基于IKKβ/NF-κB通路探讨温胆汤对睡眠障碍小鼠的神经保护作用

目的 探讨温胆汤对睡眠障碍小鼠神经损伤的影响及其机制。方法 小鼠采用改良版水平转盘睡眠剥夺法构建失眠模型,造模成功后随机分为模型组、艾司唑仑片组(0.15 mg/kg)和温胆汤低、高剂量组(12.5、50 g/kg),每组6只,另取6只作为对照组。给药干预7 d后,HE染色观察大脑皮层组织、海马CA1区组织、下丘脑组织变化;尼氏染色观察神经元损伤情况;ELISA法检测脑组织和血清中神经丝轻链(NEFL)、神经特异性烯醇化酶(NSE)、S100钙结合蛋白B(S100B)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)水平;免疫组化法检测脑组织中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达;Western blot法检测脑组织中GFAP、磷酸化IκB激酶β(p-IKKβ)、磷酸化核转录因子-κB(p-NF-κB)蛋白表达。结果 与模型组比较,温胆汤高剂量组小鼠神经元细胞数量增加,结构完整,排列整齐,神经元细胞核皱缩变形数量减少,尼氏小体增多,血清和脑组织NEFL、NSE、S100B、TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低(P<0.01),脑组织GFAP表达降低(P<0.01),脑组织p-IKKβ和p-NF-κB磷酸化水平均降低(P<0.01)。结论 温胆汤能够减少睡眠障碍小鼠的神经损伤,减少促炎介质释放,其机制可能与抑制IKKβ/NF-κB通路的激活有关。

真武汤调控ROCK/IKK/NF-κB通路关键分子表达改善脾肾阳虚型DN小鼠肾脏炎症损伤的机制研究

基于Rho相关卷曲螺旋激酶(Rho-associated coiled helix kinase,ROCK)/核因子-κB上游激酶(IκB kinase,IKK)/核因子-κB(nuclear factor kappaB,NF-κB)通路探讨真武汤对脾肾阳虚型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠的干预作用及机制。95只7周龄db/db雄性小鼠和25只7周龄db/m雄性小鼠适应性喂养1周,采用灌服大黄水煎液联合氢化可的松法复制脾肾阳虚型DN小鼠模型,随后进行模型评价,造模成功后随机分为模型组,真武汤高、中、低剂量组(33.8、16.9、8.45 g·kg^(-1)·d^(-1)),厄贝沙坦组(25 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每组至少15只,持续干预8周。干预结束后,检测体质量、饮食量;测定血清肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、尿微量白蛋白(urinary albumin,uALb)、尿肌酐(urine creatinine,Ucr)含量,计算尿微量白蛋白与尿肌酐比值(ACR)、24 h尿蛋白(urinary protein,UTP);HE染色、Masson染色评价肾脏病理形态;采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测ROCK/IKK/NF-κB通路关键分子蛋白水平;采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、白细胞介素^(-1)0(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量。与空白组相比,模型组小鼠BUN、uALb、SCr含量上升,24 h UTP、ACR上升,Ucr含量下降(P<0.05);肾小球增大,基底膜变厚且系膜基质出现增生,炎性细胞浸润,胶原纤维沉积;肾脏中ROCK1、ROCK2、IKK、NF-κB以及磷酸化后的核因子-κB上游激酶(p-IκB kinase,p-IKK)、磷酸化后的核因子-κB(p-nuclear factor-kappaB,p-NF-κB)、磷酸化后的NF-κB抑制蛋白(p-inhibitor of NF-κB,p-IκB)蛋白表达上升(P<0.05),NF-κB抑制蛋白(inhibitor of NF-κB,IκB)蛋白表达下降(P<0.05);炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量升高(P<0.05),IL-10含量降低(P<0.05)。与模型组相比,各组小鼠BUN、uALb、SCr含量下降,24 h UTP、ACR均下降,Ucr含量升高(P<0.05);肾脏病理状态与模型组相比均有不同程度改善;真武汤高、中剂量组及厄贝沙坦组小鼠肾脏中ROCK1、ROCK2、IKK、NF-κB、p-IKK、p-NF-κB、p-IκB蛋白表达下降(P<0.05),IκB蛋白表达上升(P<0.05),血清炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量降低(P<0.05),IL-10含量升高(P<0.05)。真武汤能够显著改善脾肾阳虚型DN小鼠肾功能及肾脏病理损伤,其具体机制与真武汤下调肾脏中ROCK/IKK/NF-κB通路关键分子表达抑制炎症反应发生有关。

