脓毒症继发急性肺损伤患者血清CCL25和PARK7表达水平及其临床价值研究

目的探讨脓毒症患者血清C-C模体趋化因子配体25(C-C motif chemokine ligand 25,CCL25),人帕金森病蛋白7(Parkinson’s disease protein 7,PARK7)水平与急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的关系及临床意义。方法选取2019年2月~2023年2月合肥京东方医院诊治的138例脓毒症患者为脓毒症组,根据是否继发ALI分为ALI组(n=40)和非ALI组(n=98),以同期体检的70例健康人为对照。酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清CCL25和PARK7水平。Pearson相关分析血清CCL25,PARK7与临床指标的相关性。多因素Logistic回归分析脓毒症继发ALI的危险因素。受试者工作特征曲线分析血清CCL25和PARK7水平对脓毒症继发ALI的预测价值。结果脓毒症组患者血清CCL25(367.52±46.87ng/L),PARK7(54.26±17.45μg/L)水平高于对照组(48.17±5.26ng/L,12.31±4.12μg/L),差异具有统计学意义(t=46.825,19.813,均P<0.05)。ALI组患者血清CCL25(434.65±52.87ng/L vs 340.12±42.64ng/L),PARK7(103.47±22.51μg/L vs 34.18±7.46μg/L),呼吸指数(1.58±0.48 vs 0.88±0.07)、动脉血二氧化碳分压(Pa CO_(2))(50.11±6.27mm Hg vs 40.42±5.20mm Hg)、急性生理学与慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)评分(23.37±3.82分vs 17.15±3.41分)、序贯器官衰竭(SOFA)评分(13.56±2.93分vs 10.18±2.81分)均高于非ALI组,而氧合指数(237.14±23.56分vs341.14±21.37分)、动脉血氧分压(Pa O_(2))(55.87±8.03mm Hg vs 63.11±7.14mm Hg)低于非ALI组,差异具有统计学意义(t=10.998,27.151,14.145,9.342,9.385,6.332,25.172,5.210,均P<0.05)。ALI组患者血清CCL25,PARK7水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分、呼吸指数、Pa CO_(2)呈正相关(r=0.579~0.801,均P<0.05),与氧合指数、Pa O_(2)呈负相关(r=-0.687,-0.643;-0.654,-0.712,均P<0.05)。血清CCL25(OR=1.309,95%CI:1.040~1.646),PARK7(OR=1.288,95%CI:1.016~1.633),APACHEⅡ评分(OR=1.188,95%CI:1.019~1.384),SOFA评分(OR=1.197,95%CI:1.006~1.425)是影响脓毒症患者继发ALI的独立危险因素。血清CCL25,PARK7联合对脓毒症继发ALI预测的曲线下面积(95%CI)[0.833(0.784~0.872)]大于单项指标[0.770(0.725~0.835),0.741(0.691~0.790)],差异具有统计学意义(Z=4.602,4.318,均P<0.05)。结论脓毒症患者血清CCL25和PARK7水平升高,是影响脓毒症继发ALI发生的独立危险因素,两者联合对脓毒症继发ALI具有较高的预测价值。

miR-25靶向RECK促进宫颈癌HeLa细胞的增殖

目的探讨微小RNA-25(miR-25)对宫颈癌He La细胞增殖活性的影响及其与逆向诱导的带Kazal基序的富含半胱氨酸蛋白(RECK)的靶向关系。方法构建pc DNATM6.2-GW-pre-miR-25、pmir GLO-野生型RECK(RECK-WT)和突变型RECK(RECK-MT)真核表达载体及miR-25抑制剂(anti-miR-25),采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测pre-miR-25和anti-miR-25在He La细胞中的转染效率,并采用MTT法分析miR-25对He La细胞增殖活性的影响,双萤光素酶报告基因、qRT-PCR和Western blot法检测miR-25与RECK靶向关系。结果测序结果显示pc DNATM6.2-GW-pre-miR-25、pmir GLO-RECK-WT和pmir GLO-RECK-MT重组载体构建成功,qRT-PCR提示pre-miR-25与anti-miR-25在He La细胞中具有良好的转染效率。MTT结果显示miR-25能够明显促进He La细胞的增殖。双萤光素酶报告基因检测显示共转染pre-miR-25与RECK-WT的He La细胞其萤光活性显著下降,同时qRT-PCR及Western blot也显示anti-miR-25在转录和转录后水平均能够显著增加He La细胞中RECK的表达。结论miR-25能够靶向RECK,促进宫颈癌He La细胞的增殖。

