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基于RNA-Seq技术对不同品种猪排卵前卵泡差异表达基因的筛选与注释
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作者 刘林清 李庆岗 +3 位作者 苏世广 周梅 张威 王重龙 《安徽农业科学》 CAS 2024年第11期76-79,共4页
[目的]筛选淮猪和大约克猪排卵前卵泡组织差异表达基因。[方法]采集淮猪和大约克猪各3头的排卵前卵泡,提取RNA,个体独立建库。采用RNA测序技术以及GO和pathway方法对所获序列进行显著性富集分析。[结果]测序后,获得的淮猪clean reads数... [目的]筛选淮猪和大约克猪排卵前卵泡组织差异表达基因。[方法]采集淮猪和大约克猪各3头的排卵前卵泡,提取RNA,个体独立建库。采用RNA测序技术以及GO和pathway方法对所获序列进行显著性富集分析。[结果]测序后,获得的淮猪clean reads数分别为85958912、91701082、84448828,其中有效Reads数分别达到98.39%、98.59%、96.04%;获得的大约克猪clean reads数分别为87914166、80480542、85994612,其中有效reads数分别达到98.61%、96.95%、98.80%,测序饱和度良好(证明测序数据真实可靠)。结果表明,筛选到上调基因67个,下调基因54个。GO和Pathway分析发现,差异表达基因富集在繁殖过程、生长过程和代谢过程及WNT信号通路、卵巢类固醇生成通路和类固醇生物合成通路等。[结论]获得了猪排卵前卵泡基因表达谱,并筛选到与繁殖性状相关的关键候选基因。 展开更多
关键词 淮猪 大约克猪 rna-seq 差异表达基因
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基于RNA-seq对复合益生菌作用于肉鸡回肠中新转录本预测及可变剪接、SNP分析
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作者 曹威荣 王燕飞 +3 位作者 张若男 贾浩 刘璇 张利环 《中国饲料》 北大核心 2024年第3期20-27,共8页
为分析复合益生菌饲喂肉鸡回肠转录组中的新转录本预测、可变剪接事件和SNP,选择200只1日龄黄麻肉鸡随机分为2组,每组5个重复,每个重复20只。对照组正常饮水,益生菌组饮用水中补充1%复合菌制剂,试验分为生长前期(1~21 d)、后期(22~42 d... 为分析复合益生菌饲喂肉鸡回肠转录组中的新转录本预测、可变剪接事件和SNP,选择200只1日龄黄麻肉鸡随机分为2组,每组5个重复,每个重复20只。对照组正常饮水,益生菌组饮用水中补充1%复合菌制剂,试验分为生长前期(1~21 d)、后期(22~42 d)两个阶段。42日龄时进行肉鸡屠宰试验,取对照组和益生菌组回肠各3个样本进行转录组测序。对测序数据进行分析,共发现1047个新基因,20176个新转录本,276个新基因在GO数据库中得到归类注释。对转录组数据进行可变剪接分析,外显子跳跃(SE)占可变剪接类型的比例最高,共筛选到1131个显著的差异剪接基因,在外显子跳跃(SE)、第一个外显子可变剪接(A5SS)、最后一个外显子可变剪接(A3SS)、外显子选择性跳跃(MXE)、内含子滞留(RI)事件中鉴定到的差异剪接基因数分别为588、139、176、136、92。对获得的差异剪接基因进行GO富集分析,主要富集在代谢和免疫GO term。KEGG富集到了胞吞作用、MAPK信号通路等。在各样品中大多数碱基取代均为转换大于颠换,其中转换单核苷酸多态性(SNP)所占百分比为73.53%~73.94%;颠换型SNP所占百分比为26.05%~26.47%。试验对对照组、益生菌组肉鸡的回肠进行了RNA-seq测序分析,为发掘复合益生菌作用于肉鸡回肠中的可变剪接事件提供基础,为进一步了解复合益生菌作用于肉鸡回肠中新转录本的发现和SNP位点提供了数据支撑。 展开更多
关键词 肉鸡 rna-seq 新转录本 SNP 可变剪接
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BSA-Seq结合RNA-Seq技术挖掘大豆叶片提前黄化衰老基因 被引量:1
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作者 李世宽 洪慧龙 +3 位作者 付佳祺 谷勇哲 孙如建 邱丽娟 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期294-309,共16页
大豆产量与其生殖生长的持续时间呈正相关,延缓其开花后叶片的衰老,提高其生理功能,有利于增加植物的粒重。叶片黄化是植物衰老的显著特征之一。关于在大豆鼓粒后期叶片黄化的研究鲜见报道。本研究对鼓粒后期叶片提前黄化突变体ly和野生... 大豆产量与其生殖生长的持续时间呈正相关,延缓其开花后叶片的衰老,提高其生理功能,有利于增加植物的粒重。叶片黄化是植物衰老的显著特征之一。关于在大豆鼓粒后期叶片黄化的研究鲜见报道。本研究对鼓粒后期叶片提前黄化突变体ly和野生型ofc杂交组合进行遗传分析,结果表明,大豆鼓粒后期叶片提前黄化性状受单隐性核基因控制。通过BSA-Seq在19号染色体得到一个2.23Mb的初定位区间,经开发标记图位克隆后将区间缩短至1.75 Mb,区间内有219个基因,再结合RNA-Seq分析,得到了区间内12个候选基因,其中有4个SNP变异基因和8个差异表达基因。本研究结果为大豆鼓粒后期叶片黄化衰老基因的克隆奠定了基础。 展开更多
关键词 大豆 突变体 BSA-Seq rna-seq 图位克隆
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基于RNA-Seq分析大白猪和巴马香猪背最长肌组织基因表达差异
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作者 韦茜尹 雷国凤 +8 位作者 陈奎蓉 黄志威 蒋昱雯 陈晓榕 容宁 陈钊 徐玉培 梁晶 兰干球 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期208-214,共7页
以180日龄的大白猪(n=6)与巴马香猪(n=6)为研究对象,屠宰后测定肌内脂肪、肉色、嫩度、pH、滴水损失等肉质性状,采集背最长肌组织提取总RNA,利用RNA-Seq技术鉴定大白猪和巴马香猪背最长肌组织中的表达差异基因及其功能富集通路。结果发... 以180日龄的大白猪(n=6)与巴马香猪(n=6)为研究对象,屠宰后测定肌内脂肪、肉色、嫩度、pH、滴水损失等肉质性状,采集背最长肌组织提取总RNA,利用RNA-Seq技术鉴定大白猪和巴马香猪背最长肌组织中的表达差异基因及其功能富集通路。结果发现,以大白猪为对照组,在巴马香猪和大白猪背最长肌组织中共鉴定到5 037个差异表达基因,其中有3 326个上调表达基因,1 711个下调表达基因。经过KEGG富集通路分析,发现巴马香猪和大白猪一共有168条显著富集通路,其中上调DEGs有92条富集路径,下调DEGs有76条富集路径;GO功能分析中上调表达基因富集到BP有3 058条、CC有413条、MF有559条,下调表达基因富集到BP有3 050条、CC有415条、MF有557条。大白猪与巴马香猪肉色的亮度L在45min时呈极显著差异;大白猪与巴马香猪之间的肌内脂肪、水分均呈现显著差异。本文对大白猪与巴马香猪肌内脂肪含量进行转录组测序分析,初步认为CAPN3、MTM1、TMOD4等基因在巴马香猪肉质中发挥重要作用。 展开更多
