血清miRNA-146、LPS、ROS在早期妊娠胚胎丢失患者中的水平及临床意义

目的探讨血清微小RNA(miRNA)-146、脂多糖(LPS)和活性氧(ROS)在早期妊娠胚胎丢失(EPEL)患者中的水平及临床意义。方法选取2021年3月至2023年3月广东省东莞市妇幼保健院收治的100例EPEL患者作为研究组,另外选取同期在广东省东莞市妇幼保健院就诊的100例正常妊娠女性作为对照组,检测并比较研究组和对照组血清指标水平。培养HTR-8/SVneo细胞,按照不同转染方式分成miRNA-146抑制剂组、miRNA-146模拟物组及NC组。比较miRNA-146抑制剂组、miRNA-146模拟物组Toll样受体4(TLR4)蛋白和核因子-κB(NF-κB)蛋白水平,比较NC组、miRNA-146模拟物组和miRNA-146抑制剂组miRNA-146水平及HTR-8/SVneo细胞的凋亡率,比较不同水平LPS处理的HTR-8/SVneo细胞生长活力。采用Pearson相关分析EPEL患者miRNA-146水平与ROS、LPS、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、TLR4蛋白和NF-κB蛋白水平的相关性。结果研究组LPS、ROS、IL-6和TNF-α水平高于对照组,且雌二醇、孕酮、miRNA-146水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-146模拟物组miRNA-146水平高于miRNA-146抑制剂组和NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-146模拟物组TLR4蛋白、NF-κB蛋白水平低于miRNA-146抑制剂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同水平LPS(8、12、16、20μg/mL)处理的HTR-8/SVneo细胞生长活力低于20μg/mL LPS+miRNA-146模拟物处理的HTR-8/SVneo细胞生长活力,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-146抑制剂组HTR-8/SVneo细胞的凋亡率高于NC组和miRNA-146模拟物组,且NC组高于miRNA-146模拟物组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,EPEL患者miRNA-146水平与ROS、LPS、IL-6、TNF-α、TLR4蛋白和NF-κB蛋白水平呈负相关(r=-0.737、-0.614、-0.712、-0.729、-0.739、-0.708,P<0.05)。结论EPEL患者血清中miRNA-146水平明显下降,并与LPS、ROS、IL-6、TNF-α的水平呈负相关,可能是EPEL发生的影响因素之一,有望为临床预测孕妇发生EPEL提供新思路。

MicroRNA-146a通过靶向TAK1诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡

目的:观察微小RNA-146a(miR-146a)对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:将miR-146a mimic(上调miR-146a表达)和miR-146a inhibitor(下调miR-146a表达)分别转染至人胃癌SGC-7901细胞中,同时设置miRNA无义序列转染为阴性对照组(NC组)。RT-q PCR检测转染后胃癌细胞miR-146a的表达水平;CCK-8法和流式细胞术检测miR-146a对SGC-7901胃癌细胞生长活力和凋亡的影响;RT-q PCR和Western blot法检测miR-146a上调或下调对转化生长因子β激活激酶1(TAK1)/核因子κB(NF-κB)通路的影响。结果:在SGC-7901细胞中,上调miR-146a表达显著促进细胞凋亡,而下调miR-146a表达则显著抑制细胞凋亡。与NC组相比,miR-146a mimics转染SGC-7901细胞后,TAK1的mRNA和蛋白表达均明显下降,差异均有统计学显著性(P<0.05),而miR-146a inhibitors转染组TAK1的mRNA和蛋白质表达则显著增加(P<0.05),提示miR-146a负调控TAK1表达。敲低TAK1促进SGC-7901细胞凋亡(P<0.01),而TAK1过表达TAKI则抑制SGC-7901细胞凋亡(P<0.01)。此外,过表达miR-146a和敲低TAK1均能显著上调NF-κB抑制蛋白α(IκBα)和下调B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达。结论:本研究结果表明miR-146a通过靶向TAK1抑制NF-κB途径,从而诱导胃癌细胞凋亡。

MicroRNA-146a与风湿性疾病

MicroRNAs（miRNAs）是一类短小（20～24nt）的非编码RNA,通过对基因表达的转录后调节参与很多生物学过程。越来越多的研究证明,miRNAs尤其miRNA-146a在免疫和自身免疫中发挥着重要作用。本文将miRNA-146a在风湿性疾病中的生物学功能及研究进展作一综述。

