荧光素酶-微RNA-126海绵腺病毒的构建及应用

目的建立荧光素酶-miRNA海绵腺病毒的构建方法,并验证该腺病毒的表达产物与miRNA的结合效率。方法化学合成能与miRNA-126部分互补配对的DNA片段;PCR扩增miRNA-126海绵片段,将其克隆至pMD-18T载体及psiCheck2质粒hRluc的3’端非编码区;将hRluc-miRNA-126海绵克隆至Ad-Track质粒,PmeⅠ酶切使Ad-Track-hRluc-miRNA-126 sponge质粒线性化,并转化BJ5183感受态细菌,与Ad-Easy质粒同源重组;重组质粒经PacⅠ酶切鉴定后,转染293细胞,7 d后收获腺病毒;用腺病毒感染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),通过细胞划痕实验观察miRNA-126对细胞迁移能力的影响。结果MiRNA-126海绵与miRNA-126形成碱基互补配对关系;双荧光素酶实验结果表明miRNA-126能够直接作用于hRluc-miRNA-126海绵。将hRluc-miRNA-126海绵克隆至Ad-Track质粒使得同步检测细胞转染效率和miRNA抑制效率成为可能。通过Ad-Track与Ad-Easy同源重组,成功构建Ad-Easy-hRluc-miRNA-126 sponge质粒,酶切后可见4.5 kb片段。将其转染293细胞,7 d后获得荧光素酶-miRNA海绵腺病毒;miRNA-126过表达能够抑制腺病毒表达产物hRluc-miRNA-126海绵(P<0.01),感染miRNA-126海绵腺病毒可以抑制HUVEC的迁移能力(P<0.05)。结论成功建立了荧光素酶-miRNA海绵腺病毒,miRNA-126与该腺病毒的表达产物有较高的结合效率。

环状RNA在肺癌发生、发展、诊断及预后中的研究进展

肺癌的发病率高,预后差,其发病机制一直备受关注。环状RNA(circRNA)是一类结构呈闭合环状的内源性非编码RNA,并且具有序列保守、高度稳定等生物学特性。circRNA可作为致癌、抑癌因子在肺癌的进展过程中发挥关键作用,有望为肺癌早期诊疗及预后提供新的分子标志物。因此,该文就circRNA的起源、生物学功能及其在肺癌发生、发展、诊断、预后等方面的研究现状进行综述。

环状RNA与人类疾病

环状RNA(circular RNAs,circRNAs)是一类广泛存在于各种生物细胞中具有调控基因表达功能的非编码RNA,具有结构稳定和组织特异性表达等特征.有些circRNA分子富含微小RNA结合位点,可通过充当竞争性内源RNA的角色来发挥作用,如CDR1as对miR-7的海绵作用与肺癌、乳腺癌、胶质瘤及肌萎缩性脊髓侧索硬化等疾病发生相关.c ANRIL可通过影响多梳家族参与动脉粥样硬化的发生.大量circRNA的发现及其结构和功能的阐明不仅可以使我们更加深入地了解疾病的发生机制,而且为相关疾病的预防、诊断和治疗提供了新的方向.

环状RNA与肿瘤的研究进展

环状RNA(circular RNAs,circ RNAs)是一种不同于线性RNA的新型RNA,广泛存在于各种细胞中,且具有基因表达调控作用的非编码RNA(non-coding RNA,nc RNA).circ RNA主要来源于内含子或外显子,通过反向拼接或套索内含子的方式产生,具有进化上保守、结构稳定以及组织表达特异性等特征,这些特征赋予circ RNA不同的功能,例如,作为micro RNA(mi RNA)海绵,调节转录拼接,调控亲代基因转录等等.在此,本文将对circ RNA的种类、特征,功能、circ RNA在肿瘤中的作用及其对肿瘤靶向治疗的影响作一综述.

