CTCs、IGF-1R及RNPC1对非小细胞肺癌患者术后复发的预测价值

目的 分析循环肿瘤细胞(CTCs)、胰岛素样生长因子1(IGF-1R)及RNA结合蛋白(RNPC1)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者术后复发的预测价值。方法 选取2021年4月至2022年1月于首都医科大学附属北京朝阳医院进行肺切除术手术治疗的NSCLC患者132例为研究对象。总结12个月后随访情况;比较手术前后CTCs、IGF-1R、RNPC1水平变化情况;分析影响NSCLC患者术后复发的单因素,采用多元Logistic回归分析CTCs、IGF-1R、RNPC1对NSCLC患者术后复发的相关因素。结果患者术后CTCs、IGF-1R、RNPC1测量值均低于术前,差异有统计学意义(P<0.05);经随访发现,复发转移组45例,非复发转移组87例;两组性别、年龄、BMI、高血压史、糖尿病史、吸烟比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组TNM分期、分化程度与CTCs、IGF-1R、RNPC1测量值比较差异具有统计学意义(P<0.05);经Logistic回归分析显示:TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为中低分化、CTCs>14.05±11.73个/mL、IGF-1R>256.39±23.47μg/L、RNPC1>0.89±0.12 IU/mL均是影响NSCLC患者术后复发的危险因素(P<0.05)。结论 CTCs、IGF-1R、RNPC1水平在NSCLC术后均明显下降,对预后评估具有重要的指导价值;因此,可将CTCs、IGF-1R、RNPC1水平作为评估NSCLC患者术后复发转移的重要参考依据。

shRNA干扰沉默RNPC1a基因对SUM1315细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:研究RNPC1a基因对SUM1315细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:应用脂质体技术将RNPC1a短发夹RNA(shRNA)转染至SUM1315细胞,通过嘌呤霉素筛选出稳定细胞株,采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测其干涉效率,并用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖情况,划痕实验及Transwell细胞侵袭实验检测其迁移和侵袭能力。结果:经qRT-PCR和Western blot方法证实稳定转染RNPC1a shRNA的SUM1315细胞中RNPC1a的mRNA和蛋白水平较对照组均明显下降(P<0.05),同时RNPC1a干扰后细胞的增殖、迁移及侵袭能力均减弱(P<0.05)。结论:RNPC1a shRNA能有效地降低SUM1315细胞中RNPC1a基因的表达,RNPC1a基因沉默可以抑制SUM1315细胞的增殖、迁移及侵袭。

RNPC1、S100A6蛋白在肺腺癌中的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨RNPC1、S100A6蛋白在肺腺癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法选取2015年1月至2018年3月我院保存的肺腺癌组织标本81例,同时选取癌旁组织作为对照,采用免疫组化染色法检测RNPC1、S100A6蛋白表达。结果肺腺癌组织RNPC1和S100A6蛋白阳性表达率分别为70.37%和81.49%,明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);RNPC1表达与肺腺癌患者吸烟、TNM分期、分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05);S100A6蛋白表达与肺腺癌患者吸烟、TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05);RNPC1与S100A6蛋白表达呈正相关(rs=0.595,P<0.05)。结论肺腺癌组织中RNPC1和S100A6蛋白表达上调,与患者病理特征有关,可能在肺腺癌发生发展中有一定作用。

肺腺癌中RNPC1蛋白、EGFRv Ⅲ蛋白表达水平及意义

目的探讨肺腺癌中RNPC1蛋白、EGFRvⅢ蛋白表达水平及意义。方法选取2015年1月至2018年4月我院保存的肺腺癌组织标本89例,同时选取癌旁组织作为对照组,采用Western blot检测RNPC1蛋白、EGFRvⅢ蛋白表达。结果肺腺癌组织RNPC1和EGFRvⅢ蛋白相对表达量分别为(0.833±0.122)和(0.910±0.115),明显高于癌旁组织(P<0.05);肺腺癌Ⅲ期、有淋巴结转移患者RNPC1蛋白相对表达量分别为(0.892±0.115)和(0.898±0.120),明显高于Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(P<0.05);肺腺癌女性、中低分化患者EGFRvⅢ蛋白相对表达量分别为(0.960±0.139)和(0.933±0.112),明显高于男性、高分化患者(P<0.05)。结论肺腺癌中RNPC1蛋白、EGFRvⅢ蛋白表达明显升高,与临床病理特征有一定关系,值得进一步研究。

