A/G)呈下降趋势(ALT,AST,AST/ALT,GGT,TBIL和A/G的最低值与最高值分别是32.3±9.7 U/L与96.2±13.6 U/L,31.1±8.38 U/L与113.5±15.9 U/L,0.86±0.09与1.19±0.11,29.2±14.5 U/L与52.7±16.2 U/L,17.2±4.32μmol/L与26.0±5.58μmol/L,0.98±0.07与1.35±0.14),差异有统计学意义(F=457.1,656.4,149.1,40.18,46.56和146.98,均P<0.01)。血细胞计数结果显示,随着血清HCVRNA含量增加,白细胞(WBC)、中性粒细胞比值(NEUT%)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)和血小板(PLT)呈下降趋势而淋巴细胞比值(LY%)呈上升趋势[WBC,NEUT%,LY%,RBC,Hb和PLT的最低值与最高值分别是(4.30±0.22)×10~9/L与(6.02±0.27)×10~9/L,(48.13±3.56)%与(59.28±3.40)%,(31.05±3.41)%与(38.81±4.65)%,(3.73±1.70)×10^(12)/L与(4.65±1.88)×10^(12)/L,(122.01±5.58)g/L与(135.37±8.50)g/L,(102.65±16.87)×10~9/L与(148.21±14.40)×10~9/L],除RBC的差异无统计学意义(F=1.926,P>0.05),WBC,NEUT%,LY%,Hb和PLT的差异均具有统计学意义(F=349.0,132.145,43.65,38.91和52.21,均P<0.01)。结论丙肝患者肝功能和血细胞计数指标与血清HCV-RNA含量有关,联合检测血清HCV-RNA含量与肝功能和血细胞计数指标对丙型肝炎的诊断及疗效观察有指导意义。

小麦不同器官总RNA含量及提取方法的比较研究

采用4种方法分别对小麦幼叶、幼茎、幼根及乳熟期籽粒的总RNA进行了提取和分析.结果表明,4种方法所提取的总RNA均能满足一般的下游操作,其中TRIzol法提取的总RNA产量最高,用该法提取的小麦叶片总RNA产量为其他方法的2～4倍;天为时代试剂盒提取时间短,可在常温下操作;而醋酸钠/乙醇沉淀法具有提取步骤少、操作时间短、可用于大量样品提取且价格便宜等优点,适于小麦不同器官的总RNA提取;经紫外分光光度计检测,各样品总RNA的A260/A280均在1.88～2.09,表明所提取的总RNA中没有蛋白质及其他有机溶剂的污染,且A260/A230在1.89～2.41,表明盐类小分子的污染也较少,所提取的总RNA质量较高.除了细胞质rRNA外,小麦中还存在叶绿体rRNA,且叶绿体rRNA占总rRNA的比例较高,在甲醛变性琼脂糖凝胶电泳时,幼叶、幼茎比幼根明显多出2条带.

复合酶制剂对樱桃谷肉仔鸭小肠黏膜的形态及DNA、RNA含量的影响

试验选用180只体重为(59.46±0.09)g的1日龄樱桃谷肉仔鸭,随机分为4组,每组3个重复(栏),每栏15只鸭,分别饲喂玉米-豆粕型、稻谷-玉米-豆粕型和稻谷-玉米-豆粕型日粮+500mg/kg或1000mg/kg复合酶制剂日粮。在试验的第7和14天,每重复选取体重相近的5只肉仔鸭进行屠宰,在十二指肠远端、空肠中端和回肠中端分别截取5cm和10cm的两段相邻肠段,观测了小肠绒毛高度、隐窝深度、绒毛宽度,并测定了黏膜DNA和RNA含量。结果表明,在1～14d肉仔鸭稻谷型日粮中添加复合酶制剂可使十二指肠的绒毛高度显著增加,而对小肠黏膜DNA和RNA的含量无显著性影响;在8～14d,添加1000mg/kg复合酶制剂可显著增加空肠和回肠的绒毛高度。