环状RNA的研究意义和功能及与肿瘤的关系

环状RNA(circRNA)是生物体内普遍存在,但近年才被发现和证实,并逐渐引起重视和深入研究的一种非编码RNA。circRNA主要由外显子序列构成,呈闭合环状结构,性质稳定,具有高度的保守性,组织器官和发育过程的特异性。circRNA主要通过微RNA海绵作用调控靶基因表达,在很多疾病,特别是肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。这些特性使circRNA有潜力成为新型分子标志物和分子靶向治疗的靶点,在肿瘤转化医学研究中意义重大。

环状RNA的功能以及调控动脉粥样硬化发生发展的研究进展

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是由多种原因引起的心血管疾病,包括高血压、糖尿病、高血脂症和吸烟等。AS对人类有极大的危害,由AS引发的心血管疾病已对人类健康构成了严重威胁。AS的发生可引起血管壁损伤和炎症反应,其原因可能是血管平滑肌细胞和内皮细胞的凋亡、坏死以及巨噬细胞的分化等。近年来,许多研究发现环状RNA(circular RNA,circRNA)在AS的发生和发展中起着关键的调节作用。因此,本文对circRNA调控AS的最新研究进行了综述。

环状RNA在肿瘤中的表达与功能

环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类闭合环状的内源RNA分子,广泛存在于不同物种及多种人体细胞中,具有丰富性、稳定性和组织特异性等特点。人体细胞中的circRNA主要可分为外显子circRNA、环状内含子RNA和外显子-内含子circRNA等。与正常组织相比,circRNA在多种肿瘤组织中异常表达,并具有作为微小RNA(microRNA,miRNA)海绵调控miRNA、结合蛋白质、参与翻译等功能。虽然circRNA在肿瘤中异常表达的具体机制尚不明确,但其在食管鳞状细胞癌、胃癌、结直肠癌、肝细胞癌、神经胶质瘤等多种肿瘤发生、发展的分子通路中具有重要作用,并有望成为全新的肿瘤标志物和治疗靶点。circRNA领域的发展日新月异,本文根据最新研究报道,就circRNA的基本特征、异常表达机制、调控肿瘤的机制及其在多种肿瘤中发挥的作用作一综述。

环状RNA的生物学功能及其在气道变应性疾病中的作用

环状RNA(circRNAs)是一类广泛存在于各种生物细胞中、具有调控基因表达功能的非编码RNA(ncRNAs),是目前RNA领域的研究热点之一。气道变应性疾病是以气道变态反应性炎症及高反应性为主要特征的慢性气道炎症性疾病,近年来的研究表明,多种microRNAs(miRNAs)参与气道变应性疾病的一系列病理生理过程,circRNAs可通过与这些miRNAs的相互作用在气道变应性疾病的发生、发展中发挥十分重要的调控作用,且可能成为气道变应性疾病的潜在治疗靶点。本文对circRNAs的来源、生物学特性及其在气道变应性疾病中的作用及其调控机制进行综述。

环状RNA在皮肤肿瘤中的研究进展

环状RNA(circRNA)是mRNA在剪接过程中5'端与3'端剪接到一起而形成的非编码RNA。circRNA的高度稳定性、高丰度和组织特异性赋予circRNA的许多潜在功能,近年来研究发现circRNA对基因转录及转录后水平有重要意义,此外已发现circRNA与多种癌症的发生有关。皮肤基底细胞癌中,显著异常表达的circRNA潜在靶向与癌症相关的miRNA,如hsa-miR-19b-1。皮肤鳞癌中circRNA的miRNA响应元件已有23个与之对应的且与皮肤鳞癌相关的miRNAs。目前发现肿瘤中存在许多异常表达的circRNA,对于circRNA-miRNA的研究,可以为癌症的基因靶向治疗提供新思路。

环状RNA在胶质瘤临床诊疗中的研究进展

环状RNA(circular RNAs,circRNAs)是一类共价闭合环状的单链RNA分子,具有高度的稳定性、丰度和保守性,并显示组织/发育阶段特异性表达。与其它非编码RNA类似,circRNAs的功能也具有多样性。近年来,circRNAs作为微小RNA(microRNAs,miRNAs)海绵和蛋白质海绵、翻译、转录和剪接等功能的调控机制逐渐被揭示,circRNAs可为癌症诊疗/预后提供新的生物标志物和靶点。越来越多的研究表明,circRNAs在神经元组织中高丰度存在,其失调与神经系统疾病(包括胶质瘤)的发生密切相关。本文就circRNAs在胶质瘤中诊疗的作用研究进展进行综述。

