非酒精性脂肪性肝炎患者血清前神经降压素和微小RNA-122水平变化及其诊断脂肪性肝炎的价值探讨

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清脂肪细胞因子前神经降压素(Pro-NT)和微小RNA-122(miRNA-122)水平变化及其诊断非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的潜在价值。方法2017年1月~2022年6月我院诊治的NAFLD患者159例和同期入院体检的健康人90例,行腹部超声检查,采用ELISA法检测血清Pro-NT水平,采用RT-PCR法检测血清miRNA-122。对NAFLD患者行肝活检检查,确定NASH诊断。应用受试者工作特征曲线(ROC)并计算曲线下面积(AUC)评估指标诊断的敏感度和特异度。结果在159例NAFLD患者中,经肝活检检查诊断NASH患者49例和单纯性脂肪肝110例;NASH患者BMI为(28.4±1.2)kg/m^(2),显著大于NAFLD患者【(27.3±1.4)kg/m^(2),P<0.05】;NASH患者血清ALT、AST、空腹血糖(FBG)、胰岛素、HOMA-IR和尿酸水平分别为62(48,96)U/L、56(47,85)U/L、(5.9±0.6)mmol/L、10.2(8.8,13.4)μU/mL、2.6(1.8,3.4)和496(392,515)μmol/L,均显著高于NAFLD患者38(25,53)U/L、32(21,49)U/L、(5.3±0.6)mmol/L、9.0(7.2,12.6)μU/mL、2.2(1.3,2.7)和446(351,495)μmol/L,P<0.05;血清Pro-NT和miRNA-122分别为167(148.4,186.9)pmol/L和8.2(2.0,29.3),显著高于NAFLD患者【分别为82(53.0,100.4)pmol/L和2.2(1.4,10.6),P<0.05】;NAFLD患者上述指标又显著高于健康人(P<0.05);分别以血清Pro-NT≥112 pmol/L和miRNA-122≥7.08为截断点,结果Pro-NT诊断NASH的AUC为0.824,灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为80.0%、80.0%、84.9%和82.3%,经Delong法检验,显著优于miRNA-122诊断(分别为0.637、56.0%、70.0%、76.5%和56.8%,P<0.05)。结论应用血清Pro-NT水平在NAFLD患者中初筛NASH可能有一定的临床价值,值得进一步研究。

microRNA-122与非酒精性脂肪性肝病研究进展

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)作为一种代谢性肝脏病变,其主要病理学表现为肝细胞内过量脂肪积聚[1,2]。NAFLD可由单纯性脂肪肝逐步演化为非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH),继而导致肝脏纤维化,甚至肝硬化,这一进展显著增加了NAFLD患者发展为终末期肝病的风险[3]。近20年来,NAFLD发病率显著上升,尤其在西方,患病比例达到人口的三分之一[4]。NAFLD的发生与超重、肥胖、胰岛素抵抗和高脂血症紧密关联,并增加了心血管、内分泌和消化系统疾病的发生风险[5]。微小RNA(microRNA,miRNA)是一类在进化上高度保守、内源性的单链非编码RNA分子。

微小RNA-122、HOMA-IR水平的表达与妊娠期糖尿病及妊娠结局的关系

目的:探讨微小核糖核酸-122(MicroRNA-122,mi R-122)、胰岛素抵抗指数(Insulin Resistance of Homeostasis Model Assessment,HOMA-IR)水平的表达与妊娠期糖尿病(Gestational Diabetes Mellitus,GDM)及妊娠结局的关系。方法:选取孕24~32周GDM孕妇52例作为观察组,口服葡萄糖耐量试验(Oral Glucose Tolerance Test,OGTT)正常的孕24~32周孕妇45例作为对照组,比较两组糖代谢指标、HOMA-IR水平及血清和胎盘中mi R-122水平;根据GDM患者妊娠结局(若出现流产、早产、巨大儿、死胎、死产、胎儿畸形、新生儿呼吸窘迫综合征及新生儿死亡等任一情况均归为不良结局组),将52例GDM患者分为结局良好组34例和不良结局组18例,比较两组上述指标;分析mi R-122水平与HOMA-IR的相关性。结果:两组年龄、分娩孕周、孕次、产次、孕前等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组空腹血糖、胰岛素水平、HOMA-IR及血清和胎盘mi R-122水平均高于对照组(P<0.05)。不良结局组HOMA-IR及血清和胎盘mi R-122表达水平均高于结局良好组(P<0.05)。经Pearson相关分析结果显示,GDM患者血清及胎盘mi R-122水平均与HOMA-IR呈正相关(P<0.05)。结论:GDM患者伴有明显的胰岛素抵抗,mi R-122在GDM患者体内呈高水平表达,且其高水平表达与胰岛素抵抗有关,并可影响妊娠结局,这可能是GMD临床诊断和治疗GMD的潜在靶点。

