RNA诱导沉默复合体中的生物大分子及其装配

在RNA干扰机制中,双链RNA诱导同源RNA降解的过程依赖于RNA诱导沉默复合体(RISC)的活性。RISC由Dicer酶,Argonaute蛋白,siRNA等多种生物大分子装配而成,对这些大分子的结构和功能进行深入细致的研究,有助于进一步了解RISC的形成过程、作用方式,以及阐明整个RNAi过程的作用机制。研究表明,RISC中的Dicer具有RNaseIII结构域,在RNAi的起始阶段负责催化siRNA的产生,在RISC装配过程中起稳定RISC中间体结构和功能的作用;Argonaute蛋白是RISC中的核心蛋白,有PAZ和PIWI两个主要的结构域,前者为siRNA的传递提供结合位点,后者是RISC中的酶切割活性中心;siRNA是RISC完成特异性切割作用的向导,在成熟的RISC中虽然只包含siRNA的一条链,但siRNA在RISC形成过程中的双链结构是保证RNAi效应的决定因素。尽管RISC中还存在其他一些功能未知的蛋白质,但在RISC组分结构及功能研究方面取得的进展为建立一个可能的RISC装配模型提供了理论基础。

阿格蛋白2:RNA诱导基因沉默复合物的切片机

RNA干扰是生物体基因表达调节的一种重要方式,由RNA诱导的基因沉默复合物(RISC)来介导完成,这个复合物中除了微小RNA外,最新研究表明阿格蛋白2是其中的主要应答元件,它本身具有核酸内切酶活性,可以有效启动mRNA的剪切反应而实现对基因表达的调节,这个进展使我们对RNA干扰过程有了更为详尽的理解。

非编码RNA和RNA沉默

生物体内存在大量的非编码RNA ,它们形态各异 ,功能也千差万别 ,在生物的生长、发育、分化进程中扮演着不同的角色 ,尤其是siRNA ,它是RNA沉默的诱因。RNA沉默是真核生物特有的现象 ,它需要一系列因子的参与 ,其中RNA依赖性的RNA聚合酶是沉默起始的关键 ,Dicer酶是形成siRNA的基础 ,而RNA沉默诱导复合体 (RSIC)等是发生RNA沉默“链式反应”

RNA沉默拮抗类病毒

RNA沉默在植物对抗外源性病源入侵,尤其是病毒入侵的过程中具有重要作用,当外源RNA或病毒进入植物细胞时,RNA沉默被激活,从而把外源病原性RNA和病毒等对细胞的影响降到最低程度。类病毒这种非编码RNA由于其特殊的结构,为研究RNA沉默和非编码RNA在植物中的互作提供了绝佳的模型。

RNA干扰作用(RNAi)研究进展

RNA干扰作用 (RNAi)是生物界一种古老而且进化上高度保守的现象 ,是基因转录后沉默作用 (PTGS)的重要机制之一 .RNAi主要通过dsRNA被核酸酶切割成 2 1～ 2 5nt的干扰性小RNA即siRNA ,由siRNA介导识别并靶向切割同源性靶mRNA分子而实现 .RNAi要有多种蛋白因子以及ATP参与 ,而且具有生物催化反应特征 .RNAi是新发现的一种通过dsRNA介导的特异性高效抑制基因表达途径 。

RNA干扰机制研究进展

RNAi是多种生物体内由dsRNA介导的同源mRNA降解现象。这是一个高度特异化的过程,涉及多种蛋白质的共同参与。在这一过程中,siRNA的结构影响其两条链装配到RISC中去的能力。除了与RISC结合外,siRNA还引导了RITS复合物结合到同源染色质,介导异染色质化过程。干扰效应的扩散,即系统性沉默可能依赖于跨膜蛋白的转运,并且很可能是在多因素调控下完成的。

microRNA的研究进展

在多细胞生物的基因组中都存在一类非编码RNA基因,能够产生长度约为22个核苷酸的小分子RNA,称为mi鄄croRNA(miRNA),具有调节其他基因表达活性的功能。miRNA的发现,为我们理解复杂的基因调节网络开辟了新的空间。本文概述了miRNA的产生过程、转录抑制机理、研究并预测miRNA的方法等。

微小RNA调控靶基因作用机制的研究进展

微小RNA是一类通过转录后调控机制对基因进行调控的非编码的短链RNA。研究发现微小RNA的功能涉及多种生物学过程,与肿瘤的发生、发展和多种疾病密切相关。本文就微小RNA形成过程及对靶基因调控机制的研究进展作一综述。

