甜高粱茎秆总RNA提取方法的比较

甜高粱是最具潜力的能源作物之一,新鲜的甜高粱茎秆中含有大量汁液且富含多糖和多酚成分,很难获得高质量的总RNA。以甜高粱Rio的茎秆为实验材料,利用Trizol法、SDS法、改良CTAB法和RNAiso法分别提取新鲜茎秆总RNA,比较几种方法获取的总RNA质量与纯度。实验结果证明,RNAiso改良法提取的茎秆总RNA质量高,完整性好,总RNA产物可直接用于建库和转录组测序等后续实验。

3种烟草RNA高效提取方法的比较

为了寻求烟草叶片RNA高效提取方法,为烟草分子生物学研究提供理论基础,试验以烟草叶片为材料,采用试剂盒法、Trizol法、RNAiso法提取RNA,凝胶电泳和分光光度计检测确定高效、经济的RNA提取方法。结果表明：试剂盒法操作简单,但提取量较少;Trizol法方便快捷,但有部分蛋白质污染,并出现RNA降解现象;相比以上2种方法,RNAiso法提取的RNA浓度在100～500 ng/μL之间,A260/A280在1.8～2.0之间,条带清晰明亮,无RNA降解,且28 S条带亮度约是18 S的两倍;RT-PCR检测结果显示,RNAiso法提取的RNA可以扩增出目的基因,大小约2500 bp,与参考序列大小吻合,可用于后续的功能验证。因此,在烟草RNA提取方法比较中,RNAiso法较适合烟草叶片RNA提取,并已在很多实验室推广利用。