微RNA-122在原发性肝癌围手术期的表达和预后价值的研究进展

原发性肝癌是临床常见的恶性肿瘤之一,具有预后差、死亡率高等特点。随着研究的深入,临床现已在肝脏疾病的诊断与治疗方面开发了许多新技术。其中微RNA(mi RNA)因其具有高度保守性、时序性、稳定性及组织特异性成为肝脏疾病治疗的新靶点。mi RNA-122是肝脏组织中的特异性mi RNA,可通过调节肝脏细胞中对应靶分子的表达进而抑制原发性肝癌进展。近年来,关于mi RNA-122在原发性肝癌手术中价值的研究也相继展开,并且显示出一定优势,在肝脏手术围手术期监测mi RNA-122对病情评估及预后具有重要价值。本文就mi RNA-122在原发性肝癌围手术期的表达和预后价值展开综述。

微小RNA-122、人去乙酰化酶4、网膜素-1对非酒精性脂肪肝的预测效能研究

目的:探讨肥胖儿童微小RNA-122(miR-122)、人去乙酰化酶4(SIRT4)、网膜素-1(Omentin-1)与肥胖程度关系及对非酒精性脂肪肝(NAFLD)的预测效能。方法:选取2019年8月-2021年6月本院收治的160例肥胖儿童为研究对象,根据其是否发生NAFLD分为NAFLD组58例、非NAFLD组102例。分析两组不同肥胖程度儿童血清miR-122、SIRT4、Omentin-1水平,分析其与肥胖程度、临床指标[尿酸、腰围、体质量、空腹胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]对NAFLD的预测价值。结果:与非NAFLD组比较,NAFLD组血清miR-122水平升高(P<0.05),SIRT4、Omentin-1水平降低(P<0.05);血清miR-122水平随着肥胖程度增加而升高(P<0.05),SIRT4、Omentin-1水平随着肥胖程度增加而降低(P<0.05);miR-122水平与肥胖程度、尿酸、腰围、体质量、FINS、TG、HOMA-IR呈正相关,与HDL呈负相关(P<0.05);SIRT4、Omentin-1与肥胖程度、尿酸、腰围、体质量、FINS、TG、HOMA-IR呈负相关,与HDL呈正相关(P<0.05);联合预测NAFLD的AUC大于单项预测(P<0.05)。结论:NAFLD儿童血清miR-122水平升高,SIRT4、Omentin-1水平降低,其与肥胖程度、脂质代谢、胰岛素抵抗密切相关,联合检测其水平对肥胖儿童NAFLD的发生具有一定预测价值。

CHB患者血清miRNA-122和miRNA-155检测的价值

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清微小RNA(miRNA)-122和miRNA-155水平与乙型肝炎病毒(HBV)复制情况、抗病毒治疗及耐药基因突变等的关系。方法检测35例CHB患者和24名体检健康者的血清miRNA-122、miRNA-155、HBV DNA载量、乙型肝炎血清学标志物[乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)]、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HBV耐药基因突变、HBV基因型等指标。采用Spearman相关分析评估各项目间的相关性。结果CHB组血清miRNA-122相对表达量明显高于正常对照组(P<0.05),血清miRNA-155表达量明显低于正常对照组(P<0.05)。根据是否使用核苷类药物进行抗病毒治疗将CHB患者分为治疗组(17例)和非治疗组(18例)。Spearman相关分析结果显示,非治疗组血清miRNA-122相对表达量与乙型肝炎血清学标志物模式呈正相关(r=0.73,P=0.00),与HBV DNA载量及HBsAg、HBeAg、ALT水平均呈正相关(r值分别为0.69、0.74、0.53、0.48,P<0.05),与年龄呈负相关(r=-0.58,P=0.01)。治疗组血清miRNA-122相对表达量与HBsAg水平呈正相关(r=0.54,P<0.05),血清miRNA-155相对表达量与HBV DNA载量呈负相关(r=-0.54,P<0.05)。根据是否检测到HBV DNA将治疗组CHB患者分为HBV DNA阴性组和HBV DNA阳性组,HBV DNA阳性组血清miRNA-155相对表达量明显低于HBV DNA阴性组(P<0.05)。结论CHB患者血清miRNA-122与乙型肝炎相关指标HBV DNA、HBsAg、HBeAg、ALT密切相关,或可用于评价HBV复制情况和CHB的严重程度;血清miRNA-155与HBV DNA载量密切相关,或可用于预测和评价CHB的疗效。