血清miR-124、CD146及Angptl2水平与急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系研究

目的探讨血清微小RNA-124(miR-124)、CD146、血管生成素样蛋白2(Angptl2)与急性脑梗死(ACI)患者颈动脉粥样硬化(CAS)斑块稳定性的关系,为ACI患者的早期防治提供参考依据。方法选择2020年1月至2023年2月在邯郸市中心医院就诊的ACI患者191例作为ACI组,另选取同期在该院体检的健康志愿者61例作为对照组。根据颈动脉彩色多普勒超声结果将ACI患者分为不稳定斑块组(56例)、稳定斑块组(71例)、无斑块组(64例)。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)技术检测所有对象血清miR-124表达水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清CD146、Angptl2水平,采用单因素及多因素Logistic回归分析ACI患者CAS斑块不稳定的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-124、CD146联合Angptl2对ACI患者CAS斑块不稳定的预测价值。结果ACI组血清CD146、Angptl2水平高于对照组,miR-124表达水平低于对照组(P<0.05)。单因素分析结果显示,ACI患者CAS斑块的稳定性与患者年龄、合并高血压、合并高脂血症、纤维蛋白原(FIB)、血清C反应蛋白(CRP)、血清胱抑素C(CyC)、CD146、Angptl2、miR-124有关(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,血清miR-124下降、CD146升高、Angptl2升高、合并高脂血症是ACI患者CAS斑块稳定性的危险因素(P<0.05)。血清miR-124、CD146、Angptl2及三项指标联合应用预测ACI患者CAS斑块不稳定的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.741、0.719、0.781和0.834。结论血清miR-124表达水平及CD146、Angptl2水平是ACI患者CAS斑块不稳定的影响因素,可能参与ACI患者CAS斑块形成及发展过程,三者联合检测对ACI患者CAS斑块不稳定具有较好的预测效能。

miR-146a-5p、SMAD4在甲状腺滤泡癌组织中表达变化和对FTC-238细胞系增殖迁移侵袭影响及靶向关系

目的通过观察甲状腺滤泡癌(FTC)组织中miR-146a-5p、SMAD4的表达变化及对细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响,分析miR-146a-5p与SMAD4之间的靶向关系,以探讨miR-146a-5p是否通过靶向SMAD4促进FTC增殖、迁移、侵袭。方法收集FTC组织标本30例份,非肿瘤甲状腺或距离肿瘤边缘>2 cm癌旁组织30例份,采用RT-qPCR法检测FTC组织及癌旁组织中miR-146a-5p、SMAD4 mRNA。将FTC-238细胞系分为miR-146a-5p mimics组和阴性对照(miR-NC组)分别转染miR-146a-5p mimics(使细胞过表达miR-146a-5p)及miR-NC。采用CCK8法观察两组培养12、24、48 h时的细胞增殖能力,划痕实验观察两组细胞迁移能力,Transwell小室实验观察两组细胞侵袭能力。分别采用RT-qPCR及免疫印迹法检测两组细胞中SMAD4 mRNA及蛋白。双荧光素酶报告基因实验验证miR-146a-5p与SMAD4的靶向关系。结果与癌旁组织相比,FTC组织中miR-146a-5p相对表达量降低(P<0.05);SMAD4 mRNA相对表达量升高(P<0.05)。与miR-NC组相比,各个时间点miR-146a-5p mimics组细胞OD值降低(P均<0.05);与miR-NC组相比,miR-146a-5p mimics组细胞迁移、侵袭数目减少(P均<0.05)。与miR-NC组相比,miR-146a-5p mimics组SMAD4 mRNA及蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。miR-146a-5p与SMAD4存在靶向关系。结论FTC组织中miR-146a-5p表达降低、SMAD4表达升高;miR-146a-5p过表达可抑制FTC-238细胞系增殖、迁移、侵袭;miR-146a-5p与SMAD4之间存在靶向关系。miR-146a-5p可能通过靶向抑制SMAD4促进FTC癌细胞的增殖、迁移、侵袭。