白细胞介素17C通过IKK/NF-κB通路调控慢性鼻窦炎的作用机制

[目的]探讨白细胞介素17C(IL-17C)通过IKK/NF-κB通路调控慢性鼻窦炎(CRS)的作用机制,旨在为临床治疗CRS提供参考.[方法]选择IL-17C刺激人鼻黏膜原代上皮细胞(HNEPCs),采用CCK-8法检测不同质量浓度的IL-17C对HNEPCs活力的影响;利用ELISA法检测IL-17C诱导的HNEPCs中相关因子的表达水平;采用Western blot法检测IL-17C诱导的HNEPCs中IKK/NF-κB信号通路中相关蛋白的表达情况.[结果]与对照组比较,不同质量浓度的IL-17C对HNEPCs活力无显著影响(P>0.05);IL-17C干预组HNEPCs中IL-4、IL-5、IL-13、IL-17及p-IKK表达水平均明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);IL-17C干预组HNEPCs中p-IKK、p-IκBα及p-NF-κB表达均明显升高(P<0.05),IKK、IκBα及NF-κB蛋白表达无明显改变(P>0.05).与IL-17C干预组比较,IL-17C+地塞米松组p-IKK、p-IκBα及p-NF-κB蛋白表达均明显降低(P<0.05).[结论]IL-17C可诱导HNEPCs中Th2及Th17相关炎症因子的产生,机制认为可能是调控IKK/NF-κB信号通路.

基于IKK/IκBα/NF-κB通路探讨葛根素对创伤后应激障碍大鼠行为学、单胺类递质、炎症的影响

目的探究葛根素对创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)大鼠行为学、单胺类递质、炎症的影响,并从抑制性核因子激酶κB/核因子κB抑制剂α/核转录因子κB(inhibitory nuclear factor kinase-κB/inhibitor nuclear factor-κBα/nuclear transcription factor-κB,IKK/IκBα/NF-κB)通路分析其作用机制。方法将120只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、消退组、舍曲林组和葛根素组各24只。除对照组外,其余各组采用声音和电击刺激来建立PTSD模型。采用恐惧消退保持实验、旷场实验(open field test,OFT)、高架十字迷宫实验(elevated plus maze,EPM)、水迷宫实验测试大鼠行为学变化,高效液相-电化学法测定海马和前额皮质中单胺类神经递质水平,ELISA检测大鼠海马组织炎性因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平,Western blot检测大鼠海马组织中NF-κB p65,抑制性核因子激酶κB-β(the kinase of nuclear factor-kappa B inhibitorβ,IKK-β),IκBα和磷酸化的IκBα(phosphorylation-IκBα,p-IκBα)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组呆滞时间、闭环时间占比、上台潜伏期明显增加,开环时间占比、旷场中心区运动时间、进入中心区次数、穿越象限次数、靶象限停留时间减少(P<0.05),而与模型组比较,葛根素组、舍曲林组呆滞时间、闭环时间占比、上台潜伏期减少,开环时间占比、旷场中心区运动时间、进入中心区次数、穿越象限次数、靶象限停留时间增加,且葛根素组改善效果优于舍曲林组(P<0.05);与对照组比较,模型组大鼠海马组织和前额皮质中5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)、多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平及海马组织中IL-6、IL-1β、IFN-γ、NF-κBp65、p-IκBα蛋白表达显著升高,5-羟胺(5-hydroxylamine,5-HT)、IKK-β、IκBα蛋白表达降低,而与模型组比较,葛根素组、舍曲林组降低了海马组织和前额皮质中NE、DA、5-HIAA及海马中IL-6、IL-1β、IFN-γ、NF-κBp65、p-IκBα蛋白表达水平,提高了5-HT、IKK-β、IκBα蛋白表达水平,且葛根素组改善效果优于舍曲林组(P<0.05);而消退组与模型组上述指标比较无明显差异(P>0.05);Pearson相关性分析显示,海马组织中NF-κBp65、p-IκBα与海马组织和前额叶皮质中NE、DA、5-HIAA水平及海马组织中IL-6、IL-1β、IFN-γ水平呈正相关,与海马组织和前额叶皮质中5-HT呈负相关(P<0.05);海马组织中IKK-β、IκBα与海马组织和前额叶皮质中NE、DA、5-HIAA水平及海马组织中IL-6、IL-1β、IFN-γ水平呈负相关,与海马组织和前额叶皮质中5-HT呈正相关(P<0.05)。结论葛根素可能通过调控IKK/IκBα/NF-κB通路,改善创伤后应激障碍大鼠焦虑程度、自主运动和学习能力,降低大脑单胺类递质和炎症因子水平。

