微小RNA-31在肿瘤中的作用研究进展

微小RNA-31 (miR-31)是在动物和人体组织中广泛存在的一种多功能miRNA,可调控靶基因的表达并参与细胞增殖、分化和凋亡等生理、病理过程。miR-31与肿瘤的发生发展密切相关。miR-31可作为抑癌或促癌基因表达于各个肿瘤中,并在肿瘤细胞增殖、侵袭和迁移等多个生物学过程中发挥重要作用。因此,miR-31有望成为恶性肿瘤的新型生物标志物和治疗靶点。本文就miR-31在恶性肿瘤中的作用机制、治疗预后等方面的研究进展进行综述,以期为恶性肿瘤的早期诊断及个性化治疗提供策略。

慢性乙型病毒性肝炎病人血浆中LncRNA PVT1、微RNA-31-5p表达水平与炎症损伤程度的相关性分析

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1()、微RNA-31-5p(miR-31-5p)在慢性乙型病毒性肝炎(CHB)病人血浆中的表达情况,并分析其与炎症损伤程度的关系。方法选取东莞市人民医院2019年12月至2020年12月确诊的180例CHB病人为CHB组,所有病人均行肝穿刺活检,根据CHB病人炎症损伤程度分为G1组(66例),G2组(58例),G3组(41例),G4组(15例),根据肝纤维化程度进行分组,无明显肝纤维化(S0,S1)组(64例),明显肝纤维化组(S2,S3)(78例),早期肝硬化(S4)组(38例)。同时选取55例健康者为对照组。收集CHB组和对照组的一般资料,分别检测两组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-10、超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷氨酰基转移酶(GGT)等指标水平;采用实时荧光定量PCR法对血清中LncRNA PVT1、miR-31-5p表达水平进行检测,Pearson法分析LncRNA PVT1、miR-31-5p表达的相关性。结果CHB病人血清中LncRNA PVT1(1.52±0.31、1.93±0.47、2.57±0.63、3.42±1.03)表达水平高于对照组0.68±0.23,且LncRNA PVT1表达水平随着炎症损伤程度加重而升高,miR-31-5p表达水平(0.85±0.22、0.79±0.18、0.63±0.14、0.50±0.11)低于对照组0.96±0.24,且miR-31-5p表达水平随着炎症损伤程度加重而降低,差异有统计学意义(P<0.05);CHB组病人TNF-α(108.13±30.32)ng/L、IL-6(68.50±22.59)ng/L、IL-1β(358.92±36.80)ng/L、IL-10(75.25±18.99)ng/L、Hs-CRP(11.22±3.15)mg/L、ALT(57.13±9.34)U/L、AST(37.86±5.56)U/L、GGT水平(33.21±10.62)U/L均显著高于对照组[(38.49±19.88)ng/L、(19.12±3.21)ng/L、(169.05±5.24)ng/L、(16.56±2.34)ng/L、(1.68±0.56)mg/L、(24.62±7.95)U/L、(22.32±4.26)U/L、(26.94±8.32)U/L](P<0.05);CHB组病人血清中LncRNA PVT1表达与TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、Hs-CRP、ALT、AST、GGT均呈正相关(P<0.05),miR-31-5p与TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、Hs-CRP、ALT、AST、GGT均呈负相关(P<0.05);CHB病人血清中LncRNA PVT1、miR-31-5p的表达呈明显负相关(r=−0.36,P<0.05)。结论CHB病人血清中LncRNA PVT1表达升高,miR-31-5p表达降低,且二者均与炎症损伤程度有关。

microRNA-31联合CEA对肺癌早期诊断的临床意义

目的探讨microRNA-31联合癌胚抗原(Carcino-embryonic antigen CEA)检测对肺癌的临床诊断价值,以期寻找到一种更加有效地肺癌诊断方法。方法选取365例于2016年1月至2018年2月我院就诊患者。其中186例确诊为肺癌患者,设为肺癌组;肺良性病变组患者108例,设为肺良性病变组;另有健康体检者71例,设为健康对照组。分别应用实时荧光定量PCR法及Elisa测定血清中microRNA-31及CEA的含量。结果肺癌组血清中microRNA-31水平、CEA的含量均显著高于良性病变组和健康对照组(P<0.05)。相比microRNA-31及CEA单独检测,microRNA-31联合CEA检测显著提高了肺癌诊断的灵敏度、阴性预测率及阳性预测率,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论microRNA-31联合CEA检测能够有效提高肺癌的诊断效能,具有一定的临床应用价值。