环状RNA在心血管疾病中的研究进展

环状RNA是一类非编码RNA,呈共价闭合环状结构,结构稳定、高度保守,具有组织特异性和发育阶段特异性表达的特征。环状RNA的功能仍不清楚,目前认为其有以下功能:microRNAs海绵、调节剪切或转录、与RNA结合蛋白相互作用调节基因表达。有报道发现环状RNA在衰老、胰岛素分泌、组织发育、动脉粥样硬化性血管疾病、心肌肥厚和肿瘤中发挥重要作用。本文对环状RNA的结构、分类、功能及其在心血管系统疾病中的作用进行综述。

环状RNA与肿瘤研究进展

环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类由外显子或内含子反向剪接形成的闭合环状非编码RNA。越来越多的证据表明,circRNA高度保守,普遍存在于各种真核细胞基因组中,且稳定表达于胞质内。circRNA可作为微小RNA(microRNA,miRNA)海绵吸附miRNA或与RNA相关蛋白结合形成复合物,进而调节基因转录等。肿瘤组织circRNA的发现提示其可能在肿瘤发生、发展和侵袭等方面发挥着重要调控作用,有望成为肿瘤诊断和治疗的潜在靶标。

环状RNA的研究进展

环状RNA(circular RNA,circRNA)是以共价封闭环为特征,广泛存在于真核细胞转录的一类新型RNA分子,具有结构稳定、高度保守性、表达量丰富的特点,并且在不同组织的各发育阶段具有表达特异性。目前已在哺乳动物、植物中发现成千上万circRNA。环状RNA有充当微小RNA(microRNA,miRNA)海绵、剪切和转录的调控,亲代基因修饰的功能。与许多疾病密切相关,可能成为疾病诊断或预测的生物学标志物。同miRNA和长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)类似,环状RNA已经成为RNA研究领域新的热点,可能同生命进程息息相关。本文就其形成、特征、功能及在疾病潜在意义进行综述。

CDR1as与疾病的相关性

环状RNA(circular RNA,circRNA)是存在于真核细胞中的一种非线性RNA,具有稳定性、特异性以及进化保守性等特征,通过发挥microRNA的海绵作用,对其靶基因进行调控。与线性RNA相比,环状RNA自身的闭合环状结构使其更具优越性。小脑变性相关蛋白1反义转录物(cerebellar degeneration-related protein 1 antisense,CDR1as)作为一种竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)间接调控miR-7靶标,通过多种途径影响多种疾病的发生和发展。本文就CDR1as的发现、来源及特征、功能以及与不同疾病的相关性作一概述。

环状RNA的生物学功能及其在疾病发生中的作用

环状RNA(circular RNA,circRNA)主要包括由外显子转录本构成的、经非线性反向剪接形成的内源性RNA分子和内含子来源的环状RNA分子等两类。研究发现,circRNA在人体细胞中广泛表达,在转录后水平具有调控基因表达的重要功能。有些circRNA具有天然微小RNA(microRNA,miRNA)海绵作用,可通过与miRNA结合而抑制其活性,从而调控miRNA靶标发挥作用。circRNA在动脉粥样硬化、神经系统紊乱、糖尿病和肿瘤等疾病发生过程中起着较为重要的作用,深入研究circRNA的结构和功能可使我们更好地了解疾病的发生机制,提高相关疾病的预防和诊断水平。文章就circRNA的形成、功能及其在疾病发生中的作用等做一综述。

环状RNA的生物学功能及其在肿瘤发生中的作用

近年来,随着RNA研究技术的进步,研究者们在多种生物中发现了数量众多的环状RNA,且发现它们具有重要的生物学功能。环状RNA来源于内含子或外显子,可以充当微小RNA海绵,还能与蛋白质相结合,从而参与基因表达调控并影响蛋白质的功能,此外,个别环状RNA甚至能编码蛋白质。更重要的是,环状RNA在肿瘤(如:胃癌、肝癌、结直肠癌、乳腺癌、宫颈癌和卵巢癌等)的发生和发展过程中起着重要的调控作用。因此,环状RNA有希望成为肿瘤诊断的标志物和治疗的新靶点。

