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Ⅰ型鸭肝炎病毒RNA聚合酶基因的克隆及原核表达
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作者 王超 付玉志 +5 位作者 张伟伟 陈宗艳 李传峰 杨宗伟 吴润 刘光清 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第2期20-25,共6页
根据Ⅰ型鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV-Ⅰ)ZJ-Ⅴ株基因组序列(GenBank登录号:EF382778),设计了一对扩增RNA聚合酶基因(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)的特异性引物,以ZJ-Ⅴ株基因组为模板,扩增DHV-Ⅰ的RdRp基因。运... 根据Ⅰ型鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV-Ⅰ)ZJ-Ⅴ株基因组序列(GenBank登录号:EF382778),设计了一对扩增RNA聚合酶基因(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)的特异性引物,以ZJ-Ⅴ株基因组为模板,扩增DHV-Ⅰ的RdRp基因。运用DNAStar软件对ZJ-Ⅴ株病毒与GenBank上已发表的其他不同DHV毒株的RdRp基因序列进行同源性比较和遗传进化分析,结果表明,ZJ-Ⅴ株与A型DHV-ⅠR85952株(DQ226541)的同源性为97.1%,亲缘关系最近,与2株台湾新型(B型)DHV之间为76.9%和77.0%,与C-GY株和4株韩国新型(C型)DHV株之间为76.2%~76.5%,亲缘关系较远。将RdRp基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),获得重组表达质粒pET-RdRp,转化宿主菌E.coli BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示RdRp蛋白分子量约为65 kDa,Western blot检测证明RdRp蛋白能与Ⅰ型鸭病毒性肝炎阳性血清产生特异性免疫反应,具有良好的免疫学活性。本文为进一步研究DHV-Ⅰ的复制机理奠定了基础。 展开更多
关键词 Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ) rna聚合酶基因(RdRp) 原核表达 序列分析
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一种简单有效的T7 RNA聚合酶调控的植物基因表达系统 被引量:5
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作者 路子显 魏晓丽 +2 位作者 伍晓丽 常团结 朱祯 《自然科学进展》 北大核心 2002年第7期702-707,共6页
T7 RNA聚合酶在原核系统的基因表达与调控中起重要作用。将T7 RNA聚合酶基因的5’端与来自SV40大T抗原基因的核定位信号编码序列融合在一起,利用rolC启动子控制修饰的T7 RNA聚合酶基因,与Φ10启动子控制的β-葡萄糖醛酸酶基因串联在一起... T7 RNA聚合酶在原核系统的基因表达与调控中起重要作用。将T7 RNA聚合酶基因的5’端与来自SV40大T抗原基因的核定位信号编码序列融合在一起,利用rolC启动子控制修饰的T7 RNA聚合酶基因,与Φ10启动子控制的β-葡萄糖醛酸酶基因串联在一起,构建了植物表达载体,通过基因枪介导法转化了烟草叶片。结果表明,这一表达系统能够增加β-葡萄糖醛酸酶基因的瞬时表达,这为提高外源基因在转基因植物中的高效表达提供了新的工具。 展开更多
关键词 植物基因表达系统 T7 rna聚合酶基因 φ10启动子 β-葡萄糖醛酸基因 串联表达载体 基因调控
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利用修饰的T7 RNA聚合酶基因建立一种植物耦联表达系统 被引量:2
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作者 陈峰 路子显 +4 位作者 常团结 徐鸿林 吴茜 肖桂芳 朱祯 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第10期775-779,共5页
通过基因修饰,在T7 RNA聚合酶基因的5'端添加了SV40大T抗原的核定位信号编码序列.利用CaMV35S启动子和修饰的T7 RNA聚合酶基因构建了植物表达载体pBBT7.同时,利用T7启动子和β-葡糖醛酸酶基因(gusA)构建了另一个植物表达裁体pBTG.通... 通过基因修饰,在T7 RNA聚合酶基因的5'端添加了SV40大T抗原的核定位信号编码序列.利用CaMV35S启动子和修饰的T7 RNA聚合酶基因构建了植物表达载体pBBT7.同时,利用T7启动子和β-葡糖醛酸酶基因(gusA)构建了另一个植物表达裁体pBTG.通过农杆菌介导法将上述两个植物表达载体共转化烟草,共转化植株表现出较强的β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)活性.上述结果表明T7 RNA聚合酶-T7启动子耦联表达系统在植物中是有效的,说明已成功构建了一种植物耦联表达系统. 展开更多
关键词 植物耦联表达系统 基因修饰 T7rna聚合酶基因 核定位信号 T7启动子 β-葡萄醛酸 基因表达 植物基因工程
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赭纤虫RNA聚合酶Ⅰ基因片段的分析 被引量:2
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作者 梁爱华 王伟 K.Heckmann 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1999年第4期435-439,共5页
