聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽缓释微球的血液相容性(英文)

目的:评价聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽缓释微球的血液相容性。方法:①聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽微球制备:采用Fmoc法由C端至N端先合成粗品肽;采用反相液相色谱法对RNAⅢ抑制肽粗品进行纯化分析,按紫外吸收峰收集组分,冷冻干燥,得到RNAⅢ抑制肽纯品。再采用液相复乳法制备直径50～70μm的聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽微球。②浸提液制备:聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽微球粉末按1g/L在37℃无菌条件下用生理盐水浸提72h,制得浸提液原液;加入同体积的无菌生理盐水制得0.5g/L的浸提液。以溶血实验、凝血实验、血小板聚集实验,测定凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间、观察对兔白细胞、红细胞和血小板的影响,对聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽微球血液相容性进行初步评价。结果:①浸提液原液和0.5g/L浸提液的溶血率分别为3.24%和2.67%,两者的溶血率均<5%,符合医用生物材料的溶血实验要求。②浸提液原液和0.5g/L浸提液对兔凝血时间,各时间点凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间,白细胞、红细胞和血小板数量,对血小板聚集无明显影响。结论:聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽缓释微球具有良好的血液相容性。

基于滚环转录技术的siRNA递送策略对粘虫的干扰效果

【目的】评估基于滚环转录技术的siRNA递送策略对粘虫Mythimna separata的RNA干扰效果。【方法】采用荧光定量PCR,测定靶标基因Msα-tubulin和Msβ-tubulin的沉默效率;通过饲喂方法进行生物测定,观察经滚环转录制备的RNA微球处理粘虫3龄幼虫后其体重、体长和致死表型特征的变化。【结果】靶标基因沉默效率测定结果表明,RNA微球处理24 h后,Msα-tubulin和Msβ-tubulin的基因表达量分别下降51.6%和44.3%;Msα-tubulin在48 h的表达量下降32.0%,在72 h的表达量上调134.4%;处理48和72 h后,Msβ-tubulin的表达量分别上调120.5%和129.0%。生物学干扰效应结果表明,与对照组相比,处理7 d后,Msα-tubulin处理组幼虫体重、体长分别下降51.1%和34.9%,而Msβ-tubulin处理组的幼虫分别下降49.0%和32.4%;处理14 d后,这两种靶标基因处理组的幼虫死亡率均为42.2%。【结论】滚环转录制备的RNA微球能够触发粘虫的RNAi响应,干扰靶标基因的表达,抑制幼虫体重、体长并引起粘虫明显的死亡。