血清MicroRNA-122作为脓毒症诊断特异性标志物的研究

目的观察脓毒症患者血清中miRNA-122的表达量在病程中的动态变化情况,并探讨其与脓毒症严重程度的关系。方法选择52例脓毒症患者,其中一般脓毒症23例,重症脓毒症29例,23例健康人作为对照。采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测研究对象在入组第1,3,5,7,10,14天血清中miRNA-122表达量,并记录患者的基本临床信息。结果在脓毒症患者入组后14d的病程中,52例脓毒症患者和23例健康人群血清中的miRNA-122表达量在每个时间点比较,前者均比后者显著下降(P<0.01)。用入组第1天的miRNA表达量做ROC诊断分析得出,miRNA-122诊断脓毒症的特异性是95.7%,敏感性是53.8%。重症脓毒症组的血清miRNA-122表达量水平高于一般脓毒症组,并且在各个观测时间点两组表达量具有统计学差异(P<0.01)。结论血清中miRNA-122可能作为脓毒症诊断的特异性标志物,具有潜在的临床价值,并且miRNA-122在预警脓毒症患者疾病严重程度方面具有积极的临床意义。

血清微小RNA-122及半乳糖凝集素3与2型糖尿病患者合并冠心病的关系

目的探讨血清微小RNA-122(miR-122)、半乳糖凝集素3(Gal-3)与2型糖尿病患者合并冠心病(冠状动脉粥样硬化性心脏病)的关系。方法选取2018年2月至2020年8月昆明医科大学第一附属医院收治的193例2型糖尿病患者,包括79例合并冠心病(合并冠心病组)、114例未合并冠心病(未合并冠心病组)。另选取同期50例健康志愿者为对照组。收集受试者的临床资料,检测血清miR-122、Gal-3水平,分析miR-122、Gal-3与2型糖尿病合并冠心病的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-122、Gal-3及二者联合诊断2型糖尿病合并冠心病的价值。结果合并冠心病组、未合并冠心病组体重指数、吸烟史比例、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖、空腹胰岛素、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇水平均低于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。合并冠心病组体重指数、2型糖尿病病程、吸烟史比例、高脂血症比例、LDL-C、HOMA-IR水平均高于未合并冠心病组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。合并冠心病组、未合并冠心病组血清miR-122、Gal-3水平均高于对照组[(8.1±2.3)、(4.2±1.4)比(1.0±0.6),(56.4±6.4)、(26.4±4.2) ng/L比(8.2±2.0) ng/L],且合并冠心病组均高于未合并冠心病组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。多因素Logistic回归分析显示,高LDL-C、miR-122、Gal-3水平均为2型糖尿病合并冠心病的独立危险因素(均P <0.05)。ROC曲线显示联合检测miR-122、Gal-3预测2型糖尿病合并冠心病的曲线下面积高于miR-122、Gal-3单独检测[0.885 (95%置信区间:0.830~0.940)比0.747 (95%置信区间:0.674~0.821)、0.740(95%置信区间:0.665~0.815)](Z=2.423、2.419,均P <0.05)。联合检测miR-122、Gal-3诊断2型糖尿病合并冠心病的敏感度、特异度、约登指数均高于单独检测miR-122、Gal-3。结论血清miR-122、Gal-3水平升高是2型糖尿病合并冠心病的独立危险因素,可为2型糖尿病患者心血管疾病风险评估提供依据。

miRNA-122与丙肝病毒感染及肝癌关系的研究进展

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）感染机体后易发展为肝炎、肝硬化及肝癌。目前，传统治疗方法为聚乙二醇干扰素联合利巴韦林，其效果不佳且副作用大，而新型直接抗病毒药物价格昂贵。因此，寻求廉价而无毒副作用的抗 HCV感染治疗方法是目前研究的重点。越来越多的证据表明，微小核糖核酸（micro-ribose nucleic acid，miRNAs）在肝脏疾病发展、肝细胞再生和功能调节等方面发挥着重要的作用。该文就miR-122与丙肝病毒感染及肝癌关系的研究现状作一综述。