赭纤虫被认为是一类进化过程中较为原始的纤毛虫。本研究以储纤虫基因组DNA为模板,利用锚定PCR技术,扩增出RNA聚合酶I第二大亚基基因片段,并对扩增出的基因片段进行了克隆和序列分析。结果表明:由该基因片段导出的氨基酸序列中共有1... 赭纤虫被认为是一类进化过程中较为原始的纤毛虫。本研究以储纤虫基因组DNA为模板,利用锚定PCR技术,扩增出RNA聚合酶I第二大亚基基因片段,并对扩增出的基因片段进行了克隆和序列分析。结果表明:由该基因片段导出的氨基酸序列中共有10个半胱氨酸,均由通用密码子UGU、UGC编码,开放读框中不存在由UGA转译为半眈氨酸这一非通用密码的现象。 展开更多
关键词 纤毛虫 赭纤虫 PCR rna聚合基因 遗传密码
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逆转录病毒载体介导的T7RNA聚合酶在猪源细胞PK15及SK6中的稳定表达 被引量:2
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作者 吴锦艳 田宏 +4 位作者 郑海学 陈妍 靳野 尚佑军 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期527-532,共6页
本研究旨在利用逆转录病毒载体系统将T7RNA聚合酶基因导入猪源细胞,并对该基因的遗传稳定性进行分析。作者克隆并构建含T7RNA聚合酶基因的逆转录病毒重组载体pBABEpuro/T7。将pBABEpuro/T7与水泡性口炎病毒载体pVSV-G共转染GP2-293细胞... 本研究旨在利用逆转录病毒载体系统将T7RNA聚合酶基因导入猪源细胞,并对该基因的遗传稳定性进行分析。作者克隆并构建含T7RNA聚合酶基因的逆转录病毒重组载体pBABEpuro/T7。将pBABEpuro/T7与水泡性口炎病毒载体pVSV-G共转染GP2-293细胞,收获重组病毒并用该病毒在Polybrene的介导下分别感染PK15和SK6细胞,用嘌呤霉素筛选阳性细胞克隆。对此阳性细胞进行传代,并对不同代次细胞中的T7RNA聚合酶基因进行扩增,确定其遗传稳定性。用直接荧光法和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测细胞中T7RNA聚合酶基因的表达及其活性。结果表明T7RNA聚合酶能够被稳定地整合进靶细胞基因组内,细胞系内的T7RNA聚合酶具有较好的转录活性,其活性传代不减弱。免疫荧光检测发现所表达的T7RNAP蛋白具有良好的反应原性。本研究表明T7RNA聚合酶基因稳定整合进猪源细胞,该基因的稳定整合为建立高效体内病毒拯救系统提供了良好的工具。 展开更多
关键词 T7rna聚合酶基因 逆转录病毒载体 PK15细胞 SK6细胞 稳定表达
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16S核糖体RNA基因和RNA聚合酶β亚基基因及基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱鉴定海洋副溶血性弧菌及其同源性分析的研究
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作者 周月霞 胡成进 +3 位作者 武静 陈英剑 曹源 王明义 《中国医药》 2017年第6期929-933,共5页
目的评价16S核糖体RNA基因(16SrRNA)、RNA聚合酶β亚基基因(rpoB)及基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)技术对海洋副溶血性弧菌的鉴定及同源性分析的性能。方法将50株海洋副溶血性弧菌以及与其亲缘关系相近的30株... 目的评价16S核糖体RNA基因(16SrRNA)、RNA聚合酶β亚基基因(rpoB)及基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)技术对海洋副溶血性弧菌的鉴定及同源性分析的性能。方法将50株海洋副溶血性弧菌以及与其亲缘关系相近的30株海洋溶藻弧菌、8株海洋坎贝式弧菌、11株海洋哈维氏弧菌、3株海洋需钠弧菌、2株海洋创伤弧菌分别用16SrRNA、rpoB和MALDI-TOFMS技术3种方法进行鉴定并做系统进化树、聚类分析,比较分析结果。结果50株海洋副溶血性弧菌用16SrRNA鉴定出5株,rpoB鉴定出41株,MALDI-TOFMS技术鉴定出41株。16SrRNA系统进化树的结果不能将海洋副溶血性弧菌和海洋溶藻弧菌、海洋坎贝式弧菌、海洋需钠弧菌、海洋创伤弧菌分开。rpoB和MALDI.TOFMS可以准确地做出同源性分析。rpoB鉴别来自不同地域的海洋副溶血性弧菌的能力优于MALDI-TOFMS。而MALDI-TOFMS在海洋副溶血性弧菌的环境株和临床株的鉴别上优于rpoB。结论rpoB和MALDI.TOFMS技术鉴定海洋副溶血性弧菌准确,二者相结合是进行海洋副溶血性弧菌鉴定和同源性分析的适宜技术。 展开更多
关键词 弧菌 副溶血性 海洋 16S核糖体rna rna聚合β亚基基因 基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱 同源性分析
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蜜蜂囊状幼虫病病毒的基因型分析 被引量:15
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作者 曹兰 沈克飞 +6 位作者 张邑帆 罗文华 王瑞生 任勤 郭军 王志冬 戴荣国 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第1期41-44,共4页
为了解蜜蜂囊状幼虫病病毒的遗传进化规律,依据SB14f/SB15r引物所扩增的RNA依赖的RNA聚合酶基因片段序列对该病毒进行基因型分析。结果表明,该病毒主要分为欧洲型、远东型和南非型3个基因型。欧洲基因型分为中欧和英国亚型,远东基因型... 为了解蜜蜂囊状幼虫病病毒的遗传进化规律,依据SB14f/SB15r引物所扩增的RNA依赖的RNA聚合酶基因片段序列对该病毒进行基因型分析。结果表明,该病毒主要分为欧洲型、远东型和南非型3个基因型。欧洲基因型分为中欧和英国亚型,远东基因型分为东方蜜蜂和西蜂亚型。提示蜜蜂囊状幼虫病病毒总体上按地域分型。 展开更多
关键词 囊状幼虫病病毒 rna依赖的rna聚合酶基因 基因 蜜蜂
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从云南蚕区分离BmCPV病毒株的全基因组克隆与系统发育分析 被引量:1
