长链非编码RNA-PVT1促进肾癌细胞的迁移和转移

目的探讨长链非编码RNA-PVT1(Lnc-PVT1)在透明细胞肾细胞癌(ccRCC)中的表达水平及临床意义。方法收集69对ccRCC组织和癌旁正常组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Lnc-PVT1在ccRCC中的表达水平。应用RNA原位杂交(RISH)技术测定ccRCC中Lnc-PVT1阳性表达情况。采用Transwell实验分析ccRCC细胞迁移的数目变化。通过生物信息学预测Lnc-PVT1和微小RNA-145(miR-145)的下游靶基因,并通过实验加以验证。采用Rescue回复实验分析Lnc-PVT1对miR-145/基质金属蛋白酶-9(MMP9)通路和迁移的影响。结果qRT-PCR结果显示,Lnc-PVT1在ccRCC组织和细胞中表达水平升高(P<0.05)。RISH实验提示,Lnc-PVT1在ccRCC组织中呈阳性表达。ccRCC组织Lnc-PVT1阳性率为73.91%(51/69),高于癌旁正常组织的14.49%(10/69),差异有统计学意义(χ^(2)=4.128,P<0.05)。Lnc-PVT1的阳性表达与ccRCC病理分级和淋巴结转移相关(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤大小和TNM分期无关(P>0.05)。Transwell迁移实验结果表明,过表达Lnc-PVT1促进ccRCC细胞迁移能力,降低Lnc-PVT1表达抑制ccRCC细胞迁移能力(P<0.05)。miR-145是Lnc-PVT1调控的靶基因;miR-145下游直接靶基因是MMP9。Lnc-PVT1能抑制miR-145表达,促进MMP9蛋白表达。结论Lnc-PVT1通过miR-145/MMP9通路促进肾癌细胞的迁移和转移,或可为治疗转移性肾细胞癌提供可能的分子靶点和依据。

Lnc RNA-PVT1在恶性肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA-PVT1(Lnc RNA-PVT1)是一种特殊类型的RNA,虽然不具有编码蛋白质的功能,但是在细胞增殖和分化的调控过程中有着不可忽视的作用。近年来,越来越多的学者对Lnc RNA-PVT1与肿瘤间的关系进行研究,以期明确其参与肿瘤发生发展过程中的作用机制。本文主要通过总结近年来部分学者对Lnc RNA-PVT1在恶性肿瘤中的研究情况,旨在进一步明确并总结Lnc RNA-PVT1可能的作用机制,为临床工作者提供参考。

长链非编码RNA-PVT1在人胃癌组织中的表达及临床意义

目的检测胃癌组织长链SK编码RNA(lncRNAs)的表达,寻找新的胃癌标记物和治疗靶点。方法首先使用lncRNAs表达芯片筛选胃癌组织中高表达的lncRNAs,寻找靶lncRNA。使用q PCR在较大胃癌样本中对筛选的靶lncRNA进行验证,并寻找靶lncRNA与胃癌临床特征的相关性。结果胃癌lncRNAs芯片检测显示PVT1在胃癌组织高表达。使用q PCR进行临床较大样本检测发现:PVT1在胃癌组织表达明显高于癌旁组织,PVT1在胃癌组织中高表达与淋巴结转移相关(P<0.05)。结论 PVT1在胃癌组织中高表达,可以作为新的胃癌标记物,有希望成为胃癌治疗新的靶点。