MiRNA-122对5-氟尿嘧啶诱导BEL-7402/5-FU细胞凋亡的影响

目的探讨微水RNA-122(miR-122)对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导BEL-7402/5-FU细胞凋亡的影响。方法构建miR-122和阴性对照质粒瞬时转染至BEL-7402/5-FU细胞;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测caspase-8,caspase-9和caspase-3蛋白表达水平。结果仅用miR-122处理BEL-7402/5-FU细胞时,与未转染组和转染对照组比较,miRNA-122转染组细胞凋亡率增加,用10μmol/m L 5-FU作用BEL-7402/5-FU细胞24 h后,与未转染组和转染对照组比较,miR-122转染组细胞凋亡率明显增加;与未转染组和转染对照组比较,转染了miRNA-122的BEL-7402/5-FU细胞中caspase-8、caspase-9和caspase-3前体蛋白表达降低,活化的caspase-8、caspase-9和caspase-3蛋白表达升高。结论 miR-122能够下调BEL-7402/5-FU细胞中caspase-8、caspase-9和caspase-3前体蛋白表达,上调活化的caspase-8、caspase-9和caspase-3蛋白表达,miR-122能促进5-FU诱导的BEL-7402/5-FU细胞凋亡。

白藜芦醇通过miRNA-122调节神经酰胺水平而治疗非酒精性脂肪肝

目的:探讨白藜芦醇通过微小RNA(miRNA)-122调节神经酰胺水平从而治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法:高脂高胆固醇饲料喂养C57BL/6J小鼠建立非酒精性脂肪肝模型,实验分为正常对照(control)组、模型(model)组及白藜芦醇80 mg/kg和160 mg/kg给药组,给药4周后检测血清中总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量,收集肝脏,行HE染色观察肝脏脂质浸润情况,检测肝组织神经酰胺水平,real-time PCR检测miRNA-122含量,Western blot检测肝组织中丝氨酸棕榈酰转移酶(SPT)水平。人肝癌Hep G2细胞含10%小牛血清的RPMI-1640培养基培养,实验分为正常对照组、模型(油酸诱导)组、模型+白藜芦醇给药组、miRNA-122 siRNA组及白藜芦醇和miRNA-122 siRNA联合给药组,除正常对照组外,各组细胞均同时给予油酸刺激或药物持续孵育24 h,检测细胞匀浆中TC和TG含量、miRNA-122及神经酰胺水平,Western blot法检测各组肝细胞中SPT水平。结果:白藜芦醇低、高剂量组均能显著降低非酒精性脂肪肝小鼠血清TC和TG水平,改善肝组织细胞中脂质浸润情况,减少miRNA-122表达,同时降低肝组织神经酰胺水平及SPT蛋白表达。细胞实验结果显示,与正常对照组相比,油酸诱导脂质沉积模型组及miRNA-122 siRNA组细胞内TC和TG含量均显著增加,神经酰胺及SPT水平亦显著上升;白藜芦醇给药干预能降低油酸诱导模型组细胞中TC和TG含量、神经酰胺水平及SPT蛋白表达;与miRNA-122 siRNA组相比,白藜芦醇与miRNA-122 siRNA共孵育组TC和TG含量、神经酰胺水平及SPT蛋白水平有所降低,但作用有限。结论:白藜芦醇能够显著减少整体及细胞水平非酒精性脂肪肝模型肝细胞中脂质堆积,其机制可能是白藜芦醇通过上调miRNA-122水平、下调SPT蛋白水平而减少肝细胞中神经酰胺水平,从而达到治疗非酒精性脂肪肝的作用。