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作者 张永红 唐芬芬 +2 位作者 邵榆岚 朱峰 白兴荣 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1036-1043,共8页
家蚕质型多角体病毒(BmCPV)是家蚕中肠型脓病的病原物。从云南蚕区的病蚕样品中分离到一株BmCPV病毒分离株,提取纯化该病毒粒子的总RNA并合成cDNA,克隆病毒全基因组序列,研究该病毒分离株的基因组结构与系统进化。克隆得到该病毒10条d... 家蚕质型多角体病毒(BmCPV)是家蚕中肠型脓病的病原物。从云南蚕区的病蚕样品中分离到一株BmCPV病毒分离株,提取纯化该病毒粒子的总RNA并合成cDNA,克隆病毒全基因组序列,研究该病毒分离株的基因组结构与系统进化。克隆得到该病毒10条dsRNA序列(S1~S10)并提交至NCBI数据库中。序列分析表明该病毒基因组序列全长24810bp,S1~S10片段序列都具有完整的ORF。BLAST比对发现克隆的该病毒基因组各片段编码区序列与已报道的1型BmCPV片段的相似度达88%以上,氨基酸序列相似度达90%以上;10条dsRNA基因组片段末端均有保守帽子结构5'-AGUAA……GUUAGCC-3'。基于S2片段RdRp基因的系统进化分析发现,该病毒与其他3个1型BmCPV分离株BmCPV1-Suzhou、BmCPV1-China、BmCPV1-Ⅰ聚为一支,基于S10片段polh基因的系统进化分析也表明该病毒为1型BmCPV新的分离株系。根据上述研究结果将该病毒定名为BmCPV1-Yunnan。 展开更多
关键词 家蚕质型多角体病毒 分离株 基因组片段 系统进化 rna聚合酶基因 多角体蛋白基因
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鼠脑心肌炎病毒(TMEV)3D基因的序列保守性分析 被引量:1
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作者 杨鹏华 倪凤娥 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第12期38-40,共3页
为了探索RNA依赖RNA聚合酶基因(3D基因)的抗病机理,试验比较了小RNA病毒科所有病毒3D基因的序列,分析了3D基因的序列特征。结果表明:小RNA病毒科病毒3D基因的核酸同源性为50.91%,其中最保守的位点有37个,且均有1个异常保守的TAYGGNGAYGA... 为了探索RNA依赖RNA聚合酶基因(3D基因)的抗病机理,试验比较了小RNA病毒科所有病毒3D基因的序列,分析了3D基因的序列特征。结果表明:小RNA病毒科病毒3D基因的核酸同源性为50.91%,其中最保守的位点有37个,且均有1个异常保守的TAYGGNGAYGAY基序,它编码的氨基酸为YGDD;3D基因的氨基酸同源性为42.22%,保守的基序有KDE、PSG、YGDD和PLKR。 展开更多
关键词 鼠脑心肌炎病毒(TMEV) rna依赖rna聚合酶基因(3D基因) 抗病机理 基因育种
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应用rpoB和16S rDNA基因的变性梯度凝胶电泳技术对山羊瘤胃细菌多样性的研究 被引量:22
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作者 石鹏君 柏映国 +6 位作者 袁铁铮 姚斌 范云六 周志刚 孟昆 伍宁丰 刁其玉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期285-289,共5页
采用免培养的rpoB和16S rDNA基因的变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)对3种山羊(波尔山羊,内蒙古绒山羊,四川南江黄羊)瘤胃细菌优势菌群结构进行了比较分析。研究结果显示rpoBDGGE图谱中条带数目少于16S rDNA图谱,并且条带分离效果明显,更有... 采用免培养的rpoB和16S rDNA基因的变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)对3种山羊(波尔山羊,内蒙古绒山羊,四川南江黄羊)瘤胃细菌优势菌群结构进行了比较分析。研究结果显示rpoBDGGE图谱中条带数目少于16S rDNA图谱,并且条带分离效果明显,更有利于分析瘤胃细菌群落组成。从两种DGGE图谱中均可以发现3种山羊瘤胃细菌具有一定的相似性,种内个体间相似性明显高于种间相似性,这说明寄主品种是影响瘤胃细菌种群构成的一个重要因素。同时进行了部分优势细菌16S rDNA基因V6-V8区序列的系统发育分析。基因序列分析表明,DGGE图谱中优势条带的16S rDNA基因序列中有4条克隆的序列与基因库最相似菌的相似性大于97%,余下的克隆序列相似性在89%~96%之间,其中13条序列的与之相似性最高的序列均来自于未被鉴定的瘤胃细菌。 展开更多
关键词 DGGE 16S RDNA基因 编码rna聚合β亚基(rpoB)基因 瘤胃细菌 遗传多样性
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Epigenetics: heterochromatin meets RNAi 被引量:7
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作者 Ingela Djupedal Karl Ekwall 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2009年第3期282-295,共14页