同步化培养后莱茵衣藻生物量和总RNA含量的变化

为了探索莱茵衣藻经光 暗同步化培养后的细胞生长和总RNA的变化规律。本研究检测了 16h光 8h暗同步化培养后莱茵衣藻的生物量和总RNA含量的变化规律。结果 ,在同步化培养结束后的前 2 8h ,莱茵衣藻的生物量呈现有节律的阶梯增长 ;在同步化培养结束后的 2 8～ 4 8h ,这种阶梯式增长方式逐步消失。在同步化培养结束后的前 2 4h,总RNA含量呈现有节律的峰—谷—峰变化 ;在同步化培养结束后的 2 4～ 4 8h ,这种变化幅度逐步减小 ,节律周期也逐步缩短。对比同步化培养后莱茵衣藻生物量和总RNA含量的变化可以得出 ,同步化培养后莱茵衣藻的同步化节律仍然可以维持一定时间 ;但随着连续光培养时间的延长 ,这种节律逐步消失。通过测定生物量和总RNA含量的变化可以跟踪同步化培养后莱茵衣藻的同步化变化。

低温对中缅树鼠句肝脏、BAT总RNA含量的影响

肝脏和 BAT是小型哺乳动物体内重要的产热器官。中缅树鼠句肝脏、BAT重量及肝脏和 BAT总 RNA含量在冷驯化过程中出现先降低再增加的趋势。冷驯化 4 h～ 7d肝脏总 RNA含量与对照组相比 ,变化均不显著 ,但冷驯化 1 4 d时显著上升 ;BAT总 RNA含量从 1 h到 8h有下降趋势 ,从 2 4 h开始显著上升并持续至 1 4 d。在冷驯化过程中 ,中缅树鼠句肝脏 RNA含量较 BAT的增加快 ,但 BAT RNA含量的增幅较肝脏大。表明中缅树鼠句肝脏对急性冷暴露的反应要比 BAT快 ,但其 BAT的产热能力强于肝脏。文章的实验结果表明 ,低温能够诱导中缅树鼠句 BAT和肝脏重量和总 RNA含量增加 ,从而使其适应性产热增加 ,能够更好地适应其生存环境。

丙型肝炎病人在治疗过程中HCV-RNA含量、血清抗HCV抗体及其生化指标的变化

目的了解丙型肝炎病人在治疗过程中HCV—RNA含量与血清ALT、白蛋白、胆红素、肝纤维化指标等生化指标变化的相关性。方法用AB1700荧光定量仪检测HCV—RNA，AU2700全自动生化仪检测各种生化指标，Biokit-Elx800酶标仪检测免疫学指标，肝纤维化指标由MP280化学发光免疫分析仪检测。结果HCV—RNA阳性的样本血清血清谷丙转氨酶、血清总胆红素、甲胎蛋白（AFP）、肝纤维化指标等结果异常率明显高HCVRNA阴性样本，HCV-RNA含量的高低与患者ALT等生化指标水平水平无正相关。结论选用HCVRNA含量与抗-HCV同时检测可以提高临床对丙型肝炎的诊断，然后再根据具体情况适当增加相对特异的实验项目，避免滥检查，减少患者的痛苦和经济负担。

细胞RNA、DNA含量与原发性肝细胞癌相关性研究

目的 探讨原发性肝细胞癌RNA，DNA定量测定的临床意义。方法 应用流式细胞分析技术。对64例原发性肝细胞癌（PHC）RNA，DNA含量进行定量分析。并对病人进行1-5.5年的随访。结果 RNA指标和DNA指标对PHC的临床病理诊断符合率分别为93.7%和75.0%，RNA指标更敏感，双指标联合应用与临床病理诊断符合率为96.8%；DNA倍体与年龄，HCV感染密切相关（P<0.05)。与性别，AFP水平，HBsAg及瘤体大小无关；DI随组织学分级的增高而增加（P<0.05)。RNA和DNA含量与预后密切相关（P<0.01-0.05)。结论 RNA，DNA含量可作为PHC诊断及判断预后的理想指标，RNA及DNA双指标同时应用优于任一单项指标。