微小RNA-31-5p调控蛋白激酶Cε通路在远程缺血预处理保护兔脊髓缺血再灌注损伤中的作用机制

目的探讨微小RNA-31-5p(miR-31-5p)在远程缺血预处理(RIPC)保护兔脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)中的作用及其机制。方法将60只日本大耳白兔分为假手术(sham)组、缺血再灌注(I/R)组、RIPC组、RIPC+miR-NC组、RIPC+miR-31-5p mimic组,每组12只。采用夹闭腹主动脉30 min建立SCIRI模型,通过鞘内注射miR-31-5p mimic质粒构建miR-31-5p过表达模型,除sham组和I/R组外,其余各组于闭腹主动脉前1 h实施RIPC。再灌注48 h后,对动物进行后肢运动功能评分和血-脊髓屏障(BSCB)通透性检测;苏木精-伊红(HE)染色观察脊髓组织形态学变化;TUNEL检测脊髓组织神经元凋亡情况;逆转录-实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测脊髓组织miR-31-5p和蛋白激酶Cε(PKCε)和脑源性神经营养因子(BDNF)的mRNA表达;Western Blot检测脊髓组织PKCε、BDNF蛋白表达。结果与sham组相比,I/R组后肢运动功能评分降低,伊文思蓝(EB)含量、神经元凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05),且脊髓神经元数量减少,空泡化明显,胞核固缩;与I/R组相比,RIPC组后肢运动功能评分、PKCε和BDNF的mRNA和蛋白表达增加,EB含量、神经元凋亡率、miR-31-5p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05),且正常神经元明显增多,少数细胞空泡变性,核仁明显;使用miR-31-5p mimic上调miR-31-5p的表达可显著减弱RIPC对兔SCIRI的保护作用(P<0.05)。结论 miR-31-5p的表达在RIPC后降低,并可通过激活PKCε蛋白,上调脊髓组织中BDNF的表达,减轻SCIRI。

MicroRNA-31在肝癌中的肿瘤抑制作用

目的分析微小RNA-31(MicroRNA-31)在肝癌中的肿瘤抑制作用和影响机制。方法选取2014年6月至2016年1月收治的HBV感染者为研究对象,依照患者病情分为急性肝炎组、慢性肝炎组、肝硬化组、肝癌组,另外选取同期健康体检人员30例作为健康组,采集患者外周静脉血,测定MicroRNA-31表达情况。肝癌手术患者留取肝癌组织和癌旁正常组织,细胞转染,实施平板克隆形成实验。选取健康裸鼠,在无菌条件正常饮食下,将转染肝癌组织经皮下注射置入裸鼠,3 w后处死,取出肿瘤组织,测量体积。同时开展Western印迹,采用实时荧光RNA和免疫组织化学法测定观察。结果感染HBV后,细胞MicroRNA-31存在高表达情况,肝癌组患者组织核细胞MicroRNA-31表达显著高于其他组(P<0.05)。平板克隆实验测定,转染MicroRNA-31的肿瘤细胞克隆数增殖减少50%(P<0.05)。体外成瘤实验,转染MicroRNA-31后的肝癌细胞成瘤能力下降,而且肿瘤体积缩小。Western印迹检测,细胞转染后,LATS2表达水平提高1.5倍,PPP2R2A表达无明显变化,转染LATS2siRNA细胞中LATS2表达显著下降(P<0.05)。MicroRNA-31表达与LATS2呈现负相关(P<0.05)。免疫组织化学法检测显示,肝癌组织中LATS2表达水平显著低于正常组织。结论肝癌组织中MicroRNA-31可能通过调节LATS2抑制肿瘤增殖,MicroRNA有望成为分子指标靶向药物。

