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RNA干扰用siRNA的体外转录合成
被引量:
4
1
作者
孟和
陈学辉
潘玉春
《上海交通大学学报(农业科学版)》
2004年第1期64-68,共5页
RNA干扰(RNAinterference,RNAi)作为一种特异性沉默基因表达的方法,正在成为研究基因功能、胚胎发育及病毒性疾病治疗的重要工具,而获得符合干扰要求的短双链干扰RNA(smallinterferenceRNA,siRNA)是进行RNA;研究的首要步骤。本研究建立...
RNA干扰(RNAinterference,RNAi)作为一种特异性沉默基因表达的方法,正在成为研究基因功能、胚胎发育及病毒性疾病治疗的重要工具,而获得符合干扰要求的短双链干扰RNA(smallinterferenceRNA,siRNA)是进行RNA;研究的首要步骤。本研究建立了体外转录合成siRNA方法,并用其生成的siRNA干扰鸡成纤维细胞外源绿荧光蛋白(GFP)基因和内源3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的表达。结果显示,siRNA能特异性降低鸡成纤维细胞中内外源基因的表达。本实验认为这种以DNA为模板体外转录合成siRNA方法操作简单、成本低、产物得率高,值得从事RNA研究者参考借鉴。
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关键词
RNA干扰
rnai
特异性沉默基因表达
短双链干扰RNA
sirna
鸡成纤维细胞
gfp
gapdh
体外转录合成
下载PDF
职称材料
短双链RNA对鸡胚盘细胞外源绿荧光蛋白基因表达的影响
被引量:
6
2
作者
孟和
陈学辉
+2 位作者
王起山
崔芳岩
潘玉春
《动物学报》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期302-307,共6页
RNA干扰 (RNAinterference,RNAi)作为一种特异性沉默基因表达的方法 ,正在成为研究基因功能、胚胎发育及病毒性疾病治疗的重要工具。为了了解RNA干扰在禽类中的作用情况 ,实验将体外转录合成的绿荧光蛋白短双链干扰RNA (siGFP)和 3 磷...
RNA干扰 (RNAinterference,RNAi)作为一种特异性沉默基因表达的方法 ,正在成为研究基因功能、胚胎发育及病毒性疾病治疗的重要工具。为了了解RNA干扰在禽类中的作用情况 ,实验将体外转录合成的绿荧光蛋白短双链干扰RNA (siGFP)和 3 磷酸甘油醛脱氢酶短双链干扰RNA (siGAPDH )分别同绿荧光蛋白(Greenfluorescentprotein ,GFP)表达载体 (pEGFP C1Vector)用脂质体转染试剂LipofectamineTM2 0 0 0共转染鸡胚盘细胞 ,并于转染后 36h在荧光显微镜下观察转染和干扰效果。对细胞绿荧光蛋白表达率的方差分析结果显示 ,不同处理组间差异达极显著水准 ,其中GFP组和GFP +siGAPDH组均同GFP +siGFP组差异极显著 ,GFP组同GFP +siGAPDH组差异不显著。实验结果说明 ,siGFP能特异、有效地敲低细胞绿荧光蛋白的表达。同线虫、真菌、拟南芥、水螅、锥虫、涡虫、果蝇、斑马鱼、小鼠等其它生物体一样 ,鸡胚盘细胞中也存在短双链干扰RNA (siRNA)
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关键词
RNA干扰
短双链RNA
鸡胚盘细胞
外源绿荧光蛋白基因
表达
rnai
下载PDF
职称材料
题名
RNA干扰用siRNA的体外转录合成
被引量:
4
1
作者
孟和
陈学辉
潘玉春
机构
上海交通大学农业与生物学院
出处
《上海交通大学学报(农业科学版)》
2004年第1期64-68,共5页
基金
国家973计划"SARS防治基础研究"专项基金(2003CB514129)
中国博士后科学基金(2003034267)资助项目
文摘
RNA干扰(RNAinterference,RNAi)作为一种特异性沉默基因表达的方法,正在成为研究基因功能、胚胎发育及病毒性疾病治疗的重要工具,而获得符合干扰要求的短双链干扰RNA(smallinterferenceRNA,siRNA)是进行RNA;研究的首要步骤。本研究建立了体外转录合成siRNA方法,并用其生成的siRNA干扰鸡成纤维细胞外源绿荧光蛋白(GFP)基因和内源3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的表达。结果显示,siRNA能特异性降低鸡成纤维细胞中内外源基因的表达。本实验认为这种以DNA为模板体外转录合成siRNA方法操作简单、成本低、产物得率高,值得从事RNA研究者参考借鉴。
关键词
RNA干扰
rnai
特异性沉默基因表达
短双链干扰RNA
sirna
鸡成纤维细胞
gfp
gapdh
体外转录合成
Keywords
rnai
sirna
chicken
fibroblast
cell
gfp
gapdh
分类号
Q344.11 [生物学—遗传学]
下载PDF
职称材料
题名
短双链RNA对鸡胚盘细胞外源绿荧光蛋白基因表达的影响
被引量:
6
2
作者
孟和
陈学辉
王起山
崔芳岩
潘玉春
机构
上海交通大学农业与生物学院
出处
《动物学报》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期302-307,共6页
基金
973计划"SARS防治基础研究"专项课题(No2003CB514129)
中国博士后科学基金(2003034267)资助~~
文摘
RNA干扰 (RNAinterference,RNAi)作为一种特异性沉默基因表达的方法 ,正在成为研究基因功能、胚胎发育及病毒性疾病治疗的重要工具。为了了解RNA干扰在禽类中的作用情况 ,实验将体外转录合成的绿荧光蛋白短双链干扰RNA (siGFP)和 3 磷酸甘油醛脱氢酶短双链干扰RNA (siGAPDH )分别同绿荧光蛋白(Greenfluorescentprotein ,GFP)表达载体 (pEGFP C1Vector)用脂质体转染试剂LipofectamineTM2 0 0 0共转染鸡胚盘细胞 ,并于转染后 36h在荧光显微镜下观察转染和干扰效果。对细胞绿荧光蛋白表达率的方差分析结果显示 ,不同处理组间差异达极显著水准 ,其中GFP组和GFP +siGAPDH组均同GFP +siGFP组差异极显著 ,GFP组同GFP +siGAPDH组差异不显著。实验结果说明 ,siGFP能特异、有效地敲低细胞绿荧光蛋白的表达。同线虫、真菌、拟南芥、水螅、锥虫、涡虫、果蝇、斑马鱼、小鼠等其它生物体一样 ,鸡胚盘细胞中也存在短双链干扰RNA (siRNA)
关键词
RNA干扰
短双链RNA
鸡胚盘细胞
外源绿荧光蛋白基因
表达
rnai
Keywords
rnai
,
sirna
,
chicken blastoderm cell
,
gfp
,
gapdh
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RNA干扰用siRNA的体外转录合成
孟和
陈学辉
潘玉春
《上海交通大学学报(农业科学版)》
2004
4
下载PDF
职称材料
2
短双链RNA对鸡胚盘细胞外源绿荧光蛋白基因表达的影响
孟和
陈学辉
王起山
崔芳岩
潘玉春
《动物学报》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004
6
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职称材料
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