关键词 巴马香猪 大白猪 rna-seq 肉质性状
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基于RNA-Seq探究蔗糖影响黑果枸杞枝刺发生的机理
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作者 乔杨 刘雯 +2 位作者 李璐佳 孙丽丽 王钦美 《经济林研究》 北大核心 2024年第1期126-139,共14页
【目的】黑果枸杞Lycium ruthenicum是集生态、经济和药用价值等为一体的灌木。然而,其密集的枝刺严重阻碍其作为经济林推广,本研究旨在探究蔗糖(Suc)促进黑果枸杞(黑杞)枝刺的发生机理,为培育其无刺优良品种提供依据。【方法】在证明Su... 【目的】黑果枸杞Lycium ruthenicum是集生态、经济和药用价值等为一体的灌木。然而,其密集的枝刺严重阻碍其作为经济林推广,本研究旨在探究蔗糖(Suc)促进黑果枸杞(黑杞)枝刺的发生机理,为培育其无刺优良品种提供依据。【方法】在证明Suc通过能量和信号路径促进黑杞枝刺发生的基础上,利用RNA-Seq对无刺茎顶芽(TleCK)、有刺茎顶芽(ThoCK)、黑暗处理的有刺茎顶芽(ThoDCK)、减少内源Suc处理后有刺变无刺茎顶芽(TleDPL)和喷施外源Suc后无刺变有刺茎顶芽(ThoSuc)5种样品的差异表达基因(DEG)和叶绿体差异基因(cpDEG)进行筛选和分析,并采用RT-qPCR验证了9个DEG的表达情况。【结果】5组有刺和无刺材料顶芽之间(ThoCK vs.TleCK、ThoCK vs.TleDPL、ThoDCK vs.TleDPL、TleCK vs.ThoSuc和TleDPL vs.ThoSuc)的DEG分别为5281、4363、3125、5226和3278个,这5组DEG共同显著富集在9个GO条目和4个KEGG通路(“类黄酮生物合成”“二萜生物合成”“苯丙烷生物合成”、“芪类、二芳基庚烷和姜辣素生物合成”)。韦恩图显示5组比较组共有的DEG是196个,其中33个被预测为转录因子基因,较多转录因子基因被预测为NAC和WRKY家族。5组比较组有3个共有DEG注释在植物激素信号转导KEGG通路,分别参与生长素、茉莉酸和水杨酸信号传导。3个关键有刺和无刺比较组(ThoCK vs.TleCK、ThoCK vs.TleDPL和TleCK vs.ThoSuc)中共有2个DEG被预测为TCP转录因子基因,这3个比较组均有cpDEG被注释到光合作用KEGG通路。9个DEG的RT-qPCR验证了RNA-Seq结果的可靠性。【结论】Suc可能通过影响生长素、茉莉酸和水杨酸信号传导以及赤霉素合成基因表达来促进黑杞枝刺发生,枝刺发生也可能与类黄酮积累和木质素减少有关,而且增施外源和减少内源Suc并非通过简单地逆转cpDEG的表达来影响枝刺发生。注释到WRKY、TCP和NAC转录因子家族的共有DEG可能是调控枝刺发生的关键基因。本研究建立了Suc影响黑杞枝刺发生的机理模型图。 展开更多
关键词 黑果枸杞 顶芽 枝刺 rna-seq 蔗糖
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基于BSA-seq和RNA-seq挖掘西瓜果皮硬度候选基因
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作者 张敬敬 田鹏 +9 位作者 于洪春 李冰 高秀瑞 刘伟 吴楠 赵鑫泽 宋雪 刘会茹 潘秀清 武彦荣 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期63-71,共9页
为了挖掘西瓜果皮硬度关键调控基因,选育耐裂高硬度果皮西瓜品种。以西瓜果皮硬度差异显著的高硬度材料901和低硬度材料BSH为亲本,构建F 2分离群体,采用极端性状混池重测序接合BSA(BSA-seq)方法进行定位,并结合转录组测序(RNA-seq)数据... 为了挖掘西瓜果皮硬度关键调控基因,选育耐裂高硬度果皮西瓜品种。以西瓜果皮硬度差异显著的高硬度材料901和低硬度材料BSH为亲本,构建F 2分离群体,采用极端性状混池重测序接合BSA(BSA-seq)方法进行定位,并结合转录组测序(RNA-seq)数据进行关联分析,挖掘果皮硬度关键调控基因。BSA-seq结果表明,SNPs和InDels关联区域交集位于10号染色体1620000—3760000 bp区间内共2.14 Mb的区段,包含150个候选基因,其中2个非同义突变基因和1个移码突变基因。将BSA-seq测序结果与RNA-seq测序结果进行联合分析发现,共有Cla97C10G187120、Cla97C10G187020、Cla97C10G187430、Cla97C10G187510、Cla97C10G187280和Cla97C10G1865406个基因相关联,经生物信息学分析,确定Cla97C10G187120基因为西瓜果皮硬度候选基因。实时荧光定量(qRT-PCR)试验结果表明,转录组试验数据可靠,并且候选基因Cla97C10G187120在901中表达较BSH明显降低。本研究为进一步精细定位西瓜果皮硬度调控基因奠定了基础。 展开更多
关键词 西瓜 果皮硬度 基因组测序 转录组测序 候选基因
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基于RNA-Seq技术的山羊嘴唇黏膜色素沉积相关差异表达基因筛选及初步分析
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作者 蒋婧 屈明好 +4 位作者 孙晓燕 李杰 陈灿灿 李世勇 任航行 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期1361-1369,共9页
