RNA支架系统介导大肠杆菌生产甲羟戊酸

利用0D RNA支架系统可共聚集酶的优势提高大肠杆菌甲羟戊酸的产量。通过RNA-EMSA证明RNA适配体与RBDs(RNA binding domains)存在相互作用;将RBDs与荧光蛋白融合表达以评估RNA支架系统效率。相比对照菌株BLCCG,表达0D RNA支架的菌株BLPCG及表达RBDs的菌株BLCPG荧光强度分别提高126%和129%。表达0D PP7 RNA支架系统的菌株BLPPG提高375%;应用0D RNA支架系统生产甲羟戊酸。相比对照菌株BLCCES,表达0D PP7 RNA支架系统菌株BLPPES的甲羟戊酸产量提高84%,达3.13 g/L。因此,RNA支架系统是提高多酶代谢途径效率的有效工具。

基于核酸适配体的蛋白靶向降解工具用于EGFR的降解

目前基于核酸的蛋白质水解-靶向嵌合体(PROTAC)为降解一些不可成药的靶标提供了强有力的工具.我们报告过基于核酸适配体的PROTAC作为一种拓宽靶标的降解工具,目标蛋白RNA适配体作为靶向降解弹头,异双功能分子Dth可以将E3泛素连接酶招募到基因编码的适体RNA支架上,促进靶蛋白的泛素化并将其降解.通过将膜蛋白表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的适配体在RNA支架上表达,小分子Dth适当浓度作用下,实现了对EGFR的选择性降解,将此工具的靶标扩展到膜蛋白.另外,通过在RNA支架上共同表达EGFR和p50的适配体,小分子Dth适当浓度作用下,实现了同时对p50和EGFR的降解.本研究基于核酸适配体的PROTAC降解工具提供了一个通用平台,可用于后续生化研究和潜在的疾病治疗.(图4表1参25)