孕早期血清半乳糖凝集素3、微RNA-29a对孕妇发生妊娠糖尿病风险的预测价值分析

目的分析孕早期血清半乳糖凝集素3(Gal-3)、微RNA(miR)-29a对孕妇发生妊娠糖尿病(GDM)风险的预测价值。方法选取2021年3月至2022年3月在东部战区总医院进行围生期检查的60例GDM病人作为GDM组,同期体检健康的孕妇60例作为对照组。抽取病人空腹静脉血,检测并比较两组间病人孕早期血清Gal-3(以酶联免疫吸附测定检测)、miR-29a(PCR法)表达水平。绘制受试者操作特征曲线(ROC曲线)评估孕早期血清Gal-3、miR-29a水平预测孕妇发生GDM风险的价值,行多因素logistic回归分析影响孕妇发生GDM的因素。结果GDM组血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、Gal-3[(40.31±4.12)μg/L比(35.79±3.58)μg/L]、糖化血红蛋白(HbA1c)、服糖后2 h血糖(2 hPG)、空腹血糖(FPG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均明显高于对照组(P<0.05),空腹胰岛素(FINS)、miR-29a(26.78±2.72比30.46±3.09)水平明显低于对照组(P<0.05);绘制ROC曲线评估血清Gal-3、miR-29a水平预测GDM发生的价值显示,单独检测时,Gal-3的特异度86.67%最高,miR-29a的灵敏度90.00%最高,两者联合检测灵敏度、特异度均处于较高水平(95.00%、88.33%)。行多因素logistic回归分析显示,血清Gal-3、miR-29a、HOMA-IR、HbA1c为GDM发生的影响因素(P<0.05)。结论GDM病人孕早期血清Gal-3水平较高、miR-29a水平较低,可能为预测GDM发生的潜在指标,两者联合检测价值更高。

微小RNA-29a及水通道蛋白4与创伤性脑损伤和预后的关系

目的探究微小RNA-29a(miR-29a)/水通道蛋白(AQP)4在早期急性创伤性脑水肿(TBE)中的表达和术后神经功能损伤及预后的相关性。方法收集2018年1月至2019年6月重庆医科大学附属第三医院神经疾病中心收治的老年重型脑挫伤患者50例,根据术前头颅CT检查结果分为阴性组5例、轻度组11例、中度组20例、重度组14例。检测患者血清及组织miR-29a水平、组织AQP4水平,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估患者术后神经功能损伤情况,格拉斯哥昏迷评分(GCS)评价患者预后情况,GCS4~5分纳入预后良好组11例,GCS<4分纳入预后不良组39例。结果阴性组、轻度组、中度组和重度组组织AQP4蛋白表达量逐渐增加,同时组织和血清miR-29a相对表达量逐渐降低(P<0.01);血清和组织miR-29a相对表达量与组织AQP4蛋白表达量均呈负相关性(r=-0.748、r=-0.538,P<0.01);组织AQP4蛋白表达量与NIHSS评分呈正相关性(r=0.634,P<0.01),而血清和组织miR-29a相对表达量与NIHSS评分呈负相关性(r=-0.700、r=-0.801,P<0.01)。与预后良好组比较,预后不良组组织AQP4蛋白表达量升高,组织、血清miR-29a相对表达量降低(P<0.01)。ROC曲线分析显示,术前血清miR-29a相对表达量预测患者预后不良曲线下面积为0.879(95%CI:0.746~1.000)。结论老年患者早期急性TBE后脑水肿程度越严重,组织中AQP4表达越高,同时组织与血清中miR-29a表达越低,与术后神经功能下降有关。检测血清miR-29a相对表达量可提供一定的预后信息。