穿心莲内酯抑制IKK/IκBα/NF-κB信号通路改善抑郁症大鼠的抑郁样行为

目的探讨穿心莲内酯(Andro)通过抑制核转录因子-κB抑制蛋白激酶(IKK)/核因子κB抑制蛋白(IκBα)/核因子-κB(NF-κB)信号通路改善抑郁症(MDD)大鼠的抑郁样行为。方法随机取12只SD大鼠作为空白对照组(NC组),其余大鼠采用慢性不可预知轻度应激(CUMS)结合孤养模式造模,将造模成功大鼠随机平分为模型组(Mod组)、Andro组(25 mg·kg^(-1)·d^(-1))、Res组(30 mg·kg^(-1)·d^(-1)IKK/IκBα/NF-κB信号通路激活剂Res)、Andro+Res组(25 mg·kg^(-1)·d^(-1)Andro+30mg·kg^(-1)·d^(-1)Res),每组12只大鼠,Mod组和NC组灌胃等量0.9%氯化钠溶液。旷场实验、糖水偏好实验、强迫游泳实验、平衡木实验评估大鼠行为;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平;免疫荧光染色检测小胶质细胞、星形胶质细胞活性;Western blot检测NLRP3、cleaved-Caspase-1以及IKK/IκBα/NF-κB信号通路蛋白水平。结果与NC组相比,Mod组站立次数、饮用蔗糖量显著减少(P<0.05),游泳不动时间、通过平衡木时间、IL-1β、IL-6、TNF-α含量、Iba-1、GFAP阳性细胞数量、NLRP3、cleaved-Caspase-1、p-IKK/IKK、IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平显著增加(P<0.05);与Mod组相比,Andro组大鼠游泳不动时间、通过平衡木时间、IL-1β、IL-6、TNF-α含量、Iba-1、GFAP阳性细胞数量、NLRP3、cleaved-Caspase-1、p-IKK/IKK、IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平显著降低(P<0.05),站立次数、饮用蔗糖量显著增加(P<0.05),而Res组以上指标趋势相反(P<0.05);Res逆转了Andro对MDD大鼠抑郁样行为的改善。结论Andro可能通过下调IKK/IκBα/NF-κB通路对MDD大鼠的抑郁样行为起到一定的改善作用。

蒙花苷通过调控IKK/NF-κB信号通路抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭

目的:探究蒙花苷(LIN)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力的影响,并探讨可能的分子机制。方法:用不同浓度(5、10、20、40、80和160μmol/L)的LIN处理MCF-7、MDA-MB-231和MCF-10A细胞24 h后,CCK-8法和集落形成实验检测细胞的增殖能力,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot检测Snail、E-cadherin、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκB激酶α/β(p-IKKα/β)和磷酸化p65(p-p65)的蛋白水平。结果:LIN可剂量依赖性地抑制MDA-MB-231细胞活力(P<0.05),IC 50为55.89μmol/L;20μmol/L LIN作用24 h后,MDA-MB-231细胞集落形成率显著降低(P<0.05);与对照组相比,5μmol/L和10μmol/L LIN作用24 h后,MDA-MB-231细胞迁移率和侵袭率显著降低(P<0.05),Snail和MMP-9的蛋白水平下调(P<0.05),E-cadherin的蛋白水平上调(P<0.05),IKKα/β和p65蛋白的磷酸化水平降低,IκBα的蛋白水平上调(P<0.05);同时,IKK-16(IKKα/β抑制剂)和PDTC(NF-κB抑制剂)也可下调MDA-MB-231细胞中Snail和MMP-9的蛋白水平(P<0.05),并上调E-cadherin的蛋白水平(P<0.05)。结论:LIN可能通过抑制IKK/NF-κB信号通路活化而下调Snail和MMP-9蛋白水平并上调E-cadherin蛋白水平,最终导致MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力降低。