miRNA-31-5p和SATB2的表达对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响机制

目的:探讨微小RNA-31-5p(microRNA-31-5p,miRNA-31-5p)和核基质结合蛋白质2(special AT-rich sequence-binding protein 2,SATB2)在乳腺癌中的表达,以及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法:选取2017年3月至2020年12月于天津医科大学总医院收治行外科切除的80例乳腺癌患者的临床病理资料,定量反转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测乳腺癌组织标本和各细胞系中miRNA-31-5p和SATB2 mRNA表达。双荧光素酶实验证明miRNA-31-5p和SATB2的关系。细胞实验分为正常组(未行任何干预),miRNA-31-5p-agomir-对照组(细胞转染miRNA-31-5p-agomir-NC),miRNA-31-5p激动剂组(细胞转染miRNA-31-5p-agomir),pcDNA3.1组(细胞转染miRNA-31-5p-agomir+pcDNA3.1-SATB2)。EDU染色、Transwell小室实验检测各组细胞的体外增殖与转移活性;裸鼠皮下种植乳腺癌模型检测细胞的体内生长、转移能力;Western blot检测SATB2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达。结果:与癌旁组织和乳腺正常细胞相比,miRNA-31-5p在乳腺癌组织和乳腺癌细胞中的表达下降,SATB2 mRNA表达升高;miRNA-31-5p能靶向调控SATB2表达;与正常组相比,miRNA-31-5p激动剂组细胞的体外增殖与转移以及体内生长与转移能力均明显下降,SATB2和Vimentin的表达降低,E-cadherin的表达升高,而转染pcDNA3.1-SATB2后可部分逆转这一抑制作用,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:miRNA-31-5p在乳腺癌中的表达降低,SATB2的表达升高,过表达miRNA-31-5p后能明显抑制MDA-MB-231细胞的体外增殖与转移、体内生长与转移能力,但转染pcDNA3.1-SATB2可部分逆转这一抑制作用。

炎症性肠病的微小RNA-377、微小RNA-31表达及其与肠道菌群相关性

目的 探讨微小RNA-377(miR-377)、微小RNA-31(miR-31)在炎症性肠病血清中的表达及其与肠道菌群相关性。方法选取2016年5月至2019年6月保定市第一中心医院收治的110例炎症性肠病病人为研究组,其中活动期69例、缓解期41例,同时选取同院体检的健康志愿者60例为对照组;采用qRT-PCR法检测血清miR-377、miR-31的表达量;根据表达量平均值将病人分为miR-377低表达组53例、miR-377高表达组57例、miR-31低表达组57例、miR-31高表达组53例,比较分析miR-377、miR-31表达量与肠道菌群[肠球菌(EC)、酵母菌(SB)、双歧杆菌(BL)、消化球菌(PS)、小梭菌(CD)、肠杆菌(EMB)、葡萄球菌(SP)、拟杆菌(BD)、乳杆菌(LC)、真杆菌(ES)]数量的相关性;采用ELISA法检测血清白细胞介素-34(IL-34)、C反应蛋白(CRP)的水平;采用电化学发光法检测血清降钙素原(PCT)的水平;采用Pearson法分析miR-377、miR-31表达量与IL-34、CRP、PCT水平的相关性。结果 与对照组比较,研究组血清中miR-377、miR-31的表达水平显著升高[(0.96±0.16)比(2.23±0.50)、(0.97±0.24)比(2.39±0.41)](P<0.05),活动期明显高于缓解期[(1.70±0.26)比(2.54±0.30)、(2.02±0.19)比(2.61±0.34)](P<0.05),血清IL-34、CRP、PCT水平显著升高(P<0.05);miR-377与IL-34、CRP、PCT水平呈正相关(r=0.99、0.50、0.86,均P<0.001);miR-31表达量与IL-34、CRP、PCT水平呈正相关(r=0.95、0.64、0.85,均P<0.001);与miR-377低表达组比较,miR-377高表达组SB、BL、LC、EC、BD、PS、SC的数量明显升高(P<0.05),ES的数量明显降低(P<0.05);与miR-31低表达组比较,miR-31高表达组SB、BL、LC、EC、BD、PS、SC的数量明显升高(P<0.05),ES的数量明显降低(P<0.05)。结论 miR-377、miR-31在炎症性肠病血清中的表达水平升高,二者均与炎性反应及肠道菌群有关。