胸腔积液中微RNA-29a和腺苷脱氨酶联合检测对结核性胸膜炎的临床 诊断 效能

目的探讨胸腔积液中微RNA-29a(miR-29a)和腺苷脱氨酶(ADA)联合检测诊断结核性胸膜炎的临床效能。方法选择2018年1月至2019年6月新乡医学院第一附属医院收治的142例胸腔积液患者为研究对象,根据原发病分为结核性胸腔积液(TPE)组(n=63例)和恶性胸腔积液(MPE)组(n=79例),TPE患者给予抗结核治疗方案治疗后根据有无胸膜增厚分为预后良好组和预后不良组。采用酶速率法检测胸腔积液中ADA水平,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胸腔积液中miR-29a的相对表达量。比较TPE组和MPE组患者胸腔积液中miR-29a和ADA表达水平,应用Spearman分析2组患者胸腔积液中miR-29a相对表达量与ADA水平的相关性,应用受试者操作特征(ROC)曲线分析胸腔积液中miR-29a、ADA单独及联合诊断TPE的临床效能;比较预后良好组和预后不良组TPE患者治疗前胸腔积液中miR-29a表达水平,使用ROC曲线分析TPE患者治疗前胸腔积液中miR-29a和ADA表达水平对治疗后出现胸膜增厚的临床诊断效能。结果TPE组患者胸腔积液中miR-29a相对表达量和ADA表达水平均显著高于MPE组(P<0.05)。TPE组胸腔积液中miR-29a与ADA存在显著正相关性(r=0.314,P>0.05),MPE组患者胸腔积液中miR-29a与ADA无明显相关性(r=0.234,P>0.05)。miR-29a诊断TPE的曲线下面积(AUC)为0.903[95%置信区间(CI):0.853~0.954],当截断值为0.46时,敏感度和特异度分别为90.50%和79.70%;ADA诊断TPE的AUC为0.840(95%CI:0.767~0.913),当截断值为18.63 U·L^(-1)时,敏感度和特异度分别为84.10%和74.70%;miR-29a联合ADA诊断TPE的AUC为0.943,敏感度和特异度分别为94.90%和92.40%。预后不良组患者治疗前胸腔积液中miR-29a相对表达量显著高于预后良好组(P<0.05),预后不良组与预后良好组患者胸腔积液中ADA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前胸腔积液中miR-29a相对表达量诊断TPE患者治疗后出现胸膜增厚的AUC为0.832(95%CI:0.727~0.939),当截断值为0.615时,敏感度和特异度分别为73.50%和78.60%;治疗前胸腔积液中ADA表达水平诊断TPE患者治疗后出现胸膜增厚的AUC为0.614(95%CI:0.432~0.795),当截断值为22.59 U·L^(-1)时,敏感度和特异度分别为46.28%和52.56%。结论胸腔积液中miR-29a联合ADA检测对结核性胸膜炎具有显著的临床诊断效能,miR-29a可作为诊断结核性胸膜炎患者抗结核治疗后出现胸膜增厚的标志物。

血清微小RNA-29a水平与妊娠糖尿病孕妇母婴结局的相关性

目的分析血清微小RNA-29a水平与妊娠糖尿病(GDM)孕妇母婴结局的相关性。方法纳入245例GDM孕妇,233例随访至分娩结束,根据母婴结局将其分为对照组(n=168)和不良结局组(n=65)。比较两组孕妇的一般资料、血清微小RNA-29a水平和其他实验室指标;应用多因素Logistic回归模型分析GDM孕妇发生母婴不良结局的影响因素;应用受试者工作特征曲线分析危险因素预测GDM孕妇发生母婴不良结局的价值。结果完成随访的233例GDM孕妇中,65例GDM孕妇出现母婴不良结局,发生率为27.90%。不良结局组的孕期增重大于对照组,空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)和微小RNA-29a水平均高于对照组(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,孕期增重、空腹血糖、HbA1c和微小RNA-29a水平均是GDM孕妇发生母婴不良结局的独立危险因素(均P<0.05)。微小RNA-29a预测GDM孕妇发生母婴不良结局的曲线下面积为0.821,大于孕期增重、空腹血糖、HbA1c的曲线下面积(均P<0.05)。结论微小RNA-29a水平升高的GDM孕妇发生母婴不良结局的风险增高,该指标有助于GDM孕妇母婴结局的评估。

