阿维链霉菌来源EndoH在枯草芽孢杆菌中的表达及应用

内切β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶H(Endo H)是一类识别并切割与糖肽和糖蛋白的天冬氨酸残基连接的寡聚糖上N-乙酰氨基壳糖核心的糖苷酶,可用于糖组学中大规模糖基化位点的鉴定。克隆阿维链霉菌来源的endo H,成功构建p MA0911.1-Endo H重组质粒,并转化到枯草芽孢杆菌WB600中。发酵液经疏水层析和离子交换层析等技术手段得到目的蛋白Endo H。通过重组Endo H高效率酶切RNase B及对鸡卵清标准糖蛋白(OVA)的N-糖链结构的鉴定,表明重组Endo H在糖组学N-糖链结构研究中具有良好的应用前景。