2型糖尿病患者血清微小RNA-31表达与肾病并发症及机体炎症水平的关系

目的探讨2型糖尿病患者血清微小RNA-31(miR-31)表达水平与并发糖尿病肾病(DN)的相关性,以及miR-31与机体炎症水平的相关性。方法纳入2016年6月至2018年6月河北省沧州市人民医院的2型糖尿病患者75例,其中无任何糖尿病相关血管并发症者25例(无并发症组),合并DN者25例(DN组),仅合并视网膜病变者25例(视网膜病变组);另选取同期健康志愿者50例(对照组)。应用实时聚合酶链反应技术检测各组受试者血清miR-31表达水平,流式细胞仪检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平。结果对照组和2型糖尿病患者的血清miR-31表达量比较,差异无统计学意义(P=0.528)。DN组的血清miR-31表达量明显低于无并发症组[(0.39±0.21)比(1.05±0.67)](P=0.001),而视网膜病变组的血清miR-31表达量与无并发症组比较差异无统计学意义(P=0.356)。DN组的血清ICAM-1水平明显高于无并发症组[(158.60±25.93)μg/L比(96.75±19.54)μg/L](P=0.001)。Pearson相关性分析结果显示,DN组患者血清miR-31水平与TNF-α(r=-0.614,P=0.001)、IL-6(r=-0.452,P=0.026)、ICAM-1水平(r=-0.540,P=0.006)之间存在负相关。结论血清miR-31可作为2型糖尿病患者发生DN的生物学标志物,miR-31的表达与炎症因子TNF-α、IL-6、ICAM-1呈负相关。

微小RNA-31水平在糖尿病肾病患者外周血中的表达及其与肾小球滤过功能的关系研究

目的探讨微小RNA(microRNA,miR)-31水平在糖尿病肾病患者外周血中的表达及其与肾小球滤过功能的关系。方法选取2019年10月至2020年10月华中科技大学同济医学院附属梨园医院收治的130例糖尿病肾病患者为研究对象,根据肾小球滤过率(estimate glomerular filtration rate,eGFR)不同将研究对象分为A组(60ml/min<eGFR≤90ml/min,48例)、B组(30ml/min≤eGFR≤60ml/min,53例)和C组(eGFR<30ml/min,29例)。比较分析三组患者的miR-31表达水平和临床资料,分析糖尿病肾病患者肾小球滤过功能的独立影响因素以及miR-31表达水平与糖尿病肾病患者肾小球滤过功能的相关性。结果A组患者的miR-31表达量为1.29±0.25,B组患者的miR-31表达量为1.41±0.36,C组患者的miR-31表达量为1.52±0.43,C组患者的miR-31表达水平明显高于A组和B组,B组患者的miR-31表达水平明显高于A组,差异均有显著性(F=3.598,P=0.030)。C组患者的舒张压、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、尿素氮、尿酸、肌酐、尿蛋白、尿白蛋白排泄率均显著高于A组和B组(P<0.05);B组患者的舒张压、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、尿素氮、尿酸、肌酐、尿蛋白、尿白蛋白排泄率均显著高于A组(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,年龄、舒张压、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、miR-31是糖尿病肾病患者肾小球滤过功能的独立危险因素(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,miR-31表达水平与糖尿病肾病患者肾小球滤过功能呈负相关(r=-0.318,P<0.001)。结论糖尿病肾病患者外周血miR-31的表达水平与糖尿病肾病患者的肾小球滤过功能呈负相关,是肾小球滤过功能的独立危险因素,可通过检测外周血miR-31的表达水平为糖尿病肾病患者肾小球滤过功能的评估和临床治疗提供指导。