依普利酮通过靶向微小RNA-192和微小RNA-29a/b/c减轻糖尿病肾病模型大鼠肾损伤机制研究

目的:探讨依普利酮通过靶向微小RNA(miR)-192和miR-29a/b/c减轻糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤的机制。方法:将30只成年雄性SD大鼠分为对照组、模型组、依普利酮组,每组10只。通过实时定量PCR(RT-qPCR)分析各实验组大鼠肾脏组织中miR-192和miR-29a/b/c的mRNA表达水平。使用血糖仪检测大鼠血糖,并对大鼠整体和肾脏组织样本进行称重。通过相关商用试剂盒检测大鼠尿蛋白、肌酐和血尿素氮的浓度。通过蛋白印迹分析大鼠肾脏组织中转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Smad家族蛋白3(Smad3)的蛋白表达。通过免疫组化分析大鼠肾脏切片中TGF-β_(1)、Smad3和α-SMA的表达。结果:模型组miR-29a、miR-29b、miR-29c的mRNA表达水平低于对照组,miR-192的mRNA表达水平高于对照组(均P<0.05)。依普利酮组miR-29a、miR-29b、miR-29c的mRNA表达水平高于模型组,miR-192的mRNA表达水平低于模型组(均P<0.05)。模型组体重低于对照组,空腹血糖和肾脏质量/体重高于对照组(均P<0.05)。依普利酮组体重高于模型组,空腹血糖和肾脏质量/体重低于模型组(均P<0.05)。模型组尿蛋白、肌酐和血尿素氮水平高于对照组,而依普利酮组低于模型组(均P<0.05)。三组大鼠GFR比较差异有统计学意义,且模型组低于对照组,依普利酮组高于模型组(均P<0.05)。模型组基底膜变薄,肾小球萎缩,近曲小管损伤,经依普利酮治疗后得到改善。模型组TGF-β_(1)、Smad3和α-SMA平均光密度(MOD)高于对照组,而依普利酮组MOD低于模型组(均P<0.05)。结论:依普利酮通可减轻DN模型大鼠肾损伤,机制与靶向miR-192和miR-29a/b/c表达调控TGF-β_(1)/Smad信号通路有关。

子宫内膜癌组织中长链非编码RNA核富含丰富的转录本1、微小RNA-29a的表达及临床意义

目的探讨子宫内膜癌(EC)组织中长链非编码RNA(LncRNA)核富含丰富的转录本1(NEAT1)、微小RNA(miR)-29a的表达及临床意义。方法选取2017年7月至2022年6月在郑州人民医院诊治的EC患者45例,检测癌组织和癌旁组织LncRNA NEAT1、miR-29a表达,并分析癌组织中LncRNA NEAT1、miR-29a表达与临床病理特征的关系,以及LncRNA NEAT1、miR-29a表达对EC的诊断价值。结果EC患者癌组织LncRNA NEAT1表达明显高于癌旁组织(t=7.951,P<0.001),miR-29a表达与癌旁组织比较明显较低(t=5.616,P<0.001)。肿瘤大小≥2cm、临床分期Ⅲ~Ⅳ期EC患者癌组织中LncRNA NEAT1表达高于肿瘤大小<2cm、临床分期Ⅰ~Ⅱ期EC(t=2.251,P=0.030;t=2.273,P=0.028);临床分期Ⅰ~Ⅱ期EC患者癌组织中miR-29a表达高于临床分期Ⅲ~Ⅳ期患者(t=3.091,P=0.003)。ROC曲线分析得出,LncRNA NEAT1、miR-29a、两者联合诊断测EC的AUC分别为0.861、0.700、0.934。在最佳临界值点对应的敏感性、特异性分别为:LncRNA NEAT1为62.2%、100.0%,miR-29a为100.0%、48.9%,两者联合为100.0%、75.6%。结论EC癌组织LncRNA NEAT1呈高表达,miR-29a呈低表达,均和临床分期有关,且前者还与肿瘤大小有关,LncRNA NEAT1、miR-29a联合可为诊断EC提供参考。

微小RNA-29a-3p靶向Serpinh1调控人胃癌细胞系BGC823增殖和侵袭的分子机制

目的探讨微小RNA(miR)-29a-3p影响Serpinh1对胃癌细胞的增殖与侵袭,并分析其相关的分子机制。方法检测miR-29a-3p在胃癌BGC823细胞中的表达水平,并评估miR-29a-3p在胃癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。通过Western blotting和荧光素酶分析证明,miR-29a-3p与Serpinh13’UTR直接结合。此外,采用MTT法、集落形成法和Transwell法在体外检测miR-29a-3p/Serpinh1轴对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果转染后miR-29a-3p模拟物(mimic)组中miR-29a-3p的表达明显高于miR-29a-3p阴性对照和空白组,转染miR-29a-3p mimic后BGC823细胞增殖能力显著降低。荧光素酶分析显示,miR-29a-3p通过靶向Serpinh13’-非翻译区(3’UTR)抑制Serpinh1的表达。此外,miR-29a-3p的过表达通过靶向Serpinh1显著抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移。结论MiR-29a-3p可靶向作用于Serpinh1,从而调控胃癌细胞的增殖与侵袭。

