血清LncRNA MALAT1和microRNA-124水平检测对非小细胞肺癌患者预后的评估价值

目的:探究长链非编码RNA-转移相关肺腺癌转录本1(LncRNA MALAT1)和微小RNA-124(microRNA-124)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的预测效能。方法:选取2020年06月至2022年06月我院收治的124例NSCLC患者作为研究对象,入院后,收集患者的病历资料,检测入院时外周血LncRNA MALAT1、microRNA-124的相对表达量。电话随访12个月记录患者的死亡率,分为生存组和死亡组,分析NSCLC患者预后的影响因素,评估血清LncRNA MALAT1、microRNA-124对NSCLC患者预后的预测效能。结果:死亡组患者的IV期占比及LncRNA MALAT1相对表达量高于生存组,microRNA-124相对表达量低于生存组。Logistic遂步分析显示,病理分期IV期(OR=12.342,95%CI:4.295~36.765)、LncRNA MALAT1(OR=5.371,95%CI:1.836~15.714)及microRNA-124(OR=0.257,95%CI:0.089~0.752)是NSCLC患者死亡的影响因素(P<0.05)。LncRNA MALAT1与microRNA-124呈负相关(P<0.05)。受试者工作特性曲线(ROC)分析显示,LncRNA MALAT1及microRNA-124单一及联合预测NSCLC患者预后的灵敏度分别为0.741(95%CI:0.601~0.846)、0.759(95%CI:0.621~0.861)、0.815(95%CI:0.682~0.903),特异度分别为0.825(95%CI:0.705~0.906)、0.762(95%CI:0.635~0.856)、0.841(95%CI:0.723~0.917),曲线下面积(AUC)分别为0.781、0.760、0.839。联合预测效能更高(P<0.05)。结论:LncRNA MALAT1及microRNA-124可用于预测NSCLC患者的预后,且预测效能良好。

微RNA-124-3p在溃疡性结肠炎病人外周血中的表达及意义

目的检测溃疡性结肠炎(UC)病人外周血中微RNA-124-3p(miR-124-3p)的表达水平,并讨论其临床意义。方法选择121例UC病人(UC组)和60例健康体检者(对照组)作为研究对象进行前瞻性研究,UC组来源于2019年8月至2021年8月期间武汉市蔡甸区人民医院住院治疗的病人,对照组为同期来院进行健康体检的个体。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-124-3p在各组外周血中的表达水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测C-反应蛋白(CRP)在各组外周血中的表达水平。UC活动期病人外周血miR-124-3p表达水平与CRP水平的相关性采用Pearson法,与UC内镜严重指数(UCEIS)评分、改良梅奥(Mayo)评分的相关性分析采用Spearman法。结果与对照组相比,UC组病人外周血中miR-124-3p的表达水平显著降低(0.84±0.22比0.52±0.17,P<0.05),CRP水平显著升高[(7.08±2.52)mg/L比(9.83±2.91)mg/L,P<0.05]。与UC缓解期病人相比,活动期病人外周血中miR-124-3p的表达水平显著降低(0.67±0.22比0.44±0.14,P<0.05),CRP水平显著升高[(9.06±2.85)mg/L比(10.25±2.94)mg/L,P<0.05]。UC不同临床活动度病人外周血miR-124-3p表达水平由高至低依次为轻度(0.53±0.16)、中度(0.45±0.13)、重度(0.30±0.09),CRP表达水平及UCEIS评分、改良Mayo评分由高至低依次为重度[(12.03±3.02)mg/L、(5.97±1.82)分、(11.53±0.46)分]、中度[(10.35±2.79)mg/L、(4.82±1.51)分、(7.70±1.64)分)]、轻度[(8.74±2.83)mg/L、(3.03±0.90)分、(3.98±0.95)分],组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。UC活动期病人外周血miR-124-3p表达水平与CRP、UCEIS评分及改良Mayo评分均呈负相关(r=−0.57、−0.44、−0.59,P<0.05)。结论UC病人外周血miR-124-3p表达水平降低,其水平变化与UC疾病活动和病情程度密切相关。

