褐飞虱安全高效RNAi靶基因的筛选及Snf7同源基因的控害效果

褐飞虱(Nilaparvata lugens)是一种具有高繁殖力、强适应性和迁飞性的重要水稻害虫。为更有效地获得安全高效的褐飞虱RNAi靶标基因,建立了一套安全高效RNAi靶基因的筛选流程,获得了32个安全高效致死候选基因,并检测了其中12个基因的RNAi效率。进一步对其中的转运必需内吞体分选复合物Ⅲ亚基Snf7同源基因(简称为NlSnf7)的控害效果进行了研究。NlSnf7基因在褐飞虱各个时期和组织均有表达。通过注射法和饲喂法RNAi技术对NlSnf7进行低剂量干扰,结果表明干扰后NlSnf7的mRNA表达水平显著降低,褐飞虱的校正死亡率在每头注射50 ng后第13天可达70%,饲喂50 ng/μL后第9天可达48%;注射dsNlSnf7后第5天NlSnf7的蛋白水平也显著降低。此外,选择无连续21 bp相同序列的亚洲玉米螟和白背飞虱进行dsNlSnf7注射,发现与对照组相比,实验组均无显著变化。这些结果表明dsNlSnf7片段是一个高效安全的RNAi靶标分子。

The Influence of RNA Secondary Structure on the Efficiency of si RNA Silencing

In the application of RNAi technology,it is an essential step to design siR NA applicable to target gene.At present,there are many researches and conclusions on siR NA design.This paper aims to the influences of mR NA secondary structure or siR NA antisense-strand secondary structure on siR NA silence efficiency.The paper also discusses the problems and sets out further insights in the research.