血清微小RNA-31和微小RNA-27b表达对持续性心房颤动患者射频消融术后复发的预测价值

目的探究血清微小RNA-31(miR-31)、微小RNA-27b(miR-27b)表达水平对持续性心房颤动(房颤)患者射频消融术后复发的预测价值。方法选取2016年10月至2019年12月濮阳市油田总医院收治的首次行射频消融术的持续性房颤患者114例(持续性房颤组),根据患者随访时是否复发房颤分为复发组41例和未复发组73例;同期选择健康体检者114例为对照组。利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测所有受试者血清miR-31、miR-27b相对表达水平。分析持续性房颤射频消融术后复发患者的血清miR-31、miR-27b表达水平与左心房内径、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-31、miR-27b对持续性房颤射频消融术后复发的诊断效能。结果与对照组比,持续性房颤组患者的血清miR-31、miR-27b相对表达水平较高(均为P<0.05);与未复发组比,复发组患者血清中hs-CRP、NT-proBNP水平、miR-31、miR-27b相对表达水平较高(均为P<0.05),左心房内径较大(P<0.05)。持续性房颤射频消融术后复发的患者血清miR-31、miR-27b表达水平与左心房内径、hs-CRP、NT-proBNP均呈正相关(均为P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清miR-31、miR-27b联合诊断持续性房颤射频消融术后复发的AUC为0.915,敏感度为80.50%,特异度为95.90%。结论血清miR-31、miR-27b可能参与了持续性房颤的发生,且与房颤病情发展密切相关,可作为房颤射频消融预后的判断指标。

微小RNA-30b和微小RNA-31与卵巢癌患者肿瘤标志物的相关性分析

目的 探讨微小RNA-30b(miR-30b)、微小RNA-31(miR-31)与卵巢癌患者肿瘤标志物糖链抗原153(CA153)、糖链抗原125(CA125)及癌胚抗原(CEA)水平的相关性。方法 选取2020年7月-2021年7月肿瘤医院收治的卵巢癌患者70例、卵巢良性肿瘤患者50例。取所有卵巢癌、卵巢良性肿瘤患者手术治疗前血清标本,取手术切除卵巢良性肿瘤患者肿瘤组织及卵巢癌患者癌组织标本进行免疫组化染色,RT-PCR法检测miR-30b、miR-31表达,酶联免疫吸附实验法检测CA153、CA125及CEA水平,Pearson相关性分析miR-30b、miR-31表达与CA153、CA125及CEA水平相关性。结果 卵巢癌组织中miR-30b表达较高(t=-15.87,P<0.001),miR-31表达低于卵巢良性肿瘤组织(t=28.58,P<0.001)。与肿瘤直径≤3 cm、Ⅰ+Ⅱ期、无远处转移、高及中分化患者相比,肿瘤直径>3 cm、Ⅲ+Ⅳ期、有远处转移及低分化患者miR-30b表达较高(P<0.05),miR-31表达较低(P<0.05);卵巢癌患者血清CA153、CA125、CEA水平高于卵巢良性肿瘤患者(t=24.68,21.42、28.82,均P<0.05)。卵巢癌患者miR-30b表达与CA153、CA125及CEA水平呈正相关;miR-31表达与CA153、CA125及CEA水平呈负相关;卵巢癌组织中miR-30b、miR-31表达呈负相关(P<0.05)。结论 miR-30b在卵巢癌表达较高,miR-31表达较低,且与卵巢癌患者病理组织特征、肿瘤标志物水平有关。miR-30b、miR-31在卵巢癌组织中表达具有一定相关性,并且二者表达与肿瘤标志物水平具有相关性。

微小RNA-31对缺血性脑卒中患者氧化应激水平和神经功能的影响

目的 探讨在缺血性脑卒中(Ischemic stroke,IS)患者体内微小RNA-31对氧化应激各指标和神经功能的影响。方法 自2019年10月至2022年5月收集65例在我院进行诊治的缺血性脑卒中患者作为观察组,选择同期在我院进行健康体检的志愿者65例作为对照组。检测两组研究对象体内的微小RNA-31、血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的表达水平,并进行美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分和临床神经功能缺损评分,对比分析微小RNA-31对缺血性脑卒中患者氧化应激水平和神经功能的影响。结果 观察组的IS患者体内微小RNA-31表达量明显高于健康对照组(t=18.758,P=0.000),血清MDA水平明显高于对照组(t=15.002,P=0.000),GSH-Px水平明显低于对照组(t=11.359,P=0.000);患者组组内比较,随着病情的加重,NIHSS评分呈上升趋势,且组间比较差异具有统计学意义(P>0.05);通过Pearson相关性分析结果显示,患者组血清微小RNA-31表达量与MDA及NIHSS评分呈正相关(r=0.526,r=0.511,P<0.05),与GSH-Px呈负相关(r=-0.435,P=0.032);MDA与NIHSS评分呈正相关(r=0.547,P<0.05),GSH-Px与NIHSS评分呈负相关(r=-0.424,P<0.05)。结论 微小RNA-31的表达参与缺血性脑卒中的发生与发展,其作用机制可能与抑制机体的氧化应激反应有关。