急性脑梗死患者血清微小RNA-124和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9水平与预后相关

目的:探讨急性脑梗死(ACI)患者血清微小RNA-124(miR-124)与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)的关系,及二者对患者预后的预测价值。方法:收集216例ACI患者为研究对象,选择同期健康体检者86例为对照组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测患者血清miR-124水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清Caspase-9及炎性因子超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6、正五聚蛋白(PTX)-3水平。ACI患者根据6个月随访结果分为预后良好组152例和预后不良组64例;分析预后不良组患者血清miR-124、Caspase-9表达水平与炎性因子相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-124、Caspase-9表达水平对患者预后的预测价值;采用Logistic回归方程分析影响预后的因素。结果:预后不良组患者miR-124、Caspase-9、hs-CRP、TNF-α、IL-6、PTX-3高于预后良好组和对照组,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平及冠心病、糖尿病、大血管闭塞患者比例高于预后良好组(P均<0.05)。预后不良组患者血清miR-124与Caspase-9水平呈正相关(r=0.582,P<0.05),且二者与hs-CRP、TNF-α、IL-6、PTX-3水平呈正相关(P均<0.05)。血清miR-124、Caspase-9水平预测ACI患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.906、0.836,特异性分别为77.6%、88.8%,灵敏度分别为89.1%、71.9%;二者联合预测的AUC为0.920,特异性为90.8%,灵敏度为81.3%。miR-124、Caspase-9、LDL-C、冠心病、糖尿病、大血管闭塞是ACI患者发生不良预后的危险因素(P均<0.05)。结论:联合检测血清miR-124、Caspase-9水平可能有助于早期预测ACI患者预后。

微小RNA-124促进氧糖剥夺/复糖复氧后脑微血管内皮细胞血管新生的研究

目的探讨微小RNA(miR)-124对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)后脑微血管内皮细胞(BMEC)血管新生的作用及相关机制。方法将小鼠BMEC随机分为6组,正常对照组(con组),OGD/R组,OGD/R+过表达对照组(OGD/R+ov-con组),OGD/R+miR-124过表达组(OGD/R+ov-miR-124组),OGD/R+沉默对照组(OGD/R+si-con组),OGD/R+miR-124沉默组(OGD/R+si-miR-124组)。比较各组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量、CD31阳性细胞数、miR-124水平、15脂氧化酶(15-LOX)mRNA及蛋白表达水平。结果与con组比较,OGD/R组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量及miR-124水平降低(P<0.05,P<0.01);OGD/R组15-LOXmRNA及蛋白表达水平较con组显著升高(3.29±0.24vs1.00±0.00,4.31±0.39vs1.00±0.00,P<0.01)。与OGD/R+ov-con组比较,OGD/R+ov-miR-124组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量、CD31阳性细胞数、miR-124水平明显升高,15-LOXmRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05);与OGD/R+si-con组比较,OGD/R+si-miR-124组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量、CD31阳性细胞数、miR-124水平降低,15-LOXmRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论miR-124可能通过调控15-LOX水平促进OGD/R后BMEC血管新生,为缺血性脑卒中提供潜在治疗靶点。

外周血miRNA-124表达水平与创伤性颅脑损伤病情严重程度及预后的关系

目的探究外周血miRNA-124表达水平与创伤性颅脑损伤病情严重程度及预后的关系方法 选取2019年5月~2022年5月我院诊治的118例创伤性颅脑损伤患者,收集记录患者的一般临床资料以及病情、预后情况,观察外周血miRNA-124表达水平与患者病情严重程度的关系,并采用因素logistic回归分析影响患者预后的独立相关因素,采用受试者工作特性曲线(ROC)评估相关指标预测患者预后的预测价值,并以患者预后对相关指标进行比较分析。结果 118例患者中,轻度27例,中度50例,重度41。轻度组miRNA-124低于中、重度组,中度组miRNA-124低于重度组,差异有统计学意义(P <0.05)。118例患者中,92例预后良好,26例预后不良。影响创伤性颅脑损伤病情严重程度的单因素分析结果提示,D-二聚体、APACHEⅡ评分、国家早期预警评分(NEWS)、miRNA-124、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、血糖均是影响创伤性颅脑损伤病情严重程度的相关因素(P <0.05)。进一步多因素logistic回归分析结果提示,miRNA-124(OR=5.436,95%CI:1.600~18.468,P=0.008)、血糖(OR=3.296,95%CI:1.044~10.405,P=0.042)、APACHEⅡ评分(OR=1.633,95%CI:1.023~2.607,P=0.040)均是影响创伤性颅脑损伤病情严重程度的独立危险因素。受试者工作特征曲线(ROC)结果显示,mi RNA-124相对表达量的ROC曲线下面积(AUC)为0.894,其敏感度为0.808,特异度为0.917,3组指标联合的AUC为0.943,其敏感度为0.924,特异度为0.859。结论 患者的miRNA-124、血糖、APACHEⅡ评分均为影响创伤性颅脑损伤病情严重程度的独立影响因素,且miRNA-12相对表达量与3组指标联合对创伤性颅脑损伤病情严重程度具有较好的预测效能,临床治疗可对相关指标予以关注。