Lnc RNA-PVT1对脓毒症急性肺损伤巨噬细胞凋亡的影响

目的分析Lnc RNA-PVT1对脓毒症急性肺损伤巨噬细胞凋亡的影响。方法对THP-1单核细胞进行培养及诱导,使其分化成巨噬细胞,并将THP-1源巨噬细胞分为空白组(TPH-1源巨噬细胞组)、模型组(脓毒症急性肺损伤巨噬细胞模型)及PVT1-siRNA组。通过LPS刺激TPH-1源巨噬细胞产生炎症反应造模,对比各组细胞的IL-1βmRNA、TNF-αmRNA及Lnc RNA-PVT1表达情况。结果PVT1-siRNA组的IL-1βmRNA、TNF-αmRNA及Lnc RNA-PVT1表达水平最高,其次是模型组,且三组之间均存在差异,P<0.05;IL-1βmRNA与TNF-αmRNA均于RNA-PVT1呈正相关,P<0.05。结论Lnc RNA-PVT1对脓毒症急性肺损伤巨噬细胞的凋亡具有重要影响作用。

LncRNA-PVT1对人胰腺癌细胞株HPAF-Ⅱ增殖和凋亡的影响

背景:近年来,长非编码RNA(lncRNAs)在肿瘤发生、发展中的作用日益受到重视。研究发现lncRNA-PVT1在多种人类恶性肿瘤中表达上调并发挥促癌作用。目的:探讨PVT1在人胰腺癌细胞中的表达及其对HPAF-Ⅱ细胞增殖和凋亡的影响。方法:以脂质体转染技术将siRNA-PVT1转染入HPAF-Ⅱ细胞;以real-time PCR检测PVT1mRNA表达,MTS实验和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞分析检测细胞周期和细胞凋亡,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白和原癌基因蛋白c-Myc表达。结果:以人永生化正常胰腺导管上皮细胞株H6c7作为对照,各人胰腺癌细胞株中以HPAF-Ⅱ细胞PVT1 mRNA表达升高最为明显。与转染阴性对照siRNA和未予转染siRNA的细胞相比,转染siRNA-PVT1的HPAF-Ⅱ细胞PVT1 mRNA表达显著降低,细胞增殖能力减弱,发生细胞周期G1期阻滞并出现凋亡峰,细胞中凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3、cleaved-PARP表达上调,Bcl-2/Bax比值降低,c-Myc蛋白表达下调。结论:LncRNA-PVT1在人胰腺癌细胞株HPAF-Ⅱ中呈高表达,其可能通过调控c-Myc表达影响HPAF-Ⅱ细胞的增殖和凋亡。

LncRNA-PVT1在巨噬细胞炎症反应中的表达及与炎症基因相关性研究

目的:研究长链非编码RNA(LncRNA)PVT1在LPS诱导THP-1源巨噬细胞炎症反应中的表达及其与炎症基因表达相关性,推测lncRNA-PVT1在脓毒症急性肺损伤炎症反应中的可能作用。方法:通过LPS刺激THP-1源巨噬细胞产生炎症反应造模,利用RT-qPCR检测,比较不同刺激浓度(0、0.5、5.0μg/ml,8 h)下各组细胞中lncRNA-PVT1及TNF-α、IL-1βmRNA表达情况。结果:与对照组相比,IL-1β及TNF-αmRNA在LPS不同刺激浓度下,均表达上调,且具有统计学差异(均P<0.05)。随着刺激浓度增加,IL-1β及TNF-αmRNA表达量上升,呈浓度依赖,在LPS 5.0μg/ml作用8 h下,IL-1β及TNF-αmRNA表达量达峰值。与对照组相比,在5.0μg/ml LPS组中ln-cRNA-PVT1表达明显上调,具有统计学差异(P<0.0001)。相关性分析发现5μg/ml LPS刺激8 h后,THP-1源巨噬细胞中lncRNA-PVT1相对表达量分别与IL-1β及TNF-αmRNA相对表达水平呈正相关(分别为R^2<0.6134,P=0.0125;R^2<0.7825,P=0.0015)。结论:LncRNA-PVT1在LPS致THP-1源巨噬细胞炎症反应中高表达,且与TNF-α及IL-1βmRNA表达呈正相关,提示该lncRNA-PVT1在脓毒症急性肺损伤炎症反应中可能起重要作用。