连花清瘟胶囊对脂多糖致急性肺损伤小鼠IKK/IκB/NF-κB信号通路的影响

目的探讨连花清瘟胶囊对经气管内滴注脂多糖（LPS）致小鼠急性肺损伤引起的肺组织炎症因子和IKK/IκB/NF-κB信号通路的蛋白表达的影响。方法将急性肺损伤的100只SPF级18~20 g雄性KM小鼠随机均分为5组,LPS组,地塞米松组,连花清瘟胶囊高、中、低剂量组,另设正常对照组（n=20）。光镜下观察实验小鼠肺组织病理变化,流式细胞术检测外周血中白介素-6（IL-6）的阳性表达率,RT-PCR法检测肺组织中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）mRNA表达,Western blot检测肺组织中中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达。结果与正常对照组相比,LPS组小鼠肺组织中有大量炎性细胞渗出,外周血中IL-6,肺组织中MCP-1 mRNA,NE、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达均明显升高;与脂多糖组相比,外周血中IL-6的阳性表达率用药组均有所下降,肺组织中MCP-1mRNA表达用药组均改善明显,肺组织中NE、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达为地塞米松组与高剂量组改善较明显,连花清瘟中、低剂量组也有不同程度改善。结论连花清瘟胶囊能够通过降低IKK/IκB/NF-κB信号通路的表达来减轻肺内炎症反应程度。

IKK/IκB/NF-κB信号通路阻断及临床应用

核因子Kappa B（nuclear factor—kappa B，NF-κB）是一种具有多项转录调节作用的蛋白质，NF-κB信号传导途径参与应激反应和免疫细胞活化、增殖、分化、凋亡及肿瘤形成等相关的400多种基因转录的调控。现已证实在多种急慢性炎症性疾病、肿瘤和变态反应性疾病发生过程中发挥重要作用。NF-κB的激活涉及IKB（NF—κB抑制剂）的磷酸化，而后者有赖于IKK（IKB激酶）的调控,IKK／IκB／NF—κB是一个有机联系的系统，虽然该信号通路在机体发挥重要作用，但目前临床应用方面仍然未发挥其潜在的价值．本文将对IKK／IκB／NF-κB信号通路及其临床应用价值作一综述。

芍药苷基于IKK/NF-κB信号通路对大鼠脊髓损伤后继发性损害的保护作用

目的探讨芍药苷对脊髓损伤(SCI)大鼠模型IKK/NF-κB信号通路的影响及神经保护机制研究。方法采用改良Allen法建立SCI模型,将大鼠随机分为5组:假手术组、SCI组、芍药苷低、中、高剂量(5、30、60 mg/kg)组,每组20只。芍药苷低、中、高组大鼠在建立SCI模型后给予相应剂量芍药苷,假手术组与SCI组给予等量生理盐水,连续28 d。采用斜坡、印迹试验检测大鼠行为学能力;取损伤区组织测定脊髓空洞率、水肿程度及病理变化;蛋白印迹分析检测pI-κBα、NF-κB、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达。结果芍药苷中、高剂量组大鼠运动功能显著改善,呈现剂量-时间依赖关系,脊髓空洞率、水肿程度显著减少(P<0.05);在SCI后6、12 h两个时间点,芍药苷中、高剂量组IKKβ激酶活性下降近50%(P<0.05);SCI后72 h,与SCI组相比,芍药苷中、高剂量组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-18的含量显著降低(P<0.01);pI-κBα、NF-κB、Bax、Caspase-3蛋白表达显著下调,Bcl-2的蛋白水平显著上调(P<0.05)。结论芍药苷能够通过抑制IKK/NF-κB信号通路,减少大鼠脊髓损伤后炎症因子释放,抑制细胞凋亡,发挥神经保护作用。

烙灸对兔激素性股骨头坏死组织中IKKβ、IκBα表达的影响

目的探讨烙灸治疗早期激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of the femoral head,SONFH)的作用机制。方法将新西兰兔按随机数表法分为空白组、模型组、烙灸组、抑制剂组,每组6只,采用内毒素联合激素的方法制备SONFH模型。烙灸组进行4周的烙灸治疗,抑制剂组给予IκBα磷酸化抑制剂Bay11-7082(1 mg·kg-1)腹腔注射3周。干预前后分别观察实验兔一般状况变化;HE染色观察各组实验兔股骨头组织病理学变化;Western blot和RT-qPCR分别检测股骨头组织中IKKβ、磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白及mRNA的表达变化;ELISA检测血清中核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平。结果与空白组比较,模型组实验兔逐渐出现精神萎靡、毛发暗淡等情况,股骨头组织骨小梁出现断裂、稀疏等改变,IKKβ、p-IκBα蛋白水平,IKKβmRNA水平及血清中NF-κB、TNF-α、IL-6水平均升高(P均<0.05);与模型组比较,烙灸组股骨头组织病理学改善,IKKβ、p-IκBα蛋白水平,IKKβmRNA水平及血清中NF-κB、TNF-α、IL-6水平均降低(P均<0.05),而IκBα蛋白及mRNA表达均升高(P均<0.05)。结论烙灸可改善早期SONFH骨代谢,缓解骨坏死,其机制与抑制TLR4/NF-κB通路有关。