【目的】通过RNA-Seq技术筛选不同颜色山羊嘴唇色素代谢相关的候选基因,初步揭示山羊嘴唇黏膜颜色差异形成的分子机理,为动物黏膜色素代谢研究提供理论依据。【方法】以嘴唇等面部可视黏膜颜色存在差异的酉州乌羊(乌黑色)和板角山羊(粉... 【目的】通过RNA-Seq技术筛选不同颜色山羊嘴唇色素代谢相关的候选基因,初步揭示山羊嘴唇黏膜颜色差异形成的分子机理,为动物黏膜色素代谢研究提供理论依据。【方法】以嘴唇等面部可视黏膜颜色存在差异的酉州乌羊(乌黑色)和板角山羊(粉色)为研究对象,采用Illumina Hiseq 2000测序平台对嘴唇黏膜组织进行转录组测序,所得序列经质控、组装后,以|log_(2)(Fold Change)|>1且q value<0.05为标准筛选差异表达基因,并对差异表达基因进行功能注释和富集分析。【结果】利用RNA-Seq技术共筛选出249个基因差异表达,其中与粉色嘴唇黏膜组织相比,乌黑色嘴唇黏膜组织中上调基因有218个,下调基因有31个。23个差异表达基因被划分在9种TFs家族中,其中14个基因属于含有锌指结构域的转录因子家族。GO功能富集分析结果显示,差异表达基因主要参与离子转运相关生物学过程和分子功能。KEGG代谢通路富集结果显示,差异表达基因显著富集于催产素、钙、cGMP-PKG信号通路,以及肥厚性心肌病、心脏肌肉收缩等7个与肌肉组织功能相关的信号通路,其中钙和cGMP-PKG信号通路与色素代谢密切相关;此外,ASIP等12个基因富集到MAPK信号通路、cAMP信号通路、黑色素合成信号通路(Melanogenesis)等色素代谢核心通路中;CALML6、OXTR、ATP1A2、ATP1B44个差异表达基因同时富集到多条与色素代谢相关的通路。qRT-PCR结果与测序结果一致,表明测序结果可靠。【结论】初步确定ASIP基因为山羊嘴唇色素代谢的候选基因,CALML6、OXTR、ATP1A2、ATP1B44个基因参与了山羊嘴唇黏膜色素沉积过程,为研究山羊黏膜色素代谢的分子机制提供理论基础,也为探究人类黏膜异常着色的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 山羊 转录组测序 嘴唇黏膜 色素沉积 差异表达基因
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基于RNA-Seq技术筛选姜曲海猪子宫和卵巢发育相关基因
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作者 朱淑斌 徐盼 +2 位作者 周春宝 许琴瑟 吴嘉韵 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期130-140,共11页
母猪的子宫和卵巢组织发育情况直接影响母猪的繁殖性能,进而对养猪业的经济效益造成重大影响。为探究姜曲海猪子宫和卵巢发育的分子机理,本研究选取1月龄和8月龄姜曲海猪各3头,利用转录组测序技术(RNA-Seq)对子宫和卵巢组织进行测序,通... 母猪的子宫和卵巢组织发育情况直接影响母猪的繁殖性能,进而对养猪业的经济效益造成重大影响。为探究姜曲海猪子宫和卵巢发育的分子机理,本研究选取1月龄和8月龄姜曲海猪各3头,利用转录组测序技术(RNA-Seq)对子宫和卵巢组织进行测序,通过生物信息学手段筛选差异表达基因并进行基因本体(Gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto ncyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,再与猪数量性状基因座(Quantitative trait locus,QTL)数据库比对后鉴定出重要的候选基因。结果显示,1月龄和8月龄姜曲海猪子宫组织中有1688个差异表达基因,表达上调和下调的基因各844个;卵巢组织中存在3833个差异表达基因,其中2831个表达上调,1002个表达下调。富集分析结果显示这些差异表达基因主要显著富集于动物器官发育、组织发育和细胞分化等生物学过程。本研究在子宫和卵巢组织中分别筛选出11个和31个与发育性状有关的候选基因,其中共有的候选基因有6个,分别为LHFPL1、MTUS2、LIF、RBP4、EPHB2和TESC。本研究结果为姜曲海猪子宫和卵巢发育分子层面的研究提供了参考,也为今后姜曲海猪繁殖性状的分子改良提供了新的研究方向。 展开更多
关键词 姜曲海猪 子宫 卵巢 转录组测序
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基于RNA-seq不明原因复发性流产绒毛组织mRNA基因差异性表达研究
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作者 杨丽 杨静 +2 位作者 叶尔登切切克 韩锐 腊晓琳 《国际妇产科学杂志》 CAS 2024年第3期322-328,341,共8页
目的:构建不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)孕妇绒毛组织的mRNA差异性表达谱并进行功能分析,为阐明URSA的发生发展机制提供依据。方法:收集2022年3月于新疆医科大学第一附属医院妇科门诊收治的4例U... 目的:构建不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)孕妇绒毛组织的mRNA差异性表达谱并进行功能分析,为阐明URSA的发生发展机制提供依据。方法:收集2022年3月于新疆医科大学第一附属医院妇科门诊收治的4例URSA(试验组)和4例选择性终止妊娠孕妇(对照组)的绒毛组织样本。应用转录组测序技术(RNA-seq)筛选2组差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并对其进行GO功能注释、KEGG通路分析及蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析,进一步研究差异表达mRNA的功能,并筛选出URSA的关键基因。结果:RNA-seq分析共筛选出3350个DEGs,其中上调基因2259个,下调基因1091个。通过PPI网络分析,筛选出与URSA有关的前10个关键基因:TYROBP、CD74、GH1、GH2、STAT5A、HLA-DRA、STAT5B、HLA-DRB1、CISH和HLA-A。通过GO和KEGG生物学功能分析,发现差异性表达的mRNA参与到多种白细胞分化相关免疫反应通路和同种异体免疫应答等生物学过程。结论:利用RNA-seq获得的URSA的mRNA差异性表达谱,筛选出可能与URSA有关的关键基因及生物学通路,为进一步研究URSA的发病机制和诊疗靶点提供了理论依据。 展开更多
关键词 流产 习惯性 绒毛组织 RNA 信使 转录组测序 免疫调节
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RNA-seq技术在虾蟹研究中的应用
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作者 谢姝敏 张惠玲 +4 位作者 熊佳瑶 花松松 邢超凡 高焕 王攀攀 《水产学杂志》 CAS 2024年第2期116-125,共10页
基于高通量测序技术的RNA-seq技术已被广泛应用于较高经济价值的虾蟹类动物研究中,从分子水平剖析虾蟹类生命周期中相关基因的调控功能和遗传信息。本文综述了对虾蟹类动物转录组研究现状,包括虾蟹类的生长发育、生殖繁育、环境胁迫、... 基于高通量测序技术的RNA-seq技术已被广泛应用于较高经济价值的虾蟹类动物研究中,从分子水平剖析虾蟹类生命周期中相关基因的调控功能和遗传信息。本文综述了对虾蟹类动物转录组研究现状,包括虾蟹类的生长发育、生殖繁育、环境胁迫、免疫应答、营养代谢和分子标记开发等,分析了RNA-seq技术在虾蟹类研究中面临的局限与挑战,以期为更深入开展虾蟹类分子生物学研究提供参考。 展开更多