miRNA-146通过调控TLR4/NF-κB信号通路促进 POI模型卵巢颗粒细胞生长的机制研究

目的 探讨小鼠原发性卵巢功能不全(POI)模型的微小RNA(miRNA)-146、Toll样受体4(TLR4)和核转录因子-κB(NF-κB)的水平及对卵巢颗粒细胞生长的影响。方法 取健康雌性BALB/c小鼠40只,随机分为POI组和对照组,每组20只。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清miRNA-146水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)表达水平;采用蛋白质印迹法检测小鼠卵巢组织TLR4和NF-κB蛋白水平。采用miRNA-146模拟物或抑制剂转染小鼠卵巢颗粒细胞,评估卵巢颗粒细胞增殖、生长活力和细胞凋亡率及TLR4、NF-κB通路蛋白的表达。采用Spearman相关分析POI模型miRNA-146水平与TLR4和NF-κB水平的相关性。结果 POI组的miRNA-146水平显著低于对照组(P<0.05),TNF-α、IL-6、TLR4、NF-κB水平高于对照组(P<0.05)。miRNA-146模拟物在卵巢颗粒细胞中呈高表达水平,且呈浓度依赖趋势。miRNA-146转染后,miRNA-146模拟物组细胞凋亡率低于对照组,miRNA-146抑制剂组细胞凋亡率高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。Spearman相关性分析结果显示,POI小鼠的miRNA-146水平与TLR4、NF-κB水平呈负相关(r=-0.725、-0.681,P<0.05)。结论 上调miRNA-146水平具有促进卵巢颗粒细胞生长的作用,其机制可能与miRNA-146负性调控TLR4/NF-κB信号通路和下调TNF-α、IL-6的表达相关,miRNA-146有望作为评估卵泡质量的指标之一。

MicroRNA-146b在病毒性心肌炎小鼠血清中的表达及其意义

目的研究病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠血清micro RNA-146b(mi R-146b)浓度,探究其在VMC发病中的变化及其意义。方法用柯萨奇病毒B3(CVB3)建立Balb/c VMC小鼠模型,实验组注射100 TCID50病毒液0.1 m L,对照组注射等量磷酸盐缓冲液。在注射的第0、1、2、4和6周分别采用实时定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测两组小鼠血清mi R-146b浓度,同时用酶联免疫吸附试验法检测血清中白细胞介素(interleukin,IL)-17和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α的浓度。结果实验组相应时间点小鼠血清mi R-146b浓度均高于对照组,差异均有统计意义(P<0.05)。血清mi R-146b浓度和血清IL-17与TNF-α浓度呈正相关(r=0.37,P<0.05;r=0.68,P<0.05)。结论 mi R-146b在VMC小鼠血清中表达明显增高,与IL-17和TNF-α呈正相关,提示循环中的mi R-146b可能通过IL-17和TNF-α而参与了VMC的发病过程。

miRNA-19、miRNA-146、miRNA-155在支气管哮喘患者中的表达及与气道重塑的相关性

目的探讨微小RNA-19(miRNA-19)、微小RNA-146(miRNA-146)、微小RNA-155(miRNA-155)在支气管哮喘患者中的表达及与气道重塑的相关性。方法选取2019年2月至2021年2月92例支气管哮喘患者作为研究组,根据病情严重程度分为重度组(n=17)、中度组(n=30)及轻度组(n=45),根据胸部高分辨率CT诊断结果将研究组分为气道重塑组(n=34)及非重塑组(n=58),另取同期60例健康体检者作为对照组,检测并比较各组血清miRNA-19、miRNA-146、miRNA-155,采用Perason相关性系数分析血清miRNA-19、miRNA-146、miRNA-155与病情严重程度、气道重塑的相关性。结果研究组血清miRNA-19、miRNA-146水平高于对照组,miRNA-155水平低于对照组(P<0.05);重度组血清miRNA-19、miRNA-146水平均高于中度组、轻度组,中度组血清miRNA-19、miRNA-146水平均高于轻度组(P<0.05);重度组血清miRNA-155水平低于中度组、轻度组,中度组血清miRNA-155水平低于轻度组(P<0.05);重塑组血清miRNA-19、miRNA-146水平均高于非重塑组,miRNA-155水平低于非重塑组(P<0.05);Perason相关性分析显示,血清miRNA-19、miRNA-146与病情严重程度、气道重塑呈正相关,血清miRNA-155与病情严重程度、气道重塑呈负相关(P<0.05)。结论支气管哮喘患者血清miRNA-19、miRNA-146呈高表达、miRNA-155呈低表达,三者均与病情严重程度及气道重塑情况存在相关性。