回回甘松饮含药血清对高糖诱导的小鼠肾足细胞的LncRNA-PVT1及相关信号通路的影响

目的研究回回甘松饮(Hui-hui Gan-song Yin,HGY)对高糖诱导的小鼠肾足细胞Lnc RNA-PVT1、FN、ColⅠ基因及蛋白表达的影响。方法体外培养小鼠肾足细胞,分为:正常对照组、高糖组、坎地沙坦(阳性)组、HGY高、中、低剂量组。除正常对照组给外,其余各组分别给予25mmol/L葡萄糖+5%正常小鼠鼠血清、坎地沙坦(1mg/kg)组小鼠血清、HGY(5、10、20g/kg)组大鼠血清干预24小时。细胞培养结束后,采用RT-PCR方法和ELISA法检测Lnc RNA-PVT1、FN、ColⅠ的基因及蛋白表达水平。结果高糖(25mmol/L)使MPs中Lnc RNA-PVT1、FN、ColⅠ基因及蛋白表达量升高(P<0.01),HGY含药血清可下调高糖诱导的MPs中Lnc RNA-PVT1、FN、ColⅠ的基因及蛋白表达量(P<0.01,或P<0.05),且与坎地沙坦含药血清的调控结果接近,无显著差异。结论 HGY含药血清可调控MPs在高糖环境下的Lnc RNA-PVT1、FN、ColⅠ的基因及蛋白表达水平,可能是其延缓早期DKD所致RF进程的机制之一。

LncRNA-PVT 1/miR-15 a/Bmi-1通路调控HGC-27胃癌细胞的体外增殖

【目的】探讨lncRNA-PVT1/miR-15a/Bmi-1通路在胃癌细胞体外增殖中的调控作用。【方法】分别研究PVT1,miR-15a及Bmi-1在HGC-27胃癌细胞体外增殖中的作用。体外培养的人胃癌细胞株HGC-27分为如下组别:①空白对照组、si-PVT1(转染PVT1 siRNA)和si-PVT1 NC(转染PVT1 siRNAscramble阴性对照);②空白对照组、miR-15a(转染miR-15a模拟物)和miR-15a NC(转染miR-15a模拟物的阴性对照)。③空白对照组、si-Bmi-1(转染Bmi-1的siRNA)和si-Bmi-1 NC(转染Bmi-1的siRNAscramble阴性对照)。采用MTS法检测上述组别的细胞增殖情况。在抑制PVT1后检测不同组别PVT1、miR-15a和Bmi-1的表达情况。为验证miR-15a与Bmi-1之间的调节关系,将HGC-27胃癌细胞株分为3组:空白对照、miR-15a(转染miR-15a模拟物)和miR-15a NC(转染模拟物阴性对照),检测各组miR-15a和Bmi-1的表达情况。通过生物信息学网站预测PVT1与miR-15a以及miR-15a与Bmi-1的潜在结合位点。采用双荧光素酶报告基因技术验证PVT1与miR-15a以及miR-15a和Bmi-1之间的靶向调节关系。在前述基础上,逆向验证PVT1、miR-15a和Bmi-1三者之间的调控关系。【结果】抑制PVT1、Bmi-1或者过表达miR-15a后,HGC-27胃癌细胞的OD490值以及增殖率在0 h后的不同时间点均出现显著降低(P<0.01);抑制PVT1后,Bmi-1的表达出现降低,而miR-15a表达增高(P<0.01);转染miR-15a后,miR-15a表达升高,而Bmi-1表达出现降低(P<0.01)。与空白对照和miR-15a模拟物阴性对照组相比,PVT1以及Bmi-1野生型报告基因的萤光素酶活性在miR-15a模拟物组呈现显著降低,两者分别下降约56%和32%左右(P<0.01)。与空白对照组和si-PVT1 NC组相比,si-PVT1组PVT1和Bmi-1表达明显下降,miR-15a表达升高,在si-PVT1组加入miR-15a inhibitor之后,miR-15a表达下降,PVT1和Bmi-1的表达降低均出现了逆转;而si-PVT1组加入miR-15a后,miR-15a表达升高,在si-PVT1组加入miR-15a之后,miR-15a表达升高,PVT1和Bmi-1的表达出现进一步下降。【结论】LncRNA-PVT1能够通过靶向抑制miR-15a上调Bmi-1(lncRNA-PVT1/miR-15a/Bmi-1通路),进而促进胃癌细胞的体外增殖。