低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α蛋白和血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的:探讨低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的影响。方法:选用健康雄性SD大鼠72只,随机分为9组。采用递增负荷跑台训练及低氧、超低氧两种不同程度的递增低氧刺激,在运动中和运动后给予低氧处理。应用免疫组织化学、原位杂交、计算机显微图像分析等方法,检测HIF-1α、VEGFmRNA在骨骼肌组织中的定位及含量。采用相关分析方法,分析低氧训练骨骼肌HIF-1α蛋白表达对骨骼肌VEGF转录的促进作用。结果与结论:低氧和运动训练可增加骨骼肌组织HIF-1α蛋白和VEGFmRNA含量,低氧训练骨骼肌组织HIF-1α蛋白表达的增加对VEGF基因转录具有促进作用。

丙肝患者在治疗过程中血清RNA与抗HCV定量检测及其生化指标的相关性研究

目的比较不同实验诊断方法在丙型肝炎(丙肝)检测中的应用价值,了解丙型肝炎病人在治疗过程中HCV-RNA含量与血清ALT、前白蛋白、胆红素等生化指标变化的相关性。并探讨HCV RNA定量与ALT、PA、TBIL指标之间的关系。方法对57例丙型肝炎分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、增强化学发光法(CIA)和荧光定量聚合酶链反应(RFQ-RT-PCR)进行检测,应用AU2700型自动生化仪及其生化检测试剂检测全部标本ALT、PA、TBIL指标。结果ELISA、CIA及PCR方法检测样本丙肝阳性率分别为77.2%、78.9%和84.2%;三组χ2检验没有统计学意义,HCVRNA含量呈阳性的样本中,ALT异常率与HCVRNA含量间呈正相关P<0.01,而ALT数值的变化与HCV RNA含量并无相关性(P>0.05)。PA在治疗前后升高差异显著(P<0.05),可与HCVRNA、ALT联合监测丙肝治疗过程中肝功变化。结论 ELISA诊断试剂盒较CIA法检测丙肝抗体同样具有较高的灵敏度和准确性,在临床诊断中联合PCR检测HCVRNA能提高HCV感染诊断的阳性率;HCVRNA含量反映了病毒复制的活跃程度和患者的病程变化,并且在丙肝治疗进程中能与ALT、PA联合监测疗效。

不同强度的耐力运动对糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4 mRNA表达的影响

目的:探讨不同强度的耐力运动对糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4 mRNA表达的影响。方法:雄性SD大鼠,其中36只大鼠经尾静脉注射链脲霉素,建立糖尿病模型。然后随机分为低强度运动组(EL)、高强度运动组(EH)、低强度运动加胰岛素治疗组(LI)、高强度运动加胰岛素治疗组(HI)、胰岛素治疗非运动组(DI)和非胰岛素治疗非运动组(DM)。6只SD大鼠为非运动正常血糖组(CN)。耐力训练采用活动平板,胰岛素采用皮下注射,共8周。运用RT-PCR法测定骨骼肌GLUT4 mRNA。结果:DM组骨骼肌GLUT4 mRNA表达水平显著低于其它各组(P<0.05)。LI组骨骼肌GLUT4 mRNA表达水平明显增高接近CN组,并且显著高于DI组。DI组GLUT4 mRNA含量与EL、EH、HI各组相当,差异无显著性意义。结论:运动可以促进GLUT4m RNA的表达,而运动强度对GLUT4 mRNA表达量无显著影响;低强度运动加胰岛素所具有最佳的GLUT4 mRNA表达水平是其它单独干预措施所无法替代的。

人肝癌组织中APRIL及其受体mRNA水平的定量测定

[摘要]目的：采用实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ—PCR）技术分析肝癌组织中增殖诱导配体（APRIL）及其受体mRNA的表达水平。方法：在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针，实时检测PCR产物的荧光强度。根据标准品建立的标准曲线。由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA准确含量，并以靶基因和内参B2MmRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。

丙型肝炎病毒IgG抗体阳性患者血清抗HCV IgM、ALT及HCV RNA的对比分析

目的:探讨丙型肝炎(H C V)IgG阳性患者的血清抗-H C V IgM、丙氨酸转移酶(A LT)水平与H C V R N A之间的关系。方法:通过第三代E IA试剂盒检测抗-H C V IgG、抗-H C V IgM,全自动生化分析仪检测丙型肝炎患者A LT水平,荧光定量逆转录聚合酶链反应(R T-PC R)方法检测H C V R N A,并进行比较。结果:在丙型肝炎IgG阳性患者中,抗-H C V IgM阳性率为8.3%,H C V R N A阳性率为41.7%。H C V R N A的检出在A LT异常情况下较正常明显高(P<0.05),但A LT水平与H C V R N A含量无线性相关性(r=0.346,P>0.05)。结论:抗-H C V IgM不能反映病毒复制,A LT异常情况下H C V R N A检出率高,但A LT水平与H C V R N A含量无线性相关性,H C V R N A仍是反映H C V复制的可靠指标。