食管鳞状细胞癌组织中miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c、VEGF-A表达变化及其相关性

目的观察食管鳞状细胞癌(ESCC)癌组织及癌旁组织中miRNA-29家族(miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c)及血管内皮生长因子A(VEGF-A)的相对表达量变化,并探讨他们之间的关系。方法收集手术切除并经病理检查确诊的ESCC癌组织及癌旁组织,应用qRT-PCR及免疫组织化学染色技术分别检测miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c、VEGF-A的相对表达量,并分析其相关关系;进一步应用生物信息学方法和双荧光素酶报告基因系统推测和验证miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同调控同一靶基因VEGF-A的分子调节机制。结果与癌旁组织比较,ESCC癌组织中miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c呈低表达(P均<0.05);VEGF-A呈高表达(P<0.05),且其之间呈负相关关系(miRNA-29a:r=-0.955;miRNA-29b:r=-0.950;miRNA-29c:r=-0.893,P均<0.01)。生物信息学分析结果发现,VEGF-A能够与miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c进行特异性结合,可能为miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同的靶基因。双荧光素酶报告基因系统验证了VEGF-A是miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同的靶基因。结论 ESCC癌组织中miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c低表达,VEGFA高表达;且他们之间具有负相关关系。VEGF-A为miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c共同的靶向调节基因。

微小RNA-29a-3p调节卷曲蛋白4表达影响高脂血症大鼠种植体骨整合的实验研究

目的研究microRNA-29a-3p(miR-29a-3p)对高脂环境下大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化和高脂血症大鼠种植体骨整合的影响及其作用位点。方法 1)体外实验:对BMSCs分别进行普通和高脂成骨诱导,通过逆转录实时定量聚合酶链反应和Western blot检测miR-29a-3p及成骨相关因子碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关基因2(Runx2)的基因和蛋白质表达;高脂培养的BMSCs分别转染miR-29a-3p模拟物、抑制物及阴性对照(NC)质粒,RT-qPCR检测miR-29a-3p、ALP及Runx2基因表达情况,Western blot检测ALP、Runx2蛋白表达情况。通过靶基因预测软件(Target Scan、MiRNA.org等)预测miR-29a-3p与成骨相关的靶基因为卷曲蛋白4(Fzd4),双荧光素酶报告检测miR-29a-3p与Fzd4的相互作用关系。2)体内实验:高脂血症大鼠为实验组,普通大鼠为对照组,两组分别植入种植体,检测种植体周围骨组织中miR-29a-3p、ALP、Runx2的表达差异;行种植体-骨组织的硬组织切片,亚甲基蓝-酸性品红染色,进行组织学观察。分别将miR-29a-3p过表达慢病毒载体及空白对照慢病毒载体注射入高脂血症大鼠,种植体植入后3、10 d检测种植体周围骨组织中ALP、Runx2的表达变化以研究miR-29a-3p对高脂血症大鼠成骨的作用。结果高脂组与普通组相比,ALP、Runx2和miR-29a-3p表达下调,BMSCs成骨分化能力下降。miR-29a-3p模拟物组与抑制物组相比,ALP、Runx2表达升高,BMSCs成骨分化能力增强。体内实验也得到了相似结果。双荧光素酶报告基因分析证实miR29a-3p通过直接结合3’-UTR抑制Fzd4表达。结论miR-29a-3p对高脂环境下大鼠BMSCs成骨分化起正向调节作用,可直接与Fzd4结合调节成骨分化;mi R-29a-3p能够促进高脂血症大鼠种植体周围成骨标志基因的表达,有利于骨整合。

过表达miRNA-29a对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压的作用

目的:检测微小RNA(miRNA)-29a在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺动脉血管壁组织中的表达,研究过表达miRNA-29a对肺动脉高压大鼠的影响,并探讨其初步机制。方法:在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠模型上,用实时荧光定量PCR测定肺组织miRNA-29a的表达水平;尾静脉注射miRNA-29a-mimic后,记录大鼠肺动脉压和体循环动脉压,苏木素-伊红染色观察肺动脉组织的形态,Western blot检测肺动脉组织中p-Akt与peNOS的蛋白水平。结果:野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺动脉血管壁组织中miRNA-29a呈低表达;过表达miRNA-29a后,大鼠肺动脉压明显下降,体循环血压无显著变化,肺动脉中膜增厚程度显著减弱,肺血管重构现象不明显,p-Akt与p-eNOS的蛋白水平上调。结论:过表达miRNA-29a对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压具有改善作用,可能与激活PI3k/Akt-eNOS信号通路有关。

