诱骗RNA靶向阻断RNA结合蛋白E2诱导K562细胞向粒系分化

目的应用诱骗RNA（decoy RNA）靶向阻断RNA结合蛋白E2（hnRNP E2）调节CCAAT增强子结合蛋白（C／EBPα）基因异常翻译的作用，诱导白血病细胞株K562细胞向粒系分化，并初步探讨其分子机制。方法将已构建的hnRNP E2 decoy RNA表达质粒经阳离子脂质体的介导转染K562细胞，用G418筛选出稳定表达细胞株，用RT—PCR和Western blot方法检测该细胞株C／EBPα和粒细胞集落刺激因子受体（G—CSFR）的表达，通过瑞特-姬姆萨染色观察细胞形态，免疫细胞化学法分析细胞粒系分化抗原CD13、CD15的表达。结果筛选到稳定表达细胞株pG细胞，与未转染的K562细胞相比，其C／EBPα mRNA水平无改变，但相对分子质量42×10^3的C／EBPα蛋白（42kD—C／EBPα）水平升高了（49．7±5．5）％（P〈0．05）；G—CSFR mRNA水平升高了（42．1±3．6）％（P〈0．05），其蛋白水平也升高了（37．4±6．2）％（P〈0．05）；细胞形态学方面观察到pG细胞出现中、晚幼粒细胞甚至成熟粒细胞的特征，且免疫细胞化学法检测显示粒系分化抗原CD13、CD15表达增高[阳性细胞百分比分别为（18、7±2．5）％和（15．2±2．6）％]。结论hnRNP E2 decoy RNA能够诱导K562细胞向粒系分化，G—CSF对其分化过程有促进作用，其作用机制可能与decoy RNA靶向阻断hnRNP E2，调节C／EBPα mRNA翻译，恢复42kD—C／EBPα表达，上调42kD-C／EBPα下游分化基因G-CSFR的表达有关。

LncRNA ZEB2-AS1在Ⅲ期大肠癌中的表达及意义

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)锌指E盒结合同源盒蛋白(ZEB)2-AS1在Ⅲ期大肠癌中的表达及意义。方法诊断为Ⅲ期大肠癌并行手术切除患者87例,采用实时定量PCR法检测其大肠癌组织及癌旁正常黏膜组织中lncRNA ZEB2-AS1的表达,分析其与临床病理参数及预后的关系。结果大肠癌组织中lncRNA ZEB2-AS1表达较癌旁正常黏膜组织增高18.75倍(P<0.01),其增高与患者死亡相关(P<0.01)。LncRNA ZEB2-AS1高表达(≥381.5)组5年生存率低于低表达(<381.5)组(43.2%vs.76.7%)(P<0.01)。LncRNA ZEB2-AS1表达、淋巴结分期和肿瘤部位是Ⅲ期大肠癌患者预后的独立影响因素(P<0.05或P<0.01)。结论 LncRNA ZEB2-AS1参与大肠癌的发生和发展,是影响预后的独立因素。