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一种高通量快速鉴定重组子方法的建立
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作者 王亚男 黄培华 樊宝良 《江苏农业科学》 北大核心 2014年第5期65-66,共2页
利用添加了RNaseA的1X cracking buffer直接裂解细菌增强观测效果,排除RNA干扰,通过琼脂糖凝胶电泳与空载体质粒进行比较,建立一种高通量快速鉴定重组子的方法。该方法方便易行,大大提高了工作效率。
关键词 CRACKING BUFFER 直接裂解 rnasea 重组子鉴定 克隆鉴定 优化方法
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诱发RNase A活性的最低水含量阈值的测定
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作者 傅亚珍 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期21-26,共6页
通过RNaseA的水合等温线,确定RNaseA吸附水时所处的相对湿度及其水合值的关系;通过将酶与底物的水溶液在低温下混合,冰冻和冷干后的酶-底物复合物在不同相对湿度下与水相互作用(酶反应)两天,经0.01NNaOH猝... 通过RNaseA的水合等温线,确定RNaseA吸附水时所处的相对湿度及其水合值的关系;通过将酶与底物的水溶液在低温下混合,冰冻和冷干后的酶-底物复合物在不同相对湿度下与水相互作用(酶反应)两天,经0.01NNaOH猝灭反应后用紫外差吸收光谱法测相对酶活;从而建立了含微量水的RNaseA活性的测定方法,并得到诱发RNaseA活性的最低水含量阈值约为0.16克水/克酶,即当一个RNaseA分子周围有约122个水分子时RNaseA开始具有生物活性。 展开更多
关键词 水合作用 rnasea 酶活性 水含量 域值
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核糖核酸酶A在DAB-环己烷溶液中的活性和构象 被引量:3
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作者 黄文 李晓峰 顾惕人 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第4期353-356,共4页
The activity and conformation of ribonuclerse A (RNaseA) solubilized in cyclohexane via dodecylammonium butyrate(DAB) reverse Ancelles were investigated. The activity of RNaseA was studied using the cytidine 2’,3’-p... The activity and conformation of ribonuclerse A (RNaseA) solubilized in cyclohexane via dodecylammonium butyrate(DAB) reverse Ancelles were investigated. The activity of RNaseA was studied using the cytidine 2’,3’-phosphate as the substrate, and it was found that kcat increases significantly with respect to that in water attended by an increased Km·FT-IR spectra of RNaseA in reverse Ancellax solution were investigated as a function of w0(= [H2O]/ [DAB]), and it was noted that the structure of RNaseA became looser in reverse micelles campared to that in aqueous solution. The relation between activity and conformation was discussed. 展开更多
关键词 核糖核酸酶 反胶束 构象 DAB 环己烷 活性
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盐浓度对变性核糖核酸酶在液/固界面吸附的影响
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作者 刘爱玲 耿信鹏 +1 位作者 柴瑜 侯海云 《西安工程大学学报》 CAS 2009年第4期56-61,共6页
采用摇床法,测定25℃不同浓度硫酸铵时变性牛胰核糖核酸酶(RNase A)在固体疏水作用色谱填料PEG-600表面上的吸附等温线.得出随盐浓度的增加,变性蛋白分子与疏水表面吸附亲和作用增强,吸附量随盐浓度的增加而增大.DSC和FTIR的研究证实,... 采用摇床法,测定25℃不同浓度硫酸铵时变性牛胰核糖核酸酶(RNase A)在固体疏水作用色谱填料PEG-600表面上的吸附等温线.得出随盐浓度的增加,变性蛋白分子与疏水表面吸附亲和作用增强,吸附量随盐浓度的增加而增大.DSC和FTIR的研究证实,变性吸附态蛋白分子的热稳定性随盐浓度的增加而增强,保留了更多的蛋白二级结构,且在疏水表面上进行再折叠,得到部分有序的蛋白三级结构. 展开更多