CircPVT1在子痫前期中的表达意义及其对胎盘绒毛外滋养层细胞的功能影响和作用机制

目的探究环状RNA PVT1(circPVT1)在子痫前期(preeclampsia,PE)患者胎盘组织中的表达及临床意义,并探究circPVT1对胎盘绒毛外滋养层(extravillous trophoblasts,EVTs)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响以及其可能的分子机制。方法选取子痫前期(PE组)和健康孕妇(Con组)各30例作为研究对象,qRT-PCR检测2组胎盘组织中circPVT1的表达;CCK-8增殖实验、细胞划痕实验和transwell实验检测circPVT1对EVTs细胞功能的影响;利用生物信息学分析、双荧光素酶报告实验和挽救实验等确定circPVT1在EVTs细胞中潜在的作用机制。结果胎盘组织中circPVT1表达与孕妇收缩压、舒张压和尿蛋白呈负相关(r=-0.630、r=-0.608、r=-0.679,均P<0.01),与孕妇分娩孕周和新生儿出生体重呈正相关(r=0.449、r=0.435,均P<0.01);与Con组胎盘组织相比,circPVT1在PE组胎盘组织中表达量显著下降(P<0.05);过表达circPVT1可促进EVTs的增殖、侵袭和迁移,反之,干扰circPVT1表达后EVTs的增殖、侵袭和迁移能力均降低(均P<0.05);circPVT1可直接与miR-145-5p结合,通过Wnt/β-catenin通路促进EVTs细胞增殖和侵袭。结论circPVT1与子痫前期发生及妊娠结局相关,可能通过调控miR-145-5p/Wnt/β-catenin信号通路促进EVTs细胞增殖、迁移和侵袭,参与子痫前期发生。

慢性乙型病毒性肝炎病人血浆中LncRNA PVT1、微RNA-31-5p表达水平与炎症损伤程度的相关性分析

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1()、微RNA-31-5p(miR-31-5p)在慢性乙型病毒性肝炎(CHB)病人血浆中的表达情况,并分析其与炎症损伤程度的关系。方法选取东莞市人民医院2019年12月至2020年12月确诊的180例CHB病人为CHB组,所有病人均行肝穿刺活检,根据CHB病人炎症损伤程度分为G1组(66例),G2组(58例),G3组(41例),G4组(15例),根据肝纤维化程度进行分组,无明显肝纤维化(S0,S1)组(64例),明显肝纤维化组(S2,S3)(78例),早期肝硬化(S4)组(38例)。同时选取55例健康者为对照组。收集CHB组和对照组的一般资料,分别检测两组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-10、超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷氨酰基转移酶(GGT)等指标水平;采用实时荧光定量PCR法对血清中LncRNA PVT1、miR-31-5p表达水平进行检测,Pearson法分析LncRNA PVT1、miR-31-5p表达的相关性。结果CHB病人血清中LncRNA PVT1(1.52±0.31、1.93±0.47、2.57±0.63、3.42±1.03)表达水平高于对照组0.68±0.23,且LncRNA PVT1表达水平随着炎症损伤程度加重而升高,miR-31-5p表达水平(0.85±0.22、0.79±0.18、0.63±0.14、0.50±0.11)低于对照组0.96±0.24,且miR-31-5p表达水平随着炎症损伤程度加重而降低,差异有统计学意义(P<0.05);CHB组病人TNF-α(108.13±30.32)ng/L、IL-6(68.50±22.59)ng/L、IL-1β(358.92±36.80)ng/L、IL-10(75.25±18.99)ng/L、Hs-CRP(11.22±3.15)mg/L、ALT(57.13±9.34)U/L、AST(37.86±5.56)U/L、GGT水平(33.21±10.62)U/L均显著高于对照组[(38.49±19.88)ng/L、(19.12±3.21)ng/L、(169.05±5.24)ng/L、(16.56±2.34)ng/L、(1.68±0.56)mg/L、(24.62±7.95)U/L、(22.32±4.26)U/L、(26.94±8.32)U/L](P<0.05);CHB组病人血清中LncRNA PVT1表达与TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、Hs-CRP、ALT、AST、GGT均呈正相关(P<0.05),miR-31-5p与TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、Hs-CRP、ALT、AST、GGT均呈负相关(P<0.05);CHB病人血清中LncRNA PVT1、miR-31-5p的表达呈明显负相关(r=−0.36,P<0.05)。结论CHB病人血清中LncRNA PVT1表达升高,miR-31-5p表达降低,且二者均与炎症损伤程度有关。