微小RNA-124在急性脊柱创伤所致急性脊髓损伤中的诊断价值

目的探讨微小RNA-124(miR-124)对急性脊柱创伤所致急性脊髓损伤的诊断价值。方法选取2014年9月—2015年9月在郑州大学第一附属医院急诊入院的45例急性脊柱创伤患者,并按照脊髓损伤神经学分类国际标准中的美国脊髓损伤协会残损分级(AISA分级)将患者分为脊髓完全损伤组(AISA分级A级)15例、脊髓不完全损伤组(AISA分级B、C、D级)15例、神经功能正常组(AISA分级E级)15例,另选取同期入院的急性四肢创伤患者15例为对照组。抽取各组患者创伤后24 h内外周静脉血并对其血浆miR-124水平及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平进行测定。结果各组间miR-124、TNF-α水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。脊髓完全损伤组、脊髓不完全损伤组的miR-124、TNF-α水平均高于神经功能正常组与对照组(P<0.05)。患者创伤后24 h外周静脉血miR-124、TNF-α诊断急性脊髓损伤的受试者工作特征(ROC)曲线下面积分别为0.948[95%CI(0.890,1.000)]、0.770[95%CI(0.641,0.879)]。结论 miR-124诊断急性脊髓损伤的特异度要优于TNF-α,今后可将miR-124作为诊断急性脊柱创伤后急性脊髓损伤的潜在检测标志物。

妊娠期高血压疾病患者血清微小RNA-124-3p的表达及其临床意义研究

目的探究微小RNA-124-3p(miR-124-3p)在妊娠期高血压疾病(HDCP)患者血清中的表达水平及其与妊娠结局的关系。方法选取2018年1月至2020年2月在邯郸市中心医院定期产检并分娩的80例HDCP患者作为患病组,按照病情程度将其分为妊娠期高血压组(n=39)、轻度子痫前期(PE)组(n=26)、重度PE组(n=15);按照是否发生不良妊娠结局将其分为不良妊娠组(n=31)和良好妊娠组(n=49)。另选取同期80例产检正常孕妇作为正常组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定血清miR-124-3p的表达水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清胎盘生长因子(PLGF)的水平;比较正常组及不同病情严重程度HDCP患者的血清miR-124-3p、PLGF水平;采用Pearson检验分析HDCP患者血清miR-124-3p与PLGF表达水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清miR-124-3p、PLGF对HDCP患者妊娠结局的预测价值。结果患病组血清miR-124-3p水平高于正常组,PLGF水平低于正常组(P<0.05);随HDCP病情加重,血清miR-124-3p水平升高,PLGF水平降低(P<0.05);HDCP患者血清miR-124-3p与PLGF的表达水平呈负相关(P<0.05)。患病组胎膜早破、胎儿窘迫、胎儿生长受限、早产、产后出血发生率高于正常组(P<0.05);不良妊娠组HDCP患者血清miR-124-3p水平高于良好妊娠组(P<0.05),PLGF水平低于良好妊娠组(P<0.05)。分别采用血清miR-124-3p、PLGF预测HDCP患者妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.844、0.849,截断值分别为1.86、38.78pg/mL,灵敏度均为87.1%,特异度分别为75.5%、73.5%,二者联合预测HDCP患者妊娠结局的AUC为0.942,其灵敏度、特异度分别为83.9%、89.8%。结论HDCP患者血清miR-124-3p表达水平升高,与PLGF水平呈负相关,且miR-124-3p、PLGF表达水平均与HDCP病情严重程度、妊娠结局相关,二者联合可提高对HDCP患者妊娠结局的预测效能,有利于临床判断HDCP患者的妊娠结局。

环状RNA circ_MTHFD2对mircoRNA-124的调控在肺癌培美曲塞耐药中的作用

目的探讨circ_MTHFD2调控microRNA-124(miR-124)的表达在肺癌培美曲塞耐药发生过程中的作用。方法采用高浓度反复间歇诱导法建立肺癌培美曲塞耐药细胞株A549/PEM。通过瘤内注射建立培美曲塞耐药的裸鼠移植瘤模型;采用Lipofectamine脂质体法将miR-124模拟物、miR-124抑制剂及阴性对照转染至A549和A549/PEM细胞,并分为miR-124上调组、miR-124抑制组及阴性对照组;采用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖及凋亡情况,比较各组细胞对培美曲塞的敏感性;采用实时荧光定量PCR(QPCR)和基因芯片检测miR-124和环状RNA的表达;通过测序技术检测耐药细胞及耐药裸鼠的肿瘤组织与对照组间环状RNA的表达,预测环状RNA上的miR-124结合位点。结果亲本细胞A549和耐药细胞的半数抑制浓度(IC_(50))分别为(30.78±1.97)μmol/L和(913.53±14.1)μmol/L,最终获得耐药指数(RI)为29.69±1.49的培美曲塞耐药细胞,命名为A549/PEM。耐药细胞A549/PEM中miR-124的表达显著降低,相比A549细胞,下降约145.952倍;下调miR-124表达的A549细胞对培美曲塞敏感性降低,miR-124抑制组及阴性对照组细胞的IC_(50)分别为(80.45±3.50)μmol/L和(9.94±1.90)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术检测显示miR-124表达上调可以显著诱导A549、A549/PEM细胞的凋亡;通过高通量测序提示在耐药的细胞及组织中环状RNA表达明显上调,表达量上调的circ_MTHFD2可与miR-124结合。结论 circ_MTHFD2可能通过调控miR-124的表达,参与肺癌培美曲塞耐药的发生发展。