肾癌中PPARα通过IKK改变NF-κB信号通路活性的实验研究

目的:观察对舒尼替尼耐药的肾癌细胞系(A498、Caki-1、786-O)中PPARα调控NF-κB信号通路活性的作用机制。方法:首先培养对舒尼替尼耐药的三种肾癌细胞系(A498、Caki-1、786-O),上调和下调PPARα的表达后,用Western blot法和荧光素酶法,分别检测耐药和敏感细胞系中NF-κB p65的表达水平以及NF-κB活性。用RT-PCR和Westen blot法分别检测空白对照组和NF-κB+SN50(信号通路抑制组)中,PPARα的mRNA和蛋白表达水平。在稳定过表达PPARα和低表达PPARα时用Westen blot法分别检测耐药细胞株(A498)中IKK,P-IKK,P-NF-κB p65蛋白的表达水平。结果:舒尼替尼耐药的肾癌细胞系中,下调PPARα,抑制NF-κB p65的表达。抑制NF-κB信号通路,PPARα表达变化未出现显著性差异。上调PPARα基因表达,IKK、P-IKK、P-NF-κB p65蛋白的表达显著性升高。结论:PPARα可能通过改变上游基因IKK的表达来调控NF-κB信号通路活性。

基于IKK/IκB/NF-κB信号通路探讨养心颗粒干预急性心肌梗死后心室重构的作用机制

目的探讨养心颗粒对抗大鼠急性心肌梗死后心室重构的作用,并通过IKK/IκB/NF-κB信号通路探讨其作用机制。方法将60只SD大鼠,按照体质量随机分为假手术组(12只)和手术组(48只),手术组大鼠结扎冠状动脉左前降支,复制急性心肌缺血模型。假手术组只穿线,不结扎。将模型复制成功的36只大鼠随机分为模型组、养心颗粒组、依那普利组,每组12只。养心颗粒组大鼠每日灌胃养心颗粒12.07 g/kg;依那普利组每日灌胃依那普利混悬液10 mg/kg;模型组和假手术组灌胃等体积的生理盐水。连续给药8周后,取静脉血,酶联免疫吸附法(ELISA)测定其中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)水平;取梗死部位心肌组织,苏木精-伊红(HE)染色后电镜下观察大鼠心肌组织病理学变化,ELISA测定梗死心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定心肌组织核转录因子-κB(NF-κB)p65、抑制性核因子激酶κB-β(IKK-β)、核转录因子κB抑制剂(IκB-α)和磷酸化的IκB-α(p-IκBα)蛋白的表达。结果与模型组比较,养心颗粒组大鼠心肌细胞肿胀和变形有所减轻,胶原纤维增生和炎性细胞浸润减少,外周血MMP-2浓度、心肌组织TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ水平及NF-κBp65和p-IκB蛋白的表达均明显降低(P<0.05),外周血TIMP-2浓度、心肌组织IKK-β和IκB-α蛋白的表达则明显升高(P<0.05)。养心颗粒组与依那普利组大鼠的以上指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论养心颗粒可以缓解急性心肌梗死后大鼠的心室重构,其作用机制与降低炎性细胞因子水平、调控IKK/IκB/NF-κB信号通路密切相关,且作用效果与依那普利相当。