长链非编码RNAPVT1在肾癌组织中的表达及意义

目的探讨长链非编码RNA PTV1在肾癌组织的表达及意义。方法收集54例肾癌患者的癌组织,并选取距离肿瘤边缘2 cm以上(镜下未见癌细胞)的癌旁组织作为对照;提取总RNA、反转录获得c DNA后,采用Real-time PCR法检测肾癌及癌旁组织PTV1的相对表达量;分析肾癌组织PTV1的相对表达与患者临床病理特征及预后的关系。MTT方法检测肾癌细胞增殖水平、流式细胞术检测细胞凋亡率的改变。结果肾癌组织与癌旁组织PVT1的相对表达量分别为6.22±0.71和2.26±0.36,肾癌组织明显高于癌旁组织(P<0.05)。54份肾癌组织PVT1高表达39份,低表达15份,肾癌组织PTV1相对表达与患者淋巴结转移和TNM分期相关(P均<0.05),与性别、年龄及病理类型未见相关性(P均>0.05)。肾癌组织PVT1高表达与低表达者总体生存时间分别为(47.9±9.4)、(67.2±3.8)个月,PTV1高表达者的总体生存时间明显低于PTV1低表达者(P<0.05)。体外786-0肾癌细胞转染PVT1 siRNA,肾癌细胞增殖活性明显降低、凋亡率明显增高(P均<0.05)。结论 PVT1可能通过影响肾癌细胞增殖与凋亡促进肾癌的发生、发展,可作为潜在的肾癌治疗新靶点。

长链非编码RNA PVT1调控miR-551通过Wnt信号通路对卵巢癌迁移和侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA PVT1在卵巢癌组织中的表达情况及其在卵巢癌细胞迁移和侵袭过程中的作用及机制。方法:q PCR检测卵巢癌和正常卵巢组织及不同卵巢癌细胞中PVT1的表达情况;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的变化;双萤光素酶报告基因检测PVT1与微小RNA(miR)-551的相互作用;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后miR-551-inhibitor对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blot法检测沉默PVT1后Wnt信号通路相关蛋白的表达情况。裸鼠皮下成瘤实验检测沉默PVT1对卵巢癌成瘤重量及体积的影响。结果:与正常卵巢组织相比,卵巢瘤组织中PVT1表达明显增高(P<0.05);卵巢癌细胞株ES-2中PVT1表达水平最高(P<0.05);沉默PVT1可以抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;PVT1能与miR-551的位点特异性结合;沉默PVT1后,miR-551-inhibitor可以促进卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;沉默PVT1后Wnt信号通路蛋白的表达相应下调;与阴性对照组相比,PVT1-siRNA组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显减小(P<0.05)。结论:PVT1在卵巢癌发生发展过程中起重要作用,它可以靶向调节miR-551,通过Wnt信号通路调控卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。