微小RNA-124及其相关疾病研究进展

微小RNA(microRNA,miRNA)是内源性单链非编码RNA,通过与靶基因互补结合产生转录后沉默的作用。近年来,miRNA-124(miR-124)作为中枢神经系统中含量最丰富的miRNA受到普遍关注。miR-124的作用复杂,合成过程中受多种因子的调控,成熟的miR-124可调节数百种靶基因的表达,对神经元的发育、小胶质细胞的激活都有着重要作用。也有研究表明,多种肿瘤的发生与miR-124表达的异常有关。本文介绍了miR-124的研究现状,主要包括其合成、靶基因、生物学作用及在疾病发生中的作用。

MicroRNA-124作为缺血性脑卒中标志物的研究进展

微RNA(miRNA/miR)是一类小的(18~20个核苷酸)非编码RNA,其主要作用是调节基因的表达,参与了几乎所有的生物学过程。其中miR-124几乎只在中枢神经系统中持续表达,被称为"大脑特异性miRNA"。miR-124通过靶向作用于多种蛋白在缺血性脑卒中患者的神经元分化及神经形成的过程中也起到了重要的调节作用,今后很可能作为缺血性脑卒中诊断及治疗的生物标志物。

老年重症肺炎病人血清微小RNA-146a、微小RNA-223、微小RNA-21、微小RNA-124水平及其与预后的关系

目的 探究老年重症肺炎病人血清微小RNA(miR)-146a、miR-223、miR-21、miR-124表达水平及其与预后的关系。方法选取2018年2月至2020年3月郑州大学第二附属医院诊治的128例老年重症肺炎病人、130例普通肺炎病人分别为重症肺炎组、普通肺炎组,并纳入同期128例体检健康者为健康组。比较三组血清miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124表达水平及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;分析老年重症肺炎病人血清miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124表达水平与TNF-α的相关性;比较不同预后老年重症肺炎病人临床资料和血清miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124水平;分析老年重症肺炎病人死亡的影响因素;分析血清miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124、TNF-α对老年重症肺炎病人预后的预测价值。结果 普通肺炎组病人血清miR-146a、miR-223、miR-21表达水平及TNF-α水平分别为1.67±0.56、1.64±0.55、1.71±0.57、(12.78±4.30)ng/L,重症肺炎组病人血清miR-146a、miR-223、miR-21表达水平及TNF-α水平分别为2.32±0.78、2.27±0.76、2.39±0.80、(23.64±7.92)ng/L,高于健康组的1.03±0.35、1.01±0.34、0.99±0.33、(5.43±1.84)ng/L、(P<0.05),普通肺炎组、重症肺炎组血清miR-124表达水平分别为0.71±0.24、0.37±0.13,低于健康组的1.07±0.37(P<0.05);重症肺炎组病人血清miR-146a、miR-223、miR-21表达水平及TNF-α水平高于普通肺炎组(P<0.05),血清miR-124表达水平低于普通肺炎组(P<0.05);老年重症肺炎病人血清miR-146a、miR-223、miR-21表达水平与TNF-α呈正相关(P<0.05),血清miR-124表达水平与TNF-α呈负相关(P<0.05);死亡组老年重症肺炎病人血清miR-146a、miR-223、miR-21、TNF-α水平及有呼吸系统疾病史、吸烟史、机械通气占比高于生存组(P<0.05),血清miR-124表达水平、氧分压水平低于生存组(P<0.05);miR-146a、miR-223、miR-21、TNF-α、机械通气是老年重症肺炎病人死亡的危险因素(P<0.05);血清miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124、TNF-α预测老年重症肺炎病人预后的曲线下面积(AUC)分别为0.84、0.88、0.82、0.66、0.68,其灵敏度分别为72.5%、80.4%、82.4%、60.8%、60.8%,特异度分别为85.7%、81.8%、79.2%、67.5%、72.4%。结论 老年重症肺炎病人血清miR-146a、miR-223、miR-21表达水平较高,与TNF-α水平呈正相关;miR-124表达水平较低,与TNF-α水平呈负相关。且测定血清miR-146a、miR-223、miR-21表达水平有助于临床预测老年重症肺炎病人的预后情况。