关键词 rna-seq 虾蟹类动物 生长繁育 环境胁迫
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Meiotic transcriptional reprogramming mediated by cell-cell communications in humans and mice revealed by scATACseq and scRNA-seq
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作者 Hai-Quan Wang Xiao-Long Wu +6 位作者 Jing Zhang Si-Ting Wang Yong-Juan Sang Kang Li Chao-Fan Yang Fei Sun Chao-Jun Li 《Zoological Research》 SCIE CSCD 2024年第3期601-616,共16页
Meiosis is a highly complex process significantly influenced by transcriptional regulation.However,studies on the mechanisms that govern transcriptomic changes during meiosis,especially in prophase I,are limited.Here,... Meiosis is a highly complex process significantly influenced by transcriptional regulation.However,studies on the mechanisms that govern transcriptomic changes during meiosis,especially in prophase I,are limited.Here,we performed single-cell ATAC-seq of human testis tissues and observed reprogramming during the transition from zygotene to pachytene spermatocytes.This event,conserved in mice,involved the deactivation of genes associated with meiosis after reprogramming and the activation of those related to spermatogenesis before their functional onset.Furthermore,we identified 282 transcriptional regulators(TRs)that underwent activation or deactivation subsequent to this process.Evidence suggested that physical contact signals from Sertoli cells may regulate these TRs in spermatocytes,while secreted ENHO signals may alter metabolic patterns in these cells.Our results further indicated that defective transcriptional reprogramming may be associated with non-obstructive azoospermia(NOA).This study revealed the importance of both physical contact and secreted signals between Sertoli cells and germ cells in meiotic progression. 展开更多
关键词 Single-cell rna-seq Single-cell ATAC-seq SPERMATOGENESIS MEIOSIS Transcriptional reprogramming Cell-cell communication
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Bulked Segregant RNA-Seq Analysis of Pollinated Pistils Reveals Genes Influencing Spikelet Fertility in Rice
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作者 Kanokwan KAEWMUNGKUN Keasinee TONGMARK +3 位作者 Sriprapai CHAKHONKAEN Numphet SANGARWUT Theerachai THANANANTA Amorntip MUANGPROM 《Rice science》 SCIE CSCD 2024年第5期556-571,I0031-I0056,共42页
Prezygotic isolation is important for successful fertilization in rice, significantly affecting yield. This study focused on F_(5:6) generation plants derived from inter-subspecific crosses(Nipponbare × KDML105) ... Prezygotic isolation is important for successful fertilization in rice, significantly affecting yield. This study focused on F_(5:6) generation plants derived from inter-subspecific crosses(Nipponbare × KDML105) with low(LS) and high seed-setting rates(HS), in which normal pollen fertility was observed. However, LS plants showed a reduced number of pollen grains adhering to the stigma and fewer pollen tubes reaching the ovules at 4-5 h post-pollination, compared with HS plants. Bulked segregant RNA-Seq analysis of pollinated pistils from the HS and LS groups revealed 249 and 473 differentially expressed genes(DEGs), respectively. Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes analysis of the HS and LS-specific DEGs indicated enrichment in metabolic pathways, pentose and glucuronate interconversions, and flavonoid biosynthesis. Several of these DEGs exhibited co-expression with pollen development genes and formed extensive clusters of co-expression networks. Compared with LS pistils, enzyme genes controlling pectin degradation, such as OsPME35 and OsPLL9, showed similar expression patterns, with higher levels in HS pistils pre-pollination. Os02g0467600, similar to cinnamate 4-hydroxylase gene(CYP73), involved in flavonoid biosynthesis, displayed higher expression in HS pistils post-pollination. Our findings suggest that OsPME35, OsPLL9, and Os02g0467600 contribute to prezygotic isolation by potentially modifying the stigma cell wall(OsPME35 and OsPLL9) and controlling later processes such as pollen-stigma adhesion(Os02g0467600) genes. Furthermore, several DEGs specific to HS and LS were co-localized with QTLs and functional genes associated with spikelet fertility. These findings provide valuable insights for further research on rice spikelet fertility, ultimately contributing to the development of high-yielding rice varieties. 展开更多
关键词 bulked segregant rna-seq flavonoid inter-subspecific cross PECTIN pollinated pistil prezygotic barrier spikelet fertility
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Revealing the role of honokiol in human glioma cells by RNA-seq analysis
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作者 YUNBAO GUO XU LIU +5 位作者 QI XU XIAOTONG ZHOU JIAWEI LIU YANYAN XU YAN LU HAIYAN LIU 《BIOCELL》 SCIE 2024年第6期945-958,共14页
Background:Glioma is a kind of tumor that easily deteriorates and originates from glial cells in nerve tissue.Honokiol is a bisphenol compound that is an essential monomeric compound extracted from the roots and bark ... Background:Glioma is a kind of tumor that easily deteriorates and originates from glial cells in nerve tissue.Honokiol is a bisphenol compound that is an essential monomeric compound extracted from the roots and bark of Magnoliaceae plants.It also has anti-infection,antitumor,and immunomodulatory effects.In this study,we found that honokiol induces cell apoptosis in the human glioma cell lines U87-MG and U251-MG.However,the mechanism through which honokiol regulates glioma cell apoptosis is still unknown.Methods:We performed RNA-seq analysis of U251-MG cells treated with honokiol and control cells.Protein-protein interaction(PPI)network analysis was performed,and the 10 top hub unigenes were examined via real-time quantitative PCR.Furthermore,MAPK signaling and ferroptosis were detected via western blotting.Results:332 differentially expressed genes(DEGs)were found,comprising 163 increased and 169 decreased genes.Analysis of the DEGs revealed that various biological processes were enriched,including‘response to hypoxia’,‘cerebellum development cellular response to hypoxia,’‘iron ion binding,’‘oxygen transporter activity,’‘oxygen binding,’‘ferric iron binding,’and‘structural constituent of cytoskeleton.’Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)pathway analysis revealed that the DEGs were enriched in the following pathways:‘mitogen-activated protein kinases(MAPK)’,‘Hypoxia-inducible factor 1(HIF-1)’,‘ferroptosis,’‘Peroxisome proliferator-activated receptor(PPAR),’‘Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase(PI3K)-protein kinase B(Akt),’and‘phagosome.’Among these pathways,the MAPK signaling pathway and ferroptosis were verified.Conclusion:This study revealed the potential mechanism by which honokiol induces apoptosis and provided a comprehensive analysis of DEGs in honokiol-treated U251-MG cells and the associated signaling pathways.These data could lead to new ideas for future research and therapy for patients with glioma. 展开更多
关键词 Human glioma HONOKIOL rna-seq APOPTOSIS Ferroptosis MAPK
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Identifying genetic susceptibility to Aspergillus fumigatus infection using collaborative cross mice and RNA-Seq approach
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作者 Roa'a H.S.Yosief Iqbal M.Lone +3 位作者 Aharon Nachshon Heinz Himmelbauer Irit Gat-Viks Fuad A.Iraqi 《Animal Models and Experimental Medicine》 CAS CSCD 2024年第1期36-47,共12页
Background:Aspergillus fumigatus(Af)is one of the most ubiquitous fungi and its infection potency is suggested to be strongly controlled by the host genetic back-ground.The aim of this study was to search for candidat... Background:Aspergillus fumigatus(Af)is one of the most ubiquitous fungi and its infection potency is suggested to be strongly controlled by the host genetic back-ground.The aim of this study was to search for candidate genes associated with host susceptibility to Aspergillus fumigatus(Af)using an RNAseq approach in CC lines and hepatic gene expression.Methods:We studied 31 male mice from 25 CC lines at 8 weeks old;the mice were infected with Af.Liver tissues were extracted from these mice 5 days post-infection,and next-generation RNA-sequencing(RNAseq)was performed.The GENE-E analysis platform was used to generate a clustered heat map matrix.Results:Significant variation in body weight changes between CC lines was ob-served.Hepatic gene expression revealed 12 top prioritized candidate genes differ-entially expressed in resistant versus susceptible mice based on body weight changes.Interestingly,three candidate genes are located within genomic intervals of the previ-ously mapped quantitative trait loci(QTL),including Gm16270 and Stox1 on chromo-some 10 and Gm11033 on chromosome 8.Conclusions:Our findings emphasize the CC mouse model's power in fine mapping the genetic components underlying susceptibility towards Af.As a next step,eQTL analysis will be performed for our RNA-Seq data.Suggested candidate genes from our study will be further assessed with a human cohort with aspergillosis. 展开更多