下调长链非编码RNA PVT1表达对胰腺癌BxPC-3细胞凋亡、侵袭及转移的影响

目的研究下调长链非编码RNA PVT1的表达对胰腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移能力的影响。方法体外转染PVT1干扰序列si PVT1-1和si PVT1-2降低胰腺癌细胞系Bx PC-3 PVT1表达,同时转染阴性对照si PVT1-NC作为对照组。CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭转移;qRT-PCR检测E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、vimentin和PVT1 mRNA表达;Western blot检测凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase-3)和上皮间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、vimentin)表达。结果下调胰腺癌细胞Bx PC-3 PVT1表达能明显抑制细胞增殖、促进细胞凋亡和减少细胞侵袭转移数目(P<0.05);E-cadherin蛋白和分子水平升高,N-cadherin、β-catenin、vimentin蛋白和分子水平降低(P<0.05);Bax和caspase-3蛋白水平升高,而Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05)。结论下调长链非编码RNA PVT1表达能抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭转移能力,促进胰腺癌细胞凋亡,且能够逆转胰腺癌细胞上皮间质转化。

长链非编码RNA PVT1通过激活Wnt信号通路对肝癌干细胞自我更新能力的调控

目的:探讨长链非编码RNA PVT1通过激活Wnt信号通路对肝癌干细胞自我更新能力的调控作用。方法:设HEPG2肝癌干细胞组、LNCRNA PVT1 mimics组、LNCRNA PVT1 inhibitor组,培养结束后,检测各组细胞活力、单克隆形成数目、成球率、凋亡率水平、G1期、PVT1 mRNA、WNT、SWI、SNF蛋白表达水平。结果:LNCRNA PVT1 mimics组OD值、存活率水平、克隆形成数目、成球率、G1期、PVT1 mRNA、WNT、SWI、SNF蛋白表达水平高于HEPG2肝癌干细胞组(P<0.05),细胞凋亡率低于HEPG2肝癌干细胞组(P<0.05);LNCRNA PVT1 inhibitor组OD值、存活率、克隆形成数目、成球率、G1期、PVT1 mRNA、WNT、SWI、SNF蛋白表达水平低于HEPG2肝癌干细胞组、LNCRNA PVT1 mimics组(P<0.05),细胞凋亡率高于HEPG2肝癌干细胞组、LNCRNA PVT1 mimics组(P<0.05)。LNCRNA PVT1 mRNA与克隆形成数目、成球率、G1期、WNT、SWI、SNF正相关关系明显,与凋亡率负相关关系明显(P<0.05)。结论:LNCRNA PVT1通过激活SWI/SNF复合物进而激活Wnt信号传导来促进肝癌干细胞的自我更新和肿瘤增殖。

LncRNA PVT1 miR-30d表达与上皮性卵巢癌患者化疗敏感性及预后的关系

目的探讨LncRNA PVT1、miR-30d表达与上皮性卵巢癌患者化疗敏感性及预后的关系。方法选取2012年2月~2014年1月行手术治疗的76例上皮性卵巢癌患者的癌组织标本作为上皮性卵巢癌组,另选取本院收治的76例良性卵巢肿瘤作为对照组。检测LncRNA PVT1、miR-30d相对表达量,根据表达水平分为高表达组与低表达组;根据对顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、环磷酰胺(CTX)的敏感性将患者分为敏感组和耐药组并对比LncRNA PVT1、miR-30d表达情况;应用Pearson法对miR-30d和LncRNA PVT1表达的相关性进行分析;采用Kaplan-Meier对上皮性卵巢癌患者5年的生存情况进行分析。结果与对照组相比,上皮性卵巢癌组miR-30d表达水平降低(P<0.05),LncRNA PVT1表达水平升高(P<0.05)。miR-30d、LncRNA PVT1表达均与FIGO分期、分化程度密切相关(P<0.05)。DDP、ADM敏感组miR-30d表达水平显著高于耐药组(P<0.05),LncRNA PVT1表达水平显著低于耐药组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示上皮性卵巢癌组织中miR-30d和LncRNA PVT1表达呈负相关(P<0.05)。Kaplan-Meier法分析显示miR-30d高表达组5年内总生存率及中位生存时间远高于低表达组(73.7%VS 33.3%,28.0月VS 20.0月,P<0.05);LncRNA PVT1低表达组5年内总生存率及中位生存时间远高于高表达组(81.5%VS 22.4%,27.0月VS 18.0月,P<0.05)。结论上皮性卵巢癌患者癌组织miR-30d低表达,LncRNA PVT1高表达,miR-30d、LncRNA PVT1表达与上皮性卵巢癌患者化疗敏感性及预后有关。