外周血中微RNA-16和微RNA-124表达水平对抑郁症患者治疗效果的影响

目的探讨外周血中微RNA(miR)-16、miR-124表达水平对抑郁症患者治疗效果的影响。方法选择2020年5月至2021年3月新乡医学院第二附属医院收治的60例抑郁症患者为研究对象。患者均接受米氮平片口服治疗,起始剂量为15 mg·d^(-1),服用2周后增加至30 mg·d^(-1),并维持此剂量服用;若服用2周后治疗效果不明显,可将米氮平片增加至45 mg·d^(-1),或调整为联合口服艾司西酞普兰,艾司西酞普兰起始剂量为每次10 mg·d^(-1);治疗周期为3个月。治疗3个月后,采用汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评估所有患者临床疗效,并根据临床疗效将患者分为疗效不佳组(n=19)和疗效良好组(n=41)。治疗前,采集患者空腹静脉血3 mL,采用实时荧光聚合酶链式反应法检测患者外周血中miR-16、miR-124相对表达量。采用logistic回归分析外周血中miR-16、miR-124表达与抑郁症患者临床疗效的关系。绘制受试者工作曲线,并计算曲线下面积(AUC),分析外周血中miR-16、miR-124表达预测抑郁症患者临床疗效的价值。结果疗效良好组患者外周血中miR-16相对表达量显著高于疗效不佳组,miR-124相对表达量显著低于疗效不佳组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,miR-16是抑郁症患者临床疗效的保护因子(OR<1,P<0.05),miR-124是抑郁症患者临床疗效的危险因子(OR>1,P<0.05)。抑郁症患者外周血中miR-16、miR-124相对表达量单独及联合检测预测抑郁症患者临床疗效的AUC分别为0.843、0.849、0.944。外周血中miR-16和miR-124相对表达量单独及联合检测预测抑郁症患者临床疗效的AUC、敏感度比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-16、miR-124相对表达量联合检测预测抑郁症患者临床疗效的特异度显著高于miR-16相对表达量单独检测,显著低于miR-124相对表达量单独检测(P<0.05)。结论抑郁症患者接受艾司西酞普兰、米氮平治疗的临床疗效欠佳可能受外周血中miR-16水平降低、miR-124水平升高影响,miR-16、miR-124表达水平联合检测预测抑郁症患者临床疗效不佳风险具有较高价值。

颅脑损伤患者外周血miRNA-124与Treg细胞和IL-10表达的关系

目的:研究颅脑损伤后外周血小RNA(miRNA)-124与调节性T细胞(Treg)及白细胞介素-10(IL-10)表达的关系,探讨miRNA-124在颅脑损伤中的作用及其机制。方法:纳入颅脑损伤患者109例,根据GCS评分分为轻度损伤组35例,中度损伤组45例,重度损伤组29例,同时纳入正常体检者20例为对照组。受伤后24 h分别采集各组的外周静脉血,采用流式细胞术检测Treg细胞的表达;实时荧光定量聚合酶联反应检测miRNA-124表达;酶联免疫吸附试验检测IL-10的水平。结果:各组颅脑损伤患者外周血Treg比例、miR-124表达及IL-10水平均显著高于对照组(P<0.05),中、重度颅脑损伤组高于轻度损伤组(P<0.05),重度组高于中度组(P<0.05);重度损伤组患者外周血miR-124和Treg比例呈正相关。结论:颅脑损伤后,miRNA-124可能参与对Treg细胞增殖的调节,调控炎症反应。