血清miR-31、IL-22联合检测在儿童病毒性心肌炎诊断及预后评估中的价值

目的 研究血清微小RNA-31(miR-31)、白细胞介素-22(IL-22)在儿童病毒性心肌炎(VMC)诊断及预后评估中的价值。方法 选取2017年1月至2022年1月河南省儿童医院心血管内科收治的病毒性心肌炎患儿作为研究对象,将其命名为VMC组(n=106),另选同期在本院进行体检的健康儿童为对照组(n=70)。比较两组血清miR-31、IL-22、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)及心电图参数[QRS间期、PR间期]与超声心动图参数[左室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)];在治疗结束后对VMC患儿随访1年,以随访期间发生恢复迁延、扩张性心肌病、遗留心律失常及患儿死亡等事件为预后不良,根据多因素Logistic回归分析VMC患儿预后不良的影响因素,并绘制ROC曲线分析血清miR-31、IL-22水平对VMC患儿诊断及预后不良评估的价值。结果 VMC组的血清miR-31、IL-22、CK-MB、cTnT水平及QRS间期、PR间期均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),LVEF、LVFS均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,miR-31水平高表达、IL-22水平升高、CK-MB水平升高、cTnT水平升高、QRS间期延长、PR间期延长、LVEF降低及LVFS降低均是VMC患儿预后不良的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清miR-31、IL-22水平二者联合检测诊断VMC的曲线下面积(AUC)为0.990,优于单一检测(P<0.05);血清miR-31、IL-22水平二者联合检测评估VMC患儿预后不良的曲线下面积(AUC)为0.919,优于单一检测(P<0.05)。结论 miR-31、IL-22在病毒性心肌炎患儿血清中高表达,可能成为儿童病毒性心肌炎诊断及预后评估的辅助诊断指标。

2型糖尿病患者血清微小RNA-31表达与肾病并发症及机体炎症水平的关系

探析2型糖尿病患者血清微小RNA-31表达与肾病并发症以及机体炎症水平之间的关系。方法 以2021年3月-2023年3月作为时间段,选取于我院接受诊治的2型糖尿病患者72例纳入实验研究范围,作为研究组,将其中未出现并发症的24例作为A组,合并糖尿病肾病24例作为B组,另外仅合并视网膜病变的24例作为C组;并于同一时间段内选取我院健康体检患者48例作为对照组。参考实时聚合酶链反应技术与流式细胞仪对每组研究对象的相关指标进行测评,以血清miR-31、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)以及白细胞介素6(IL-6)作为指标展开对比研究。结果 从血清miR-31表达水平来看,观察组与对照组、A组与C组基本一致,无显著差距(P>0.05),而B组低于A组,差距显著(P<0.05);从血清ICAM-1水平来看,B组高于A组,差距显著(P<0.05);并且根据相关性分析结果显示B组患者的血清miR-31表达水平与TNF-α、ICAM-1以及IL-6存在密切联系,呈现出负相关。结论 临床上针对2型糖尿病患者是否并发糖尿病肾病可通过检测血清miR-31进一步明确,其表达水平与TNF-α、ICAM-1以及IL-6等炎性因子有着紧密联系,可用作临床上评定糖尿病肾病的重要手段。