己酮可可碱调节微RNA-122和过氧化物酶体增殖物激活受体α减轻酒精性肝炎大鼠肝损伤

目的探讨己酮可可碱(PTX)对大鼠酒精性肝炎(AH)的治疗作用及其可能的机制。方法将30只Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组(对照组)、AH模型组(模型组)、PTX组,每组各10只。模型组和PTX组采用乙醇阶梯灌胃的方式造模,对照组给予等体积的0.9%氯化钠溶液灌胃;从第9周起PTX组加用PTX 9 mg/(kg·d)灌胃,对照组和模型组则给予等体积的0.9%氯化钠溶液灌胃,共造模12周。造模结束后观察大鼠的一般情况,测定其体重、肝重、肝指数,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)和白蛋白水平,采用H-E染色对比各组大鼠肝脏组织病理学状态,实时PCR检测大鼠肝组织微RNA(miRNA)-122的转录水平,Western印迹法测定大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)蛋白质表达情况。结果①模型组和PTX组大鼠体重均显著低于对照组(P值均<0.01),PTX组大鼠体重显著高于模型组(P<0.01)。②模型组和PTX组大鼠肝重、肝指数均显著高于对照组(P值均<0.01),PTX组大鼠肝重、肝指数均显著低于模型组(P值均<0.01)。③模型组和PTX组的血清ALT、AST、GGT水平均高于对照组(P值均<0.05),白蛋白水平均显著低于对照组(P值均<0.05);而PTX组的血清ALT、AST、GGT水平均显著低于模型组(P值均<0.05),白蛋白水平显著高于模型组(P<0.05)。④模型组和PTX组均存在不同程度的脂肪变性和炎性细胞浸润,但PTX组脂肪变性和炎性细胞浸润程度较模型组有不同程度的减轻。⑤模型组和PTX组的miRNA-122表达均较对照组显著上调(P值分别为<0.01、0.05),PTX组miRNA-122表达显著低于模型组(P<0.01)。⑥模型组和PTX组PPAR-α表达均显著低于对照组(P值均<0.01),PTX组肝组织PPAR-α蛋白质相对表达量显著高于模型组(P<0.01)。结论 PTX可能是通过下调miRNA-122和上调其靶基因PPAR-α的表达对AH大鼠肝损伤产生一定的治疗作用。

微小RNA-122在人乳腺癌组织中的表达及对体外培养人乳腺癌细胞他莫昔芬耐药的影响

目的探讨微小RNA-122(miR-122)在人乳腺癌组织中的表达及对体外培养人乳腺癌细胞他莫昔芬耐药的影响。方法收集2015年1-6月河北省保定市第二中心医院行乳腺切除术的56例Luminal型乳腺癌患者的肿瘤组织及癌旁组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)法检测miR-122表达量。所有患者规范口服他莫昔芬3年,按照实体瘤疗效评价标准划分为他莫昔芬敏感者和他莫昔芬耐药者。体外培养人乳腺癌细胞株MCF-7,他莫昔芬长期浓度梯度递增法体外建立MCF-7TamR耐药细胞株;转染miR-122抑制剂(抑制剂组),采用噻唑蓝(MTT)法检测他莫昔芬对MCF-7细胞、MCF-7TamR细胞以及抑制剂组MCF-7TamR细胞增殖活性的影响。采用q PCR法检测雌激素受体α(ER-α)、人类表皮生长因子受体2(HER-2)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3) mRNA表达。采用蛋白质印迹法检测ER-α、HER-2、细胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)、磷酸化ERK-MAPK(p-ERK/MAPK)蛋白表达。结果乳腺癌组织中miR-122相对表达量明显高于癌旁组织[(0. 70±0. 38)比(0. 24±0. 10)],他莫昔芬耐药患者(11例)肿瘤组织中miR-122相对表达量明显高于敏感患者(45例)[(0. 89±0. 13)比(0. 67±0. 15)](均P <0. 001)。体外成功建立MCF-7TamR耐药细胞株,不同浓度他莫昔芬(0. 1、0. 5、2. 5、12. 5、62. 5、312. 5μmol/L)对MCF-7TamR细胞的增殖抑制率分别均明显低于MCF-7细胞(均P <0. 05);MCF-7TamR细胞的耐药指数为4. 97。转染miR-122抑制剂后,抑制剂组MCF-7TamR细胞miR-122表达量为(0. 14±0. 04),明显低于空白对照组[CTL组:(0. 67±0. 09)]和空转染组[NC组:(0. 65±0. 08)](均P <0. 001)。不同浓度他莫昔芬对抑制剂组MCF-7TamR细胞的增殖抑制率明显高于CTL组和NC组(均P <0. 05)。经q PCR法,抑制剂组MCF-7TamR细胞ER-αmRNA表达量为(1. 02±0. 17),明显高于CTL组和NC组;HER-2和MAPK3 mRNA表达量为(0. 37±0. 09)和(0. 25±0. 07),明显低于CTL组和NC组(均P <0. 05)。经蛋白质印迹法,抑制剂组MCF-7TamR细胞ER-α蛋白表达量为(0. 91±0. 18),明显高于CTL组和NC组;HER-2和p-ERK/MAPK蛋白表达量为(0. 24±0. 09)和(1. 15±0. 26),明显低于CTL组和NC组(均P <0. 05)。结论乳腺癌组织中miR-122表达增高,下调miR-122可明显逆转乳腺癌MCF-7TamR耐药细胞对他莫昔芬的抗性,并抑制MCF-7TamR细胞增殖,其机制可能与阻断ERK/MAPK信号通路,提高ER表达有关。