The term epigenetics refers to heritable changes not encoded by DNA. The organization of DNA into chromatin fibers affects gene expression in a heritable manner and is therefore one mechanism of epigenetic inheritance... The term epigenetics refers to heritable changes not encoded by DNA. The organization of DNA into chromatin fibers affects gene expression in a heritable manner and is therefore one mechanism of epigenetic inheritance. Large parts of eukaryotic genomes consist of constitutively highly condensed heterochromatin, important for maintaining genome integrity but also for silencing of genes within. Small RNA, together with factors typically associated with RNA interference (RNAi) targets homologous DNA sequences and recruits factors that modify the chromatin, com- monly resulting in formation of heterochromatin and silencing of target genes. The scope of this review is to provide an overview of the roles of small RNA and the RNAi components, Dicer, Argonaute and RNA dependent polymerases in epigenetic inheritance via heterochromatin formation, exemplified with pathways from unicellular eukaryotes, plants and animals. 展开更多
关键词 EPIGENETICS HETEROCHROMATIN rnaI sirna ARGONAUTE DICER rna dependent polymerase
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龙眼RDRP基因家族的全基因组鉴定与功能预测
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作者 林艺灵 徐小萍 +3 位作者 张春渝 陈晓慧 张梓浩 赖钟雄 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1364-1371,共8页
为了解龙眼RNA依赖的RNA聚合酶基因(RDRP)家族的生物学功能,采用生物信息学分析方法对龙眼RDRP家族基因成员进行鉴定,并且对其染色体定位、分子进化树、启动子顺式作用元件、蛋白质结构域、蛋白质二级和三级结构、蛋白质互作、可变剪接... 为了解龙眼RNA依赖的RNA聚合酶基因(RDRP)家族的生物学功能,采用生物信息学分析方法对龙眼RDRP家族基因成员进行鉴定,并且对其染色体定位、分子进化树、启动子顺式作用元件、蛋白质结构域、蛋白质二级和三级结构、蛋白质互作、可变剪接类型以及在体胚发生过程中差异表达的FPKM值进行分析.结果显示:龙眼RDRP家族基因包括10位成员,分别定位在1、8、9、11、15号共5条染色体上.通过龙眼与拟南芥、水稻构建的进化树分析,将其分为4类,分别为DlRDR1、DlRDR2、DlRDR4、DlRDR6.龙眼RDRP成员启动子包含多种植物激素以及低温、干旱等非生物胁迫的元件.龙眼RDRP家族均含有RDRP保守结构域,其蛋白质家族成员二级、三级结构较为相似,并且与特异性核酸内切酶(DCL)蛋白互作关系密切,同时也与基因沉默蛋白抑制剂3(SGS3)、依赖DNA的RNA聚合酶(NRPD1A)发生互作.不同体细胞胚发生阶段与不同组织部位的可变剪接事件以内含子剪接为主.龙眼体细胞胚不同阶段的表达模式分析中,龙眼RDRP在非胚性阶段显著上调.本研究表明龙眼RDRP家族成员能够响应植物激素的应答并且参与龙眼体胚和不同组织部位生长发育调控. 展开更多
关键词 龙眼 rna依赖的rna聚合酶基因(RDRP) 基因家族 基因组鉴定 功能分析
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华支睾吸虫成虫CsRPEF基因的生物信息学分析 被引量:1
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作者 范为 詹苗 张咏莉 《热带医学杂志》 CAS 2009年第2期168-170,共3页
目的筛选华支睾吸虫的功能基因并进行相应的生物信息学分析。方法使用PCGENE软件、Antheprot-5软件、ExPASy在线分析工具、NCBI上的Blastx程序进行华支睾吸虫RNA聚合酶Ⅱ延长因子(CsRPEF)基因的生物信息学分析。结果获得了CsRPEF基因的... 目的筛选华支睾吸虫的功能基因并进行相应的生物信息学分析。方法使用PCGENE软件、Antheprot-5软件、ExPASy在线分析工具、NCBI上的Blastx程序进行华支睾吸虫RNA聚合酶Ⅱ延长因子(CsRPEF)基因的生物信息学分析。结果获得了CsRPEF基因的序列特征,推测到了CsRPEF的同源蛋白并预测出CsRPEF编码蛋白的分子量、等电点、柔曲性、疏水性、功能性位点等二级结构特征。结论华支睾吸虫成虫CsRPEF基因是一新筛选的功能基因,CsRPEF蛋白是可能参与华支睾吸虫基因转录途径的重要因子。CsRPEF基因的生物信息学分析可为其进一步进行生物学功能的实验研究奠定基础。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 华支睾吸虫rna聚合Ⅱ延长因子基因 生物信息学分析
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A new method for improving the accuracy of miRNA detection with NaYF4:Yb,Er upconversion nanoparticles
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作者 Lanlan Mao Zhuoxuan Lu +3 位作者 Nongyue He Liming Zhang Yan Deng Deming Duan 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第1期157-162,共6页