微小RNA与人类疾病的研究进展

微小RNA（miRNA）是一类长约22nt的非蛋白编码RNA家族，它通过切割mRNA或者抑制翻译两种作用机制调控动植物生长发育。大量研究表明miRNA与人类疾病密切相关，其在肿瘤、心脏病、糖尿病和艾滋病等多种疾病中都起着重要作用。miRNA的深入研究，将有助于对生物体各种生理、病理机制的理解，并最终可能为疾病诊断和治疗提供新的思路和理论基础。

人Argonaute2蛋白多克隆抗体制备及初步应用

目的:制备人Argonaute2(Ago2)的多克隆抗体,鉴定其特异性,并应用该抗体检测Ago2在人各细胞系中的表达差异及细胞定位。方法:用DNAstar软件寻找抗原性高的Ago2序列区域(命名为k-Ago2),构建k-Ago2的表达质粒,转化大肠杆菌并诱导表达。融合蛋白经切胶回收纯化后免疫大白兔制备抗体。以ELISA检测抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性及检测Ago2在细胞系中的表达差异,免疫荧光染色观察Ago2的细胞定位。结果:成功构建表达质粒,继而k-Ago2得以表达与纯化,免疫大白兔后得到Ago2多克隆抗体。ELISA检测抗体效价为1∶19 000,Western blot确定抗体具有高度特异性,并成功地用该抗体检测到Ago2在人各细胞系中的表达差异及细胞定位。结论:Ago2多克隆抗体的成功制备,对RNAi机制的深入研究及其进一步的临床应用均具有重要价值。

miRNA:一种新的基因调控元件

miRNA(microRNA)是一类长约22个核苷酸的小分子非编码RNA。近年来,科学家发现miRNA与基因表达调控密切相关,miRNA可通过与靶mRNA特异性的碱基配对,引起靶mRNA的降解,抑制其翻译,或以其它形式的调节机制抑制靶基因的表达。本文概述了miRNA特点、生物合成过程、功能以及作用机制。

RNA干扰及其在动物传染病预防上的应用

RNA干扰技术是近几年发展起来的分子生物学新技术,广泛应用于基因功能研究和人畜疾病预防。在RNaseⅢ的协助下,siRNA能够结合并切断相应基因的mRNA,从而阻断基因的表达。siRNA可以是人工体外合成,也可以是转染到细胞内的重组载体转录产生。对碱基上某些基团的取代会影响到siRNA的干扰活性及其对RNA酶的耐受性。由于siRNA只有不到30个碱基的长度,很容易在病毒的不同亚型和变异株之间找到保守序列,且应用后能快速产生抗病毒作用,这是疫苗和抗病毒药物不具备的优点。

RNA干扰及其应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)现象存在的广泛性远远超过人们的预期。研究表明RNAi具有特异性和高效性,已经成为研究基因功能的重要工具。文章阐明了RNAi的作用机制及其在基因治疗、药物筛选、研究信号传导通路等方面的重要应用价值,并对RNAi技术及应用研究进行了展望。

miRNA及其在医药领域应用的研究进展

miRNAs（MicroRNAs）是一类内生性、序列结构进化上高度保守、长度为20～23nt（核苷酸）的非编码性质单链小分子RNA，广泛存在于真核生物。miRNA在生命活动中具有必不可少的调节作用，主要包括个体时序性发育、细胞增值、分化、凋亡、器官发育、脂肪代谢、激素分泌、神经系统发育，并与肿瘤产生等密切相关。本综述主要涉及miRNA结构特征、分子生物学功能、生物合成过程及其在疾病治疗、新药研发等相关领域的研究进展。

RNA干扰及其应用综述

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是真核生物中普遍存在的一种自然现象,是由双链RNA (double-stranded RNA,dsRNA)启动的序列特异的转录后基因沉默过程。在这一过程中,双链RNA被核酸内切酶切割成小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),小干扰RNA与相关的蛋白质结合成RNA 诱导沉默复合体(siRNA-induced silencing complex,RISC),RISC识别并降解靶mRNA。现在认为RNA 干扰是真核生物共有的抗病毒、抗转座子、抗转基因和抗异常RNA的基因组免疫系统。随着RNA干扰的研究,产生了一种新的技术——RNA干扰技术,并得到了广泛的应用。

siRNA诱导基因沉默复合物(RISC)的研究

自RNA干扰现象发现以来,科研人员对RNA干扰的作用机制进行了深入的研究,可简单描述为dsRNA被Dicer酶切割成小分子siRNA,siRNA由RLC呈递,Hsp90/Hsp70协助装载入Ago蛋白,形成pre-RISC。装载后的siRNA解链,正义链被降解,pre-RISC活化为成熟的RISC,由反义链引导其靶向降解目的RNA。本综述对近年来RISC的组装,活化过程及其重要组分的结构功能的研究进展进行综述。