小干扰RNA沉默IKK/NF-κB信号通路对HSC-T6细胞凋亡的影响

目的研究小干扰RNA(siRNA)沉默IKK/NF-κB信号通路对于肝星状细胞株HSC-T6凋亡的影响。方法根据Gen Bank数据库IKKβ的c DNA序列,设计构建合成IKKβsiRNA,采用阳性脂质体转染,设立空白对照组、阴性对照组及siRNA实验组,采用TUNEL法和流式细胞仪Annexin-V/PI双染法测定IKKβsiRNA转染后24 h、48 h和72 h细胞凋亡率,同时采用Western blotting检测NF-κB P65、Bcl-2、Bax和Caspase3的蛋白表达情况。结果与空白对照组和阴性对照组相比,实验组24 h、48 h和72 h HSC-T6细胞凋亡率均显著增加(P<0.05),且具有时间依赖性;实验组的NF-κB P65及Bcl-2蛋白的表达均明显升高,而Caspase3和Bax则显著增加,与空白对照和阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SiRNA沉默IKK/NF-κB信号通路能够下调NF-κB P65的表达,同时提高Bax和Caspase3的表达,促进HSC-T6凋亡,这种肝星状细胞凋亡诱导效应具有潜在的逆转肝纤维化的治疗作用。

基于RhoA/ROCK/NF-κB信号通路探究益肾活血化痰方对动脉粥样硬化小鼠炎症反应的影响

目的探讨益肾活血化痰方对动脉粥样硬化(AS)小鼠炎症反应的影响及机制。方法采用高脂饲养法制备AS模型。将小鼠分为对照组、模型组、药物组(303 mg/kg益肾活血化痰方灌胃给药)、抑制剂组(仅给予5 mg/kg的ROCK抑制剂Y-27632腹腔注射)、阳性药物组(3.03 mg/kg的阿托伐他汀灌胃给药),每组10只。油红O染色观察小鼠主动脉组织斑块形成。ELISA法检测血清炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)水平,自动生化分析仪检测血脂(TG、TC、LDL-C、HDL-C)水平,免疫组化法检测主动脉组织IL-1β表达。Western blot法检测主动脉组织RhoA、ROCK蛋白表达及NF-κB p65磷酸化水平。结果与对照组比较,模型组小鼠血清TG、TC、LDL-C、TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高(P<0.05),HDL-C水平显著降低(P<0.05),主动脉斑块面积增大(P<0.05),主动脉组织IL-1β、RhoA、ROCK蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65显著升高(P<0.05)。与模型组比较,药物组、抑制剂组、阳性药物组小鼠血清TG、TC、LDL-C、TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低(P<0.05),HDL-C水平显著升高(P<0.05),主动脉斑块面积减小(P<0.05),主动脉组织IL-1β、RhoA、ROCK蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65显著降低(P<0.05)。药物组与阳性药物组、抑制剂组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论益肾活血化痰方可能通过抑制RhoA/ROCK/NF-κB信号通路激活,改善AS小鼠血脂代谢,减轻AS小鼠炎症反应。

小干扰RNA沉默IKK/NF-κB信号通路对HSC-T6细胞增殖的影响

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默IKK/NF-κB信号通路对肝星状细胞株HSC-T6细胞增殖的影响。方法根据GenBank数据库IKKβ的c DNA序列,设计构建合成IKKβsiRNA,采用阳性脂质体转染,设立空白对照组、阴性对照组及实验组,采用MTT法测定IKKβsiRNA转染后24、48、72 h细胞的相对数量及活力,流式细胞仪测定细胞周期的变化。结果 (1)与空白对照组和阴性对照组相比,实验组不同时间HSC-T6细胞增殖均受到明显抑制(P<0.05),且这种抑制效应具有时间依赖性;(2)流式细胞仪检测发现实验组G0/G1期细胞比例增多,S期与G2/M期细胞则显著减少(P<0.05)。结论 siRNA沉默IKK/NF-κB信号通路能够明显抑制HSC-T6细胞的增殖,这种抑制作用是通过改变其细胞周期来实现的,具有潜在的逆转肝纤维化的治疗作用。

IKK/NF-κB信号通路与2型糖尿病及中药抗炎治疗

目的:探讨IKK/NF-κB信号通路在2型糖尿病中的作用及以IKK/NF-κB信号通路中相关蛋白及酶为靶点进行2型糖尿病的中药抗炎治疗。方法:介绍并总结了IKK/NF-κB信号通路系统组成及激活途径,以及IKK/NF-κB信号通路与炎症、炎症与T2DM的关系,并探索了以IKK/NF-κB信号通路相关蛋白及酶为靶点,中药进行T2DM的抗炎治疗。结果与结论:IKK/NF-κB信号通路在T2DM和胰岛素抵抗的发生机制中可能发挥着一定的作用,这为治疗T2DM提供了新的治疗靶点。