高压静电场胁迫对甘草生长过程中RNA的影响

为探究高压静电场对甘草生长过程中RNA含量的影响,本试验以甘草幼叶、嫩茎和种子为研究材料,依次采用十二烷基苯磺酸钠(SDS)法、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、异硫氰酸胍(Trizol)法提取甘草幼叶、嫩茎、种子的RNA,并进行比较分析。并通过紫外分光光度法,分析检测经不同强度高压静电场(0、12、15、18 kV)处理之后生长过程中甘草不同组织RNA含量。结果表明,3种方法均能从甘草中提取出RNA。SDS法是适用于甘草组织RNA提取的最佳方法。经不同强度高压静电场处理,甘草RNA含量增加,降解含量降低。高压静电场影响最明显的是处理电场强度为18 kV时,甘草生长9 d时,RNA含量最高。本研究初步探究了高压静电场对甘草生长过程中RNA含量的影响,为甘草RNA的研究和高压静电场与分子生物学的研究提供了基础参考。

慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞HCV RNA检测及其与机体免疫功能的相关性研究

目的观察慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)HCVRNA含量及其对T淋巴细胞亚群的影响,以探讨HCV感染者PBMC中HCVRNA水平及其与机体免疫功能的关系。方法采用荧光定量PCR(FQPCR)技术对128例丙型肝炎患者血清、外周血单个核细胞的HCVRNA含量进行了检测,同时检测CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+。结果PBMC内HCVRNA阳性组与HCVRNA阴性组比较,前者CD3+、CD4+水平降低、CD8+水平增高,CD4+/CD8+比值下降大于后者,差异有显著性(P<0.05)。结论丙型肝炎病毒侵染PBMC后可加重患者的细胞免疫功能紊乱。

几个甘蓝型油菜雄性不育系花药败育过程中核糖核酸酶的变化

以5种不同类型甘蓝型油菜雄性不育系为材料,以保持系为对照,对其花药败育过程进行了研究,发现其败育过程中核糖核酸酶活力及游离尿苷酸(UMP)含量显著升高,而RNA及可溶性蛋白质含量显著下降。不育系雄蕊的核糖核酸酶活力与RNA含量呈负直线相关,相关系数为-0.9796**。认为核糖核酸酶活力异常增强与甘蓝型油菜雄性不育有密切关系。

高压均质与酶法破碎酵母细胞壁的工艺条件研究

采用高压均质与蛋白酶法相结合的破壁方法破碎酵母细胞壁。以得率、细胞溶出物上清液中RNA含量和氨基酸态氮含量来衡量酵母细胞的破壁率,筛选最佳破壁条件。结果表明,在60MPa高压均质3次后,添加0.6%的1:1配比的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶制成的复合蛋白酶,在pH值为5.0、55℃恒温自溶8h可得最佳破壁效果。

大肠癌VEGFR-3与Prox1的相关性研究

目的探讨VEGFR-3和Prox1在大肠癌组织、正常黏膜组织和淋巴结中的表达及其相互关系。方法采用实时定量RT-PCR检测63份直肠癌远端肠壁组织,156枚系膜淋巴结,配对肿瘤组织和邻近正常黏膜组织各13份的VEGFR-3,Prox1的表达。结果VEGFR-3和Prox1的mRNA含量中位数在肿瘤远端肠壁组织分别为22.08和544.97,两者有明显相关性(r=0.716,P=0.000 1)。在淋巴结分别为33.81和439.16,两者有明显相关性(r=0.618,P=0.000 1)。在肿瘤组织分别为0.65和5877,两者没有相关性(r=-0.280,P=0.353)。结论VEGFR-3与Prox1在正常肠壁组织和系膜淋巴结的新生淋巴管形成中可能有协同作用,但在肿瘤组织不存在协同关系。