miRNA-146的靶基因及其参与的信号通路与骨关节炎

骨关节炎对个人健康和社会经济造成重大影响,目前仍缺乏相对有效的预防和治疗措施。了解骨关节炎发病的分子机制,包括细胞外调节和细胞内的信号传导机制,有助于找到潜在的治疗靶点。文章结合近几年的国内外研究,就mi RNA-146的结构特性、靶基因、参与的信号通路及其与骨关节炎的关系进行了探讨。

miRNA-146a对乙型肝炎病毒生活周期的影响及机制研究

目的研究微小RNA-146a(microRNA-146a,miR-146a)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)生活周期的影响及其可能机制。方法利用miRNA芯片比较Hep G2.2.15细胞与Hep G2细胞miRNAs表达谱差异,选择miR-146a为研究对象,RT-PCR验证芯片结果。在Hep G2.2.15细胞中分别转染miR-146a mimic和inhibitor,RT-PCR检测HBV复制水平,ELISA和Western blot检测蛋白水平。双荧光素酶报告系统进一步验证miR-146a与潜在靶点HS3ST3B1相互作用。Hep G2.2.15细胞中转染miR-146a mimic,RT-PCR和Western blot分别检测HS3ST3B1 mRNA和蛋白水平。结果 miRNA芯片发现72条miRNAs在Hep G2.2.15中表达发生变化,其中27条上调,45条下调,RT-PCR证实,miR-146a在Hep G2.2.15细胞(1.55±0.13)中表达水平明显高于Hep G2细胞(1.00±0.01)(P<0.05)。Hep G2.2.15细胞转染miR-146a mimic后,HBV复制和蛋白水平较对照组明显升高(P<0.05);转染miR-146a inhibitor后,HBV复制和蛋白表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。生物信息学预测发现HBV抑制因子HS3ST3B1是miR-146a的潜在靶点,双荧光素酶报告系统显示,HS3ST3B1野生型载体的报告荧光较对照组明显下调(P<0.05),突变预测靶位点后,HS3ST3B1突变型载体的报告荧光与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。Hep G2.2.15细胞中转染miR-146a mimic后,HS3ST3B1 mRNA水平较对照组差异无统计学意义(P>0.05),HS3ST3B1蛋白水平较对照组明显下调。结论 miR-146a能影响HBV生活周期,miR-146a可能通过作用于HBV抑制因子HS3ST3B1 3'UTR抑制其翻译从而影响HBV生活周期。

血清miR-146a、Lp-PLA2与脓毒症急性肾损伤患者肾功能的相关性分析

目的探讨血清微小RNA-146a(miR-146a)、脂蛋白相关性磷脂酶A2(Lp-PLA2)与脓毒症急性肾损伤(AKI)患者肾功能的相关性。方法选取2020年2月—2022年2月本院感染性疾病科住院的88例脓毒症患者进行回顾性分析,根据入院24 h内是否发生AKI分组(包括入院时已发生AKI的患者),将40例发生AKI的患者设为观察组1,48例未发生AKI的患者设为观察组2,另选取同期本院体检中心的45例健康体检者设为对照组。检测、比较3组入院24 h内/体检时血清miR-146a、Lp-PLA2、肾功能[胱抑素C(Cys-C),血肌酐(Scr)]指标。根据脓毒症AKI疾病严重程度,将观察组1患者分为休克组(7例)、重度组(20例)、轻度组(13例),比较脓毒症AKI患者中不同疾病严重程度、不同AKI分期组血清miR-146a、Lp-PLA2、肾功能指标,Pearson分析miR-146a、Lp-PLA2与肾功能指标的相关性,绘制受试者工作曲线(ROC),计算曲线下面积(AUC),分析miR-146a、Lp-PLA2、肾功能对脓毒症发生AKI的预测效能。结果观察组1入院24 h内血清miR-146a、Lp-PLA2、Cys-C、Scr均高于观察组2及对照组(P<0.05)。脓毒症休克组血清miR-146a、Lp-PLA2、Cys-C、Scr均高于重度组及轻度组(P<0.05)。AKIⅢ期组血清miR-146a、Lp-PLA2、Cys-C、Scr均高于Ⅱ期组及Ⅰ期组(P<0.05)。入院24 h内血清miR-146a、Lp-PLA2与Cys-C、Scr均呈正相关性(P<0.05)(r=0.421、0.417、0.398、0.387)。血清miR-146a、Lp-PLA2、Cys-C、Scr联合检测预测脓毒症发生AKI的AUC为0.798,(95%CI:0.716~0.947),灵敏度是93.13%,特异度是91.84%,联合检测预测脓毒症发生AKI的灵敏度及特异度均高于单独检测(P<0.05)。结论脓毒症AKI患者血清miR-146a、Lp-PLA2呈高表达,与Cys-C、Scr呈相关性,血清miR-146a、Lp-PLA2联合Cys-C、Scr检测可提高对AKI的预测灵敏度及特异度,在脓毒症患者AKI诊断中具有一定的参考价值。