微小RNA-29a在膝骨关节炎兔子中的表达及其对干细胞生长因子β、血管内皮生长因子表达和炎症反应的影响

目的探讨微小RNA(miRNA)-29a在膝骨关节炎(KOA)兔子中的表达水平及其对干细胞生长因子β(SCGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平及炎症反应的影响。方法(1)在48只新西兰兔中取8只作为空白对照组,另外40只用于建立KOA模型,建模成功后随机平均分为非干预组、SCGF-β组、VEGF组和SCGF-β+VEGF组。SCGF-β组、VEGF组和SCGF-β+VEGF组分别采用相应抗体干预,空白对照组与非干预组采用等量生理盐水干预。干预1周后,检测各组血清miRNA-29a、SCGF-β、VEGF、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)的表达水平。(2)取非干预组兔子的软骨组织制备KOA软骨细胞,利用miRNA-29a模拟物(Mimic组)、miRNA-29a阴性对照物(NC组)和miRNA-29a抑制物(Inhibitor组)转染细胞。正常组不予干预。7 d后检测各组软骨细胞miRNA-29a的表达水平及SCGF-β、VEGF mRNA和蛋白的相对表达水平。结果(1)与空白对照组相比,非干预组、SCGF-β组、VEGF组及SCGF-β+VEGF组的血清miRNA-29a表达水平均降低,而血清SCGF-β、VEGF、TNF-α和CRP水平均升高(均P<0.05)。SCGF-β组和SCGF-β+VEGF组的血清SCGF-β表达水平均低于VEGF组与非干预组,VEGF组和SCGF-β+VEGF组的血清VEGF表达水平均低于SCGF-β组与非干预组;SCGF-β组、VEGF组和SCGF-β+VEGF组的血清TNF-α和CRP表达水平均低于非干预组,且SCGF-β+VEGF组的血清TNF-α和CRP表达水平均低于SCGF-β组与VEGF组(均P<0.05)。(2)正常组及NC组miRNA-29a相对表达水平低于Mimic组,高于Inhibitor组;且Inhibitor组miRNA-29a相对表达水平低于Mimic组(均P<0.05);3组转染后的软骨细胞SCGF-β、VEGF的蛋白及mRMA相对表达水平均为Inhibitor组>NC组>Mimic组(均P<0.05)。结论KOA兔子血清miRNA-29a的表达水平降低,血清SCGF-β、VEGF、TNF-α和CRP的表达水平升高,下调SCGF-β和VEGF表达可抑制KOA兔子体内的炎症反应。上调miRNA-29a表达水平可抑制KOA软骨细胞SCGF-β、VEGF的表达,这有助于减轻KOA引起的炎症反应,从而控制病情。

MicroRNA-29a与宫腔粘连相关性的研究

目的探讨微小RNA-29a(microRNA-29a)、转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad通路及雌激素受体(ER)与宫腔粘连(IUA)的相关性。方法将行宫腔镜检查并确诊为宫腔粘连的患者60例作为研究组,其中中度及重度IUA组各30例;将同期因其他原因(不孕、子宫纵隔)行宫腔镜检查并确诊为非宫腔粘连的患者45例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测各组子宫内膜中microRNA-29a水平、TGF-β1mRNA水平及ERmRNA水平;采用免疫印迹法(Western blot)检测各组子宫内膜中TGF-β1蛋白及ER蛋白的表达水平。结果 MicroRNA-29a水平从对照组、中度IUA组至重度IUA组依次下降,且两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);3组中microRNA-29a与TGF-β1mRNA呈负相关(r=-0.814,P<0.05);3组中microRNA-29a与ERmRNA呈正相关(r=0.646,P<0.05)。结论 MicroRNA-29a与TGF-β1/Smad通路及ER参与宫腔粘连的形成过程有一定的相关性。