MicroRNAs(miRNAs)are small noncoding RNAs,which play a central role in gene expression regulation and have been considered as excellent biomarker candidates for clinical diagnosis and prognosis.So far,many miRNAs dete... MicroRNAs(miRNAs)are small noncoding RNAs,which play a central role in gene expression regulation and have been considered as excellent biomarker candidates for clinical diagnosis and prognosis.So far,many miRNAs detection methods require polymerase chain reaction(PCR)amplification following reverse transcription of miRNAs.These processes are complicated and time-consuming.In this work,we have developed a simpler method for miRNA detection based on base stacking hybridization happening on the surface of NaYF_4:Yb,Er upconversion nanoparticles.In this method,the fluorescence of NaYF_4:Yb,Er upconversion nanoparticles were functionalized as a reference standard,which can improve the accuracy of miRNA detection.On the basis of these findings,we suggest this novel approach for miRNA detection could be applied as an accurate and specific technique for miRNAs detection. 展开更多
关键词 micrornas detection NaYF4:Yb Er reference standard base stacking hybridization
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食品中伯克霍尔德菌属快速鉴定及耐药性分析
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作者 肖桃 雷高鹏 +3 位作者 吕虹 梁倩 杨小蓉 黄伟峰 《疾病监测》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期91-96,共6页
目的探究伯克霍尔德菌属快速鉴定方法,以及食品中伯克霍尔德菌属的分布特点及耐药现状。方法依据模式菌株的RNA聚合酶β亚基编码基因(rpoB)序列设计引物,扩增食品分离株的rpoB序列,构建基于rpoB的系统发育树。同时利用基质辅助激光解吸... 目的探究伯克霍尔德菌属快速鉴定方法,以及食品中伯克霍尔德菌属的分布特点及耐药现状。方法依据模式菌株的RNA聚合酶β亚基编码基因(rpoB)序列设计引物,扩增食品分离株的rpoB序列,构建基于rpoB的系统发育树。同时利用基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对食品分离株进行快速鉴定。利用微量肉汤稀释法对食品分离株进行耐药表型检测。结果在种水平,rpoB与基因组鉴定一致率可达100.00%。而MALDI-TOF MS的鉴定准确性为73.47%(36/49),洋葱伯克霍尔德菌复合群(Bcc)存在种间误判的情况。食品分离的Bcc菌株对大多数抗生素的最小抑菌浓度(MIC)远高于B.gladioli,但对头孢他啶的MIC却相反。结论可利用MALDI-TOF MS在属水平对伯克霍尔德菌属进行快速准确的鉴定,再利用rpoB鉴定到种。食品中检出耐多药的伯克霍尔德菌高致病种,提示应加强对食品中伯克霍尔德菌属的监测。 展开更多
关键词 伯克霍尔德菌属 洋葱伯克霍尔德菌复合群 rna聚合β亚基编码基因 型(株)基因组服务器 基质辅助激光解吸飞行时间质谱
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Histone variants: the artists of eukaryotic chromatin 被引量:4
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作者 LI Min FANG YuDa 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2015年第3期232-239,共8页
The eukaryotic genome is packaged into a complex nucleoprotein structure named chromatin, balancing the compactness of genome and the accessibility of regulatory proteins and RNA polymerases to DNA. The mechanisms of ... The eukaryotic genome is packaged into a complex nucleoprotein structure named chromatin, balancing the compactness of genome and the accessibility of regulatory proteins and RNA polymerases to DNA. The mechanisms of the regulation of chromatin dynamics include the post-translational modification of histones, alteration of nucleosome positions by chromatin