RNF181在非小细胞肺癌中低表达并抑制肿瘤进展

目的探讨环指蛋白(RNF)181调控非小细胞肺癌的作用及其分子机制。方法采用免疫组织化学染色技术检测RNF181在75例非小细胞肺癌及其癌旁组织的表达情况,分析其临床病理学意义。在非小细胞肺癌细胞系H1299及A549中通过转染质粒或siRNA差异表达RNF181,通过MTT实验,流式细胞技术及Transwell实验分别检测细胞增殖能力,细胞周期及侵袭能力变化情况,通过Western印迹实验检测上皮细胞间质转化(EMT)相关蛋白及细胞周期相关蛋白的表达情况。结果RNF181主要定位于细胞质,其在肺癌组织中呈相对低水平表达(P<0.01),并与肺癌临床分期(P<0.05)及局部淋巴结转移呈负相关(P<0.01)。RNF181可分别抑制H1299和A549的增殖能力,阻滞细胞周期于G1/S期,并可抑制细胞周期蛋白(cyclin)D1的表达;RNF181可分别抑制H1299和A549的侵袭能力,促进内皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达,并抑制神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)、Snail同源物1(Snail)及Snail同源物2(Slug)蛋白的表达。结论RNF181可通过调控EMT及细胞周期抑制非小细胞肺癌进展过程。

RNF181、cyclin D1、Ki-67在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:研究环指蛋白181(ring finger protein 181,RNF181)、cyclin D1、Ki-67在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达水平及其临床病理学意义。方法:采用免疫组织化学染色法检测83例NSCLC组织及癌旁组织中RNF181、cyclin D1、Ki-67的蛋白表达情况并分析其临床病理意义。结果:在NSCLC组织中RNF181主要定位于细胞浆,在肺癌组织中普遍低表达;cyclin D1、Ki-67主要定位于细胞核,在癌组织中相对高表达。不同肿瘤分化患者NSCLC组织中RNF181表达、cyclin D1阳性、Ki-67表达情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05);不同局部淋巴结转移患者NSCLC组织中RNF181表达、cyclin D1阳性情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同年龄、性别、病理类型患者NSCLC组织中RNF181表达、cyclin D1阳性、Ki-67表达情况及不同局部淋巴结转移患者NSCLC组织中Ki-67表达情况比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。NSCLC组织中RNF181表达与cyclin D1、Ki-67均呈负相关(r_(s)=-0.373、-0.417,P<0.001),cyclin D1与Ki-67表达水平呈正相关(r_(s)=0.526,P<0.001)。结论:RNF181在NSCLC组织中低表达,cyclin D1、Ki-67在NSCLC组织中高表达分别与肿瘤进展相关,并随肿瘤分化程度或局部淋巴结转移情况不同而存在差异,三者蛋白表达水平存在相关性。

RNF181在头颈部鳞癌组织中低表达并抑制肿瘤进展

目的研究RNF181在头颈部鳞癌中的表达水平及其临床病理意义。方法采用免疫组织化学染色检测RNF181在62例头颈部鳞癌及10例癌旁组织中的表达情况,分析其表达情况与患者年龄、性别、肿瘤直径、病理分级、TNM分期之间的关系。在口腔鳞癌细胞系Tca-8113中过表达RNF181,通过MTT检测其增殖能力,通过Western印迹检测细胞周期相关蛋白CyclinD1、CDK4及p18的表达情况。结果RNF181主要定位于细胞质,在头颈部鳞癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.0001),且与病理学分级负相关,与肿瘤直径负相关,与淋巴结转移负相关,而与年龄、性别无明显相关性。MTT结果显示过表达RNF181抑制了Tca-8113细胞的增殖能力(P<0.01)。过表达RNF181后CyclinD1及CDK4表达水平下降,而p18表达水平增加(P<0.01)。结论RNF181在头颈部鳞癌中低表达并与肿瘤进展及患者不良预后相关,过表达RNF181后抑制细胞增殖,RNF181可能成为头颈部鳞癌预后评估及治疗的新靶点。

沉默RNF181基因表达可促进结肠癌SW480细胞的生长

目的 :研究沉默环指蛋白181(ring finger protein 181,RNF181)基因表达对结肠癌细胞SW480生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :采用慢病毒感染的方法将靶向沉默RNF181基因表达的重组慢病毒颗粒LV3-RNF181-KD转入人结肠癌SW480细胞中[以感染重组慢病毒颗粒LV3-negative control(NC)为阴性对照)]。病毒感染48 h后,分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测SW480细胞中RNF181m RNA及蛋白的表达水平;CCK-8法和平板克隆法检测RNF 181基因沉默对SW480细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测对细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)及其磷酸化ERK(phospho-ERK,p-ERK)表达的影响。结果 :实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测结果显示,重组慢病毒颗粒LV3-RNF181-KD转入SW480细胞后,细胞中RNF181 m RNA和蛋白的表达水平均较阴性对照组(感染重组慢病毒颗粒LV3-NC的SW480细胞)明显下调,差异均有统计学意义(P值均<0.01)。CCK-8及平板克隆实验证实,沉默RNF181基因表达后SW480细胞的增殖能力明显增强(P值均<0.01)。细胞中ERK蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05),而p-ERK蛋白的表达水平明显升高(P<0.01)。结论 :沉默RNF181基因的表达可增强人结肠癌细胞SW480的增殖能力,其机制可能与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activate protein kinase,MAPK)/ERK信号转导通路的活化有关。