RNPC1基因对乳腺癌细胞MCF-7阿霉素药物敏感性的影响

目的 :研究RNPC1对乳腺癌细胞MCF-7阿霉素药物敏感性的影响。方法 :在MCF-7细胞中使用慢病毒转染法,设敲除(sh RNPC1)组和过表达RNPC1组、敲除对照(SCR)组和过表达对照(NC)组。用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组MCF-7细胞中RNPC1的m RNA和蛋白水平。以不同浓度的阿霉素处理各组MCF-7细胞,CCK-8法检测各组细胞生长抑制率。阿霉素处理各组MCF-7细胞后,用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞中调亡相关蛋白的表达。结果:sh RNPC1组RNPC1 m RNA和蛋白相对表达量均低于SCR组,过表达RNPC1组RNPC1 m RNA及蛋白相对表达量均高于NC组(P<0.05)。阿霉素处理各组MCF-7细胞后,sh RNPC1组IC50明显于低于SCR组(P<0.05),过表达组IC50明显高于NC组(P<0.05)。阿霉素处理各组MCF-7细胞24 h后,发现sh RNPC1组凋亡率明显高于SCR组;过表达RNPC1组凋亡率显著低于NC组(P<0.05)。阿霉素处理各组MCF-7细胞24 h后,sh RNPC1组抑凋亡蛋白BCL-XL、BCL-2的表达低于SCR组,促凋亡蛋白BIM和BID的表达高于SCR组;过表达RNPC1组抑凋亡蛋白BCL-CL、BCL-2的表达高于NC组,促凋亡蛋白BIM和BID的表达低于NC组。结论:RNPC1能降低乳腺癌细胞MCF-7对阿霉素的敏感性,其机制与抗细胞凋亡有关。

RNA结合蛋白RNPC1对肾癌细胞生物学功能的影响

目的 RNPC1在人体肿瘤中可能是抑癌基因也可能是促癌基因,其在肾癌细胞中的角色尚不明朗。研究RNPC1对肾癌细胞生物学功能的影响,以探索RNPC1的表达与肾癌发生发展之间的关系。方法将肾癌细胞CAKI-1和CAKI-2分别构建RNPC1基因高表达(RNPC1组)、短发夹RNA干扰RNPC1基因表达(shRNPC1组),另设空白对照组以及阴性对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot检测RNPC1 mRNA及蛋白在肾癌细胞中的表达情况。运用慢病毒转染技术,建立稳定表达的RNPC1高表达,干扰的肾癌细胞系。检测RNPC1稳转的肾癌细胞系中mRNA及蛋白的表达情况。通过CCK-8细胞增殖实验、克隆实验、划痕实验、迁移侵袭实验,检测RNPC1对肾癌细胞增值,迁移,侵袭能力的影响。运用Western blot检测RNPC1稳转的肾癌细胞系中EMT通路蛋白表达水平的变化,探究RNPC1对肾癌细胞生物学功能影响的分子机制。结果 Western blot和qRT-PCR结果表明,与空白对照组比较,RNPC1组的RNPC1水平明显上调(P<0.05),与阴性对照组比较,shRNPC1组的RNPC1水平明显下调(P<0.05)。RNPC1组细胞A450值和克隆计数较空白对照组明显降低;shRNPC1组细胞A450值和克隆计数较阴性对照组明显升高(P<0.05)。划痕实验结果表明shRNPC1组细胞迁移距离[CAKI-1:(303.98±12.31)μm,CAKI-2:(352.50±24.60)μm]较阴性对照组[CAKI-1:(303.98±12.31)μm,CAKI-2:(237.25±12.89)μm]增大(P<0.05);RNPC1组细胞迁移距离[CAKI-1:(132.52±35.13)μm,CAKI-2:(126.50±19.24)μm]较空白对照组[CAKI-1:(281.65±19.71)μm,CAKI-2:(300.00±22.28)μm]减小(P<0.05)。细胞的迁移和侵袭实验表明,shRNPC1组迁移和侵袭的细胞数较阴性对照组明显增多(P<0.05);迁移和侵袭的细胞数少于空白对照组(P<0.05)。结论 RNPC1基因高表达能抑制肾癌细胞CAKI-1和CAKI-2的细胞增殖、迁移及侵袭能力,可以为临床治疗肾癌提供新的作用靶点。