remodelers, replacement of canonical histones by histone variants with the aid of histone chaperones, and dynamic organization of the three-dimensional genome in the small nucleus. Histone variants are different from canonical histones by substitution of several amino acid residues or changes in amino acid sequence. Histone variants perform specialized functions such as altering nucleosome stability, dynamics, structure, as well as playing critical roles in a range of biological processes like transcriptional regulation, DNA repair and recombination, development and immune responses. Here we discuss how histone variants, their modification and specific loading to chromatin are involved in transcriptional regulation, DNA repair and plant development. 展开更多
关键词 histone variants histone modification gene regulation DNA repair stress responsiveness
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非小细胞肺癌中Brf1表达与预后的相关性
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作者 吕昊 易云峰 +4 位作者 宋志明 陈检明 焦昌结 陈松林 钟叔平 《中华胸心血管外科杂志》 CSCD 北大核心 2019年第8期489-493,共5页
目的研究转录因子ⅡB相关因子1(TFⅡB-related factor 1,Brf1)的表达与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)预后的关系。方法收集2013年1月至2015年8月我院收治的96例NSCLC患者手术标本和病例资料。首先通过Western blot和R... 目的研究转录因子ⅡB相关因子1(TFⅡB-related factor 1,Brf1)的表达与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)预后的关系。方法收集2013年1月至2015年8月我院收治的96例NSCLC患者手术标本和病例资料。首先通过Western blot和RT-qPCR比较Brf1在NSCLC组织和癌旁肺组织中的表达情况。应用免疫组化法检测Brf1在NSCLC组织中的表达,分析Brf1表达水平与临床病例特征的关系。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,进行Log-rank检验单因素分析和Cox回归模型多因素分析。结果Western blot及RT-qPCR结果显示Brf1在NSCLC组织中的表达明显高于癌旁肺组织(P<0.01)。96例NSCLC组织中Brf1阳性表达率为72.9%。Brf1表达强度在低分化组中强于中-高分化组(秩均值62.33>43.89,Z=-2.914,P=0.004),有淋巴结转移组强于无转移组(秩均值60.34>42.58,Z=-3.055,P=0.002),与患者性别、年龄、吸烟情况、肿瘤大小、TNM分期和病理类型无关(P>0.05)。通过Log-rank检验进行单因素生存分析,Brf1阳性表达组生存率较阴性组低(χ^2=7.560,P<0.01)。Cox回归模型多因素分析发现,Brf1阳性表达(HR=2.043,95%CI:1.082~3.860)是影响NSCLC患者预后的一个独立观察指标。结论Brf1在NSCLC组织中存在过表达,且Brf1阴性表达者具有较好的临床预后,提示Brf1可能成为NSCLC恶性程度判定和预后评估指标之一。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 转录因子ⅡB相关因子1 rna聚合Ⅲ依赖基因 预后
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Plutella xylostella granulovirus late gene promoter activity in the context of the Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus genome
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作者 He-Lin Ren Yuan Hu +1 位作者 Ya-Jun Guo Lu-Lin Li 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2016年第3期229-239,共11页
