RNA结合蛋白Aly/REF输出因子通过上调Yes相关蛋白表达促进胃癌细胞的增殖和迁移

胃癌是一种常见的发病率高、起病隐匿、侵袭性强的消化道恶性肿瘤,其发病机制错综复杂。RNA结合蛋白Aly/REF输出因子(RNAbinding protein Aly/REF export factor, ALYREF)作为一种RNA胞嘧啶的5-甲基化修饰(m~5C)后的结合蛋白质,在调控RNA出核及稳定其表达的过程中具有关键作用;Yes相关蛋白(yes-associated protein, YAP)作为Hippo-YAP信号通路中的关键分子,调控各种恶性肿瘤的生长和转移。本文旨在探讨ALYREF与YAP在促进胃癌细胞增殖和迁移中是否存在相关性,并初步探索这两者之间的作用机制。本文在胃癌细胞AGS和MKN-45中运用RT-PCR和Western印迹方法检测相关基因表达;CCK8试验检测细胞增殖;划痕试验和Trans-well试验分别检测细胞迁移和侵袭。结果显示,过表达ALYREF后YAP的表达增加(P<0.05),并且促进细胞的增殖、迁移和上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)(P<0.05);靶向敲低YAP,细胞的增殖、迁移和EMT能力显著抑制(P<0.05);过表达ALYREF且靶向敲除YAP与单独过表达ALYREF相比,YAP的表达显著降低(P<0.05),且细胞的增殖、迁移和EMT能力同样得到抑制(P<0.05);靶向敲低ALYREF,细胞的增殖、克隆形成和侵袭能力显著抑制(P<0.01)。综上所述,ALYREF通过上调YAP表达进而促进胃癌细胞的增殖和迁移。

非肌层浸润性膀胱癌组织中PKM2和ALYREF表达及与预后预测价值研究

目的 研究非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)组织中丙酮酸激酶M2亚型(pyruvate kinase M2 subtype,PKM2),RNA结合蛋白Aly/REF输出因子(Aly/REF export factor,ALYREF)表达及预后意义。方法 选取自2017年2月~2020年2月期间南京中医药大学翰林学院附属医院收治的84例NMIBC患者为研究对象。免疫组织化学检测NMIBC和膀胱正常黏膜组织中PKM2和ALYREF蛋白表达。Spearman秩相关分析膀胱癌组织中PKM2和ALYREF蛋白表达相关性。Kaplan-Meier生存曲线分析(Log-Rank检验)PKM2和ALYREF蛋白对无进展生存(progress free survive, PFS)预后的影响。COX比例风险模型分析影响NMIBC患者PFS预后的因素。结果 NMIBC组织中PKM2(71.43%),ALYREF(73.81%)蛋白阳性率高于膀胱正常黏膜组织(11.90%,10.71%),差异具有统计学意义(χ^(2)=61.225,68.522,均P <0.05)。T1期、高级别NMIBC癌组织中PKM2(88.37%,90.32%),ALYREF(80.05%,93.55%)蛋白阳性率分别高于Ta/Tis期(53.66%,60.38%)、低级别癌组织(60.98%,62.26%),差异具有统计学意义(χ^(2)=12.393,8.594;6.524,9.903,均P <0.05)。PKM2阳性组和阴性组患者的三年总体PFS分别为48.33%(29/60),87.50%(21/24),PKM2阳性组患者三年累积PFS显著低于PKM2阴性组患者(Log-Rank testχ^(2)=10.040,P=0.002);ALYREF阳性组和阴性组三年总体PFS分别为48.39%(30/62),90.91%(20/22),ALYREF阳性组患者三年累积PFS显著低于阴性组患者(Log-Rank test χ^(2)=11.110,P=0.001)。肿瘤TNM分期T1期(HR=1.614,95%CI:1.227~2.214)、高级别(HR=1.921,95%CI:1.324~2.788),PKM2阳性(HR=1.837,95%CI:1.229~2.745),ALYREF阳性(HR=1.744,95%CI:1.245~2.443)是影响NMIBC患者PFS预后的独立危险因素。结论 NMIBC中PKM2和ALYREF表达升高,两者表达呈正相关,是影响NMIBC患者预后的独立因素。