子宫内膜息肉组织中miR-152和miR-146b-5p的表达及意义

目的探讨微小RNA(miR)-152和miR-146b-5p在子宫内膜息肉中的表达,及其对术后复发的预测价值。方法收集2021年1月至2022年10月在石家庄市第六医院接受宫腔镜息肉切除术的196例子宫内膜息肉患者作为子宫内膜息肉组,根据患者术后6个月的复发情况分为复发组(53例)和未复发组(143例),另选取同期因不孕症进行宫腔镜检查的196例患者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测子宫内膜息肉组织和正常子宫内膜组织中miR-152、miR-146b-5p相对表达水平,并进行组间比较;采用多因素Logistic回归分析子宫内膜息肉患者术后复发的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析子宫内膜息肉中miR-152、miR-146b-5p相对表达水平对子宫内膜息肉患者术后复发的预测价值。结果复发组miR-152、miR-146b-5p相对表达水平、孕激素受体(PR)水平明显低于未复发组和对照组(P<0.05),血管内皮生长因子(VEGF)、雌激素受体(ER)水平明显高于未复发组和对照组(P<0.05);未复发组miR-152、miR-146b-5p相对表达水平、PR水平明显低于对照组(P<0.05),VEGF、ER水平明显高于对照组(P<0.05)。进一步研究显示,miR-152、miR-146b-5p、VEGF、ER、PR是子宫内膜息肉患者术后复发的影响因素(P<0.05)。miR-152、miR-146b-5p二者联合预测子宫内膜息肉患者术后复发的曲线下面积(AUC)为0.949,灵敏度为96.23%,特异度为74.02%,优于二者各自单独预测(Z联合检测-miR-152=4.854、Z联合检测-miR-146b-5p=3.431,P<0.001)。结论子宫内膜息肉组织中miR-152、miR-146b-5p表达明显下调,二者联合对预测子宫内膜息肉患者术后复发有较好的参考价值。

miR-146a和miR-181a在系统性红斑狼疮患者尿液外泌体的表达及临床意义

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者尿液外泌体微小RNA(miR)-146a和miR-181a的表达及其临床意义。方法 选取2023年1月至2023年10月四川大学华西医院诊断为SLE的患者40例作为SLE组,另同期的体检健康者20例作为对照组。根据SLE病情活动指数(SLEDAI)将SLE患者分为低活动组19例(SLEDAI≤9分)和高活动组21例(SLEDAI>9分)。采用实时荧光定量PCR检测尿液外泌体miR-146a和miR-181a表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、补体C3、IgG和抗心磷脂抗体(ACA)水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析尿液外泌体miR-146a和miR-181a表达对SLE及SLE合并肾脏受累的诊断价值。结果 SLE组尿液外泌体miR-146a和miR-181a相对表达水平高于对照组(P<0.05),且高活动组尿液外泌体miR-146a和miR-181a相对表达水平高于低活动组(P<0.05)。肾脏受累的SLE患者的尿液外泌体miR-146a和miR-181a相对表达水平高于肾脏无受累的SLE患者(P<0.05)。高活动组血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IgG和ACA水平高于低活动组,血清C3水平低于低活动组(P<0.05)。SLE患者的尿液外泌体miR-146a与血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IgG和ACA水平呈正相关(r=0.443、0.493、0.410、0.381、0.340,P<0.05),与血清C3水平呈负相关(r=-0.340,P<0.05)。SLE患者的尿液外泌体miR-181a与血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IgG和ACA水平呈正相关(r=0.342、0.470、0.373、0.371、0.334,P<0.05),与血清C3水平呈负相关(r=-0.368,P<0.05)。尿液外泌体miR-146a和miR-181a表达诊断SLE的曲线下面积分别为0.907、0.897(P<0.05),诊断SLE合并肾脏受累的曲线下面积分别为0.859和0.815(P<0.05)。结论 尿液外泌体miR-146a和miR-181a表达水平对SLE患者的疾病活动具有良好的评估作用,对SLE的病情预测和诊断具有潜在应用价值。