微小RNA-29a和内皮联蛋白在子痫前期107例胎盘组织中的表达及临床意义

目的探究微小RNA(miR)-29a和内皮联蛋白在不同程度子痫前期孕妇胎盘组织中的表达水平和临床意义。方法抽签选取2017年7月至2019年7月宜昌市妇幼保健院收治的行剖宫产的子痫前期病人107例,其中轻度子痫前期组48例,重度子痫前期组59例。另选取同期行剖宫产分娩的健康孕妇56例作为对照组。分别用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫组织化学检测胎盘中miR-29a和内皮联蛋白表达水平,并通过Pearson相关性分析检验miR-29a和内皮联蛋白在子痫前期胎盘组织中的相关性,采用logistic回归分析影响子痫前期的危险因素。结果对照组收缩压、舒张压、平均动脉压、24 h尿蛋白比轻度子痫前期组和重度子痫前期组低,轻度子痫前期组比重度子痫前期组低(P<0.05)。对照组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组胎盘组织miR-29a(1.09±0.21、3.18±1.19、6.04±1.91)和内皮联蛋白(0.22±0.10、0.37±0.14、0.49±0.22)表达水平依次升高(P<0.05)。胎盘组织miR-29a表达水平与内皮联蛋白表达水平呈正相关(r=0.52,P<0.001)。重度子痫前期组胎儿窘迫、产后大出血、胎盘早剥等并发症发生率均高于轻度子痫前期组和对照组(P<0.05)。二元logistic回归分析显示,miR-29a、内皮联蛋白水平偏高是孕妇发生子痫前期的独立危险因素(P<0.05)。结论子痫前期孕妇胎盘组织中miR-29a和内皮联蛋白随着病情的加重而不断升高,miR-29a和内皮联蛋白水平呈正相关,是孕妇发生子痫前期的独立危险因素。二者可作为子痫前期病情的参考指标。

结直肠癌患者血清微小RNA-29a-3p的表达及临床意义

目的测定结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者血清中微小RNA-29a-3p(miR-29a-3p)的表达水平,分析其临床意义.方法收集2017年02月-2019年02月就诊的65例CRC患者及65名健康体检志愿者,应用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清miR-29a-3p水平,分析其表达与临床特征之间的关系及用于诊断CRC的效能.结果CRC患者血清miR-29a-3p水平高于对照组(P<0.01),表达与临床分期、淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05);与患者性别、年龄、分化程度、肿瘤部位、癌痛评分无关(P>0.05).血清miR-29a-3p诊断CRC灵敏度(Se)为72.90%,特异度(Sp)为84.80%,正确诊断指数(YI)为0.577,ROC曲线下面积(AUC)为0.817,与AUC=0.5比较,差异具有统计学意义(P<0.01),且其介于0.7~0.9,提示有一定的准确性.结论血清miR-29a-3p可能是CRC早诊、早治和评估预后的潜在生物标记物.

血浆微小RNA-29a对冠心病患者左心室肥厚影响的分析

目的探索血浆微小RNA-29a对冠心病患者左心室肥厚的影响。方法按照是否并发左心室肥厚将164例冠心病患者分为单纯冠心病组和并发组。以血浆U6核小RNA为对照,并计算血浆微小RNA-29a表达量。分析影响冠心病患者左心室肥厚的相关因素。结果微小RNA-29a产物大小显著小于U6产物。两组男性、体质量指数(BMI)、长期吸烟史、冠心病家族史、左心室后壁厚度、右心房内径差异均无统计学意义(均P>0.05);并发组收缩末期左心室内径、舒张末期左心室内径(LVEDD)、室间隔厚度(IVSd)、左心房前后径、舒张末期左心室容积(LVEDV)、左心室质量指数(LVMI)均高于单纯冠心病组(均P<0.05)。多因素分析显示,微小RNA-29a与冠心病左心室肥厚患者LVEDD、IVSd、LVEDV、LVMI具有相关性(均P<0.05)。结论血浆微小RNA-29a与冠心病患者左心室肥厚具有密切关系,与LVEDD、IVSd、LVEDV、LVMI等超声心电图参数相关,可以作为冠心病并发左心室肥厚检查的参考标志物。

重症急性脑梗死继发肺部感染患者miRNA-146b和miRNA-29a-3p与miRNA-21水平及其预测价值

目的探讨重症急性脑梗死继发肺部感染患者血清微小RNA-146b(miRNA-146b)、miRNA-29a-3p和miRNA-21及其预测价值.方法选取2021年4月-2023年1月中国医科大学附属盛京医院收治的重症急性脑梗死继发肺部感染患者69例,根据临床肺部感染评分分为轻度组36例、中度组26例和重度组7例,同期选择单纯重症急性脑梗死患者60例为未感染组,检测全部患者血清中miRNA-146b、miRNA-29a-3p和miRNA-21,评估以上指标对继发肺部感染的诊断价值.结果感染组血清miRNA-146b、miRNA-29a-3p和miRNA-21均高于未感染组(P<0.05);重度组患者血清miRNA-146b、miRNA-29a-3p和miRNA-21高于中度组和轻度组,中度组高于轻度组(P<0.05);miRNA-146b诊断重症脑梗死并发肺部感染的价值最高,其次为miRNA-21、miRNA-29a-3p;三项指标联合检测可明显提高诊断肺部感染的价值.结论血清miRNA-146b、miRNA-29a-3p和miR-NA-21水平与急性脑梗死继发肺部感染的程度呈正相关,联合检测对疾病的早期诊断和治疗有一定的临床价值.