miRNA-122在慢性乙型肝炎患者循环血清中的水平表达及与病情程度的相关性分析

目的运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测慢性乙型肝炎(CHB)患者循环血清中miRNA-122水平的相对表达量,分析其在CHB患者循环血清中的表达水平及与HBV DNA载量和CHB患者病情程度的相关性。方法选取2019年3月至2020年3月于我院就诊的100例CHB患者为研究对象,以25例乙肝病毒携带者、30例HBV相关性肝硬化代偿期患者、20例健康体检者为对照组研究对象,所有研究对象均采用qRT-PCR法检测miRNA-122表达水平的相对表达量。结果CHB组患者循环血清中miRNA-122水平的相对表达量较健康体检组过表达,差异有统计学意义(P<0.01);乙肝病毒携带者组血清miRNA-122水平的相对表达量较乙肝肝硬化组比较差异无统计学意义(P>0.05);不同病情程度的CHB患者随病情加重,其miRNA-122水平相对表达量逐渐高表达,较乙肝病毒携带者组比较差异有统计学意义(F=249.25,P<0.01);乙肝携带者组、CHB组及乙肝肝硬化组患者血清中miRNA-122表达水平与HBV DNA载量间均呈正相关系(r=0.323,P=0.031;r=0.484,P=0.000,r=0.179,P=0.033);CHB患者血清中miRNA-122水平的相对表达量较HBsAg、HBeAg水平呈正相关系(r=0.335,P=0.000;r=0.314,P=0.000);CHB患者血清中miRNA-122水平的相对表达量与HBsAb、HBeAb、HBcAb水平比较无相关性(r=0.123,P=0.141;r=0.167,P=0.450;r=0.019,P=0.821);CHB患者血清中miRNA-122的表达水平与TBil、ALT水平呈正相关系(r=0.903,P=0.000;r=0.799,P=0.000)。结论CHB患者血清miRNA-122与HBV DNA载量、TBil、ALT水平关系密切,有助于CHB病情程度判定及抗HBV治疗终点时机选择与病情复发评估的指标之一。

血浆中micro RNA-122表达量与肝癌手术前后肝损伤的相关性

目的研究血浆中micro RNA-122（miR-122）的表达量与肝癌手术前后肝损伤的相关性。方法利用荧光定量检测30名健康人与30例肝癌患者的术前miR-122及丙氨酸氨基转移酶（ALT）的表达量,并进行比较,且检测30例肝癌患者的术前,术后第1、3、7天的血浆中miR-122及ALT,探讨miR-122与ALT的相关性。结果术前肝癌患者血浆中miR-122以及ALT的表达量均显著高于健康人群（P〈0.05）。患者术前,术后第1、3、7天血浆中的miR-122均与ALT呈正相关。结论血浆miR-122与肝切除术肝功能损伤相关,有望成为肝癌肝切除术前后肝功能损伤的检测指标。