circPVT1对鼻咽癌细胞增殖、转移和凋亡的影响及作用机制研究

目的研究环状非编码RNA基因PVT1(circPVT1)在鼻咽癌组织中的表达及对鼻咽癌细胞增殖、转移和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qRCR)检测circPVT1在鼻咽癌组织和鼻窦炎组织(对照组)中的表达,将鼻咽癌细胞系HNE1体外培养并分成阴性对照组(转染阴性对照载体)、circPVT1过表达试验组(转染circPVT1 mimic)和circPVT1干扰试验组(转染circPVT1 inhibitor)。采用RT-qRCR检测circPVT1 mimic和circPVT1 inhibitor转染效果;采用MTT试验分析circPVT1对鼻咽癌细胞增殖的影响;采用Transwell chamber试验分析circPVT1对鼻咽癌细胞转移的影响;流式细胞术分析circPVT1对鼻咽癌细胞凋亡的影响;采用Western blot分析circPVT1对PTEN-PI3K/AKT信号通路表达的影响。结果与对照组相比,鼻咽癌组织中circPVT1表达明显上调(P<0.05)。转染circPVT1 mimic后,circPVT1过表达试验组细胞中circPVT1的表达增加(P<0.05),转染circPVT1 inhibitor后,circPVT1干扰试验组细胞中circPVT1的表达降低(P<0.05)。转染circPVT1 mimic显著促进鼻咽癌细胞的增殖和转移能力,抑制细胞凋亡,同时降低PTEN表达和增加PI3K/AKT磷酸化(P<0.05)。转染circPVT1 inhibitor显著抑制鼻咽癌细胞的增殖和转移能力,促进细胞凋亡,同时增加PTEN的表达和降低PI3K/AKT磷酸化(P<0.05)。结论circPVT1在鼻咽癌中表达增加,可通过靶向调节PTEN-PI3K/AKT信号途径促进鼻咽癌细胞增殖和转移能力,并抑制细胞凋亡,进而参与鼻咽癌的发展,circPVT1可能是治疗鼻咽癌的潜在新靶点。

长链非编码RNA Pvt1致癌基因在胶质瘤细胞增殖和上皮-间充质转化过程中的作用研究

目的研究长链非编码RNA Pvt1致癌基因(PVT1)在胶质瘤细胞增殖和上皮-间充质转化(EMT)过程中的作用。方法收集不同级别胶质瘤临床样本,定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PVT1表达水平;U87MG和U251细胞系分别转染siRNA-PVT1及siNC后,CCK-8检测细胞增殖活性,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹(Western blot)法检测EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达情况。结果与正常脑组织相比,随着胶质瘤分级的增加,PVT1表达水平逐渐升高(P﹤0.05)。胶质母细胞系U87MG和U251的PVT1表达水平均明显高于正常HEB细胞系(P﹤0.01)。培养2、3天后,siRNA-PVT1组U87MG和U251细胞光密度值均低于siNC组。与siNC组相比,siRNA-PVT1组U87MG和U251细胞侵袭细胞数量均减少。siRNA-PVT1组U87MG和U251细胞系中E-cadherin蛋白相对表达量均高于siNC组,N-cadherin和Vimentin蛋白相对表达量均低于siNC组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论长链非编码RNA PVT1在胶质瘤中高表达,其表达水平与胶质瘤恶性程度有关;沉默PVT1可抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭和EMT过程,为胶质瘤的基因疗法提供了一个新的潜在靶点。