关键词 吸附 核糖核酸酶(rnasea) 蛋白结构
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人核糖核酸酶A家族生物学功能的结构基础
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作者 张安静 陆路 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期486-497,共12页
人核糖核酸酶A(ribonuclease A, RNaseA)家族成员有13个,分别为RNase1-RNase13,它们具有很高的序列相似性,大多含有6~8个半胱氨酸并形成分子内二硫键,以维持特有的空间结构。其中,RNase1-RNase8具有多种生物活性,可概括为3类:涉及核糖... 人核糖核酸酶A(ribonuclease A, RNaseA)家族成员有13个,分别为RNase1-RNase13,它们具有很高的序列相似性,大多含有6~8个半胱氨酸并形成分子内二硫键,以维持特有的空间结构。其中,RNase1-RNase8具有多种生物活性,可概括为3类:涉及核糖核酸转录后的剪切、修饰和降解;具有抗细菌、抗真菌和抗病毒活性;以及机体免疫调节作用。而RNase9-RNase13不具有核糖核酸酶活性。因此,本文将重点对RNaseA家族成员RNase1-RNase8的结构与功能研究进行综述,重点概述决定RNaseA生物学功能的结构特征,以期指导以RNaseA为基础的抗微生物药物开发及RNaseA在机体免疫中的功能研究。 展开更多
关键词 rnasea 结构与功能 酶切活性 抗微生物 免疫调节
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小量质粒快速提取法
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作者 侯亚莉 《生物制品快讯》 2001年第12期19-19,共1页
关键词 小量质粒快速提取法 rnasea 碱性溶菌法 操作方法
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核糖核酸酶A超家族抗菌活性评价
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作者 朱泽浩 励航宇 +1 位作者 孙钧 盛静浩 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期524-530,共7页
抗菌肽是机体重要的免疫防御分子,具有广谱杀菌活性。核糖核酸酶A是脊椎动物特异性的分泌型蛋白质,在人基因组中包含8个经典成员(RNase1-8)。它们作为一类重要的抗菌肽,广泛分布于机体需要抵抗外界病原微生物的组织中,除了特有的生物学... 抗菌肽是机体重要的免疫防御分子,具有广谱杀菌活性。核糖核酸酶A是脊椎动物特异性的分泌型蛋白质,在人基因组中包含8个经典成员(RNase1-8)。它们作为一类重要的抗菌肽,广泛分布于机体需要抵抗外界病原微生物的组织中,除了特有的生物学功能外,均具有一定的抗菌活性。然而,目前各实验室对它们抗菌活性的报道并不一致,有必要开展横向比较分析。为此,我们表达纯化了人核糖核酸酶A超家族8个成员的重组蛋白质,并在同一实验条件下以半致死浓度评估了它们对革兰氏阴性菌(大肠杆菌)和革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)的抗菌活性。结果显示,RNase1-8重组蛋白质对大肠杆菌半数致死浓度分别为:0.081,0.046,0.008,0.250,2.028,0.072,0.001μmol·L~(-1)和1.1416μmol·L~(-1);对金黄色葡萄球菌半数致死浓度分别为:3.427,1.856,2.211,5.188,8.274,4.356,2.502μmol·L~(-1)和9.916μmol·L~(-1)。该结果提示,RNase1-8对大肠杆菌的抗菌活性存在明显差异,其中RNase3和RNase7活性最强,且均显著高于各自对金黄色葡萄球菌的抗菌活性;8个成员对金黄色葡萄球菌的抗菌活性无明显差异。据此我们认为,核糖核酸酶A超家族对革兰氏阴性菌具有较好的杀伤活性,可用于革兰氏阴性菌抗菌产品的开发。 展开更多
关键词 核糖核酸酶A 抗菌肽 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 抗菌活性
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人类核糖核酸酶A家族 被引量:1
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作者 徐宏博 李丹 赵伟 《生命的化学》 CAS CSCD 2012年第2期174-179,共6页
核糖核酸酶A(RNase A)是脊椎动物所特有的蛋白质家族。除了水解RNA以外,它们还参与细胞成熟、细胞凋亡、血管生成以及宿主防御等过程,在疾病的诊断和治疗方面表现出重要的应用价值。随着人类基因组计划的完成,人们已经发现了13个RNase ... 核糖核酸酶A(RNase A)是脊椎动物所特有的蛋白质家族。除了水解RNA以外,它们还参与细胞成熟、细胞凋亡、血管生成以及宿主防御等过程,在疾病的诊断和治疗方面表现出重要的应用价值。随着人类基因组计划的完成,人们已经发现了13个RNase A基因。本文综述了人类RNase A的酶活性和结构特点,特别论述了其特殊的生物学活性,以及酶活性与特殊生物学活性之间的关系,为进一步的研究和应用提供信息。 展开更多
关键词 rnasea 酶活性 杀菌活性 特殊生物学活性
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