1型糖尿病患儿血清miRNA-29和TRAF3水平及临床意义

目的探讨1型糖尿病(T1DM)患儿血清微小RNA-29(miRNA-29)和肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)水平及临床意义。方法选取2021年6月至2023年1月该院收治的78例T1DM患儿作为观察组,另选取同期60例健康儿童作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测两组血清miRNA-29水平,采用酶联免疫吸附试验检测两组血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、TRAF3水平。采用多因素Logistic回归分析儿童T1DM发生的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA-29和TRAF3辅助诊断儿童T1DM的价值,并计算曲线下面积(AUC)。结果观察组IL-6、TNF-α、IFN-γ、miRNA-29和TRAF3水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。T1DM患儿血清miRNA-29和TRAF3与IL-6、TNF-α、IFN-γ均呈正相关(P<0.05)。T1DM患儿血清miRNA-29与TRAF3呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,IL-6、TNF-α、IFN-γ、miRNA-29和TRAF3水平升高均为儿童T1DM发生的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miRNA-29和TRAF3辅助诊断儿童T1DM的AUC分别为0.866、0.798,均高于IL-6(0.601)、TNF-α(0.687)、IFN-γ(0.572)。结论miRNA-29、TRAF3可能通过介导炎症损伤而参与T1DM的发生,二者有助于儿童T1DM的辅助诊断。

微小RNA-29a对心肌细胞缺血再灌注损伤作用及机制

目的 探讨微小核RNA-29a(miR-29a)在缺血再灌注引起的心肌细胞损伤中的功能和分子机制。方法 体外培养H9c2大鼠心肌细胞,并将其分为正常对照组(正常培养的H9c2细胞)、缺氧再灌注(H/R)组(缺氧处理4 h,继而复氧4 h)、H/R+miR-29a inhibitor组(在H/R组基础上转染miR-29a抑制剂)、H/R+miR-29a inhibitor+LY294002组(在H/R+miR-29a inhibitor组基础上加用2μg·mL-1抑制剂LY294002)。通过实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-29a和磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)的表达水平;使用细胞计数试剂盒8(CCK-8)试剂盒检测细胞活力;通过流式细胞术和原位末端标记(TUNEL)实验检测细胞凋亡;使用试剂盒检测乳酸盐脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性;通过双荧光素酶报告实验验证miR-29a和PI3K的靶向关系。结果 对照组、H/R组和H/R+miR-29a inhibitor组细胞miR-29a表达水平分别为1.05±0.02、4.13±0.15、1.56±0.21,细胞活力分别为(100.00±0.08)%、(50.02±0.13)%和(83.65±0.04)%,CK含量分别为(71.46±0.08)、(140.22±0.14)和(98.86±0.25)U·L-1,NC组上述指标和H/R+miR-29a inhibitor组与H/R组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。H/R+miR-29a inhibitor组中磷酸化p-PI3K蛋白(0.73±0.09)和磷酸化蛋白激酶B (p-AKT)蛋白表达(0.82±0.04)显著高于H/R组中p-PI3K蛋白(0.29±0.09)和p-AKT蛋白表达(0.39±0.24),差异均有统计学意义(均P<0.01),在加入PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002后p-PI3K和p-AKT的表达水平下调。结论 miR-29a可促进心肌细胞凋亡,敲降miR-29a可以保护心肌细胞免受H/R损伤,miR-29a对H/R心肌细胞的保护作用是通过激活PI3K/AKT通路实现的。