TRIM25泛素化IGF2BP3后抑制食管癌EC109细胞的活力

目的:探讨含三重基序蛋白25(tripartite motif-containing protein 25,TRIM25)和胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 3,IGF2BP3)与人食管癌EC109细胞活力的关系。方法:将EC109细胞分为过表达TRIM25组、过表达IGF2BP3组、敲减TRIM25组和敲减IGF2BP3表达且过表达TRIM25组,用MTT法和CCK-8法测定EC109细胞的活力;检测过表达TRIM25对IGF2BP3稳定性的影响;用免疫共沉淀技术检测TRIM25和IGF2BP3之间的相互作用;对EC109细胞转染过表达TRIM25载体或空载体,用免疫沉淀技术检测IGF2BP3泛素化程度的差异。结果:过表达TRIM25时,EC109细胞的活力受到抑制;过表达IGF2BP3时,EC109细胞的活力受到促进;敲减IGF2BP3表达的同时过表达TRIM25,EC109细胞的活力与单纯敲减IGF2BP3表达组比较无明显变化;过表达TRIM25时IGF2BP3的表达量减少,但用蛋白酶体抑制剂MG132处理EC109细胞后IGF2BP3的表达量得以恢复;敲减TRIM25对EC109细胞的活力在第2、3和4天有明显的促进效应;此外TRIM25与IGF2BP3存在相互作用;与此同时,过表达TRIM25后,IGF2BP3的泛素化程度增加。结论:TRIM25泛素化IGF2BP3,使IGF2BP3被蛋白酶体降解,从而抑制食管癌细胞的活力。

非小细胞肺癌中TRIM25和PKM2蛋白表达

目的检测临床非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)病人组织中TRIM25、PKM2蛋白的表达情况,探讨它们的关联性及意义。方法应用组织免疫荧光法,检测TRIM25、PKM2蛋白在60例NSCLC组织和20例癌旁边正常肺组织(>5 cm)表达情况,同时运用Western blotting方法检测TRIM25、PKM2在10例新鲜NSCLC组织中表达情况,并结合标本的临床病理特征进行分析。结果 TRIM25在60例非小细胞肺癌组织中的阳性表达率45%,而20例癌旁正常肺组织中仅为10%(P=0.005)。TRIM25在腺癌中阳性表达率为28.6%,而在鳞癌中为59.4%(P=0.017)。TRIM25被发现与TNM分期、淋巴结转移之间呈正相关性(P<0.05)。PKM2在60例非小细胞肺癌组织中表达率为73.3%,而在20例癌旁正常肺组织中为30%(P=0.001)。PKM2在腺癌的表达为57.1%,而在鳞癌中为87.5%(P=0.008)。通过关联性分析TRIM25和PKM2存在相关性(P=0.026)。Western blot结果表明当TRIM25表达升高时PKM2表达增长放缓。结论 TRIM25、PKM2蛋白可能同时参与到NSCLC发生发展过程中,存在负相关性。

RNA结合基序蛋白25在恶性肿瘤中的研究进展

RNA结合基序蛋白25(RBM25)属于RNA结合蛋白家族,其表达蛋白位于细胞核核斑点上,是一种剪切因子,参与基因的选择性剪切过程。近年来,RBM25对恶性肿瘤的影响引起了越来越多的学者关注。目前研究表明,RBM25表达量的高低与异常剪切对恶性肿瘤的发生、发展、转移及预后均有影响。本文就RBM25与急性髓系白血病、前列腺癌、人乳头瘤病毒阳性头颈部恶性肿瘤、乳腺癌、肺腺癌、骨肉瘤及结肠癌等多种恶性肿瘤的研究进展作一综述。