微小RNA-124-3p通过靶向抑制RIPK1的表达对缺氧/复氧心肌细胞损伤中的保护作用及其机制研究

目的探讨微小RNA-124-3p(miR-124-3p)调控受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用。方法大鼠心肌细胞随机分为Con组、H/R组、H/R+miR-124-3p组、H/R+miR-NC组、H/R+si-RIPK1组、H/R+siNC组、H/R+miR-124-3p+pcDNA组、H/R+miR-124-3p+pcDNA-RIPK1组。采用qRT-PCR法检测miR-124-3p与RIPK1 mRNA表达水平,Western blot法检测RIPK1蛋白表达情况,双荧光素酶报告基因检测验证miR-124-3p与RIPK1的靶向关系。流式细胞术检测细胞凋亡能力变化,Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白表达情况。检测乳酸脱氢酶(LDH)活性及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果H/R组心肌细胞miR-124-3p表达水平显著低于Con组(P<0.05),而RIPK1 mRNA及蛋白水平均显著升高(P<0.05);H/R组心肌细胞LDH活性、MDA水平及Bax蛋白水平均显著高于Con组(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),而SOD水平及Bcl-2蛋白水平均显著低于Con组(P<0.05);miR-124-3p过表达与抑制RIPK1表达可降低细胞凋亡率、LDH活性、MDA水平及Bax蛋白水平,而提高SOD水平及Bcl-2蛋白水平;双荧光素酶基因检测结果证实RIPK1是miR-124-3p的靶基因;RIPK1过表达逆转了miR-124-3p过表达对H/R心肌细胞损伤的作用。结论MiR-124-3p过表达可通过下调RIPK1表达进而减轻心肌细胞H/R损伤进而对心肌细胞发挥保护作用。

颅脑损伤患者血清miRNA-124、miRNA-132、NSE和S100B蛋白表达与病情严重程度的关系

目的探讨颅脑损伤患者血清微小RNA(miRNA)-124和miRNA-132与神经元特异性烯醇化酶(NSE)和中枢神经特异性蛋白(S100B)表达与病情严重程度相关性。方法选择颅脑损伤患者112例作为观察组,依据格拉斯哥昏迷评分(GCS)分为轻中度组78例与重度组34例;另选择健康体检者96例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定血清miRNA-124和miRNA-132水平;采用酶联免疫吸附法测定血清NSE和S100B水平。比较各组血清miRNA-124和miRNA-132水平变化,血清NSE和S100B水平变化;采用ROC曲线分析miRNA-124、miRNA-132、NSE和S100B对颅脑损伤预测价值;采用Pearson分析miRNA-124、miRNA-132、NSE、S100B与病情严重程度相关性。结果轻中度组和重度组血清miRNA-124 mRNA表达高于对照组,而血清miRNA-132 mRNA表达低于对照组(P<0.05);重度组血清miRNA-124 mRNA表达高于轻中度组,而血清miRNA-132 mRNA表达低于轻中度组(P<0.05)。轻中度组和重度组血清NSE和S100B水平高于对照组(P<0.05);重度组血清NSE和S100B水平高于轻中度组(P<0.05)。经ROC曲线分析,miRNA-124对颅脑损伤诊断敏感度为75.44%,特异度为43.64%;miRNA-132对颅脑损伤诊断敏感度为67.86%,特异度为35.71%;NSE对颅脑损伤诊断敏感度为86.76%,特异度为65.91%;S100B对颅脑损伤诊断敏感度为79.22%,特异度为62.86%。经Pearson相关性分析,miRNA-124、NSE和S100B与重度颅脑损伤呈线性正相关,而miRNA-132与重度颅脑损伤呈线性负相关(P<0.05)。结论颅脑损伤患者血清miRNA-124、NSE和S100B呈高表达,而miRNA-132呈低表达,且与患者病情严重程度密切相关。

microRNA-124通过Sp1控制人血管平滑肌细胞表型转换影响颅内动脉瘤发展的机制

目的探究微小RNA-124(miR-124)通过特异性β1糖蛋白(Sp1)控制人血管平滑肌细胞(HVSMC)表型转换影响颅内动脉瘤(IA)发展的机制。方法HVSMC进行原代培养,HVSMC在5%胎牛血清的生长培养基SmGM-2(Lonza)中于37℃在加湿的5%CO_(2)培养箱中培养。根据研究方案将HVSMC细胞分为对照组、miR-124模拟转染组和miR-124-pCMV-Sp1Mut共转染组。通过定量RT-PCR分析HVSMC在血小板源生长因子(PDGF-BB)刺激后miR-124表达。通过BrdU检测和刮擦试验检测HVSMC的增殖迁移。通过荧光素酶报告基因测定检测miR-124与Sp1的靶向关系。通过蛋白印迹分析HVSMC标记基因和Sp1的蛋白表达。结果与0 h相比,PDGF-BB(20 ng/mL)诱导后第6、12、24 h HVSMC中miR-124表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-124模拟转染组细胞增殖和细胞迁移能力较对照组增强,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-124模拟转染组与Sp1-WT3'-UTR融合的荧光素酶活性较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05),而miR-124模拟转染组与Sp1-MUT的3'-UTR融合的荧光素酶活性与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-124模拟转染组α-SMA、SM22a、calponin和MYH11蛋白表达较对照组升高,miR-124-pCMV-Sp1Mut共转染组α-SMA、SM22a、calponin和MYH11蛋白表达较miR-124模拟转染组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-124模拟转染组Sp1蛋白表达较对照组降低,miR-124-pCMV-Sp1Mut共转染组Sp1蛋白表达较miR-124模拟转染组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-124通过Sp1调节HVSMC的表型并显著抑制IA发展,miR-124对Sp1表达的调节可能为miR-124的功能脑血管疾病的分子机制提供新的见解。