lncR-HOXA-AS3靶向miR-29a对前列腺癌细胞凋亡和自噬的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncR)HOXA-AS3和微小RNA-29a(miR-29a)对前列腺癌(PCa)细胞凋亡、自噬的影响。方法 体外培养人PCa细胞(DU-145、LNCaP、C4-2B)和人正常前列腺细胞RWPE-1,采用RT-qPCR法检测细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达。应用双荧光素酶报告基因实验验证lncR-HOXA-AS3和miR-29a之间的靶向调控关系。取对数生长期LNCaP细胞,分为si-NC组、si-HOXA-AS3组、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC组和si-HOXA-AS3+anti-miR-29a组,利用脂质体转染法分别将si-NC、si-HOXA-AS3、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC、si-HOXA-AS3+anti-miR-29a转染至各组LNCaP细胞,应用RT-qPCR法检测各组细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达,应用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,应用Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3及自噬相关蛋白LC3II、LC3I、Beclin 1表达。结果 与正常前列腺细胞相比,人PCa细胞中lncR-HOXA-AS3表达均明显升高(P均<0.05),而miR-29a表达均降低(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因显示lncR-HOXA-AS3能靶向miR-29a抑制荧光素酶活性(P<0.05)。与si-NC组比较,si-HOXA-AS3组LNCaP细胞lncR-HOXA-AS3表达降低(P<0.05),miR-29a表达升高(P<0.05),细胞凋亡率升高(P均<0.05),Caspase-3、LC3Ⅱ/LC3I及Beclin 1蛋白表达升高(P均<0.05)。与si-HOXA-AS3+anti-miR-NC组比较,si-HOXA-AS3+anti-miR-29a组LNCaP细胞miR-29a表达下降(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Caspase-3、LC3Ⅱ/LC3I及Beclin1蛋白表达下降(P均<0.05)。结论 抑制lncR-HOXA-AS3表达能靶向调控miR-29a基因促进PCa细胞凋亡和自噬。

维持性血液透析患者血清微小RNA-29b水平与矿物质骨代谢紊乱指标的相关性分析

目的探讨维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者血清微小RNA(microRNA,miR)-29b水平与慢性肾脏病-矿物质骨代谢紊乱(chronic kidney disease-mineral and bone metabolism disorder,CKD-MBD)指标的相关性。方法选取2019年2月至2021年11月鄂州市中心医院血液净化中心进行规律MHD的患者116例作为MHD组,根据血钙、磷、全段甲状旁腺素(intact parathyroid hormone,iPTH)指标范围将其分为达标组(未合并CKD-MBD)与未达标组(合并CKD-MBD)。另选取体检健康者116名为对照组。检测血清miR-29b、钙、磷、iPTH、血红蛋白(hemoglobin,Hb)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、白蛋白(albumin,Alb)、β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)、25羟维生素D[25 hydroxyvitamin D,25(OH)D]水平,比较其在各组中的差异。Pearson法分析未达标组miR-29b与各临床指标相关性;logistic回归模型分析miR-29b降低的相关影响因素。结果MHD组患者以下指标水平高于对照组:血磷[(1.50±0.37)mmol/L比(1.12±0.26)mmol/L]、ALP[(96.07±13.54)U/L比(72.39±11.95)U/L]、β2-MG[(1.73±0.51)mg/L比(1.48±0.36)mg/L]、25(OH)D[(21.30±5.47)μg/L比(16.82±3.15)μg/L]、iPTH[(325.08±84.90)ng/L比(50.74±9.36)ng/L];以下指标水平低于对照组:Hb[(114.93±7.26)g/L比(125.74±10.51)g/L]、Alb[(37.25±3.82)g/L比(43.18±4.04)g/L]、miR-29b[(0.72±0.15)比(1.06±0.12)],差异有统计学意义(P<0.05)。116例MHD患者中9例(7.76%)同时达到CKD-MBD指南中规定的钙、磷、iPTH目标值。达标组血清miR-29b表达水平(0.92±0.17)高于未达标组(0.70±0.15),差异有统计学意义(P<0.05)。未达标组血清miR-29b与25(OH)D、磷、iPTH存在负相关(r=−0.592、r=−0.546、r=−0.601,P均<0.05),与年龄、体重指数、透析时间、Hb、ALP、Alb、钙、β2-MG不存在相关性(P均>0.05)。25(OH)D[OR(95%CI):1.627(1.110~2.384)]、磷[OR(95%CI):1.461(1.064~2.007)]、iPTH[OR(95%CI):1.539(1.092~2.169)]是导致miR-29b降低的危险因素(P<0.05)。结论miR-29b在合并矿物质骨代谢紊乱的MHD患者中呈下调表达,且与25(OH)D、磷、iPTH呈负相关。