环状RNA叉头框蛋白O3靶向微小RNA-122-5p对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨环状RNA叉头框蛋白O3(circFOXO3)靶向微小RNA(miRNA)-122-5p对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响。方法(1)选取38例结直肠癌患者结直肠癌组织、癌旁组织,采用实时定量PCR法检测结直肠癌组织、癌旁组织中circFOXO3、miRNA-122-5p的表达水平,并分析结直肠癌组织中circFOXO3与miRNA-122-5p表达水平的相关性。(2)取人结直肠癌细胞HCT116分为6组并给予相应干预,包括si-NC组(转染si-NC)、si-circFOXO3组(转染si-circFOXO3)、miRNA-NC组(转染miRNA-122-5p-NC)、miRNA-122-5p组(转染miRNA-122-5p模拟物)、si-circFOXO3+抗miRNA-NC组(共转染si-circFOXO3与抗miRNA-122-5p-NC)、si-circFOXO3+抗miRNA-122-5p组(共转染si-circFOXO3与抗miRNA-122-5p)。分别采用细胞计数法、平板克隆形成实验、Transwell小室实验检测人结直肠癌细胞HCT116的增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力,采用蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达水平。(3)通过生物信息学数据库starBase预测circFOXO3的靶基因,通过双荧光素酶报告基因实验检测circFOXO3与miRNA-122-5p的靶向关系。结果(1)与癌旁组织相比,结直肠癌组织中的circFOXO3表达水平升高,miRNA-122-5p表达水平降低,结直肠癌组织中的circFOXO3与miRNA-122-5p表达水平呈负相关(均P<0.05)。(2)与si-NC组比较,si-circFOXO3组的miRNA-122-5p表达水平升高,细胞活力降低,克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平降低(均P<0.05)。与miRNA-NC组比较,miRNA-122-5p组的细胞活力降低,克隆形成数、迁移及侵袭细胞数均减少,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平降低(均P<0.05)。与si-circFOXO3+抗miRNA-NC组比较,si-circFOXO3+抗miRNA-122-5p组的细胞活力升高,克隆形成数、迁移及侵袭细胞数均增多,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平升高(均P<0.05)。(3)circFOXO3与miRNA-122-5p存在结合位点,转染miRNA-122-5p模拟物可明显降低野生型载体WT-circFOXO3的荧光素酶活性(P<0.05),而对突变型载体MUT-circFOXO3的荧光素酶活性无明显影响(P>0.05)。结论干扰circFOXO3的表达可通过靶向调控miRNA-122-5p从而抑制结直肠癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力。

原发性肝细胞癌患者血清中微小RNA-21、微小RNA-122和微小RNA-145的表达及临床意义

目的探讨原发性肝细胞癌(HCC)患者血清中微小RNA-21(miR-21)、微小RNA-122(miR-122)和微小RNA-145(miR-145)的表达及临床意义。方法选择2014年9月至2016年9月铜川矿务局中心医院收治的HCC患者100例为HCC组,并选择体检健康者100例作为对照组。采用实时定量荧光聚合酶链反应检测血清中miR-21、miR-122和miR-145的表达水平,分析miR-21、miR-122和miR-145的表达水平与HCC患者临床特征的关系。结果HCC组患者血清中miR-21、miR-122表达水平显著高于对照组(P<0.05),miR-145表达水平显著低于对照组(P<0.05)。HCC患者血清中miR-21、miR-122和miR-145表达水平与组织分化程度、临床分期、肿瘤大小及肝硬化有显著相关性(P<0.05),与性别、年龄、乙型肝炎病毒抗原、丙型肝炎病毒抗体无显著相关性(P>0.05)。与高分化和中分化程度、临床分期低、肿瘤直径<5 cm和无肝硬化的患者相比,低分化程度、临床分期高、肿瘤直径≥5 cm和有肝硬化的患者血清中miR-21和miR-122表达显著升高,miR-145表达显著降低(P<0.05)。手术后HCC患者血清中miR-21、miR-122表达水平显著低于手术前,miR-145表达水平显著高于手术前(P<0.05)。结论 miR-21和miR-122表达上调及miR-145表达下调可能与HCC的发生、发展有关,联合检测血清中miR-21、miR-122和miR-145表达对HCC的诊断和病情评估具有重要意义。