关键词 aspergillus fumigatus infection collaborative cross(CC)mice gene expression profile gene-network host susceptibility quantitative trait loci(QTL)mapping rna-seq
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基于山羊肌内前体脂肪细胞RNA-seq数据的新基因发掘与分析
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作者 王友利 王永 +4 位作者 李志雄 李艳艳 朱江江 熊燕 林亚秋 《西南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第4期376-381,共6页
为挖掘山羊(Capra hircus)肌内前体脂肪细胞分化前后的新基因并对其进行GO功能和KEGG通路富集分析.利用转录组测序(Transcriptome sequencing,RNA-seq)技术对山羊肌内前体脂肪细胞分化前后的两组细胞cDNA样品(n=3)进行高通量测序,有效... 为挖掘山羊(Capra hircus)肌内前体脂肪细胞分化前后的新基因并对其进行GO功能和KEGG通路富集分析.利用转录组测序(Transcriptome sequencing,RNA-seq)技术对山羊肌内前体脂肪细胞分化前后的两组细胞cDNA样品(n=3)进行高通量测序,有效数据与山羊参考基因组比对后利用StringTie软件组装新基因.基于|log2foldchange|>0和P-adj<0.05筛选获得差异表达新基因,并利用clusterProfiler R包针对GO和KEGG数据库对新基因进行GO功能及KEGG通路注释.结果表明,组装获得的201个新基因可定位在山羊29对常染色体上,且在染色体2、3、5、11、18和29上定位富集.山羊肌内脂肪细胞分化前后表达上调的新基因共28个,表达下调的新基因共57个.在GO功能富集方面,共21个新基因注释到277个GO功能亚类中,其中GO功能条目中参与生物过程、细胞组成和分子功能的基因分别占73.65%、3.97%和22.38%,且3个条目中显著富集的GO功能亚类分别与代谢功能、病毒组装和分子结合相关.此外,共21个新基因富集到16条KEGG通路中,其中氨基酸生物合成通路富集的新基因最多,为3个.研究结果挖掘了山羊肌内脂肪细胞分化前后的新基因201个,为揭示山羊肌内前体脂肪细胞分化相关的新基因并进一步完善山羊功能基因组提供基础数据. 展开更多
关键词 山羊基因组 肌内脂肪前体细胞 转录组测序 新基因
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基于RNA-seq的生孢噬纤维菌新转录本预测及生物信息学分析
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作者 宋祥和 林旭 +2 位作者 杨帆 陈晓艺 李宪臻 《大连工业大学学报》 CAS 2024年第5期341-348,共8页
利用RNA-seq技术,对不同碳源条件下培养的生孢噬纤维菌CX11进行新转录本预测,实时荧光定量PCR结果表明测序数据可信度较高。共发掘新转录本1298个,其中371个新转录本在不同碳源比较组合中差异表达(p<0.05),差异转录本数目与碳源的复... 利用RNA-seq技术,对不同碳源条件下培养的生孢噬纤维菌CX11进行新转录本预测,实时荧光定量PCR结果表明测序数据可信度较高。共发掘新转录本1298个,其中371个新转录本在不同碳源比较组合中差异表达(p<0.05),差异转录本数目与碳源的复杂度成正相关。共有19个新转录本在滤纸和葡萄糖比较组合中的差异倍数超过8倍,且在其他比较组合中差异倍数明显降低,推测这些新转录本与滤纸的前期降解密切相关。GO功能分析显示437个新转录本获得注释,有机物代谢过程、碳水化合物衍生物结合、氧化还原酶活性、水解酶活性等功能显著富集,原位酶活测定结果表明水解酶活性富集合理可信。KEGG通路分析表明,共有296个新转录本富集到氨基酸生物合成、次级代谢产物生物合成、碳代谢、氧化磷酸化、ABC转运蛋白、群体感应等30条代谢通路中。 展开更多
关键词 生孢噬纤维菌 转录组测序 新转录本 生物信息学
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基于RNA-Seq技术研究枸杞多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的拮抗机制 被引量:1
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作者 王建东 唐玉林 +5 位作者 王敏 张宝锁 杨富强 高海慧 于洋 郭延生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3519-3532,共14页
本试验旨在基于RNA-Seq技术研究枸杞多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的拮抗机制,分析脾中与免疫相关差异表达基因的变化,为枸杞多糖拮抗雏鸡免疫抑制机制提供参考依据。将120只7日龄海兰褐蛋鸡随机分成3个组,分别为空白组(NC)、环磷酰胺组... 本试验旨在基于RNA-Seq技术研究枸杞多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的拮抗机制,分析脾中与免疫相关差异表达基因的变化,为枸杞多糖拮抗雏鸡免疫抑制机制提供参考依据。将120只7日龄海兰褐蛋鸡随机分成3个组,分别为空白组(NC)、环磷酰胺组(CY)及枸杞多糖组(CYLbGp),CY和CYLbGp两组连续3 d每日胸肌注射80 mg·kg^(-1)环磷酰胺建立免疫抑制雏鸡模型,NC组肌注等体积生理盐水,CYLbGp组在模型建立后通过饮水的方式每天给予5 mg·kg^(-1)枸杞多糖,连续30 d。给药结束后,每组随机选取6只雏鸡采集脾,采用RNA-Seq技术检测3组在给予枸杞多糖后的差异表达基因。通过KEGG通路富集分析和蛋白质互作(PPI)网络分析,筛选关键差异基因和通路。结果表明,枸杞多糖干预后共有178个差异表达基因显著回调,显著富集在线粒体自噬-动物、趋化因子信号通路、C型凝集素受体信号通路、B细胞受体信号通路、血小板活化、自然杀伤细胞介导的细胞毒性和Th1和Th2细胞分化等免疫相关通路上。PPI分析结果表明,磷酸肌醇3激酶调节亚基(PIK 3CD)、Janus激酶3(JAK 3)、GATA结合蛋白3(GATA 3)、低氧诱导因子(HIF 1A)、NK2同源异型框5(NKX 2-5)和肌醇多磷酸磷酸酶样1(INPPL 1)为其中的关键基因。RT-qPCR结果与转录组学数据变化趋势基本一致,进一步表明转录组数据有较高的可靠性。综上,枸杞多糖通过作用于PIK 3CD、JAK3、GATA3、HIF 1A、和INPPL 1等关键靶点,参与线粒体自噬、趋化因子信号通路、C型凝集素受体信号通路、B细胞受体信号通路、血小板活化、自然杀伤细胞介导的细胞毒性、Th1和Th2细胞分化等信号通路的调控,进而起到缓解雏鸡免疫抑制的作用。 展开更多