环状RNA与疾病的关联及其潜在的临床价值

环状RNA（circular RNA，circRNA）是区别于传统线性RNA的一类新型RNA，具有闭合环状结构，广泛存在于各种生物细胞中，具有丰度高、结构稳定和组织特异性表达等特征。circRNA在转录及转录后水平具有很多重要的调控基因表达功能。circRNA在肿瘤、神经系统紊乱和动脉粥样硬化等疾病发生、发展过程中起着较为重要的作用。研究显示circRNAs有巨大潜力成为新型的疾病临床诊断标志物或人类疾病治疗的潜在靶点，在疾病的防治领域展现出潜在的应用前景。本文就circRNA与疾病的关联及其潜在临床价值做一综述。

酒精性肝硬化相关原发性肝癌患者外周血环状RNA差异表达研究

目的由酒精性肝硬化(alcoholic liver cirrhosis,ALC)引发原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)的发展和形成极其复杂,这给PLC的诊断和治疗带来了的难题。本研究采用环状RNA(circular RNA,circRNA)微阵列芯片技术筛选酒精性肝硬化相关PLC患者外周血中差异表达的circRNA,为酒精性肝硬化相关PLC的诊断和治疗提供研究基础。方法选择2014-12-01-2015-08-31中国人民解放军第一八一医院确诊为酒精性肝硬化引发PLC的4例患者(PLC组)和4例健康志愿者(对照组)作为研究对象,采用circRNA芯片检测PLC组和健康对照组外周血的circRNA表达谱,同时进行组间差异分析,筛选出组间差异表达的circRNA。并对circRNA吸附相关的微小RNA(microRNA,miRNA)进行预测。结果与健康对照组比较,PLC患者外周血中差异表达的circRNA共有302个(fold change绝对值≥2.0),其中表达上调的有182个(fold change≥2.0),下调的有120个(fold change≤-2.0),12个circRNA对与肝癌相关的miR-483-3p、miR-483-5p、miR-203和miR-29b/c可能有miRNA海绵作用(microRNA sponge)。结论酒精性肝硬化相关PLC患者外周血与正常外周血之间存在差异表达的circRNA,这些差异表达以及和miRNA有结合位点的circRNA可能成为一种诊断和治疗PLC的候选生物标志物。

环状RNA在肿瘤中的研究进展

环状RNA（circ RNA）是一类不同于线性RNAs,可形成共价闭锁环结构,在哺乳动物体内具有巨大基因调控功能的非编码RNAs,其主要来源于外显子或内含子,经索尾插接或套索内含子方式产生,具有数量巨大,进化保守、在细胞质中稳定性高等特点,具有micro RNA分子海绵、结合RNA相关蛋白形成RNA-蛋白质复合物和基因转录调控等作用。Circ RNA可与肿瘤相关的mi RNA形成circ RNA-mi RNA轴参与肿瘤相关信号通路的调控。全文从circ RNA的种类、成环机制、功能及其在肿瘤中的作用及最新进展等方面作一综述。

环形RNA研究进展

环形RNA(circular RNA,circ RNA)广泛存在于各种生物细胞中,并且具有结构稳定、表达量丰富以及在不同组织及其不同发育阶段具有表达特异性等特征。目前认为,circ RNA可以在转录后水平调控基因表达,但是circ RNA的产生机制及其代谢途径仍然不是很清楚。迄今研究认为,circ RNA的主要生物学作用是作为微小RNA(micro RNA,miRNA)海绵体调控miRNA的表达。此外,circ RNA在肿瘤、动脉粥样硬化、糖尿病、帕金森病等多种疾病的发生发展中发挥了一定的作用。深入了解circ RNA的作用机制及其功能,有助于深入了解疾病的发生、发展机理,设计更好的预防、诊断和治疗疾病新策略。