Within Baculoviridae, little is known about the molecular mechanisms of replication in betabaculoviruses, despite extensive studies in alphabaculoviruses. In this study, the promoters of nine late genes of the betabac... Within Baculoviridae, little is known about the molecular mechanisms of replication in betabaculoviruses, despite extensive studies in alphabaculoviruses. In this study, the promoters of nine late genes of the betabaculovirus Plutella xylostella granulovirus(Plxy GV) were cloned into a transient expression vector and the alphabaculovirus Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus(Ac MNPV) genome, and compared with homologous late gene promoters of Ac MNPV in Sf9 cells. In transient expression assays, all Plxy GV late promoters were activated in cells transfected with the individual reporter plasmids together with an Ac MNPV bacmid. In infected cells, reporter gene expression levels with the promoters of Plxy GV e18 and Ac MNPV vp39 and gp41 were significantly higher than those of the corresponding Ac MNPV or Plxy GV promoters,which had fewer late promoter motifs. Observed expression levels were lower for the Plxy GV p6.9,pk1, gran, p10 a, and p10 b promoters than for the corresponding Ac MNPV promoters, despite equal numbers of late promoter motifs, indicating that species-specific elements contained in some late promoters were favored by the native viral RNA polymerases for optimal transcription. The 8-nt sequence TAAATAAG encompassing the ATAAG motif was conserved in the Ac MNPV polh, p10,and pk1 promoters. The 5-nt sequence CAATT located 4 or 5 nt upstream of the T/ATAAG motif was conserved in the promoters of Plxy GV gran, p10 c, and pk1. The results of this study demonstrated that Plxy GV late gene promoters could be effectively activated by the RNA polymerase from Ac MNPV, implying that late gene expression systems are regulated by similar mechanisms in alphabaculoviruses and betabaculoviruses. 展开更多
关键词 Plutella xylostella granulovirus(PlxyGV) Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus(AcMNPV) late gene expression
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The nucleocapsid of vesicular stomatitis virus 被引量:2
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作者 LUO Ming 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2012年第4期291-300,共10页
The nucleocapsid of vesicular stomatitis virus serves as the genomic template for transcription and replication. The viral genomic RNA is sequestered in the nucleocapsid in every step of the virus replication cycle. T... The nucleocapsid of vesicular stomatitis virus serves as the genomic template for transcription and replication. The viral genomic RNA is sequestered in the nucleocapsid in every step of the virus replication cycle. The structure of the nucleocapsid and the entire virion revealed how the viral genomic RNA is encapsidated and packaged in the virus. A unique mechanism for viral RNA synthesis is derived from the structure of the nuleocapsid and its interactions with the viral RNA-dependent RNA polymerase. 展开更多
关键词 rna cavity cross-molecular interactions rna access phosphoprotein binding to the nucleocapsid bullet-shaped vi-rion
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