关键词 rna-seq技术 免疫抑制 枸杞多糖 环磷酰胺
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基于BSA-seq和RNA-seq挖掘水稻株高相关QTL 被引量:1
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作者 吴元明 林佳怡 +4 位作者 柳雨汐 李丹婷 张宗琼 郑晓明 逄洪波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期173-184,共12页
株高是影响水稻产量稳定性的重要因素之一,水稻株高相关QTL的定位及候选基因的挖掘,有助于深入了解株高分子调控机制,进而为培育理想株型的水稻品种奠定基础。以油占8号及广西野生稻为亲本构建的285个CSSL群体为试验对象,结合NGS与BSA-... 株高是影响水稻产量稳定性的重要因素之一,水稻株高相关QTL的定位及候选基因的挖掘,有助于深入了解株高分子调控机制,进而为培育理想株型的水稻品种奠定基础。以油占8号及广西野生稻为亲本构建的285个CSSL群体为试验对象,结合NGS与BSA-seq等方法,利用SNP和InDel两种分子标记进行关联分析,对可能与株高相关的基因组区段进行定位。结果显示,Δ(SNP-index)分子标记在Chr.7和Chr.10中分别关联到3.205和1.311 Mb大小的候选基因组区域。Δ(InDel-index)标记关联到的基因组区域大小分别为2.848和1.292 Mb,且全部包含于Δ(SNP-index)关联到的区间内。结合GO、KEGG、Uniprot、eggNOG等数据库中的功能注释、高质量多态性位点筛选以及已有的株高相关转录组数据,最终关联到Chr.7中的5个候选基因,包括功能和机理已知的OsTCP21。RT-qPCR结果显示,OsTCP21在高株和矮株中的表达差异与已有研究结果相一致,LOC_Os07g05050和LOC_Os07g02850在高株中表达量较高,LOC_Os07g04220和LOC_Os07g02770在矮株中表达量较高。这5个候选基因在水稻株高性状的调控中起重要的作用,OsTCP21是一个关键调控基因。 展开更多
关键词 水稻 株高 定位 BSA-seq rna-seq
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基于RNA-Seq的向日葵脂肪酸合成基因筛选与分析 被引量:1
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作者 郭树春 张艳芳 +3 位作者 李素萍 邵盈 邢慧军 于海峰 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1663-1673,共11页
为解析向日葵主要脂肪酸组分的生物合成分子机制,选用高油酸自交系J9、低油酸自交系P50为研究材料;进行错期播种同期采样试验,以液相色谱测定授粉后不同样品籽粒的脂肪酸组分与含量;利用RNA-Seq技术对不同样品测序,获得各样品与脂肪酸... 为解析向日葵主要脂肪酸组分的生物合成分子机制,选用高油酸自交系J9、低油酸自交系P50为研究材料;进行错期播种同期采样试验,以液相色谱测定授粉后不同样品籽粒的脂肪酸组分与含量;利用RNA-Seq技术对不同样品测序,获得各样品与脂肪酸合成相关的基因表达数据,以气象学数据、液相色谱数据、向日葵基因组数据和转录组数据为基础,采用生物信息学方法分析相关数据。结果表明,(1)高油酸向日葵材料脂肪酸组分和含量受温度影响小,而低油酸材料易受温度影响;(2)J9和P50的12个样本的高表达基因数在7500个左右,而中、低表达基因数相当,是高表达基因的2倍,约15000个;(3)品种特异性表达基因和品种间特异表达基因去除重复后,在J9和P50在-CK和S数据集得到15885个,GO功能富集获得的与脂质代谢直接相关的403个DEGs映射到与的脂质代谢相关的KEGG代谢通路,累计29个DEGs直接参与了19条相关KEGG通路。 展开更多
关键词 向日葵 脂肪酸 rna-seq 分子机制
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基于RNA-seq的甘薯芽变株系类胡萝卜素基因代谢差异分析 被引量:1
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作者 赵冬兰 赵凌霄 +4 位作者 刘洋 张安 戴习彬 周志林 曹清河 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期3239-3249,共11页
为研究甘薯类胡萝卜素代谢的分子机制,本研究以浙薯81及其芽变系为材料,利用RNA-seq技术研究了浙薯81及其芽变系的薯皮(红色变黄色)和脉基(紫色变绿色)类胡萝卜素代谢相关基因。经过生物信息学分析,在薯皮和脉基分别筛选出24个和10个差... 为研究甘薯类胡萝卜素代谢的分子机制,本研究以浙薯81及其芽变系为材料,利用RNA-seq技术研究了浙薯81及其芽变系的薯皮(红色变黄色)和脉基(紫色变绿色)类胡萝卜素代谢相关基因。经过生物信息学分析,在薯皮和脉基分别筛选出24个和10个差异表达基因(DEGs),其中有4个DEGs同时存在于薯皮和脉基中。类胡萝卜合成代谢上游途径中,与浙薯81相比,芽变系薯皮中的牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶基因GGDPS (g29773、g38646)、番茄红素合成酶基因PSY (g11630)和ζ-胡萝卜素异构酶基因Z-ISO (g42608)均显著上调, GGDPS (g29773)仅在突变系中有表达;脉基部在类胡萝卜素上游代谢途径中没有筛选到DEGs。番茄红素环化分支点后,在薯皮中检测到2个β-胡萝卜素羟化酶基因CHYB (g33351、g953),与浙薯81相比,芽变系中g33351下调表达, g953则上调表达。在薯皮和脉基分别检测到一个玉米黄质环氧化酶基因ZEP,薯皮中的ZEP (g41700)显著下调,脉基部的ZEP (g1103)显著上调。类胡萝卜素分解代谢中突变体薯皮中类胡萝卜素裂解双加氧酶基因CCD8 (g21348)下调表达;2个9-顺式环氧类胡萝卜素加氧酶基因NCED (g30636、g43412)在突变系的薯皮和脉基中均下调表达;此外在薯皮和脉基分别检测出5个黄氧素脱氢酶基因ABA2,薯皮中有4个上调表达,而脉基中的则全部下调表达。利用实时定量PCR (qRT-PCR)验证了部分基因的表达模式,与RNA-seq分析结果一致。该研究对甘薯类胡萝卜素代谢的分子机制及解析甘薯薯皮和脉基不同颜色突变具有重要参考价值。 展开更多
关键词 甘薯 转录组测序 类胡萝卜素 差异基因 颜色变异
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