组织microRNA-124表达及HPV18病毒载量与宫颈癌发病的相关性

目的探讨组织中高危型HPV病毒的载量和micro RNA-124表达水平与宫颈癌发病的相关性,为宫颈癌的临床监测以及诊断提供依据。方法选取在2013年9月-2016年9月在我院行宫颈活检的宫颈癌变患者205例,其中正常或炎症56例,宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(cervical intraepithelial neoplasia gradeⅠ,CINⅠ)32例,宫颈上皮内瘤变Ⅱ级(CINⅡ)37例,宫颈上皮内瘤变Ⅲ级(CINⅢ)31例,宫颈癌49例(宫颈鳞癌38例,宫颈腺癌11例)。对宫颈组织或细胞采用逆转录—荧光定量PCR检测micro RNA-124的相对表达,采用第二代杂交捕获技术(HCⅡ)检测HPV18病毒的载量,病毒载量1 pg/ml为阴性组,1~50 pg/ml为低级载量组,51~500 pg/ml为中级载量组,501~1 000 pg/ml则为高级载量组,1 001 pg/ml及以上为极高病毒载量组。Spearman相关性分析病毒载量与宫颈组织病变程度的相关性。结果宫颈癌组HPV18病毒载量及micro RNA-124表达水平显著高于其他组(P均<0.05),而正常或炎症组高危型HPV病毒载量及micro RNA-124的表达水平最低(P=0.001),并且随着宫颈癌病变加重,HPV病毒载量及micro RNA-124的表达水平也随之升高;Spearman相关分析显示,高危型HPV病毒载量与宫颈病变程度呈正相关(R=0.975,P=0.000);随着宫颈癌病变加重,micro RNA-124表达水平呈线性升高(R=0.889,P=0.012)。结论宫颈组织中micro RNA-124表达水平及高危型HPV病毒载量与宫颈癌的发生密切相关。

微小RNA-124-3p与自发性脑出血患者血肿体积、病情严重程度的关系

目的研究微小RNA(miR)-124-3p与自发性脑出血患者血肿体积、病情严重程度间的关系,以及在预测患者预后中的价值。方法检测63例脑出血患者发病24 h内及50例健康志愿者(对照组)的外周血miR-124-3p水平。脑出血患者分别在发病1 d内及4 d时行头颅CT检查,测定脑血肿和水肿体积。分析血浆miR-124-3p水平与脑出血患者血肿、水肿体积及病情严重程度的相关性;并绘制ROC曲线,分析血浆miR-124-3p水平预测脑出血患者院内死亡的价值。结果脑出血组患者中合并高血压的比例和血白细胞计数均显著高于对照组(均P<0.001)。头颅CT检查示,脑出血患者发病4 d时的脑水肿体积较发病1 d内显著增大(P<0.05),发病4 d与发病1 d内的脑血肿体积相比,差异无统计学意义(P>0.05)。血浆miR-124-3p水平与脑出血患者发病1 d内和发病4 d的血肿、水肿体积及入院时ICH-FOS评分均呈正相关(r=0.45~0.78,均P<0.05)。脑出血患者中院内死亡患者22例,其血浆miR-124-3p水平显著高于存活患者(P<0.001)。ROC曲线分析示,血miR-124-3p相对表达量超过2.87时,预测患者院内死亡的价值较高,其曲线下面积(AUC)为0.794(95%CI 0.673~0.915),诊断灵敏度、特异度分别为95.5%和56.1%。结论脑出血患者的外周血miR-124-3p水平异常升高,且与患者的血肿体积、脑水肿体积及病情严重程度均呈正相关,在预测脑出血患者院内死亡中具有较高的价值。