长链非编码RNA PVT1在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞凋亡的影响

目的研究长链非编码RNA PVT1在胃癌组织中的表达,分析其表达差异与临床病理参数之间的关系,并探讨长链非编码RNA PVT1对胃癌细胞凋亡功能的影响。方法qRT-PCR法分别检测胃癌组织和癌旁组织中长链非编码RNA PVT1的表达,并分析18例胃癌组织中长链非编码RNA PVT1的水平与临床病理参数之间的关系。采用RNAi干扰技术沉默胃癌细胞MKN-28中非编码RNA PVT1的水平,流式细胞术检测长链非编码RNA PVT1对胃癌细胞凋亡的影响,Western blot法检测凋亡相关蛋白caspase-3的表达。结果长链非编码RNA PVT1在胃癌组织中表达(6.14±1.56)显著高于癌旁组织(1.87±0.94,P<0.01),且胃癌组织中长链非编码RNA PVT1的表达与肿瘤TNM分期、分化程度以及淋巴结转移密切相关(P<0.01)。沉默长链非编码RNA PVT1的表达后,流式细胞术结果显示胃癌细胞MKN-28的凋亡率增加(P<0.01),Western blot结果显示凋亡相关蛋白caspase-3的表达增加(P<0.01)。结论长链非编码RNA PVT1在胃癌中的表达显著增高,且其表达与TNM分期、分化程度以及淋巴结转移密切相关;长链非编码RNA PVT1可能通过抑制caspase-3表达进而抑制胃癌细胞MKN-28凋亡。

长链非编码RNAPVT1及人类抗原R的异常表达对胃癌发生发展的影响

目的检测长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)及人类抗原R(HuR)在胃癌和癌旁对照中的表达,分析相关性及对胃癌细胞增殖的影响。方法采集胃癌标本40例、癌旁对照39例并制作组织芯片,收集临床信息。采用原位杂交(ISH)检测PVT1在胃癌与对照组织中的表达,采用免疫组化检测HuR的表达,分析与临床特点的相关性,并分析同组织PVT1与HuR的表达相关性。采用PVT1真核表达载体转染胃癌细胞SGC7901,realtimePCR检测PVT1水平,Westernblot检测HuR水平,采用MTT检测细胞增殖能力。结果ISH结果显示PVT1在胃癌中的表达阳性率为72.5%(29/40),高于对照组38.46%(15/39)(P=0.002),核浆均着色阳性。PVT1的表达与淋巴结转移(P=0.001)和分期(P=0.004)相关。免疫组化结果显示HuR在胃癌中表达阳性率为67.5%(27/40),在对照组中为28.2%(11/39)(P<0.001)。HuR与淋巴结转移(P=0.007)、分期(P=0.022)分化(P=0.015)相关。同组织PVT1与HuR表达呈相同趋势,表达相关(P=0.004)。过表达PVT1后HuR表达上调,细胞增殖能力增强(P=0.000)。结论PVT1和HuR在胃癌组织中表达上调,过表达PVT1后HuR表达有所增加,胃癌细胞增殖加快,可能作为胃癌治疗的靶点。

长链非编码RNA PVT1对MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨长链非编码RNA PVT1(lncRNA-PVT1)对于乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖和侵袭的影响。方法构建pcDNA3.1-PVT1表达载体,并将其转染入MDA-MB-231细胞,用实时定量PCR方法检测转染细胞中lncRNA-PVT1的表达,用Edu标记技术检测转染细胞的增殖能力,用Transwell实验检测转染细胞的侵袭能力。结果构建成功的pcDNA3.1-PVT1重组质粒转染入MDAMB-231细胞后lncRNA-PVT1表达增加;转染细胞的增殖能力增强;转染细胞的侵袭能力增强。结论 lncRNA-PVT1能增强MDA-MB-231细胞的增殖和侵袭能力。