RNA结合基序蛋白25作用的研究进展

RNA结合基序蛋白25(RNA-binding motif protein 25,RBM25)是RNA结合蛋白(RNA binding proteins,RBPs)家族的一员。其富含丝氨酸/精氨酸蛋白,在mRNA剪接体的组装和选择性剪接的调控过程中起着重要作用,并参与多种疾病如(心血管疾病和肿瘤)的发生、发展。RBM 25可以调控BCL-2、SCN5A、BIN1等基因的可变剪接,进而参与细胞凋亡、离子通道电流改变及细胞因子活性改变等重要病理生理过程,但人们对RBM25了解甚少。该文将从RBM 25的基本结构和功能、调控作用机制和研究进展进行系统综述。为心血管疾病和肿瘤的防治提供相应的理论参考。

肝癌组织中STOML2和TRIM25的表达及其临床意义

目的探讨肝细胞癌(HCC)组织中Stomatin样蛋白2(STOML2)和三基序蛋白25(TRIM25)的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化En Vision二步法检测75例HCC组织和61例癌旁正常肝组织中STOML2和TRIM25的表达强度,根据细胞内染色强度和阳性细胞数分级,分析STOML2、TRIM25的表达与HCC临床病理特征的关系及两者的相关性;同时采用Kaplan-Meier法分析STOML2、TRIM25不同表达强度的总生存期(OS)。结果 STOML2和TRIM25在HCC组织中的高表达率分别为68.0%(51/75)和64.0%(48/75),均高于癌旁组织的24.6%(15/61)和37.7%(23/61),差异有统计学意义(P<0.01);STOML2表达与肿瘤大小、分化程度、BCLC分期、门静脉癌栓和肝外转移有关,而TRIM25蛋白表达与治疗前甲胎蛋白(AFP)、分化程度和腹水均有关(P<0.05),且STOML2与TRIM25表达呈正相关(r=0.379,P=0.001);TRIM25高表达者的中位OS为21.0个月,低于低表达者的36.5个月(P<0.05);但STOML2不同表达水平患者的中位OS的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 STOML2和TRIM25在HCC组织中呈高表达,两者联合检测可用于评估肝癌的恶性表现、分化情况及肝转移程度,且TRIM25水平可能有助于生存预后的评估和预测。

TRIM25增强EGFR稳定性及信号促进肺癌发展

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中最常见的驱动基因之一,尤其EGFR突变和扩增都参与了肺癌的恶性进程。本文旨在探究E3泛素连接酶TRIM25(tripartite motif 25)对肺癌发生发展的作用及分子机制。应用CCK-8和Transwell实验评价TRIM25对肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响,结果发现敲低TRIM25,显著抑制了细胞的增殖(抑制率为34%)和侵袭(抑制率为42%);采用基因集富集分析、免疫印迹和免疫组化法分析TRIM25对EGFR及其下游信号活性的影响,结果显示,TRIM25不仅上调了EGFR的表达水平,而且促进了EGFR信号活化;利用免疫共沉淀、实时定量PCR以及放线菌酮(cycloheximide,CHX)抑制蛋白质合成实验,初步探究TRIM25上调EGFR信号的分子机制。研究结果表明,TRIM25主要通过促进EGFR第63位赖氨酸位点发生泛素化修饰,进而增加EGFR蛋白稳定性、上调EGFR下游信号活性;而恢复EGFR蛋白表达后可逆转敲低TRIM25对肺癌细胞A549、H1975增殖和侵袭的抑制作用,在A549细胞中,细胞增殖率增加了1.5倍,侵袭率提高了1.6倍;同样,在H1975细胞中,细胞增殖率增加了2倍,侵袭率提高了1.7倍。以上研究结果表明,TRIM25通过维持EGFR信号持续活化,促进肺癌细胞的增殖和侵袭。本研究中所用的人肺癌组织由中国医学科学院肿瘤医院的肺癌患者提供,根据《赫尔辛基宣言》,已取得所有肺癌患者的知情同意。该研究得到了中国医学科学院肿瘤医院伦理委员会的批准。