RNA诱导沉默复合体中的生物大分子及其装配

在RNA干扰机制中,双链RNA诱导同源RNA降解的过程依赖于RNA诱导沉默复合体(RISC)的活性。RISC由Dicer酶,Argonaute蛋白,siRNA等多种生物大分子装配而成,对这些大分子的结构和功能进行深入细致的研究,有助于进一步了解RISC的形成过程、作用方式,以及阐明整个RNAi过程的作用机制。研究表明,RISC中的Dicer具有RNaseIII结构域,在RNAi的起始阶段负责催化siRNA的产生,在RISC装配过程中起稳定RISC中间体结构和功能的作用;Argonaute蛋白是RISC中的核心蛋白,有PAZ和PIWI两个主要的结构域,前者为siRNA的传递提供结合位点,后者是RISC中的酶切割活性中心;siRNA是RISC完成特异性切割作用的向导,在成熟的RISC中虽然只包含siRNA的一条链,但siRNA在RISC形成过程中的双链结构是保证RNAi效应的决定因素。尽管RISC中还存在其他一些功能未知的蛋白质,但在RISC组分结构及功能研究方面取得的进展为建立一个可能的RISC装配模型提供了理论基础。

非编码RNA和RNA沉默

生物体内存在大量的非编码RNA ,它们形态各异 ,功能也千差万别 ,在生物的生长、发育、分化进程中扮演着不同的角色 ,尤其是siRNA ,它是RNA沉默的诱因。RNA沉默是真核生物特有的现象 ,它需要一系列因子的参与 ,其中RNA依赖性的RNA聚合酶是沉默起始的关键 ,Dicer酶是形成siRNA的基础 ,而RNA沉默诱导复合体 (RSIC)等是发生RNA沉默“链式反应”

RNA沉默拮抗类病毒

RNA沉默在植物对抗外源性病源入侵,尤其是病毒入侵的过程中具有重要作用,当外源RNA或病毒进入植物细胞时,RNA沉默被激活,从而把外源病原性RNA和病毒等对细胞的影响降到最低程度。类病毒这种非编码RNA由于其特殊的结构,为研究RNA沉默和非编码RNA在植物中的互作提供了绝佳的模型。

微小RNA调控靶基因作用机制的研究进展

微小RNA是一类通过转录后调控机制对基因进行调控的非编码的短链RNA。研究发现微小RNA的功能涉及多种生物学过程,与肿瘤的发生、发展和多种疾病密切相关。本文就微小RNA形成过程及对靶基因调控机制的研究进展作一综述。

微小RNA与人类疾病的研究进展

微小RNA（miRNA）是一类长约22nt的非蛋白编码RNA家族，它通过切割mRNA或者抑制翻译两种作用机制调控动植物生长发育。大量研究表明miRNA与人类疾病密切相关，其在肿瘤、心脏病、糖尿病和艾滋病等多种疾病中都起着重要作用。miRNA的深入研究，将有助于对生物体各种生理、病理机制的理解，并最终可能为疾病诊断和治疗提供新的思路和理论基础。

人Argonaute2蛋白多克隆抗体制备及初步应用

目的:制备人Argonaute2(Ago2)的多克隆抗体,鉴定其特异性,并应用该抗体检测Ago2在人各细胞系中的表达差异及细胞定位。方法:用DNAstar软件寻找抗原性高的Ago2序列区域(命名为k-Ago2),构建k-Ago2的表达质粒,转化大肠杆菌并诱导表达。融合蛋白经切胶回收纯化后免疫大白兔制备抗体。以ELISA检测抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性及检测Ago2在细胞系中的表达差异,免疫荧光染色观察Ago2的细胞定位。结果:成功构建表达质粒,继而k-Ago2得以表达与纯化,免疫大白兔后得到Ago2多克隆抗体。ELISA检测抗体效价为1∶19 000,Western blot确定抗体具有高度特异性,并成功地用该抗体检测到Ago2在人各细胞系中的表达差异及细胞定位。结论:Ago2多克隆抗体的成功制备,对RNAi机制的深入研究及其进一步的临床应用均具有重要价值。

miR-210参与心肌缺血损伤修复机制及中药调控靶点分析

微小RNA-210(miR-210)有两个变体,即miR-210-3p和miR-210-5p。miR-210-3p是整合到RNA诱导沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC)上的导链,而miR-210-5p是无活性的过渡链。一般说的miR-210即是指miR-210-3p[1]。近年来发现miR-210与缺血后损伤修复密切相关。中药通过调节miR-210能促进心肌梗死边缘区血管新生、抑制心肌细胞凋亡,改善心肌梗死后的心脏组织形态结构和功能[2,3]。因此,笔者就miR-210参与心肌缺血损伤修复及中药调控的分子机制进行概述。

AGO2蛋白的抗病毒应用

AGO2（Argonaute2），也称为EIF2C2，属于Argonaute蛋白（AGO）家族成员。AGO蛋白家族首次分离于果蝇细胞，是相对分子质量约为100kD的结构高度保守的碱性蛋白。人类的AGO蛋白家族分为两个亚种：一种是AGO亚种，另一种是PIWI亚种。

Argonaute2蛋白及其在人类肿瘤研究中的新进展

蛋白质组学迅猛发展,越来越多与肿瘤发生发展相关的蛋白质被发现,并被应用于临床诊断。Argonaute2蛋白通过参与构成RNA诱导的沉默复合体,其自身催化及自身过表达功能,在人类肿瘤的发生发展中扮演了重要角色,逐渐成为研究焦点。就Argonaute2蛋白结构、功能及在肿瘤中的作用机制方面的研究新进展做一综述。