微小RNA-146a保护脑出血大鼠神经的调控机制

目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)靶向调控E盒锌指蛋白1基因(ZEB1)表达及其在脑出血大鼠模型中参与神经保护和抑制细胞自噬的相关分子机制。方法将8周龄雄性SD大鼠40只随机分为4组,分别为假手术组、模型组、miR-146a过表达组和miR-146a低表达组,每组10只。除了假手术组,其他3组采用Ⅶ型胶原酶诱导法建立动脉瘤性自发性脑出血大鼠模型。4组大鼠均基于高盐饮食饲养6周,继续饲养20周后处死。比较4组大鼠的神经功能[改良神经严重程度评分(mNSS)]、脑含水量。采用FJC染色检测退变神经元数量;采用TUNEL染色检测细胞凋亡;采用苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理变化;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-146a和ZEB1 mRNA表达;采用蛋白质印迹(Western blot)检测ZEB1、自噬相关蛋白人重组自噬效应蛋白(Beclin 1)和微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达。结果与假手术组比较,模型组的mNSS评分、脑含水量、退变神经元数量和细胞凋亡率增加,miR-146a表达量降低,ZEB1 mRNA以及ZEB1、Beclin 1和LC3蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,miR-146a过表达组的mNSS评分、脑含水量、退变神经元数量和细胞凋亡率下降,miR-146a表达量升高,ZEB1 mRNA以及ZEB1、Beclin 1和LC3蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,miR-146a低表达组的mNSS评分、脑含水量、退变神经元数量和细胞凋亡率增加,而miR-146a表达量降低,ZEB1 mRNA以及ZEB1、Beclin 1和LC3蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调miR-146a可通过靶向抑制ZEB1基因及其蛋白表达,以及调控细胞自噬活性,进而发挥神经保护作用。

彩色多普勒超声联合血清微RNA-128微RNA-146a检测对乳腺肿块定性诊断价值分析

目的探讨彩色多普勒超声(CDFI)联合血清微RNA-128(miR-128)、微RNA-146a(miR-146a)对乳腺肿块的定性诊断价值。方法选择2020年6月至2022年12月在本院就诊的有乳腺肿块患者156例为观察对象,其中良性乳腺病变患者83例、乳腺癌患者73例。分析观察对象CDFI表现特征,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测患者血清miR-128、miR-146a水平,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-128、miR-146a对乳腺癌的诊断价值,评价CDFI联合血清miR-128、miR-146a对乳腺癌的诊断效能。结果CDFI检查结果显示,156例有乳腺肿块患者中乳腺癌78例、良性乳腺病变78例,CDFI诊断乳腺癌的灵敏度为80.8%(59/73),特异度为77.1%(64/83),准确度为78.8%(123/156);与乳腺良性肿瘤患者比较,乳腺癌患者血清miR-128、miR-146a表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);血清miR-128诊断乳腺癌的曲线下面积(AUC)(95%CI)为0.793(0.717,0.869),灵敏度为75.3%,特异度为83.1%,截断值为0.7;血清miR-146a诊断乳腺癌AUC(95%CI)为0.822(0.755,0.889),灵敏度为76.7%,特异性为80.7%,截断值为0.83;CDFI、血清miR-128、miR-146a联合诊断乳腺癌的灵敏度为93.2%、特异性为89.2%,准确度为91.0%,其诊断效能显著高于CDFI、血清miR-128、miR-146a单独检测。结论CDFI联合血清miR-128、miR-146a在鉴定乳腺肿块良恶性中,有一定临床应用意义。