微小RNA-124和RNA-1976在帕金森病患者血清中的表达及临床价值

目的探讨微小RNA-124(miR-124)和RNA-1976(miR-1976)在帕金森病(PD)患者血清中的表达及临床意义。方法选取2020年9月至2022年6月在我院治疗的原发性PD患者58例为PD组,采用统一帕金森病评定量表(UPDRS)评分对PD患者分为UPDRS≤60分(25例)和UPDRS>60分(33例)两组,并进行Hoehn-Yahr分级。同时选择同期体检健康者30例为对照组。收集研究对象血清后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测血清中miR-124和miR-1976的表达水平。采用Logistic回归分析法分析影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-124、miR-1976对PD的诊断价值。利用TargetScan、miRTarbase等多个预测软件对miR-1976的靶基因进行分析。结果与对照组相比,PD组血清miR-124表达下调[(1.49±0.36)比(1.02±0.32)](t=8.85,P<0.001),miR-1976表达上调[(0.98±0.30)比(1.33±0.37)](t=6.92,P<0.001);血清miR-124低表达、miR-1976高表达是PD发生的独立危险因素(OR>1,P<0.05);UPDRS评分>60分的PD患者Hoehn-Yahr分级明显高于UPDRS≤60分的患者[(3.42±0.73)比(2.16±0.42)]差异有统计学意义(t=3.05,P<0.05),但血清miR-124、miR-1976表达水平差异无统计学意义[miR-124:(1.09±0.26)比(0.98±0.38);miR-1976:(1.42±0.43)比(1.23±0.68)](t=0.89,0.62,均P>0.05);ROC结果显示,血清miR-124、miR-1976诊断PD的曲线下面积(AUC)分别为0.832、0.797,截断值分别为1.205、1.196,对应灵敏度分别为74.1%、51.8%,特异度分别为77.8%、90.1%;二者联合诊断PD的AUC为0.912,灵敏度为76.4%,特异度为93.2%。PINK1基因为miR-1976的潜在靶基因。结论PD患者血清miR-124表达水平降低,miR-1976表达水平升高,二者均对PD诊断有一定参考价值,且联合诊断价值更高,但二者表达水平与UPDRS评分无关。

微小RNA-124-3p靶向胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响

目的探讨微小RNA-124-3p(miR-124-3p)靶向胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响。方法选取2015年1月—2021年1月磐石市医院保存的子宫内膜癌组织及癌旁组织20例,分析miR-124-3p在癌组织、癌旁组织中的表达及与患者临床病理特征的关系。用子宫内膜癌MFE-280细胞进行miR-124-3p沉默和过表达转染,分为空白组、miR-124-3p-inhibitor组、miR-124-3p-mimic组,分析调控miR-124-3p表达对子宫内膜癌MFE-280细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学行为的影响。采用双荧光素酶报告实验预测miR-124-3p的靶基因,分析miR-124-3p对子宫内膜癌MFE-280细胞IGF2BP1表达量的影响。结果子宫内膜癌组织miR-124-3p表达量(1.01±0.09)低于癌旁组织(1.89±0.25),差异有统计学意义(t=14.810,P<0.05)。miR-124-3p与FIGO分期、组织学分级、淋巴结转移、肌层浸润深度有关,miR-124-3p在Ⅳ期、G3分级、有淋巴结转移、肌层浸润≥1/2的患者中表达降低(均P<0.05)。miR-124-3p-inhibitor组72 h细胞增殖率[(52.31±3.44)%vs.(40.12±2.32)%]、迁移率[(57.63±7.89)%vs.(45.65±6.72)%]、细胞穿膜数[(348.97±40.76)个vs.(245.63±24.53)个]高于空白组,差异均有统计学意义(t=9.290、3.655、6.869,均P<0.05),miR-124-3p-inhibitor组凋亡率[(20.12±1.12)%vs.(31.45±6.49)%]低于空白组,差异有统计学意义(t=6.394,P<0.05)。miR-124-3p-mimic组72h细胞增殖率[(17.89±1.54)%vs.(52.31±3.44)%]、迁移率[(16.87±1.12)%vs.(57.63±7.89)%]、细胞穿膜数[(55.64±6.91)个vs.(348.97±40.76)个]低于miR-124-3p-inhibitor组,差异均有统计学意义(t=28.880、16.170、22.440,均P<0.05),凋亡率[(77.16±10.25)%vs.(20.12±1.12)%]高于miR-124-3p-inhibitor组,差异有统计学意义(t=17.490,P<0.05)。双荧光素酶报告实验发现:miR-124-3p可抑制WT-IGF2BP1的3’-UTR荧光素酶活性,对MUT-IGF2BP1的3’-UTR荧光素酶活性无影响,且相关性分析显示miR-124-3p与IGF2BP1在子宫内膜癌中呈负相关(r=-0.409,P<0.05)。miR-124-3p-inhibitor组IGF2BP1表达量(2.31±0.19 vs.1.34±0.14)高于空白组,差异有统计学意义(t=13.000,P<0.05);miR-124-3p-mimic组IGF2BP1表达量(0.68±0.10 vs.2.31±0.19)低于miR-124-3p-inhibitor组,差异均有统计学意义(t=24.010,P<0.05)。结论miR-124-3p在子宫内膜癌中低表达,过表达处理后经靶向调控IGF2BP1表达而影响子宫内膜癌细胞的增殖、迁移、侵袭,促进凋亡。