微小RNA-122a、微小RNA-133a-3P与脓毒症患者严重程度、预后的关系

目的 分析微小RNA(microRNA,miRNA)-122a、miRNA-133a-3P与脓毒症患者严重程度、预后的关系。方法 选取2019年1月至2020年11月在山东第一医科大学附属莱钢医院住院治疗的脓毒症患者80例,采用急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ将患者分为低分组(<15分)15例、中分组(15~20分)41例和高分组(>20分)24例,另选取30例同期健康体检者作为对照组。检测所有受试者血清miRNA-122a、miRNA-133a-3P水平,根据患者的预后情况将其分为存活组(61例)和死亡组(19例),采用受试者工作特征曲线分析miRNA-122a、miRNA-133a-3P水平对脓毒症患者死亡的预测价值。结果 脓毒症患者的血清miRNA-122a、miRNA-133a-3P水平显著高于对照组(P<0.05),且随着脓毒症病情的加重,血清miRNA-122a、miRNA-133a-3P水平逐渐升高(P<0.05);死亡组血清miRNA-122a、miRNA-133a-3P水平显著高于存活组(P<0.05);受试者工作特征曲线显示,miRNA-122a联合miRNA-133a-3P检测对脓毒症患者的死亡预测价值最高(受试者工作特征曲线下面积0.901,特异度0.900,敏感度0.933,95%CI 0.822~0.980)。结论 脓毒症患者血清miRNA-122a、miRNA-133a-3P水平与病情严重程度相关,可能是脓毒症患者病情、预后潜在预测标志物。

胆石症患者血清微小RNA-122、高迁移率族蛋白1和角蛋白-18水平及其临床意义

目的探讨胆石症患者血清微小RNA-122(miR-122)、高迁移率族蛋白1(HMGB 1)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶裂解角蛋白-18(CCK-18)水平变化及其临床意义。方法 2015年1月～2018年2月我院收治的201例胆石症患者和健康体检者103例,比较两组人群血清miR-122、HMGB 1和CCK-18水平差异。采用Logistic回归分析影响单纯性胆石症进展为复杂性胆石症的相关因素。采用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分析血清指标诊断复杂性胆石症的效能。结果胆石症患者血清miR-122、HMGB 1和CCK-18水平分别为4.7(0.9,14.3)、(2.5±0.7) ng/mL和(126.8±20.5)U/L,显著高于健康人【0.9(0.4,3.1)、(2.1±0.4) ng/mL和(101.4±18.7) U/L,均P<0.05】;97例单纯性胆石症组血清miR-122、HMGB 1和CCK-18分别为3.5(0.7,8.5)、(2.2±0.5)ng/m L和(112.4±19.4)U/L,显著低于104例复杂性胆石症组【分别为5.8(0.9,16.2)、(2.8±0.8) ng/m L和(140.2±23.5) U/L,均P<0.05】;单因素和多因素Logistic回归分析显示,肝硬化、腹腔积液、血清miR-122、HMGB 1和CCK-18为单纯性胆石症进展为复杂性胆石症的危险因素;血清miR-122、HMGB 1和CCK-18水平三者联合检测诊断复杂性胆石症的AUC为0.819(0.758～0.962),显著高于miR-122【0.724(0.657～0.815)】、HMGB 1【0.701(0.633～0.804)或CCK-18【0.767(0.702～0.873)】单指标检测。结论对血清miR-122、HMGB 1和CCK-18水平升高的胆石症患者,应想到复杂性胆石症的可能,而给予更仔细的检查和特别处理。

微小RNA-122降低乳腺癌细胞Warburg效应抑制其增殖、侵袭的作用机制研究

目的研究微小RNA-122(miRNA-122)通过降低Warburg效应抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭的机制。方法荧光素酶报告基因验证miRNA-122与M型丙酮酸激酶(PKM)和柠檬酸合酶(CS)的关系。以人乳腺癌MCF-7细胞株为对象,将细胞分为Con组和miRNA-122组,Con组不作转染,miRNA-122组转染miRNA-122类似物。以流式细胞术检测细胞周期的改变,CCK-8法检测细胞增殖能力,克隆形成实验检测肿瘤细胞克隆形成能力,Transwell小室试验检测肿瘤细胞侵袭能力,同时检测细胞的葡萄糖消耗量和乳酸产生水平,Western blot检测糖代谢关键酶PKM、CS、己糖激酶(HK)的表达水平。结果荧光素酶报告基因结果显示,PKM和CS是miRNA-122的靶基因。MCF-7细胞转染miRNA-122类似物后,G0/G1期细胞比例显著增高,而G2/M、S期细胞比例下降;细胞增殖率下调,miRNA-122组细胞增殖率低于Con组,差异有统计学意义(P<0.05)。与Con组比较,miRNA-122组细胞克隆形成能力、肿瘤侵袭能力下降,同时葡萄糖利用率和乳酸水平降低,HK、PKM表达水平下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miRNA-122可以通过靶向抑制肿瘤细胞糖代谢酶的表达,降低细胞糖代谢水平,从而抑制乳腺癌的转移和侵袭。