血清miR-155-5p和miR-146b-5p与继发性急性髓系白血病染色体畸变及预后的关系

目的探究血清微小RNA(miR)-155-5p和miR-146b-5p与继发性急性髓系白血病(sAML)染色体畸变及预后的关系。方法选择2017-05至2020-04空军军医大学第二附属医院血液内科收治的sAML患者26例,另外纳入同期在医院进行体检的健康人25名作为健康对照组。根据国际人类细胞遗传命名系统,将sAML患者分为染色体畸变组和染色体正常组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-155-5p和miR-146b-5p水平,并记录患者随访期间的总生存期。结果与健康对照组相比,sAML组患者血清miR-155-5p显著升高[4.69(1.87,30.83)vs.1.13(0.79,1.78),Z=-4.070,P<0.001],而miR-146b-5p显著降低[1.79(1.55,2.44)vs.3.02(2.58,3.43),Z=-4.561,P<0.001]。二者联合诊断sAML的曲线下面积为0.922(95%CI:0.846~0.997)。与染色体正常组相比,染色体畸变组sAML患者血清miR-155-5p明显升高[19.26(4.45,46.65)vs.1.51(0.79,3.27),Z=-3.585,P<0.001],miR-146b-5p明显降低[1.55(1.50,1.97)vs.2.16(1.79,3.00),Z=-2.954,P=0.003]。血清miR-155-5p和miR-146b-5p水平识别染色体畸变的AUC分别为0.925(95%CI:0.826~1.000)、0.850(95%CI:0.703~0.997),联合AUC可提高至0.919(95%CI:0.812~1.000)。血清miR-155-5p和miR-146b-5p是染色体畸变的独立影响因素(P<0.05)。血清miR-155-5p高表达(≥4.27)和miR-146b-5p低表达(<1.62)患者的总生存率更低,中位生存时间更短(P<0.05)。Cox回归分析结果表明,血清miR-155-5p高表达和miR-146b-5p低表达是sAML患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论血清miR-155-5p高表达和miR-146b-5p低表达与sAML患者染色体畸变和预后不良密切相关,二者有希望成为sAML染色体畸变和预后不良的风险预测指标。

miRNA-146a调控血管平滑肌细胞增殖和凋亡的作用及机制

目的探究miRNA-146a调控血管平滑肌细胞增殖、凋亡的作用及相关机制。方法取SDP级健康雄性SD大鼠作为实验对象,取血管平滑肌细胞(VSMC)消化离心后,转染50nmol/L miRNA-146a反义寡核苷酸、错义链和同等剂量磷酸盐缓冲液(PBS),进行对照比较。结果实验组细胞在转染后48h内VSMC的数目和吸光度值均低于其他两组,细胞凋亡率明显高于其他两组,核因子κBp65、PCNA的表达水平低于其他两组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论miRNA-146a可促进VSMC的增殖,抑制细胞凋亡的进行,这一作用机制与核因子κBp65、PCNA表达水平增高有关。

外周血miRNA-146a、miRNA-26a在重症急性胰腺炎预后中的价值探讨

目的 探究外周血微小RNA-146a(miR-146a)、微小RNA-26a(miR-26a)在重症急性胰腺炎预后中的价值。方法 选择器工业五二一医院2019年4月—2021年3月收治的119例重症急性胰腺炎患者作为研究对象,根据临床病历资料收集患者的临床一般资料,于患者入院24 h内对患者外周血miRNA-146a、miRNA-26a相对表达量及血常规指标进行检测。根据患者治疗28 d内病情转归情况将其分为生存组和死亡组。通过Logistic多因素回归分析影响重症急性胰腺炎患者预后的影响因素;采用受试者工作特征曲线(ROC)下面积评估外周血miR-146a及miR-26a水平对患者临床预后的预测价值。结果 死亡组胰周感染所占比例及APACHEⅡ评分、miR-146a相对表达量、miR-26a相对表达量均高于生存组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic多因素回归分析结果显示,胰周感染、APACHEⅡ评分、外周血miR-146a及miR-26a相对表达水平偏高均为重症急性胰腺炎患者预后死亡的危险因素(P<0.05)。ROC分析显示,外周血miR-146a、miR-26a水平单一及联合对重症急性胰腺炎患者预后死亡的ROC预测的曲线下面积(AUC)分别为0.793、0.780、0.883,且外周血miR-146a、miR-26a水平对重症急性胰腺炎患者死亡预后的单一预测效能低于两者联合(P<0.05)。结论 合并胰周感染、APACHEⅡ评分、外周血miR-146a及miR-26a相对表达水平偏高的重症急性胰腺患者死亡率较高,外周血miR-146a、miR-26a相对表达水平均可有效预测重症急性胰腺炎患者的死亡预后。