肺癌患者医院感染与IL-27基因多态性及microRNA-31和microRNA-150表达的相关性分析

目的探讨肺癌患者医院感染与白细胞介素-27(IL-27)基因多态性及外周血微小RNA(microRNA-31和microRNA-150)表达相关性。方法选择2017年1月-2018年12月于杭州师范大学附属医院治疗的肺癌患者483例为研究对象,根据是否发生医院感染分为感染组64例与未感染组419例。分离鉴定肺癌患者医院感染的病原菌。采用实时荧光定量PCR法检测患者IL-27基因多态性及外周血microRNA-31和microRNA-150表达。结果肺癌住院患者483例,感染患者64例,感染率为13.25%,以呼吸道感染为主。共培养分离病原菌73株,其中革兰阴性菌48株占65.75%,以肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌为主;革兰阳性菌23株占31.51%,以金黄色葡萄球菌为主;真菌2株占2.74%。感染组IL-27964基因型AA分布率为56.25%(36/64)高于未感染组,而GG分布率为31.25%(20/64)低于未感染组(P<0.05);两组IL-272905基因型TT、TG和GG基因型分布比较差异无统计学意义。感染组IL-27964等位基因A分布率为62.50%(40/64)高于未感染组(P<0.05),而IL-272905等位基因T和G分布比较差异无统计学意义。感染组外周血microRNA-31和microRNA-150表达分别为(2.38±0.35)和(1.63±0.27)高于未感染组(P<0.05)。结论肺癌患者医院感染外周血microRNA-31和microRNA-150表达明显上调,认为IL-27964 A基因为肺癌感染易感基因。

微小RNA-31靶向作用Rasp21蛋白活化子1对结肠癌细胞增殖和迁移的影响

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-31对结肠癌细胞增殖和迁移的影响，并探讨其作用机制。方法采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）的方法检测miR-31在结肠癌细胞株和结直肠癌患者癌组织中的表达，细胞计数试剂盒（CCK-8）法和细胞划痕实验分别检测过表达miR-31后结肠癌细胞增殖和迁移，Western blot检测过表达miR-31的结肠癌细胞中Rasp21蛋白活化子1（RASA1）的表达。结果miR-31在结肠癌组织和细胞中高表达（P〈0．05），过表达miR-31可促进结肠癌细胞的增殖和迁移能力。同时，转染miR-31模拟物组RASA1的相对表达量为0．21±0．05，miR-31抑制剂组的相对表达量为2．464-0．35，两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-31对结肠癌细胞的增殖和迁移具有促进作用，其机制与靶向作用于RASA1蛋白有关。

细胞外信号调节激酶通路对人动脉硬化平滑肌细胞增殖、表型标志蛋白及微小RNA-31表达水平的影响

目的 探讨阻断人动脉硬化平滑肌细胞中细胞外信号调节激酶（ERK）通路,进一步明确ERK、微小RNA（miR）-31与血小板源性生长因子（PDGF）-BB介导的平滑肌增殖之间的调控关系.方法 收集下肢动脉硬化闭塞患者下肢截肢标本,用贴壁法原代培养平滑肌细胞.相同代数的第3～6代血管平滑肌细胞（VSMCs）,加入PDGF-BB或PDGF-BB＋ PD98059分别用细胞计数试剂盒（CCK-8）法、Transwell法、Western blot、实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测VSMCs增殖、迁移能力、表型标志性蛋白表达以及miR-31表达水平.结果 经组织贴壁法成功培养出原代平滑肌细胞.PDGF-BB诱导动脉硬化细胞的增殖率上调102％ （P＜0.05）和迁移率上调246％ （P＜0.05）,ERK阻断剂PD98059能阻滞PDGF-BB诱导的诱导作用,平滑肌细胞增殖抑制53％（P＜0.05）和迁移抑制19％ （P ＜0.05）.与空白组比较PDGF-BB处理后,收缩表型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）含量下调38％ （P ＜0.05）,增殖型蛋白骨桥蛋白（OPN）和miR-31含量分别上调116％ （P ＜0.05）和386％ （P ＜0.05）.与PDGF-BB组比较,PD98059＋PDGF-BB处理后,α-SMA含量显著上调41％ （P ＜0.05）,增殖型蛋白OPN和miR-31含量分别下调33％ （P ＜0.05）和46％（P＜0.05）.结论 阻断ERK通路可促进VSMCs由增殖型向收缩型转变,同时下调miR-31的表达水平,ERK-miR-31通路可能是调控人动脉硬化平滑肌细胞功能及表型的重要通路.