IKK/NF-κB通路在肝纤维化中的作用及相关药物研究进展

肝纤维化是慢性肝病患者中最常见的病理特征。慢性肝损伤可以引发炎症和伤口愈合反应,IKK/NF-κB是炎症中一个至关重要的信号通路,在很大程度上影响肝纤维化的发生发展,可以成为预防或治疗肝纤维化的靶标。本文综述了IKK/NF-κB通路在肝纤维化中的作用机制和相关的药物研究进展。

IKK/NF-κB通路在类风湿性关节炎中的作用及相关药物研究进展

在类风湿性关节炎的病理过程中,炎症反应扮演着关键性角色。IKK/NF-κB作为炎症中一个至关重要的信号通路,在很大程度上影响了类风湿性关节炎的发展过程。本文综述了IKK/NF-κB通路在类风湿性关节炎中的作用,机制和相关药物的研究。

IKK/NF-κB信号通路与中枢神经系统疾病

IKK／NF-κB信号通路是目前研究发现最重要的炎症通路之一。炎症反应广泛参与神经系统疾病的病理生理过程，脑缺血再灌注损伤是炎症反应的急性表现，慢性炎症反应也是神经系统退行性疾病发生发展的重要原因。 IKK／NF-κB信号通路是迄今研究的最为重要的炎症反应通路之一，生理条件下，核转录因子-κB（ nuclear factor-κB，NF-κB）与NF-κB抑制蛋白（ inhibitor of NF-κB，IκB）蛋白结合以无活性的形式存在于细胞质中，当机体受到外界刺激时，激活IκB活激酶复合物（inhibitor of IκB kinases，IKK）使其发生磷酸化和泛素化，致使NF-κB与IκB发生解离并进入细胞核，与靶基因中NF-κB的结合位点相结合，启动靶基因转录，从而增加下游炎性因子的表达［1］。

柴胡皂苷A对溃疡性结肠炎大鼠IKK/IKB/NF-κB信号通路及肠上皮细胞凋亡的影响

目的探讨柴胡皂苷(SS)A对溃疡性结肠炎(UC)大鼠核因子(NF)-κB抑制物激酶(IKK)/抑制因子κB(IKB)/NF-κB信号通路及肠上皮细胞凋亡的影响。方法制备UC大鼠模型,造模后随机分为模型组、SSA(低、中、高)剂量组、阳性对照组,每组10只;正常组10只大鼠作为空白对照。常规饲养2 d,第3天时SSA(低、中、高)剂量组分别灌胃(12.5、25.0、50.0)mg/kg SSA,阳性对照组灌胃0.5 g/kg柳氮磺吡啶(SASP),正常组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续5 d。苏木素-伊红(HE)染色观察肠黏膜组织形态;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;TUNEL染色观察肠上皮细胞凋亡情况;Western印迹检测肠黏膜组织中IKKα、IKB、NF-κB p65、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平。结果正常组大鼠实验结束后毛色有光泽,大便正常;肠黏膜组织完整,肌层结构正常。模型组大鼠毛色暗淡无光泽,大便出现不同程度的便血现象,便稀且黏;肠黏膜处出现明显炎症现象,细胞排列紊乱,部分结肠腺体被浸润的炎症细胞替代,黏膜层变薄。SSA(低、中、高)剂量组、阳性对照组大鼠毛色较暗淡,大便出现不同程度的缓和;出现不同程度的炎症浸润和肠腺溃疡现象,但较模型组有所降低。与正常组相比,模型组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,肠上皮细胞凋亡率,肠黏膜组织中IKKα、IKB、NF-κB p65、caspase-3、Bax蛋白水平显著升高,Bcl-2蛋白水平显著降低(均P<0.05);与模型组相比,SSA(低、中、高)剂量组、阳性对照组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,肠上皮细胞凋亡率,肠黏膜组织中IKKα、IKB、NF-κB p65、caspase-3、Bax蛋白水平显著降低,Bcl-2蛋白水平显著升高(均P<0.05);随着SSA给药剂量的增加,SSA各剂量组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,肠上皮细胞凋亡率,肠黏膜组织中IKKα、IKB、NF-κB p65、caspase-3、Bax蛋白水平逐渐降低,Bcl-2蛋白水平逐渐升高(均P<0.05),呈剂量依赖性。结论SSA可抑制IKK/IKB/NF-κB信号通路及肠上皮细胞凋亡,实现对UC大鼠的保护。