RNPC1通过抑制Snail表达影响乳腺癌转移

目的 :研究人乳腺癌细胞BT474中RNPC1对Snail表达的调控,及其与乳腺癌淋巴结转移等生物学行为的关系。方法:采用免疫组化(SP法)检测42例伴有淋巴结转移及39例无淋巴结转移的乳腺癌组织中RNPC1蛋白的表达,并计算差值;通过TCGA数据库分析伴有或不伴有淋巴结转移的乳腺癌组织中RNPC1基因表达差异;采用慢病毒转染法干扰或过表达RNPC1基因,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测BT474细胞中Snail的表达量;以双荧光素酶报告基因实验证实RNPC1与靶基因Snail的结合。结果:与有淋巴结转移的乳腺癌组织相比,RNPC1的表达量在无淋巴结转移的组织中相对较高;干扰RNPC1能够明显增加BT474细胞中Snail的表达,过表达RNPC1可以显著降低Snail的表达;RNPC1通过结合Snail3′-非编码区(3′-UTR)降低其表达水平。结论 :RNPC1可以通过降低Snail的表达,影响乳腺癌的转移能力。

恶性血液病患者RNPC1 mRNA的表达及意义

目的:研究RNPC1基因在白血病、淋巴瘤等恶性血液病患者中的表达水平及其在恶性血液病发生、发展中的意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测32例难治的白血病、淋巴瘤患者和10例健康者骨髓单个核细胞中RNPC1 mRNA水平的表达。采用χ2检验、四格表的确切概率法进行统计分析,比较各组RNPC1基因阳性率的差异。结果:RNPC1基因在恶性血液病患者中有较高水平的表达,明显高于对照组(P<0.05)。白血病组与淋巴瘤组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:RNPC1基因过度表达在恶性血液病的发病机制中起重要的作用。

RNPC1基因对人乳腺癌细胞SUM1315化疗药物敏感性的影响

目的:探讨RNPC1对人乳腺癌细胞SUM1315化疗药物敏感性的影响及相关机制。方法:慢病毒转染技术将转染至SUN1315细胞中,设敲除(shRNPC1)组和过表达RNPC1组、敲除对照(SCR)组和过表达对照(NC)组。采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测各组SUM1315细胞中RNPC1的mRNA和蛋白水平。用不同浓度的紫杉醇、多西他赛和5-氟尿嘧啶化疗药物处理各组SUM1315细胞,通过CCK-8法测绘细胞存活曲线并计算半数抑制浓度(IC50),紫杉醇、多西他赛和5-氟尿嘧啶处理各组SUM1315细胞72 h,通过流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:敲除RNPC1组RNPC1 mRNA和蛋白相对表达量均低于SCR组,过表达RNPC1组RNPC1 mRNA及蛋白相对表达量均高于NC组(P <0.05)。紫杉醇、多西他赛和5-氟尿嘧啶处理各组SUM1315细胞72 h后,shRNPC1组IC50明显低于SCR组(P <0.05),过表达RNPC1组IC50明显高于NC组(P <0.05)。用紫杉醇、多西他赛和5-氟尿嘧啶处理各组SUM1315细胞72 h后,shRNPC1组凋亡率明显高于SCR组;过表达RNPC1组凋亡率显著低于NC组(P <0.05)。结论:RNPC1基因能显著降低人乳腺癌细胞SUM1315对紫杉醇、多西他赛和5-氟尿嘧啶化疗药物的敏感性,有望成为乳腺癌治疗的新策略。

白血病中RNA结合蛋白RNPC1的表达及意义

目的探讨白血病患者中RNPC1的表达水平及其在白血病发生、发展中的意义。方法采用RT-PCR法、Western blot法分别从mRNA和蛋白质水平检测54例白血病患者和10例健康者骨髓单个核细胞中RNPC1的表达情况。采用χ2检验、t检验进行统计分析,比较各组RNPC1表达阳性率的差异。结果 (1)90.7%的白血病患者表达不同程度的RNPC1。(2)RNPC1在白血病患者中的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)多种分型的白血病中均有RNPC1表达,且各分型之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RNPC1过度表达在白血病的发病机制中起重要的作用。

RNPC1基因对胃癌细胞MGC-823增殖、迁移及侵袭的影响

目的研究RNPC1基因对胃癌细胞MGC-823增殖、迁移及侵袭的影响。方法胃癌细胞MGC-823中构建RNPC1基因过表达(RNPC1组)及短发夹RNA干扰RNPC1基因表达(shRNPC1组),另设空白对照组(NC组)以及阴性对照组(SCR组)。采用实时荧光定量PCR和Western blot检测RNPC1mRNA及蛋白表达水平,CCK-8法检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果shRNPC1组RNPC1 mRNA及蛋白相对表达量均低于SCR组,而RNPC1组RNPC1mRNA及蛋白相对表达量均高于NC组(P<0.01)。shRNPC1组细胞增殖能力弱于SCR组,而RNPC1组细胞增殖能力强于NC组(P<0.01)。shRNPC1组细胞迁移和侵袭能力弱于SCR组,而RNPC1组细胞迁移和侵袭能力均强于NC组(P<0.01)。结论 RNPC1基因过表达能增强MGC-823细胞增殖、迁移及侵袭能力,可为临床治疗提供新的作用靶点。

