子宫内膜癌组织中miRNA-302c的表达变化及其意义

目的观察子宫内膜癌组织中miRNA-302c的表达变化,并探讨其临床意义。方法选择2012年1月~2013年12月收治的51例子宫内膜癌患者的手术切除肿瘤组织标本为观察组,同期因子宫肌瘤行全子宫切除术的40例患者的正常子宫内膜组织标本为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测两组标本中的miRNA-302c。分析51例子宫内膜癌患者肿瘤组织标本miRNA-302c相对表达量与临床病理参数的关系。采用受试者工作曲线和最大约登指数法确定用子宫内膜癌组织标本miRNA-302c表达量预测患者死亡和复发的截断值,将其用截断值分为高miRNA-302c表达组和低miRNA-302c表达组,采用Kaplan-Meier法计算并比较高、低miRNA-302c表达组的3年累计生存率和复发率。结果观察组、对照组miRNA-302c表达量分别为1.721±2.804、4.024±6.518,两组相比P<0.05。51例子宫内膜癌患者子宫内膜癌组织标本miRNA-302c表达量与临床分期、分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05)。用肿瘤组织标本miRNA-302c表达量预测患者死亡的截断值为1.568,用其将51例子宫内膜癌患者分为高miRNA-302c表达组(miRNA-302c表达量<1.568)30例和低miRNA-302c表达组(miRNA-302c表达量≥1.568)21例,其3年累计生存率分别为96.67%(29/30)、90.47%(19/21),P<0.05。用肿瘤组织标本miRNA-302c表达量预测患者复发的截断值为1.803,用其将51例子宫内膜癌患者分为高miRNA-302c表达组(miRNA-302c表达量<1.803)24例和低miRNA-302c表达组(miRNA-302c表达量≥1.803)27例,其复发率分别为16.67%(4/24)、29.63%(8/27),P<0.05。结论子宫内膜癌组织miRNA-302c表达降低。检测子宫内膜癌组织miRNA-302c表达有助于判断子宫内膜癌的临床分期、分化程度、淋巴结转移及预测预后、复发。

微小RNA-302c在高糖下对人肾小球系膜细胞的影响

目的探讨微小RNA-302c(miR-302c)在高糖环境下对人肾小球系膜细胞功能的影响。方法采用双荧光素酶报告实验验证miR-302c是否参与TIMP3表达的调控;在高糖环境下培养人肾小球系膜细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测细胞miR-302c以及TIMP3 mRNA相对表达量,检测肾小球系膜细胞的存活数,采用qRT-PCR方法检测细胞炎症因子IL-6以及IL-8 mRNA的表达。结果经双荧光素酶报告基因实验证实TIMP3是miR-302c的直接靶基因;在不同糖浓度下培养人肾小球系膜细胞,结果发现,与正常糖培养相比较,高糖处理下的人肾小球系膜细胞的miR-302c表达显著性增加,TIMP3 mRNA表达显著性下降,同时存活细胞的数量显著性减少。与正常糖培养相比较,高糖培养下人肾小球系膜细胞的炎症因子IL-6以及IL-8 mRNA的表达显著性增高。结论高糖环境下miR-302c的表达上调,并靶向下调TIMP3的表达,可能促使炎症因子分泌增加、参与高糖环境下对人肾小球系膜细胞的损伤作用。

miR-302c靶向CREB1基因通过P53信号通路影响肺癌的侵袭和迁移

目的:探讨微小RNA-302c(miR-302c)在肺癌组织中的表达,以及对肺癌侵袭和迁移的影响和作用机制。方法:在线分析GEO数据库中GSE19945和GSE136043两组肺癌数据集中miR-302c的表达情况,通过Human Protein Atlas数据库研究CREB1表达情况;双荧光素酶实验证明miR-302c和CREB1的关系。正常组细胞不加任何药物,对照组细胞转染miR-302cmimic-NC,实验组细胞转染miR-302c-mimic。通过Transwell小室检测细胞的侵袭与迁移能力,通过小管形成检测细胞的血管生成能力,通过Western blot检测各组细胞中CREB1、p-P53、p-P21的表达水平。结果:生物信息分析显示,与正常组织相比,miR-302c在肺癌组织、肺癌淋巴转移组织中的表达明显降低,肺癌组织中CREB1的表达明显升高;双荧光素酶实验证明miR-302c靶向调控CREB1的表达;与正常组相比,实验组迁移和侵袭的细胞数量、小管生成的数量明显下降,实验组中CREB1的表达明显下降,p-P53、p-P21的表达明显升高(均P<0.05)。结论:miR-302c在肺癌组织表达降低,过表达miR-302c后能明显抑制肺癌细胞的侵袭与转移,这可能与抑制靶基因CREB1的表达,以及激活P53信号通路有关。

布比卡因对胃癌细胞抑制作用的机制研究

目的探讨布比卡因对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其对长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因(LncRNA SNHG16)/微小RNA-302c-3p(miR-302c-3p)分子轴的调控作用。方法体外培养人胃癌细胞AGS,细胞中分别加入3个剂量(50,100,200μmol·L^(-1))的布比卡因处理细胞(命名为低、中、高3个剂量实验组),分别将pcDNA、pcDNA-SNHG16转染至AGS细胞随后加入高剂量布比卡因处理细胞(命名为第1转染组、第2转染组)。噻唑蓝法、Transwell实验用于检测AGS细胞增殖、迁移及侵袭,实时荧光定量-PCR法用于分析SNHG16和miR-302c-3p基因表达水平,通过双荧光素酶报告实验确定SNHG16和miR-302c-3p基因之间靶向关系。结果空白对照组和低、中、高3个剂量实验组的细胞存活率分别为(99.21±5.45)%,(83.98±11.87)%,(59.78±4.93)%,(41.00±5.45)%;这4组的SNHG16基因的表达水平分别为0.98±0.05,0.70±0.06,0.49±0.07,0.30±0.06;这4组的miR-302c-3p基因的表达水平分别为0.98±0.04,1.26±0.11,1.65±0.12,2.29±0.31;这4组的迁移细胞数分别为(104.56±3.57),(84.56±6.86),(60.44±10.78),(36.11±5.42)个;这4组的侵袭细胞数分别为(117.89±7.66),(84.67±6.78),(63.56±6.48),(28.89±4.20)个。SNHG16可竞争性结合miR-302c-3p。第1转染组、第2转染组细胞存活率分别为(41.73±13.11)%,(90.15±5.83)%;miR-302c-3p的表达水平分别为0.99±0.06,0.47±0.17;迁移细胞数分别为(36.89±8.34),(74.78±8.63)个;侵袭细胞数分别为(28.67±4.87),(79.11±10.56)个。上述指标:3个剂量实验组与空白对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),且有剂量组依赖性;第2转染组与第1转染组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论布比卡因可通过下调SNHG16基因的表达而上调miR-302c-3p基因的表达进而减弱胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。