微小RNA-31在乳腺癌细胞中低表达对乳腺癌细胞侵袭的影响

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-31在乳腺癌细胞中的表达以及对乳腺癌细胞的作用。 方法分子克隆构建重组pMSC-异源三聚体G蛋白13（GNA13） wt质粒，分别转染不同类型的乳腺癌细胞，研究miR-31对GNA13在蛋白水平和mRNA表达水平的影响以及GNA13蛋白相对表达量与细胞侵袭能力的相关性。结果在MCF-10A细胞中，pMSC-GNA13wt载体转染组GNA13 mRNA相对表达量（7.26±1.80）显著高于空载体转染组（1.05±0.02，P＝0.001）。pMSC-GNA13wt载体转染组细胞侵袭的相对数目[（13.35±0.47）个]显著高于空载体转染组[（1.38±0.12）个]细胞数目（P＝0.000），GNA13 mRNA表达水平与miR-31表达水平呈负相关性。结论通过减少GNA13表达可抑制miR-31对乳腺癌细胞侵袭。

原发性硬化性胆管炎小鼠NK1R/TGF-β1/miR-31轴对胆汁瘀积及肝纤维化的影响

目的探讨原发性硬化性胆管炎小鼠神经激肽1受体(NK1R)/转化生长因子-β1(TGF-β1)/微小RNA-31(miR-31)轴对胆汁瘀积及肝纤维化的影响。方法将120只雌性SPF级新生小鼠随机分为模型组、对照组及空白组,每组40只,比较3组实验小鼠及不同纤维化程度、不同胆汁淤积情况实验小鼠的NK1R、TGF-β1、miR-31水平差异。研究NK1R、TGF-β1、miR-31水平与肝脏的纤维化及胆汁淤积情况的相关性。结果3组实验小鼠NK1R、TGF-β1、miR-31水平比较,差异均有统计学意义(P<0.001),两两比较结果显示,NK1R、TGF-β1、miR-31水平从高到低依次为模型组、对照组、空白组;不同肝脏纤维化情况NK1R、TGF-β1、miR-31水平差异有统计学意义(P<0.001),两两比较结果显示,NK1R、TGF-β1、miR-31水平从高到低依次为早期肝硬化组、明显纤维化组、无明显纤维化组;非胆汁淤积组实验小鼠的NK1R、TGF-β1、miR-31水平低于胆汁淤积组,差异均有统计学意义(P<0.001);实验小鼠NK1R、TGF-β1、miR-31水平与肝脏的纤维化(r=0.741、0.694、0.587,均P<0.001)及胆汁淤积情况(r=0.556、0.559、0.785,均P<0.001)均呈正相关。结论原发性硬化性胆管炎小鼠NK1R、TGF-β1、miR-31水平与胆汁瘀积、肝纤维化程度呈正相关,可为临床诊断提供一定依据。

乙型肝炎病毒表面抗原在HepG2细胞中调节微小RNA-31的表达

目的研究HBV及HBsAg对肝癌细胞HepG2中微小RNA-31（miR-31）表达的调节作用。方法构建哺乳动物HBsAg表达载体并转染HepG2细胞，筛选稳定过表达HBsAg的肝癌细胞系，用酶联免疫吸附法及细胞免疫组织化学法鉴定克隆，并用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-31在肝癌细胞系中的表达水平。结果成功构建哺乳动物HBsAg表达载体，建立稳定表达HBsAg的肝癌细胞系HepG2-H2。整合HBV基因组的HepG2．2．15细胞中miR-31的相对表达量明显下调为0．003±0．001，与普通HepG2细胞的1．0±0．023相比，t=583j8，P〈0．001，差异有统计学意义ImiR-31在稳定过表达HBsAg的HepG2-H2细胞中的相对表达量明显高于空白对照细胞HepG2组及阴性对照细胞HepG2-H0组，F=24．922，P〈0．05，差异有统计学意义I而HepG2组与HepG2-H0组比较，P〉O．05，差异无统计学意义。结论HBV能够抑制miR-31的表达，而HBsAg则促进miR-31的表达。