RNA结合蛋白RNPC1的研究进展

RNPC1是一种RNA结合蛋白,通过调节其靶基因mRNA的稳定性在细胞增殖活动、细胞周期、细胞肌源性分化等细胞生物学活动中发挥作用.目前研究发现,RN PC1能够调节p53、p21、p73、p63、人抗原R、巨噬细胞抑制细胞因子1、紧密连接蛋白1、磷酸酯酶与张力蛋白同源物、雌激素受体、孕酮受体、c-Myc、鼠科双微体2等基因mRNA的稳定性.RNPC1参与肿瘤发生、发展的机制十分复杂.生物信息学分析表明,RN PC1具有抑癌和促癌双重性,在不同类型的癌症中发挥着不同的作用.本文综述RN PC1的研究进展.

探讨肺腺癌中RNPC1蛋白、EGFRvⅢ蛋白表达水平及意义

分析RNPC1蛋白、EGFRvⅢ蛋白表达水平在肺腺癌患者中表达的意义。方法:将牡丹江医学院近年来(2020.10-2021.10)期间收治的肺腺癌患者80例作为本次观察对象,分为观察组(患者癌组织)和对照组(癌旁组织),比较两组之间的表达情况(包括不同分期、不同性别、分化程度、淋巴结是否转移的RNPC1蛋白、EGFRvⅢ蛋白表达水平)。结果:观察组与对照组之间的RNPC1蛋白、EGFRvⅢ蛋白可见,观察组的相对更高(P<0.05),而所有患者不同分期的RNPC1蛋白、EGFRvⅢ蛋白分析可见,一期患者的RNPC1蛋白、EGFRvⅢ蛋白水平明显更低,三期患者明显更高(P<0.05);女性患者RNPC1蛋白与男性患者并无差异(P>0.05),EGFRvⅢ蛋白水平明显高于男性患者(P<0.05)。此外,女性患者中RNPC1蛋白和EGFRvⅢ蛋白的表达水平往往高于男性患者,提示癌细胞中可能存在一些性别差异,高分化患者的EGFRvⅢ蛋白可能显著升高(P<0.05),但RNPC1蛋白、与中低分化组并无明显差异(P>0.05)。结论:肺腺癌患者中RNPC1蛋白和EGFRvⅢ蛋白的表达水平均有不同程度的升高,这可能与临床病理特征有着一定的联系。

人乳腺癌ZR-75-1细胞中RNA结合蛋白38对孕激素受体表达的调节作用及其机制

目的明确乳腺癌细胞株ZR-75—1中RNA结合蛋白38（RNPCI）的表达对孕激素受体（PR）表达的调节作用。方法采用慢病毒转染法过表达RNPCI基因，以实时荧光定量PCR（qRT—PCR）和Westernblot法检测RNPCI调节PR表达的情况；以放线菌素实验研究RNPCI调控PR表达的机制。采用免疫组化法检测80例乳腺癌组织中RNPCI蛋白和PR蛋白的表达。结果免疫组化检测结果显示，在PR蛋白表达阳性的29例乳腺癌组织中，RNPCI蛋白高表达16例；在PR蛋白表达阴性的51例乳腺癌组织中，RNPCI蛋白低表达41例。qRT—PCR检测结果显示，过表达RNPCI组和过表达对照组乳腺癌ZR-75-1细胞中，PRmRNA的相对表达量分别为1．764±0．028和1．001±0．037．差异有统计学意义（P〈0．01）；而干扰RNPCI组和干扰对照组乳腺癌ZR-75-1细胞中PRmRNA的相对表达量分别为0．579±0．007和1．000±0．002，差异有统计学意义（P〈0．01）。Westernblot法检测结果显示，在乳腺癌ZR-75—1细胞中，过表达RNPCI可使PR蛋白的表达增加；而敲除RNPCI的表达后，PR蛋白的表达减少。放线菌素实验结果显示，乳腺癌ZR-75—1细胞过表达RNCPl后，PRmRNA的稳定性增加，其半衰期由过表达对照组的4．0h增加为6．5h；而敲除RNPCI的表达后，PRmRNA的稳定性降低，其半衰期由干扰对照组的4．1h降为3．0h。结论RNPCI在调节乳腺癌ZR-75-1细胞PRmRNA和蛋白的表达中发挥重要作用。