重症肌无力患者血清microRNA-146a水平变化及其生物信息学分析

目的观察重症肌无力(MG)患者血清microRNA-146a水平变化,并采用生物信息学方法分析microRNA-146a在MG发病中的分子调控网络。方法选取初诊MG患者108例(MG组)及同期体检健康者50例(对照组),采用RT-PCR法检测血清microRNA-146a。采用UCSC基因组在线工具分析microRNA-146a在人类基因组中的位置及保守性,采用Targetscan和Co MeTa数据库预测microRNA-146a的交集靶基因,采用DAVID数据库分析microRNA-146a靶基因的功能富集(GO富集)和信号通路富集(KEGG Pathway)。结果 MG组血清microRNA-146a相对水平为2. 13±0. 63,高于对照组的0. 86±0. 38(P <0. 05); microRNA-146a核苷酸序列具有高度保守性,其潜在靶基因有ERBB4、NUMB、CD80、TRAF6、IRAK1等88种; GO富集结果显示,microRNA-146a靶基因功能主要富集于细胞增殖调控、神经元分化、磷代谢反应、免疫炎症反应、细胞因子合成等过程; KEGG Pathway结果显示,microRNA-146a靶基因主要富集于Toll样受体信号通路、神经递质调节信号通路、EB信号通路等。结论 MG患者血清microRNA-146a水平升高,其可通过作用于多条信号通路参与MG的发病。

miRNA-146调控TLR4/NF-κB通路促进滋养层细胞增殖和迁移

目的探讨miRNA-146是否通过调控Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路促进滋养层细胞HTR-8/SVneo增殖和迁移,以期为不明原因复发性流产(uRSA)的发病机制研究和防治提供参考。方法(1)细胞研究:将转染后的胎盘滋养层细胞HTR-8/SVneo分成miRNA-146抑制剂组、抑制剂对照组、miRNA-146模拟物组、模拟物对照组,检测各组HTR-8/SVneo细胞生长的活力、增殖、凋亡、迁移情况,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测各组TLR4、NF-κB、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的mRNA和蛋白相对表达水平。(2)动物研究:建立Dicer酶敲除的uRSA小鼠模型,将正常妊娠小鼠作为对照组,通过qRT-PCR检测胎盘组织的miRNA-146 mRNA表达情况,采用免疫组织化学法检测胎盘组织的TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6蛋白表达情况。结果(1)细胞研究:与模拟物对照组比较,miRNA-146模拟物组HTR-8/SVneo细胞克隆形成率、增殖能力及迁移能力显著增加(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与抑制剂对照组和miRNA-146模拟物组比较,miRNA-146抑制剂组HTR-8/SVneo细胞克隆形成率、增殖能力及迁移能力显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。与模拟物对照组比较,miRNA-146模拟物组的TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6蛋白和mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);与抑制剂对照组和miRNA-146模拟物组比较,miRNA-146抑制剂组的TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6蛋白和mRNA相对表达量显著增加(P<0.05)。不同浓度(10~80μmol/L)miRNA-146对HTR-8/SVneo细胞生长活力的增长均有显著影响(P<0.05),并呈浓度依赖性。(2)动物研究:与对照组比较,uRSA组小鼠胎盘组织中miRNA-146 mRNA的相对表达量显著降低[(0.32±0.19)vs.(0.96±0.24),t=12.473,P<0.05],而TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6的蛋白表达有增高趋势。结论上调miRNA-146的表达具有促进胎盘滋养层细胞的增殖和迁移作用,其机制可能与负性调控TLR4/NF-κB通路相关。miRNA-146有望成为防治uRSA的潜在靶标。